六斑刺鲀仔稚魚發(fā)育過程中消化酶和非特異性免疫因子的活性變化

蘇志星，岳彥峰，施兆鴻，彭士明，夏連軍

（中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部東海與遠洋漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室，上海 200090）

海水魚類仔稚魚發(fā)育過程中較弱的消化酶活性是導(dǎo)致苗種培育過程中出現(xiàn)高死亡率的主要原因之一［1］。魚類消化酶可將大分子營養(yǎng)物質(zhì)分解為小分子，以利于其被各個組織、器官所吸收，為魚類的運動、生長和繁殖等活動提供能量［2］。因此，消化酶活性的高低是衡量仔稚魚營養(yǎng)狀況好壞的重要指標［3-4］。目前國內(nèi)外已有很多關(guān)于仔稚魚期消化酶活性變化的研究，例如匙吻鱘（Polyodon spathula）［4］、黃鰭金槍魚（Thunnus albacores）［5］、條石鯛（Oplegnathus fasciatus）［6］、牙鲆 （Paralichthys olivaceus）［7］和大黃魚（Pseudosciaena crocea）［8］等，這些研究有助于探明不同發(fā)育階段仔稚魚的消化酶活性變化和營養(yǎng)需求。魚類免疫能力易受外界環(huán)境的影響［9-10］，仔稚魚開口攝食時易被致病菌感染，水體中致病菌的入侵是導(dǎo)致仔稚魚發(fā)育過程中出現(xiàn)高死亡率的另一主要因素［11］。魚類的免疫系統(tǒng)是防御外源致病菌攻擊的重要防線，主要包括非特異性免疫和特異性免疫。魚的個體大小是特異性免疫產(chǎn)生的最關(guān)鍵因素［12］，仔稚魚期由于個體較小，免疫系統(tǒng)功能發(fā)育不完全，因此主要依賴自身的非特異性免疫來維持機體的健康生長［13］，所以，研究仔稚魚發(fā)育過程中非特異性免疫指標的變化對苗種的健康養(yǎng)殖具有重要指導(dǎo)意義。

六斑刺鲀（Diodon holocanthus）隸屬于鲀形目（Tetraodontiformes），二齒鲀科（Diodontidae），刺鲀屬，熱帶海洋性底層魚類，仔、稚魚時期隨著大洋漂游生活，成魚則棲息于巖礁區(qū)之淺水域，不善游泳，行動緩慢，主要以貝類、棘皮動物及螃蟹等無脊椎動物為食［14］。六斑刺鲀?nèi)赓|(zhì)鮮美，魚皮富含豐富的膠原蛋白，具有較高的食用、藥用及觀賞價值，深受消費者歡迎。六斑刺鲀資源漁獲量具有明顯的季節(jié)性特征，總體漁獲量不高，目前市場銷售的六斑刺鲀都是野生捕撈，市場供不應(yīng)求［15］，因此，近年來其資源量呈銳減趨勢。國內(nèi)外對六斑刺鲀研究較少，關(guān)于仔稚魚發(fā)育過程消化酶活性和非特異性免疫活性變化的研究迄今未見。本研究旨在通過探究六斑刺鲀仔稚魚生長及不同發(fā)育階段消化酶活性和非特異性免疫指標的變化，為六斑刺鲀?nèi)斯し庇拿绶N培育階段餌料選擇和健康養(yǎng)殖提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗所用六斑刺鲀仔稚魚來自于東海水產(chǎn)研究所海南瓊海研究中心。六斑刺鲀受精卵經(jīng)孵化后獲得初孵仔魚，并在室內(nèi)水泥池中進行苗種培育，仔稚魚培育期間，鹽度30.0～32.0，溫度29.0～31.0℃（用加熱棒進行控制），pH 7.8～8.2，溶氧保持＞5 mg·L-1。苗種培育過程中餌料投喂組合如下：初孵仔魚前3 d投喂經(jīng)營養(yǎng)強化后的輪蟲和鹵蟲無節(jié)幼體；第5天時，改投1 mm以下小規(guī)格的橈足類和鹵蟲無節(jié)幼體；第10天時，投喂1 mm以上大規(guī)格的橈足類（或者大型枝角類，例如蒙古裸腹溞（Moina Mongolica）以及營養(yǎng)強化后的豐年蟲（Artemia salina）；第15天左右，初孵仔魚發(fā)育至稚魚期，此時可投喂凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）的無節(jié)幼體以及2 mm左右的豐年蟲；第20天時，可投喂5 mm以上的豐年蟲以及10 mm以下的凡納濱對蝦苗種；第35天左右，發(fā)育至幼魚期，可適量投喂凡納濱對蝦肉糜和顆粒飼料。

苗種培養(yǎng)期間每天取樣觀察仔稚魚的生長發(fā)育，分別采集初孵仔魚（孵化當天，計為第1天）以及孵化后第5、10、15、20、25、30、35、40天的樣本，1～25 d樣品的采集量大約為1.5 mL離心管的2／3體積，25 d后每批采集20尾左右。采樣時間設(shè)定為投餌前，采集的樣品用蒸餾水漂洗干凈，吸取多余水分后，立即放入-80℃冰箱冷凍保存待測，同時從培育池中另取樣測定苗種全長。

1.2 樣品分析

1～25 d的魚苗整體勻漿，25 d以后的魚苗剪取腹部。以4℃冰凍重蒸水用玻璃勻漿器勻漿，取部分勻漿液直接測定脂肪酶的活力，剩余部分置于冷凍離心機中，在4℃、10 000 r·min-1離心30 min后，取上清液用于各種消化酶的活力測定。

淀粉酶（amylase）活性定義為在37℃下，每毫升酶液30 min內(nèi)完全水解10 mg淀粉為一個淀粉酶活力單位U·mg-1。

胃蛋白酶（pepsin）活性定義為每毫克組織蛋白在37℃、pH 3.8條件下每分鐘分解蛋白生成1 g氨基酸相當于一個酶活力單位U·mg-1。

胰蛋白酶（trypsin）活性定義為在37℃、pH 8.0條件下每毫克蛋白中含有的胰蛋白酶每分鐘使吸光度變化0.003即為一個酶活力單位U·mg-1。

脂肪酶（lipase）活性采用南京建成試劑盒檢測，定義為在37℃條件下，每毫升酶液在反應(yīng)體系中與底物反應(yīng)1 min，每消耗1 mmol底物為一個酶活力單位U·mg-1。

免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）采用免疫比色法進行測定，所用試劑盒采購于南京建成生物工程研究所，檢測方法參照試劑盒說明書。

溶菌酶（lysozyme，LZM）活性檢測采用濁度比色法，LZM活力的測定結(jié)果表示為U·mg-1，每個活力單位（U）定義為每毫克可溶蛋白每分鐘使吸光值降低0.001的倍數(shù)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

實驗數(shù)據(jù)采用平均值±標準差（mean±SD）表示，并用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對結(jié)果數(shù)據(jù)進行單因素方差分析（one-way ANOVA），P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 六斑刺鲀仔稚魚生長變化

經(jīng)過40 d的培育，六斑刺鲀的全長變化如圖1所示。體長由1 d的2.23 mm增長到40 d的23.47 mm，在1～15 d發(fā)育過程中魚的全長增長速度相對比較平緩，無顯著性變化（P＞0.05），而20～40 d過程中全長的增長速度明顯加快，全長也發(fā)生顯著性變化（P＜0.05）。在40 d實驗過程中，日齡和全長呈指數(shù)相關(guān)，擬合的全長增長方程為y=1.900 5e0.2683x（R2=0.980 7）。

圖1 六斑刺鲀發(fā)育過程中全長與日齡的關(guān)系Fig.1 Relation between total length and daily age of Diodon holocanthus larvae

2.2 六斑刺鲀仔稚魚消化酶活性變化

六斑刺鲀仔稚魚發(fā)育過程中各種消化酶活性變化如圖2所示。由圖2-a可知，在40 d的生長過程中，仔稚魚淀粉酶活性呈現(xiàn)明顯的先升高后降低再升高的變化趨勢；5～20 d仔魚淀粉酶活性極顯著上升（P＜0.01），并在20 d時到達最高，20～30 d時又劇烈的下降（P＜0.01），而在30 d后酶活性又緩慢升高。胃蛋白酶活性變化如圖2-b所示，在40 d的發(fā)育過程中，胃蛋白酶活性呈現(xiàn)出明顯的先升高后降低的變化趨勢；1～15 d胃蛋白酶活性極顯著上升（P＜0.01），并在15 d時達到最大值，而15～25 d活性又明顯下降（P＜0.01），25～40 d酶活性變化趨于穩(wěn)定且與1～5 d仔魚間無顯著性差異（P＞0.05）。由圖2-c可知，胰蛋白酶也呈現(xiàn)先升高后降低再升高的變化趨勢，但30 d后增長幅度比淀粉酶更明顯；1～10 d仔魚胰蛋白酶活性出現(xiàn)極顯著上升（P＜0.01），并在10 d時達到最大值，10～20 d過程中酶活性又極顯著降低（P＜0.01），20～30 d變化不明顯（P＞0.05），30～40 d又呈現(xiàn)極顯著上升趨勢（P＜0.01）。脂肪酶活性變化如圖2-d所示，1～5 d仔魚酶活性顯著下降（P＜0.05）。5～10 d又極顯著升高（P＜0.01），并在10 d達到最大，15～20 d酶活性又極顯著下降（P＜0.01），并在20 d時到達最小值，20～40 d酶活性有輕微波動，但總體變化并不明顯（P＞0.05）。

2.3 六斑刺鲀仔稚魚非特異性免疫指標活性變化

六斑刺鲀仔稚魚發(fā)育過程中非特異性免疫指標活性變化如圖3所示。由圖3-a可知，仔稚魚IgM活性呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢，1～10 d活性極顯著升高（P＜0.01），并在10 d時達到整個發(fā)育過程的最大值，10～25 d活性呈現(xiàn)波動式下降且下降趨勢明顯（P＜0.01），25～40 d酶活性變化趨于平緩并維持在較低水平，各日齡間無顯著差異（P＞0.05）。如圖3-b所示，仔稚魚LZM活性和IgM呈現(xiàn)相似的變化趨勢，1～5 d酶活性極顯著上升（P＜0.01），并在5 d時達到最高值，10～40 d酶活性出現(xiàn)緩慢下降趨勢，且各日齡間變化不明顯（P＞0.05）。

3 討論

圖2 六斑刺鲀發(fā)育過程中各種消化酶活性變化Fig.2 Changes of digestive enzyme activities in Diodon holocanthus larvae at different developmental stages

圖3 六斑刺鲀仔稚魚發(fā)育過程中非特異性免疫指標活性變化Fig.3 Changes of non-specific immune indexes in Diodon holocanthus larvae at different developmental stages

消化酶是由消化系統(tǒng)分泌的具有催化食物水解功能的蛋白質(zhì)，能夠把大分子物質(zhì)（脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和淀粉等）水解為小分子（脂肪酸、氨基酸和單糖等）以便于機體的運輸和吸收利用［16-17］。魚類消化酶的分泌受到消化器官發(fā)育、營養(yǎng)成分需求以及自身生活習(xí)性變化等因素的影響，在生長發(fā)育的不同階段也存在一定差異。魚類早期發(fā)育過程中消化酶的種類、活性和特性能初步反映魚體消化吸收能力的強弱，進而反映出機體生長和生存狀態(tài)［18-19］。大量研究［20-21］表明，魚類發(fā)育過程中消化酶活性變化主要受到不同生長期餌料需求轉(zhuǎn)變和消化器官發(fā)育程度的影響，其中仔稚魚由內(nèi)源性營養(yǎng)轉(zhuǎn)為外源性營養(yǎng)以及仔魚轉(zhuǎn)變?yōu)橹婶~是消化酶活性發(fā)生量變的兩個重要時期。大多數(shù)海水浮性卵魚類孵化時消化系統(tǒng)還沒有分化，但在六斑刺鲀（典型的浮性卵海水魚類）初孵仔魚中就可以檢測到淀粉酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和脂肪酶活性，表明六斑刺鲀消化酶的活性和種類來自于卵子本身，并受到遺傳基因的調(diào)控，而不受外源餌料誘導(dǎo)。

3.1 六斑刺鲀仔稚魚淀粉酶活性變化

魚類發(fā)育的各個階段淀粉酶活性存在較大差異。本研究中，六斑刺鲀仔稚魚開口前就具備較低的淀粉酶活性，表明初孵仔魚已經(jīng)具備消化碳水化合物的能力。匙吻鱘［4］、日本黃姑魚（Nibea japonica）［18］、金頭鯛（Sparus aurata）［22］等仔魚在開口前也具有較低的淀粉酶活性，這與六斑刺鲀極為相似；而菊黃東方鲀（Takifugu flavidus）［23］、塞內(nèi)加爾鰨（Solea senegalensis）［24］等初孵仔魚的淀粉酶活性較高，造成這種差異的原因可能與魚的種類、食性以及卵黃中糖原含量不同有關(guān)［2，25］。外源糖類可刺激魚體淀粉酶的表達，CAHU和INFANTE［26］發(fā)現(xiàn)食物中12%的淀粉含量可以顯著提高舌齒鱸（Dicentrarchus labrax）淀粉酶活性。六斑刺鲀仔魚淀粉酶活性在5 d后顯著上升，表明此時是仔魚從內(nèi)源營養(yǎng)向外源營養(yǎng)轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵期，酶活性的升高可能是受到輪蟲和鹵蟲無節(jié)幼體中的碳水化合物（如淀粉）的刺激，但5～20 d仔稚魚的全長變化并不顯著，這可能是由于攝取的物質(zhì)和能量更多地用于器官發(fā)育和組織變態(tài)，而仔魚期較弱的游泳能力也會導(dǎo)致攝食活餌時消耗大量能量。此外，活餌料中的淀粉酶對魚體淀粉酶全活力的貢獻也可能是六斑刺鲀仔稚魚淀粉酶活性增加的原因之一［27］。20 d后，六斑刺鲀仔稚魚淀粉酶活性顯著下降并在30 d時達到最低，之后維持穩(wěn)定水平。此時仔稚魚消化系統(tǒng)基本發(fā)育完善，對蛋白質(zhì)和脂質(zhì)利用率上升而對糖類的利用率下降，同時這種食物需求轉(zhuǎn)變過程中的不適應(yīng)也會導(dǎo)致淀粉酶分泌系統(tǒng)功能減弱［28-31］。20 d后仔稚魚進入快速生長期，全長變化顯著，雖然此時淀粉酶活性下降，但依然發(fā)揮重要作用。淀粉酶變化趨勢表明，仔稚魚前期淀粉酶水解的所得能量不用于機體的生長，而主要用于維持魚體生存和器官發(fā)育。相似的結(jié)果在大瀧六線魚（Hexagrammos otakii）［2］、日本鬼鲉（Inimicus japonicus）［32］、歐 洲 鱸（Dicentrarchus labrax）［33］等肉食性海水魚類中都有過報道。因此可以考慮在1～20 d期間投喂高碳水化合物含量的餌料，而在20～40 d期間投喂低碳水化合物含量的餌料。

3.2 六斑刺鲀仔稚魚胃蛋白酶活性變化

魚的胃是胃蛋白酶的主要分泌器官，胃的分化和功能的完善對蛋白質(zhì)的消化效率以及機體的營養(yǎng)狀況具有重要影響［24］。胃在完全形成之前胃酸分泌較弱，胃蛋白酶中堿性蛋白酶活性高，胃消化功能發(fā)育完善后，胃蛋白酶中的酸性蛋白活性上升而堿性蛋白活性下降［3，34］。本研究結(jié)果顯示，六斑刺鲀生長發(fā)育早期就可以檢測到胃蛋白酶，但活性較低，這與其消化系統(tǒng)的發(fā)育相一致。隨著日齡的增加，六斑刺鲀仔稚魚胃蛋白酶活性迅速升高，在大瀧六線魚［2］、長嘴硬鱗魚（Atractosteus tristoechus）［3］、菊黃東方鲀［23］、尖吻鱸（Lates calcarifer）［34］等仔稚魚的研究中也得到相似的結(jié)果。六斑刺鲀仔魚在2 d時即可開口攝食，雖然此時的胃蛋白酶活性較低，但輪蟲和鹵蟲等活體餌料中的外源消化酶可幫助消化部分蛋白質(zhì)［2，35］，蛋白質(zhì)總體利用率不高。隨著仔魚的生長和胃的不斷發(fā)育，餌料攝入量逐漸增多，誘導(dǎo)胃蛋白酶基因的表達［2］，胃蛋白酶活性顯著增加，并在15 d時達到最大，蛋白質(zhì)利用率的顯著上升也為之后魚體的快速生長積累大量物質(zhì)和能量，同時表明仔稚魚的胃器官可能在15 d或更早就已形成。15～25 d時，隨著稚魚腸道、肝胰臟等消化器官的發(fā)育完善，胃蛋白酶功能被部分替代，導(dǎo)致胃蛋白酶活性下降，并一直維持在較低水平。由此可推測，六斑刺鲀胃蛋白酶活性主要受到魚胃發(fā)育程度的影響，而餌料的不斷攝入可一定程度上刺激魚胃的快速發(fā)育。

3.3 六斑刺鲀仔稚魚胰蛋白酶活性變化

胰蛋白酶屬于堿性蛋白，在魚類早期發(fā)育過程中對蛋白質(zhì)的消化起主要作用［36］。本研究中，六斑刺鲀仔稚魚發(fā)育早期就可檢測到胰蛋白酶活性，這與大瀧六線魚［2］、細點牙鯛（Dentex dentex）［20］、梭魚（Liza haematocheila）［25］、黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）［37］等研究結(jié)果相似。胰蛋白酶對卵黃蛋白的消化具有重要作用，在1～10 d，胰蛋白酶活性顯著上升并在10 d時達到最大值，表明在六斑刺鲀仔魚發(fā)育早期，較高的胰蛋白酶活性可以彌補胃功能的缺失或不足，特別在5～10 d時，酶活性增加趨勢更為明顯，這可能是受到外源食物的刺激，加速了卵黃蛋白的吸收完畢，從而為后續(xù)完全外源性營養(yǎng)階段時自身消化能力的提升做準備［37-38］。卵黃吸收完畢后，仔稚魚一般會經(jīng)歷短暫的饑餓期，胰蛋白酶活性有所降低［2］。此外，隨著仔稚魚胃消化功能逐步發(fā)育成熟，胃的酸性消化在蛋白質(zhì)的吸收中逐漸發(fā)揮作用［3］，胃蛋白酶的分泌對胰蛋白酶基因的表達起到一定的抑制作用。在25～40 d，胰蛋白酶活性又顯著上升并維持在較高水平，說明胃的消化功能成熟后，胰蛋白酶在六斑刺鲀仔稚魚的蛋白質(zhì)消化中仍發(fā)揮著重要作用?？傮w上，胰蛋白酶活性呈現(xiàn)上升趨勢，蛋白質(zhì)的消化吸收效率也隨之增加，加速了魚體生長和發(fā)育。

3.4 六斑刺鲀仔稚魚脂肪酶活性變化

脂肪酶主要是由魚類的肝胰臟分泌的，幾乎存在于魚類所有的消化器官中，在海水仔稚魚的消化生理中占據(jù)重要地位［2，39］。飼料中脂肪的直接吸收、過量碳水化合物和蛋白質(zhì)在肝臟中的轉(zhuǎn)化是魚類脂肪的重要來源［40］。不同魚類仔稚魚的脂肪酶出現(xiàn)時間不同，本研究中，六斑刺鲀初孵仔魚就可檢測到較高的脂肪酶活性，這與匙吻鱘［4］、日本黃姑魚［18］、黃條鰤（Seriola aureovittata）［40］等研究結(jié)果相似。1～5 d六斑刺鲀仔稚魚脂肪酶活性顯著降低，5～15 d酶活性顯著增加，15～40 d又明顯下降并最終維持在較低水平，這種變化趨勢表明六斑刺鲀仔稚魚的發(fā)育伴隨著脂肪酶活性的階段性下降。有研究［27，41］表明，仔稚魚發(fā)育早期體內(nèi)存在兩種類型的脂肪酶，即磷脂酶A2和脂酶，這兩種酶在一定條件下可以相互轉(zhuǎn)化。磷脂酶A2的活性可被磷脂激活，初孵仔魚的卵黃囊中富含磷脂，這導(dǎo)致六斑刺鲀仔稚魚發(fā)育初期脂肪酶活性較高，此時的脂肪酶主要是磷脂酶A2。一般情況下，較高的酶活性可加快能量積累，為仔魚由內(nèi)源性營養(yǎng)向外源性營養(yǎng)轉(zhuǎn)化時的游泳和攝食行為的能量消耗做準備。1～5 d脂肪酶活性降低，此時仔魚已開口攝食，淀粉酶活性也較低，魚體主要通過消耗卵黃囊或活餌中的蛋白質(zhì)來提供能量需求（圖2-b，c），可推測蛋白質(zhì)在六斑仔魚發(fā)育早期具有重要作用。因此，六斑刺鲀仔稚魚發(fā)育早期應(yīng)提供蛋白質(zhì)含量高的餌料。脂酶活性主要受到餌料中三酸甘油酯的影響，隨著仔稚魚卵黃囊的消耗以及外源活性餌料的攝入，脂酶活性被餌料中的三酸甘油酯激活。5～10 d六斑刺鲀仔稚魚脂肪酶活性顯著增加，這可能與胰腺外分泌功能的成熟以及活體餌料中脂肪含量變化有關(guān)［3，27］，然而其他各種消化酶活性也很高，說明這段時間能量需求大，但魚體全長變化并不顯著（圖1），表明大部分能量用于攝食活動和器官發(fā)育，并為仔魚向稚魚的轉(zhuǎn)變提供物質(zhì)儲備。15 d后脂肪酶活性降低并一直維持在較低水平，這受到稚魚的生理需求變化、餌料種類和攝入量的影響。

3.5 六斑刺鲀仔稚魚非特異性免疫指標活性變化

魚類作為變溫、低等脊椎動物，具有特異與非特異性兩大免疫系統(tǒng)［42］。魚類系統(tǒng)發(fā)育學(xué)認為非特異性免疫要早于特異性免疫，因為特異性免疫的產(chǎn)生可能主要取決于魚的大小而非年齡［12］。魚類早期發(fā)育時個體較小，特異性免疫器官發(fā)育不完全，因此機體主要依賴非特異性免疫和母源性免疫來抵御外源致病菌的入侵［43］。LZM和IgM作為兩種最常見的生物標志物，是機體非特異性防御機制的第一道防線，其活性大小直接反映出免疫力的強弱［44-45］。本研究中，在1～10 d六斑刺鲀仔稚魚LZM活性顯著增加，隨后緩慢下降并趨于穩(wěn)定，IgM活性在1～5 d上升顯著，之后逐漸降低并維持在較低水平，總體上，兩者都呈現(xiàn)出先上升后下降的變化趨勢。3 d后的仔魚已開始攝食，仔魚處于內(nèi)源性營養(yǎng)向外源性營養(yǎng)轉(zhuǎn)化的混合營養(yǎng)期，營養(yǎng)物質(zhì)既可以從卵黃中攝取又可以從外源餌料中攝取，這個階段極易感染致病菌，非特異性免疫因子的高活性可有效增強機體免疫力。此外，外源生物餌料的攝入，也會一定程度地刺激LZM和IgM相關(guān)基因的表達［46］。而LZM和IgM活性的逐漸降低，說明仔稚魚對外部環(huán)境慢慢適應(yīng)，達到免疫平衡。最終，隨著仔稚魚的生長，特異性免疫器官也逐漸成熟，特異性免疫因子陸續(xù)表達，部分代替或抑制非特異免疫因子的作用，最終維持平衡狀態(tài)。

4 小結(jié)

綜上，在六斑刺鲀仔稚魚發(fā)育過程中，消化酶的活性隨著仔稚魚的生長發(fā)育發(fā)生顯著變化。六斑刺鲀?yōu)殡s食性魚類，在發(fā)育早期對蛋白質(zhì)的利用能力較強，隨著消化系統(tǒng)的發(fā)育，對糖類和脂肪的利用也有所提高。目前雖然對一些酶的變化機制還不是十分清楚，但了解酶活性的變化規(guī)律可為苗種培育過程中餌料投喂的調(diào)整提供理論基礎(chǔ)。此外，仔稚魚發(fā)育過程中非特異性免疫在抵御致病菌入侵時也發(fā)揮重要作用，特別在初孵仔魚開口前后非特異性免疫指標活性顯著升高，可有效提高仔稚魚開口期的成活率。