益陽地區(qū)淋病流行特征及耐藥淋球菌菌株分型的調(diào)查研究★1

朱有蔥，王 威，肖 煒，楊 鵬

（1.益陽醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校，湖南 益陽 413002；2.寧鄉(xiāng)人民醫(yī)院，湖南 寧鄉(xiāng) 410600；3.益陽中心醫(yī)院，湖南 益陽 413000）

淋病病原體為奈瑟氏淋球菌，傳統(tǒng)治療方法使用抗生素，抗生素的不正規(guī)使用和濫用導(dǎo)致耐藥菌株增加[1]。筆者對益陽地區(qū)淋病流行特征及耐藥菌、菌株分型進行研究，為本地區(qū)淋球菌感染預(yù)防和控制提供數(shù)據(jù)支持，為本地區(qū)淋球菌感染的合理用藥、科學(xué)治療提供理論依據(jù)。具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 資料源于2019年至202年間益陽地區(qū)淋球菌感染就診的200例患者疾病相關(guān)信息，根據(jù)WS 268—2019《淋病診斷標準》并結(jié)合臨床癥狀和實驗室檢查確診[2]。病人在調(diào)查人員指導(dǎo)下逐項填寫，問卷包括一般情況、性行為、相關(guān)癥狀、求醫(yī)行為。所有人自愿填寫，空間相對獨立，無記名調(diào)查，保證調(diào)查對象個人隱私，填寫問卷后調(diào)查人員核查，及時補充缺項、漏項。

1.2 方法 采集分泌物樣本，采用無菌棉試子插入男性尿道（3～4）cm，女性宮頸1cm，提取分泌物。

采用中國藥品生物制品檢驗鑒定所生產(chǎn)的青霉素鉀、阿奇霉素、四環(huán)素、壯觀霉素、頭孢曲松、環(huán)丙沙星作藥敏試驗。Oxoid公司生產(chǎn)的GC基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增菌劑（1%ISO-VitaleX）、VCN抑菌劑、10%無菌脫纖維羊血作奈瑟氏菌培養(yǎng)。GC選擇性培養(yǎng)基初次分離，培養(yǎng)［5%CO2，36.5℃，（24～48）h］，菌株染色，菌落形態(tài)觀察，初步鑒定（氧化酶試驗），單克隆菌落純培養(yǎng)（Thayer-Martin培養(yǎng)基），保存（脫脂牛奶， -70℃）。瓊脂稀釋法測定MIC。

RAPD指紋圖譜分型：制備淋球菌基因組DNA，PCR擴增，制膠與電泳，觀察成像。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 利用Epidata等統(tǒng)計學(xué)軟件建立流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)庫，經(jīng)二次核對后，利用SPSS 20.0軟件包對調(diào)查數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析處理。正態(tài)計量數(shù)據(jù)用“±s”表示，組間比較采用t檢驗，樣本率的比較采用χ2檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 社會人口學(xué)特征 200例淋病患者中男性（85.00%）多于女性（15.00%），（21～50）歲人群為主，工人、民工、干部占64.00%，已婚（66.00%）患者較多，詳細情況見表1。

2.2 性行為、疾病及求醫(yī)情況 經(jīng)調(diào)查，男性病人主要為淋菌性尿道炎96.47%（164/170），女性主要為淋菌性宮頸炎90.00%（27/30）；感染途徑主要為性傳播77.00%（154/200），其中非婚性接觸94.81%（146/154），與其他傳播途徑比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；出現(xiàn)淋病相關(guān)癥狀3d內(nèi)就診64例（32.00%），三周以上就診50例（25.00%），病人首選性病?？崎T診，其次綜合醫(yī)院，部分選擇私人診所或藥房購藥治療。

表1 淋病病理社會人口學(xué)特征（n，%）

2.3 臨床分離株分型和對抗生素敏感情況 RAPD指紋圖譜分型歸為Ⅰ型（44.00%）、Ⅱ型（52.00%）、Ⅲ型（4.00%），三種基因型菌株分布與性別、年齡、職業(yè)等無關(guān)。

NCLIS耐藥性標準判斷耐藥性，MIC為最小抑菌濃度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：環(huán)丙沙星MIC（0.5～32）mg/L，耐藥189例（94.5%）；青霉素MIC在（4～32）mg/L，耐藥176例（88.0%）；四環(huán)素MIC（8～16）mg/L，耐藥155例（77.5%）；阿奇霉素MIC（0.0625～2）mg/L，耐藥25例（12.5%），頭孢曲松MIC（0.005～0.5）mg/L，耐藥0例；壯觀霉素MIC（4～64）mg/L，耐藥0例。

3 討論

通過統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)：淋病患者中男性占比較大為85.00%，多于女性的15.00%；比較集中于已婚人群中，比例高達66.00%，年齡分布主要集中于（21～50）歲人群，其中以工人、民工、干部為主，占比達64.00%，提示已婚男性為好發(fā)人群，在預(yù)防中應(yīng)著重注意該類群體。

男性病人主要為淋菌性尿道炎96.47%（164/170），女性主要為淋菌性宮頸炎90.00%（27/30）；感染途徑主要為性傳播77.00%（154/200），其中非婚性接觸達94.81%（146/154），與其他感染途徑比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），說明應(yīng)加大對非婚性行為感染風險的科普宣傳，提高對非婚性行為危險意識的認識，以有效降低淋病發(fā)病率。RAPD指紋圖譜分型歸為Ⅰ型（44.00%）、Ⅱ型（52.00%）、Ⅲ型（4.00%），三種基因型菌株分布與性別、年齡、職業(yè)等無關(guān)。

淋病流行和抗生素濫用導(dǎo)致奈瑟氏淋球菌耐藥性不斷改變，隨著治療的多元化，耐藥菌株動態(tài)變化，監(jiān)測抗生素耐藥性十分必要[3]。常用耐藥性檢測方法有瓊脂稀釋法、紙片法等，紙片法簡便但影響因素多，常用于臨床指導(dǎo)和用藥治療[4]。瓊脂稀釋法將抗生素溶解到細菌培養(yǎng)基中，藥物低濃度細菌生長，高濃度細菌生長抑制，根據(jù)細菌生長情況測定MIC，根據(jù)NCCLS標準判斷耐藥菌株，具有準確、重復(fù)性好的特點，WHO推薦使用[5]。淋球菌對抗生素耐藥隨區(qū)域、時間變化，耐藥性明顯影響臨床有效治療和防治工作。青霉素和四環(huán)素曾是治療淋病的經(jīng)典藥物，但不正規(guī)使用淋球菌對其耐藥性很高[6]。因此，研究本地區(qū)淋球菌耐藥性對淋球菌感染的合理用藥、科學(xué)治療具有要意義。

本研究中，不同抗生素耐藥性檢測結(jié)果表明淋球菌對常用抗生素耐藥率較高，環(huán)丙沙星是既往往臨床推薦藥物，過去幾十年作為一線抗生素，但是該類藥物在本地區(qū)耐藥性明顯上升，耐藥達94.5%。結(jié)果同時顯示，本地區(qū)頭孢曲松和壯觀霉素暫未發(fā)現(xiàn)耐藥菌株，敏感性100%，今后有廣泛應(yīng)用的價值，可作為首選藥物。