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    Survivin和mmp-9在宮頸上皮內(nèi)瘤樣變及宮頸癌中表達(dá)及臨床價(jià)值

    2021-03-22 07:09:22孫紅娜王月榮黃勇華安志強(qiáng)
    實(shí)用癌癥雜志 2021年3期
    關(guān)鍵詞:樣變內(nèi)瘤上皮

    孫紅娜 王月榮 黃勇華 安志強(qiáng)

    宮頸癌是常見(jiàn)婦科惡性腫瘤之一,其發(fā)病率僅次于乳腺癌,居?jì)D科腫瘤第二位。隨著現(xiàn)代女性生活方式的改變以及工作壓力的增加,宮頸癌的發(fā)病率不僅逐年上升,還出現(xiàn)了年輕化趨勢(shì)[1-2]。相關(guān)研究表明:宮頸癌通常是由宮頸上皮內(nèi)瘤變發(fā)展而來(lái),因此癌前病變的準(zhǔn)確診斷及治療有利于對(duì)該腫瘤的進(jìn)一步惡化和發(fā)生進(jìn)行有效控制[3-4]。本研究以86例宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤樣變患者為研究對(duì)象,分析Survivin和mmp-9在宮頸上皮內(nèi)瘤樣變及宮頸癌中表達(dá)及其臨床價(jià)值。

    1 材料與方法

    1.1 一般資料

    選擇濮陽(yáng)市第三人民醫(yī)院2017年1月至2020年3月收治的86例宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤樣變(CIN Ⅰ~Ⅲ)患者作為本次研究對(duì)象,均經(jīng)臨床病理學(xué)確診。收集所有患者手術(shù)后病理組織樣本,其中宮頸癌組織22例,患者年齡25~60歲,平均(39.71±4.22)歲;CIN Ⅰ期患者25例,患者年齡25~58歲,平均(39.44±4.19)歲;CIN Ⅱ期患者22例,患者年齡26~59歲,平均(39.90±5.13)歲;CIN Ⅲ期患者17例,患者年齡27~60歲,平均(39.88±4.40)歲;另取宮頸癌癌旁組織20例為對(duì)照,患者年齡26~60歲,平均(40.20±5.19)歲。5組患者一般資料對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,可進(jìn)行比較。

    1.2 方法

    1.2.1 免疫組化(SP法)檢測(cè)Survivin和mmp-9陽(yáng)性率 收集所有患者手術(shù)切除后的病理標(biāo)本,取適量福爾馬林固定,根據(jù)石蠟切片常規(guī)步驟脫水、透明、包埋,然后進(jìn)行連續(xù)切片(厚度約5 μm),然后采用Survivin和mmp-9免疫組化試劑盒(購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司)進(jìn)行染色,具體步驟根據(jù)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作,最后DBA顯色,顯微鏡下觀察并拍照。蛋白陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。

    1.2.2 Western Blot檢測(cè)Survivin和mmp-9相對(duì)表達(dá)量 收集患者手術(shù)切除后的病理標(biāo)本,取適量研磨為組織勻漿,總蛋白提取試劑盒(購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司)提取組織勻漿中蛋白質(zhì),BCA蛋白定量試劑盒(購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司)進(jìn)行蛋白定量,然后上樣,SDS-PAGE電泳(100 V 90 min),轉(zhuǎn)膜,染色,封閉,加一抗孵育,洗膜,二抗孵育,洗膜后曝光、觀察并拍照,Image-Pro Plus 6.0圖像分析軟件獲取Survivin和mmp-9蛋白表達(dá)的條帶灰度值。

    表1 免疫組化染色陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)[5]

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    2 結(jié)果

    2.1 不同宮頸病變類型組織中Survivin陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果比較

    與癌旁組織相比,CIN Ⅰ~Ⅲ期及宮頸癌患者組織中Survivin陽(yáng)性表達(dá)率均顯著上升(P均<0.05);與CIN Ⅰ期相比,CIN Ⅲ期及宮頸癌患者組織中Survivin陽(yáng)性表達(dá)率也均顯著上升(P均<0.05),而CIN Ⅱ期Survivin陽(yáng)性率無(wú)顯著差異(P>0.05)。見(jiàn)表2。

    表2 不同宮頸病變類型組織Survivin陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果比較

    2.2 不同宮頸病變類型組織中mmp-9陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果比較

    與癌旁組織相比,CIN Ⅱ、Ⅲ期及宮頸癌患者組織中mmp-9陽(yáng)性表達(dá)率均顯著上升(P均<0.05),而CIN Ⅰ期患者mmp-9陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)顯著差異(P>0.05);與CIN Ⅰ期患者相比,CINⅢ期及宮頸癌患者組織中mmp-9陽(yáng)性表達(dá)率也均顯著上升(P均<0.05),而CIN Ⅱ期mmp-9陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)顯著差異(P>0.05)。見(jiàn)表3。

    表3 不同宮頸病變類型組織中mmp-9陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果比較

    2.3 不同宮頸病變類型組織中Survivin和mmp-9相對(duì)表達(dá)量比較

    與癌旁組織相比,CIN Ⅰ~Ⅲ期及宮頸癌患者組織中Survivin和mmp-9相對(duì)表達(dá)量均顯著升高(P均<0.05),與CIN Ⅰ期相比,CIN Ⅱ、Ⅲ期及宮頸癌患者組織中Survivin和mmp-9相對(duì)表達(dá)量也均顯著升高(P均<0.05)。見(jiàn)表4。

    表4 不同宮頸病變類型組織中Survivin和mmp-9相對(duì)表達(dá)量比較

    3 討論

    相關(guān)研究表明:宮頸癌的發(fā)病原因是細(xì)胞生物學(xué)和病理學(xué)相關(guān)的多因素、多途徑、多基因共同作用的結(jié)果,該腫瘤發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明確[6-7]。Survivin蛋白是與凋亡調(diào)控作用相關(guān)的蛋白之一,可通過(guò)相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)通路抑制細(xì)胞凋亡或調(diào)節(jié)細(xì)胞周期,通常在胚胎中表達(dá),在已分化組織中低表達(dá)或不表達(dá),在惡性腫瘤中高表達(dá)[8-9]。本研究結(jié)果顯示:與癌旁組織相比,CINⅠ~Ⅲ期及宮頸癌患者組織中Survivin陽(yáng)性率均顯著上升(P均<0.05);與CINⅠ期患者相比,CINⅢ期及宮頸癌患者組織中Survivin陽(yáng)性率也均顯著上升(P均<0.05),而CINⅡ期Survivin陽(yáng)性率無(wú)顯著差異(P>0.05)。與癌旁組織相比,CIN Ⅰ~Ⅲ期及宮頸癌患者組織中Survivin相對(duì)表達(dá)量均顯著升高(P均<0.05),與CIN Ⅰ期相比,CIN Ⅱ、Ⅲ期及宮頸癌患者組織中Survivin相對(duì)表達(dá)量也均顯著升高(P均<0.05)。表明:Survivin蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率及相對(duì)表達(dá)量一定程度上隨宮頸上皮內(nèi)瘤癌變程度加深而顯著升高,且在宮頸癌組織中Survivin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率及相對(duì)表達(dá)量均達(dá)到最高。

    mmp-9是蛋白水解酶家族的一員,相關(guān)研究顯示:該蛋白水平與惡性腫瘤血管形成密切相關(guān),且其在多種腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移、侵襲等中起重要調(diào)控作用[10-11]。宮頸癌相關(guān)研究提示:宮頸癌組織中mmps信號(hào)通路活化水平與患者預(yù)后呈顯著正相關(guān),且早期宮頸癌患者mmp-9的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)[12-13]。而在本研究中:與癌旁組織相比,CIN Ⅱ、Ⅲ期及宮頸癌患者組織中mmp-9陽(yáng)性率均顯著上升(P均<0.05),而CIN Ⅰ期患者mmp-9陽(yáng)性率無(wú)顯著差異(P>0.05);與CIN Ⅰ期患者相比,CINⅢ期及宮頸癌患者組織中mmp-9陽(yáng)性率也均顯著上升(P均<0.05),而CIN Ⅱ期mmp-9陽(yáng)性率無(wú)顯著差異(P>0.05)。與癌旁組織相比,CIN Ⅰ~Ⅲ期及宮頸癌患者組織中mmp-9相對(duì)表達(dá)量均顯著升高(P均<0.05),與CIN Ⅰ期相比,CIN Ⅱ、Ⅲ期及宮頸癌患者組織中mmp-9相對(duì)表達(dá)量也均顯著升高(P均<0.05)。表明:在宮頸上皮內(nèi)瘤樣變及宮頸癌中mmp-9蛋白的表達(dá)情況與Survivin蛋白類似,即隨宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變程度加深而顯著升高,且在宮頸癌組織中Survivin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率及相對(duì)表達(dá)量均達(dá)到最高,但二者調(diào)控作用不同。以上結(jié)論與前人相關(guān)研究中上述指標(biāo)在癌癥中表達(dá)結(jié)論類似[14-15]。另外,本研究不足之處在于樣本量較小,且未能對(duì)不同宮頸癌病變類型組織中Survivin和mmp-9相對(duì)表達(dá)量對(duì)該腫瘤診斷價(jià)值的具體數(shù)值進(jìn)行深入分析,這些將在后續(xù)延長(zhǎng)樣本納入年限并擴(kuò)大樣本量展開(kāi)深入探討。

    總之,Survivin和mmp-9在不同宮頸上皮內(nèi)瘤樣變及宮頸癌中的陽(yáng)性表達(dá)率及表達(dá)量存在顯著差異性,可考慮將其表達(dá)水平的變化作為宮頸癌病變的診斷依據(jù)。

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