一例古典豬瘟及豬繁殖與呼吸綜合征混合感染診斷與防控

楊子江 張海楠 張容萍 付 航 馬 娜 李良松 李興元 王興榮 魯富有

（1,2普洱市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心， 云南普洱 665000； 3 普洱市景東縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心， 云南普洱 665000）

隨著生豬養(yǎng)殖范圍擴(kuò)大，由于飼養(yǎng)管理不規(guī)范、疫苗免疫不到位、養(yǎng)殖人員素質(zhì)較低等原因，使得豬群存在不同程度的混合感染情況。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)記載，大部分規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶都存在混合感染，混合感染的死淘率在15%以上[1]。

古典豬瘟與豬繁殖與呼吸綜合征是養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）常見的傳染病，同時(shí)也是造成經(jīng)濟(jì)損失較為嚴(yán)重的豬的傳染病，目前在我國主要以點(diǎn)狀散發(fā)、局部流行為主[2,3]?！秶抑虚L期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012-2020 年）》將豬瘟和高致病性豬藍(lán)耳病列為優(yōu)先防治和重點(diǎn)防范的一類動(dòng)物疫病。

豬瘟（CSF）是由豬瘟病毒（CSFV）引起的一種高度接觸性傳染病，在全球范圍內(nèi)造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失[4]；豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS），俗稱豬藍(lán)耳病，是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的一種高度接觸性傳染病[5]，不同年齡、品種和性別的豬均能感染，仔豬更易感染。豬瘟與豬藍(lán)耳病均為高感染和高致死的疫病，發(fā)生混合感染時(shí)，不但會(huì)使豬本身病情加重，更會(huì)導(dǎo)致死亡率急劇升高，嚴(yán)重危害著養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展[6]。

2018 年10 月，云南省普洱市某縣某養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)生豬510 頭，其中肥豬110 頭、母豬20 頭、育肥豬272頭、仔豬108 頭。10 月29 日有6 頭豬開始發(fā)病，后陸續(xù)發(fā)病并伴有死亡，其中發(fā)病350 頭，死亡248 頭，發(fā)病率為68.63%，病死率為70.86%。各年齡段的公豬、母豬均有不同的發(fā)病和死亡情況。使用恩諾沙星、青霉素、氟苯尼考等藥物進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)性治療，無明顯效果。該疫點(diǎn)有養(yǎng)殖戶101 戶，生豬存欄1 698 頭，排查疫區(qū)內(nèi)所有養(yǎng)殖戶是否存在類似情況，結(jié)果未發(fā)現(xiàn)有異常情況。

1 材料與方法

1.1 臨床檢查及病理剖檢

1.1.1 臨床檢查

發(fā)病豬起初表現(xiàn)為高熱（41℃～41.5℃）、精神沉郁，被毛臟亂，食欲下降，便秘等，隨后發(fā)展為呼吸困難、食欲廢絕、腹瀉等。多數(shù)豬耳部、頸部、臀部、腹部出現(xiàn)不同程度的發(fā)紺，小便短赤。病程約1～3 天。如圖1、圖2 所示。

1.1.2 病例剖檢

通過對(duì)病死豬進(jìn)行剖檢可見，頜下淋巴結(jié)和腹股溝淋巴結(jié)腫大出血，胸腔、心包有呈淡黃色的不同程度的積液，肺臟肉樣變并伴有出血，腸系膜淋巴結(jié)腫大出血，脾臟邊緣呈紫黑色，邊緣有出血點(diǎn)和出血斑，胃黏膜出血等。如圖3 至圖6 所示。

1.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

1.2.1 病料來源

采集發(fā)病豬全血10 份，病死豬脾臟、肺臟、淋巴結(jié)各1 份，發(fā)病豬鼻棉拭子5 份。

1.2.2 主要試劑

Taq 酶、ddH2O、Buffer、Enzyme 等均購自寶生物工程有限公司，Agar 來自西班牙，引物均由云南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提供。

1.2.3 檢測(cè)方法

采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR），以最優(yōu)反應(yīng)條件進(jìn)行古典豬瘟、豬藍(lán)耳病、非洲豬瘟檢測(cè)。反應(yīng)程序如下：

⑴豬瘟：第一套50℃反轉(zhuǎn)錄30 min，94℃預(yù)變性2 min，（95℃變性15 s，54℃引物復(fù)性30 s，72℃延伸1 min）35 個(gè)循環(huán)，72℃延伸10 min；第二套：94℃預(yù)變性5 min，（95℃變性15 s，54℃引物復(fù)性30 s，72℃延伸1 min）35 個(gè)循環(huán)，72℃延伸10 min。4℃保存。

⑵豬藍(lán)耳病：50℃反轉(zhuǎn)錄30 min，94℃預(yù)變性2 min，（95℃變性15 s，50℃引物復(fù)性30 s，72℃延伸1 min）35 個(gè)循環(huán)，72℃延伸10 min。4℃保存。

⑶非洲豬瘟：50℃反轉(zhuǎn)錄2 min，95℃預(yù)變性10 min，（95℃變性15 s，62℃引物復(fù)性30 s，72℃延伸30 s）30 個(gè)循環(huán)，72℃延伸7 min。4℃保存。

3 結(jié)果顯示

非洲豬瘟病毒檢測(cè)呈陰性（由云南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心進(jìn)行檢測(cè)并反饋結(jié)果），古典豬瘟和豬藍(lán)耳病病毒檢測(cè)結(jié)果均為陽性，目的條帶分別為270 bp 和485 bp。如圖7、圖8 所示。

4 病因分析及防治

4.1 疫苗免疫不到位、 引種缺乏隔離措施

該養(yǎng)殖戶主要養(yǎng)殖模式為自繁自養(yǎng)，為了擴(kuò)大規(guī)模在2018 年8 月和10 月分兩批次從不同地區(qū)購入108 頭仔豬，外購仔豬免疫背景不清楚，同時(shí)場(chǎng)主也未進(jìn)行補(bǔ)免和隔離措施，直接混群飼養(yǎng)。引種之前，場(chǎng)主未對(duì)可免豬群及時(shí)進(jìn)行免疫，只對(duì)110 頭肥豬進(jìn)行了豬瘟、藍(lán)耳病、豬口蹄疫疫苗免疫，導(dǎo)致豬群整體免疫保護(hù)水平較低，達(dá)不到預(yù)期保護(hù)效果。

圖1 患病豬耳朵呈藍(lán)紫色

圖6 患病豬心包積液

圖7 古典豬瘟病毒檢測(cè)結(jié)果

圖8 豬藍(lán)耳病病毒檢測(cè)結(jié)果

4.2 養(yǎng)殖人員素質(zhì)較低、 飼養(yǎng)管理較差

該豬場(chǎng)販賣豬只車輛不固定且未經(jīng)任何消毒就進(jìn)入場(chǎng)內(nèi)，期間可能存在販運(yùn)過程中接觸到病豬或病豬的污染物，不排除由人員車輛流動(dòng)將病原帶入本場(chǎng)。管理人員對(duì)生豬養(yǎng)殖沒有足夠的養(yǎng)殖經(jīng)驗(yàn)，缺乏疫病防控的意識(shí)，認(rèn)為只要對(duì)肥豬免疫就不會(huì)造成大量的經(jīng)濟(jì)損失。

4.3 緊急免疫、 隔離、 無害化處理

對(duì)該豬場(chǎng)已死亡的豬只進(jìn)行深埋無害化處理；將發(fā)病豬與健康豬分圈分群飼養(yǎng)，避免接觸；采用云南省生豬“321”免疫模式對(duì)所有豬只進(jìn)行緊急免疫；對(duì)全場(chǎng)進(jìn)行衛(wèi)生清理、消毒。

5 討論

對(duì)豬場(chǎng)進(jìn)行全面消毒，嚴(yán)格管理豬場(chǎng)內(nèi)部人員，不得隨意進(jìn)出豬場(chǎng)，對(duì)病死豬進(jìn)行無害化處理[7,8]，控制期間不得進(jìn)行引種、販賣等，防止造成更大的污染。

在飼養(yǎng)過程中必須確保豬舍環(huán)境干凈衛(wèi)生，堅(jiān)持自繁自養(yǎng)[9]，定時(shí)定期做好消毒工作，尤其是對(duì)車輛、地面、食槽必須進(jìn)行徹底消毒，消滅細(xì)菌及病毒。確保豬舍通風(fēng)良好，光照正常，做好防寒保暖工作，確保豬群健康生長。除此之外，對(duì)引種進(jìn)來的豬要進(jìn)行隔離，單獨(dú)飼養(yǎng)，若無特殊情況則可考慮混群飼養(yǎng)。針對(duì)易患病仔豬、母豬必須做好飼養(yǎng)管理工作，及時(shí)接種免疫疫苗，結(jié)合豬的不同生長階段喂食相應(yīng)營養(yǎng)物質(zhì)，滿足豬群生長營養(yǎng)需求，提高豬群抗病能力。

疫苗免疫是防控豬瘟、豬藍(lán)耳病等傳染病最有效的手段，結(jié)合本場(chǎng)實(shí)際情況，制定科學(xué)的免疫程序，按時(shí)按量按質(zhì)完成春秋兩季常規(guī)免疫，并定期開展免疫效果評(píng)估，對(duì)免疫抗體不達(dá)標(biāo)的豬只及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)免，確保疫苗免疫效果，可有效降低本場(chǎng)發(fā)生該病的風(fēng)險(xiǎn)。