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    胃癌組織Trx-1、FN1表達及其與臨床病理特征和患者生存的關系

    2021-03-22 07:09:16張麗柯汪建光劉德純
    實用癌癥雜志 2021年3期
    關鍵詞:百分比存活陽性細胞

    張麗柯 汪建光 劉德純

    胃癌是常見消化道惡性腫瘤,近年來隨著人們生活習慣及飲食習慣的改變,胃癌發(fā)病率逐漸升高[1]。胃癌的發(fā)病機制尚未完全清楚,多基因突變及多階段的演變參與了其進展[2]。硫氧還蛋白-1(thioredoxin,Trx-1)是由108個氨基酸殘基組成的小分子蛋白,能清除單態(tài)氧自由基實現(xiàn)抗腫瘤凋亡,與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、化療耐藥等均相關[3]。纖維連接蛋白1(Fibronetin1,F(xiàn)N1)是1種細胞外非膠原糖蛋白,在細胞黏附、遷移中起著重要作用,并參與胚胎發(fā)生、宿主防御等過程,在癌癥進展中也有潛在作用[4]。因而本文通過探究胃癌組織Trx-1、FN1表達及其與臨床病理特征和生存的關系,了解Trx-1、FN1與胃癌發(fā)生、發(fā)展的關系,報告如下。

    1 材料與方法

    1.1 一般資料

    收集2016年1月至2017年1月來我院接受胃癌根治術切除標本105例,男性58例,女性47例,年齡為25~71歲,平均(46.53±9.68)歲。所有標本均在腫瘤切除后30 min內采集,并切取距離腫瘤邊緣5 cm以上的癌旁組織作為對照,所有組織均迅速凍存于液氮。納入標準:①所有患者術前未經化療,術后經病理學確診為胃癌;②患者病歷資料完整;③所以患者均知情并同意手術。排除標準:①合并其他惡性腫瘤患者;②圍手術期出現(xiàn)嚴重并發(fā)癥或術中死亡者;③不能進行隨訪患者。本研究經醫(yī)學倫理委員會同意。

    1.2 檢測方法

    應用免疫組化法檢測胃癌組織及癌旁組織中Trx-1、FN1的表達情況。步驟:石蠟切片用常規(guī)二甲苯脫蠟后,用梯度酒精脫水處理,再用枸櫞酸鹽緩沖液進行微波抗原組織修復15 min,PBS沖洗后,用3%H2O2孵育10 min,PBS沖洗2次后,加入正常山羊血清進行封閉20 min,加入兔單抗Trx-1(或兔單抗FN1),37 ℃下孵育1 h,TBST沖洗2次。加入鼠兔通用二抗,37 ℃下孵育1 h,PBS沖洗2次,再加入DAB顯色劑、蘇木精復染、梯度酒精脫水、二甲苯透明等,最后用中性樹膠封片,顯微鏡下觀察。以0~4分來判定陽性細胞的百分比(陽性細胞數(shù)/總細胞數(shù)×100):陽性細胞百分比<5%(0分);陽性細胞百分比為6%~25%(1分);陽性細胞百分比為26%~50%(2分);陽性細胞百分比為51%~75%(3分);陽性細胞百分比>75%(4分)。染色強度按無染色,弱、中、強染色分別評為0,1,2,3分。以兩個指標的乘積作為總評分:<4分為低表達,≥4分為高表達。

    1.3 觀察指標

    所有胃癌患者術后隨訪3年,以電話及門診形式進行,隨訪內容包括:患者病情進展、影像學檢查,記錄患者隨訪期內生存情況,第1年每3個月隨訪1次,第2~3年,每6個月隨訪1次,隨訪截止時間2020年1月。

    1.4 統(tǒng)計學方法

    2 結果

    2.1 Trx-1、FN1在胃癌組織及癌旁組織中的表達情況

    胃癌組織中Trx-1、FN1均呈高水平表達(P<0.05),癌旁組織中Trx-1、FN1呈低表達(P<0.05),結果見表1。

    表1 兩組臨床療效比較/例

    2.2 Trx-1、FN1與胃癌臨床病理特征的關系

    Trx-1表達與組織分化、浸潤深度有關(P<0.05),與性別、年齡、腫瘤部位、淋巴結轉移、腫瘤大小無關(P>0.05);FN1表達與組織分化、浸潤深度、淋巴結轉移有關(P<0.05),與性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小無關(P>0.05),結果見表2。

    2.3 Trx-1、FN1表達與生存分析

    隨訪105例中,3年總生存率為58.10%,存活61例。Trx-1高表達組存活27例,低表達組存活34例,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);FN1高表達組存活30例,低表達組存活31例,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),結果見表3,圖1。

    3 討論

    我國是胃癌高發(fā)國家,就診的不及時使胃癌病死率較高,嚴重影響我國居民生命健康,而對胃癌發(fā)病機制的探究一直是研究重點[5]。Trx-1位于細胞質和細胞核中,能調節(jié)NF-κB的活性,并抑制程序性細胞死亡,從而促進腫瘤生長[6]。有研究表明Trx-1的高表達與胰腺癌、乳腺癌、肺癌、宮頸癌等疾病發(fā)生、發(fā)展均相關[7]。潘濤等[8]研究表明Trx-1的表達水平升高與胃癌術后無病生存時間縮短相關,有望成為預測腫瘤復發(fā)轉移的標志物之一。本研究中,胃癌組織中Trx-1、FN1均呈高水平表達,癌旁組織中Trx-1呈低表達,結果與前人[9]研究一致。Trx-1表達與組織分化、浸潤深度有關,說明Trx-1與胃癌的發(fā)展及侵襲有關。而Trx-1高表達組3年生存率較低表達組的低,說明Trx-1高表達會降低胃癌患者生存時間。腫瘤生長、浸潤與血管生成密切相關,Trx-1的高表達能增加HIF-α表達,使血管內皮生長因子(VEGF)增加,促進腫瘤血管生成,造成腫瘤侵襲[10];胃癌細胞往往缺氧并發(fā)生氧化應激反應,而Trx-1能介導氧化還原的平衡,促進胃癌細胞生長[11]。Trx-1能通過調節(jié)凋亡信號調節(jié)激酶(ASK-1)活性,從而參與抑制腫瘤細胞凋亡過程[12]。Trx-1還能抑制腫瘤細胞的自發(fā)凋亡及藥物誘導的細胞凋亡,降低腫瘤細胞對抗癌藥物的敏感性,不利于預后,因此Trx-1可能成為抗癌治療的藥物靶標[13]。

    表2 Trx-1、FN1與胃癌臨床病理特征的關系/例

    表3 Trx-1、FN1表達與生存分析/%

    圖1 Trx-1表達、FN1表達與生存分析

    FN1是細胞外基質蛋白分子,能介導細胞黏附過程,在細胞外基質(EMC)形成和再上皮化中起著關鍵作用,是多種癌細胞形成和發(fā)育的重要調控因子,比如乳腺癌、卵巢癌、甲狀腺癌、鼻咽癌[14]。有研究[15]表明FN1能促進鼻咽癌細胞增殖,下降FN1的表達能通過激活NF-κB通路,抑制MMP2及MMP9表達,從而抑制細胞凋亡。本研究中,胃癌組織中FN1均呈高水平表達,癌旁組織中FN1呈低表達,F(xiàn)N1表達與組織分化、浸潤深度、淋巴結轉移有關,說明FN1在胃癌組織中高表達,與胃癌的發(fā)生、發(fā)展有關。FN1高表達組3年生存率低于低表達組,說明FN1高表達會影響患者生存情況。細胞外基質金屬蛋白酶(MMPs)與腫瘤轉移相關,有研究[16]表明FN1的高表達能通過激活MMP2/MMP9(EMT通路)促進胃癌細胞的增殖、遷徙及侵襲。也有研究[17]表明癌間質的FN1對癌細胞有趨化作用,癌細胞能特異性黏附在癌間質上,并生成和轉移,因而FN1的表達增高可能是胃癌浸潤轉移的機制之一。孫陽等[18]研究表明FN1的表達與KRAS、P53、TGF-β、ECM、細胞黏附和細胞骨架蛋白基因通路有關,F(xiàn)N1可作為腫瘤治療的潛在靶點。本研究還存在一定不足,如樣本量較少,隨訪時間較短,Trx-1、FN1與腫瘤的具體作用機制還未完全解釋清楚,因此還需進行大規(guī)模及多中心研究,以提高研究的客觀性。

    綜上,Trx-1、FN1在胃癌組織中均呈高表達,與胃癌的侵襲、發(fā)展相關,可能參與了腫瘤惡化的調控,并降低患者生存期。

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