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    MMP-9與趨化因子受體7在乳腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義

    2021-03-22 07:09:20呂祥瑞方卓寧王孟麗
    實(shí)用癌癥雜志 2021年3期
    關(guān)鍵詞:趨化因子陽性率乳腺

    呂祥瑞 方卓寧 王孟麗

    近年來,乳腺癌患者逐年增多,目前乳腺癌在女性惡性腫瘤中發(fā)病率居首位,對女性的身心健康的極大影響,其病死率也不容小覷[1]。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPS)是一組鋅離子依賴性內(nèi)肽酶,其中基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)是分子量最大的1種,又叫W型膠原酶,是癌基因的1種,MMP-9在正常人體中也會表達(dá)[2],MMP-9能夠降解基底膜及細(xì)胞外基質(zhì)和促進(jìn)新生血管的形成,是調(diào)控癌細(xì)胞增長的關(guān)鍵因素[3]。趨化因子受體7(chemokine receptor 7,CCR7)是CC類家族成員之一,在多種惡性腫瘤細(xì)胞中表達(dá),基因定位于17q12~q21.2,可調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的活性,促進(jìn)進(jìn)展,阻礙凋亡,其高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移也有一定關(guān)聯(lián)[4]。

    本研究分別檢測MMP-9和CCR7在乳腺癌組織及正常組織中的表達(dá)情況,并探討MMP-9與CCR7的表達(dá)相關(guān)性,進(jìn)一步分析二者與臨床病理表現(xiàn)之間的相關(guān)性,為臨床治療和預(yù)后提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 臨床資料

    選取本院2017年6月至2018年10月乳腺癌患者65例為觀察組,并選取正常乳腺組織65例作為對照組,所有標(biāo)本來源都是女性,且術(shù)前未經(jīng)任何放化療和抗腫瘤治療,年齡25~75歲,平均年齡(50.7±5.1)歲。根據(jù)《WHO乳腺腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)(2012版)》進(jìn)行分級:Ⅰ級11 例,Ⅱ級36例,Ⅲ級18例。并進(jìn)行免疫組化檢測雌激素受體(estrogen receptor,ER)和孕激素受體(progesterone receptor,PR)。

    1.2 試劑與方法

    兔抗人CCR7多克隆抗體購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司,CCR7原位雜交試劑盒購自武漢博士德生物技術(shù)有限公司。MMP-9的檢測方法是基于Luminex技術(shù)的蛋白質(zhì)全定量檢測 法,試劑盒購自密理博上海貿(mào)易有限公司。采用免疫組織化學(xué)染色對組織標(biāo)本進(jìn)行處理:固定,脫水,透明,浸臘,包埋,切片。注意石蠟組織厚切片,多聚賴氨酸防脫片,二甲苯脫蠟,梯度乙醇脫水。

    1.3 結(jié)果判斷

    觀察免疫組織化學(xué)染色切片,MMP-9陽性表現(xiàn)為細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒,CCR7以細(xì)胞膜和(或細(xì)胞質(zhì)染成)黃色或棕黃色顆粒為陽性表達(dá),ER、PR均以細(xì)胞核染成黃色顆粒為陽性表達(dá)。染色數(shù)量所占比例,不超過5%為0分,6%~25%為1分,26%~50%為2分,超過51%為3分。再觀察染色深淺,幾乎不染色為0分,淺染為1分,中強(qiáng)然為2分,深強(qiáng)染為3分。最終根據(jù)細(xì)胞的染色強(qiáng)度和范圍來綜合計(jì)分,不超過3分為陰性(-),超過4分為陽性(+)。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    采用SPSS 17.0版軟件對所得臨床數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料均采取卡方檢驗(yàn),MMP-9和CCR7表達(dá)與病理表現(xiàn)的相關(guān)性采用spearman等級相關(guān)以及t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 MMP-9與CCR-7在正常乳腺組織及乳腺癌組織中的表達(dá)

    65例乳腺癌組織中MMP-9表達(dá)陽性者44例,陽性率為67.7%;CCR-7表達(dá)陽性者42例,陽性率為64.6%。65例正常乳腺組織中MMP-9表達(dá)陽性者12例,陽性率為18.5%;CCR7表達(dá)陽性者11例,陽性率為16.9%。乳腺癌組織中高表達(dá)MMP-9和CCR7,見表1。

    2.2 乳腺癌組織中MMP-9與CCR7表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

    MMP-9和CCR-7高表達(dá)均與乳腺癌臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性組MMP-9和CCR7表達(dá)陽性率顯著高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與患者年齡、月經(jīng)情況無相關(guān)性(P>0.05)。其中MMP-9高表達(dá)還與病理分級、ER、PR有相關(guān)性(P<0.05),見表2。

    表1 MMP-9與CCR-7在正常乳腺組織及乳腺癌組織中的表達(dá)(例,%)

    表2 MMP-9與CCR7表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系/例

    2.3 乳腺癌組織中MMP-9與CCR7蛋白表達(dá)的關(guān)系

    經(jīng)Spearman等級相關(guān)分析顯示,乳腺癌組織中MMP-9與CCR7表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05),見表3。

    表3 乳腺癌組織中MMP-9與CCR7表達(dá)的關(guān)系/例

    3 討論

    近期據(jù)研究發(fā)現(xiàn),世界每年新發(fā)乳腺癌患者超過一百萬,對惡性腫瘤來說,從原位增殖到侵襲轉(zhuǎn)移是1個復(fù)雜的過程,至少有兩個以上的基因發(fā)生變化,基因不僅原有的功能喪失,突變后的基因甚至?xí)龠M(jìn)腫瘤發(fā)展,若能早發(fā)現(xiàn)、早治療,必然能使患者的生存率提高。

    基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPS)是1種可破壞體內(nèi)組織屏障,并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和侵襲的1種已知因素,是1種肽鏈內(nèi)切酶,目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的有23種,它能敲除致密的細(xì)胞外基質(zhì),從使腫瘤脫離原發(fā)灶[5]。腫瘤細(xì)胞以酶原的形式分泌MMP-9,MMP-9作用底物多樣化,且Ⅳ型膠原細(xì)胞是其特有功能域[6],故具有高效降解細(xì)胞外基質(zhì)、破壞基膜的作用,與腫瘤進(jìn)展聯(lián)系緊密[7-8],腫瘤細(xì)胞以酶原的形式分泌MMP-9,水解后形成膠原酶并降解基底膜,之后腫瘤細(xì)胞沿此缺口向周圍浸潤,導(dǎo)致腫瘤的轉(zhuǎn)移。本研究顯示,乳腺癌組織中MMP-9的陽性率為67.7%,正常乳腺組織中MMP-9,陽性率為18.5%,乳腺癌組織中MMP-9的陽性率與正常組織對比顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。且MMP-9表達(dá)率高的腫瘤具有分化差,易淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等特點(diǎn),與乳腺癌臨床分期、病理分級、ER和PR具有相關(guān)性(P<0.05)。

    趨化因子受體7(CCR7)在乳腺癌組織中陽性率為64.6%,在正常乳腺組織中陽性率為16.9%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。且CCR7蛋白的高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān),而與年齡、月經(jīng)狀況、雌激素受體、孕激素受體均無關(guān),實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明CCR7與乳腺癌淋巴結(jié)特異性侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。趨化因子及其受體在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用,且CCR7已經(jīng)被證實(shí)參與多種癌癥的侵襲和定向遷移,且在多種腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)[9]。趨化因子通過與CCR結(jié)合從而發(fā)揮趨化調(diào)節(jié)作用[10]。CCR7能促進(jìn)干細(xì)胞樣腫瘤細(xì)胞的增殖,抑制腫瘤細(xì)胞對凋亡相關(guān)蛋白的敏感性[11]。CCR7作為能夠調(diào)節(jié)腫瘤生長及轉(zhuǎn)移的重要分子,在臨床治療方面的研究也越來越深入[12]。

    綜上所述,MMP-9和CCR7的陽性表達(dá)均與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且MMP-9與CCR7聯(lián)合能更加準(zhǔn)確、客觀的把握預(yù)后,最終達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞增殖,阻止癌癥轉(zhuǎn)移,提高患者生存質(zhì)量的目的。

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