(山東省廣饒縣動(dòng)物疫病防治服務(wù)中心 257300)
肝功指數(shù)(Liver function index,LFI)是Trevisi 提出的利用奶牛產(chǎn)后3d 及28d 血液中白蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)和總膽紅素(TBIL)含量計(jì)算出的能綜合評(píng)價(jià)肝臟功能的指標(biāo)[1]。奶牛分娩后,為滿足泌乳需要,乳腺組織的發(fā)育和更新加快,奶牛對(duì)能量和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求也隨之增加。為滿足自身能量的供應(yīng),奶牛需要?jiǎng)佑皿w脂,使體內(nèi)游離脂肪酸增多,誘發(fā)奶牛酮病及脂肪肝的發(fā)生[2],進(jìn)一步損害奶牛肝臟功能。
眾所周知,圍產(chǎn)期奶牛體脂大量動(dòng)員會(huì)給奶牛健康帶來負(fù)面影響。其中,肝臟代謝負(fù)擔(dān)加重,釋放大量的急性期蛋白[3,4]。圍產(chǎn)期奶牛LFI 變化范圍為-12~5,當(dāng)LFI 為正值時(shí),表明奶牛圍產(chǎn)期營(yíng)養(yǎng)和管理比較適當(dāng),機(jī)體處于健康狀況[5]。圍產(chǎn)期能量負(fù)平衡引起的體脂動(dòng)員對(duì)奶牛繁殖性能產(chǎn)生了負(fù)面影響,是影響牧場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益的重要因素[6]。
近年來,奶牛單產(chǎn)不斷提高,繁殖力確呈現(xiàn)下降趨勢(shì),表現(xiàn)為產(chǎn)后乏情、發(fā)情周期紊亂等。但國(guó)內(nèi)集約化牛場(chǎng)并未開展肝功的綜合評(píng)價(jià)。為此,本試驗(yàn)開展圍產(chǎn)期奶牛肝功指數(shù)與繁殖性能和代謝健康的關(guān)系研究,以便為奶牛業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)。
本試驗(yàn)在黑龍江綏化裕達(dá)牧業(yè)奶牛場(chǎng)開展,所選試驗(yàn)動(dòng)物的年齡、體況、胎次相近。所有試驗(yàn)動(dòng)物均為散欄式,自由采食,全混合日糧(TMR)的飼養(yǎng)模式。泌乳早期日糧組成:大豆皮2.43%、糖蜜1.2%、玉米青貯41.3%、小蘇打0.81%、玉米23.5%、豆粕6.39%、食鹽0.38%;營(yíng)養(yǎng)水平:干物質(zhì)73.54%、粗脂肪3.83%、粗蛋白質(zhì)6.96%、粗纖維12.42%、鉀0.81%、磷鈣2.50%、鎂0.40%。
試驗(yàn)動(dòng)物分組:按照肝功能指數(shù)高低將試驗(yàn)牛分為高(UP-LFI),中(IN-LFI),低(LO-LFI)3 組,每組10 頭。計(jì)算肝功能指數(shù)(LFI)分為兩步[1]。
(1)白蛋白亞指數(shù)(Subindex of albumin,SI.ALB)=50%×C3+50%×(C28-C3),總膽固醇亞指數(shù)(Subindex of TC,SI.TC)=50%×C3+50% (C28-C3),總膽紅素亞指數(shù)(Subindex of TBIL,SI.TBIL)=67%×C3+33%× (C3-C28);
(2)LFI=(SI.ALB-17.71)/1.08+(SI.TC-2.57)/0.43-(SI.TBIL-6.08)/2.17。其中,C3 和C28 分別表示奶牛產(chǎn)后第3d 和第28d 的ALB、TC 和TBIL 在血漿中的濃度,單位分別為g/L、mmol/L 和umol/L。LFI 的取值范圍為。-12<LFI<5,當(dāng)LFI>0 時(shí),表明奶牛圍產(chǎn)期營(yíng)養(yǎng)和管理比較適當(dāng),機(jī)體處于健康狀態(tài)。
1.2.1 血液指標(biāo)
所有試驗(yàn)?zāi)膛>诋a(chǎn)后3d 和產(chǎn)后28d 清晨空腹時(shí)進(jìn)行尾根靜脈采血10ml,并在4000 r/min 離心5min,吸取上清液,再用12000r/min 高速離心5min,分裝血清,保存于-80℃待測(cè)。
肝功指標(biāo)檢測(cè):血清中白蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)、總膽紅素(TBIL)由南京建成生物公司檢測(cè);甘油三酯(TG)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)含量由艾迪康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心檢測(cè);β-羥基丁酸(BHBA)、葡萄糖(Glu)含量采用試紙條法測(cè)定,試紙條分別購(gòu)自北京田園農(nóng)人生物科技有限公司、三諾生物傳感有限公司。
1.2.2 奶?;拘畔⒉杉?/p>
根據(jù)牛場(chǎng)日常應(yīng)用的阿菲金管理軟件及現(xiàn)場(chǎng)跟蹤觀察記錄統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)牛的基本信息(年齡、胎次、體況評(píng)分、泌乳量)、繁殖數(shù)據(jù)(首次發(fā)情天數(shù)、產(chǎn)后50d 內(nèi)發(fā)情次數(shù))及病史等基本信息。
所有統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)使用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,不同組之間進(jìn)行獨(dú)立樣本T 檢驗(yàn)數(shù)據(jù),結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。p<0.05 表示差異顯著,p<0.01 表示差異極顯著。
由表1 可知,LO-LFI 組奶牛體況評(píng)分顯著高于UP-LFI,IN-LFI 組(p<0.05);LO-LFI 組奶牛泌乳量極顯著低于UPLFI,IN-LFI 組(p<0.01);IN-LFI,LO-LFI 組奶牛產(chǎn)后首次發(fā)情天數(shù)極顯著晚于UP-LFI 組(p<0.01);奶牛產(chǎn)后50d 內(nèi)發(fā)情次數(shù),UP-LFI 組顯著高于IN-LFI 組(p<0.05),IN-LFI 組顯著高于LO-LFI 組(p<0.05),且UP-LFI 組奶牛極顯著高于LOLFI 組(p<0.01)。
由表2 可知,血漿Glu 水平,奶牛產(chǎn)后3d UP-LFI,INLFI 組顯著高于LO-LFI 組(p<0.05),產(chǎn)后28d UP-LFI 組極顯著高于IN-LFI,LO-LFI 組(p<0.01);血漿BHBA 水平,奶牛產(chǎn)后3d LO-LFI 組顯著高于UP-LFI,IN-LFI 組(P<0.05),產(chǎn)后28d 組間無顯著差異(p>0.05);血漿AST 水平,奶牛產(chǎn)后3d 組間無顯著差異(p>0.05),產(chǎn)后28d IN-LFI,LO-LFI 組奶牛顯著高于UP-LFI 組(p<0.05);血漿ALB 水平,奶牛產(chǎn)后3d LO-LFI 組顯著低于IN-LFI 組(p<0.05),血漿TG 水平,奶牛產(chǎn)后3d LO-LFI 組顯著高于IN-LFI 組(p<0.05),IN-LFI 組顯著高于UP-LFI 組(p<0.05),且LO-LFI 組與UP-LFI 組差異極顯著(p<0.01)。
表1 試驗(yàn)?zāi)膛1尘靶畔⒓胺敝承阅?/p>
表2 試驗(yàn)?zāi)膛Q獫{能量和肝功指標(biāo)水平
圍產(chǎn)期奶牛產(chǎn)后3d 和28d 是奶牛產(chǎn)后重要的時(shí)期,奶牛產(chǎn)后隨著泌乳的啟動(dòng),自身對(duì)能量的需求也隨之增加,此時(shí)奶牛易處于能量負(fù)平衡狀態(tài)[7]。由表2 結(jié)果可知,泌乳早期LFI較高奶牛的血液葡萄糖水平較高,酮體水平較低,提示LFI 較高奶牛在泌乳早期的能量負(fù)平衡嚴(yán)重程度較低。LFI 較低時(shí)能量代謝指標(biāo)表現(xiàn)為能量負(fù)平衡狀態(tài),即低血糖、高酮體的狀況。
文獻(xiàn)報(bào)道,圍產(chǎn)期能量負(fù)平衡奶牛體脂大量動(dòng)員后,體內(nèi)血液中游離脂肪酸增多,甘油三酯(TG)含量升高,易引發(fā)酮病。TG 是奶牛體內(nèi)含量最多的脂類[8],它可與極低密度脂蛋白(Very low density lipoprotein,VLDL) 結(jié)合,被轉(zhuǎn)運(yùn)出肝臟,不會(huì)在肝臟中蓄積。圍產(chǎn)期奶牛發(fā)生能量負(fù)平衡時(shí),大量游離脂肪酸進(jìn)入肝臟代謝,超出肝臟代謝能力后,造成TG 不能及時(shí)的轉(zhuǎn)運(yùn)出肝臟,造成肝細(xì)胞脂肪浸潤(rùn),甚至是脂肪肝,進(jìn)一步降低肝臟功能[9,10]。本研究TG 含量在LFI 較低的奶牛中顯著較高,與文獻(xiàn)報(bào)道相符。同時(shí),本試驗(yàn)?zāi)膛.a(chǎn)后3d 不同肝功能指數(shù)奶牛血中AST 含量無顯著差異,而產(chǎn)后28d,血中AST含量較高,血中白蛋白含量下降。這與研究報(bào)道低LFI 奶牛肝功降低后影響血中AST 與ALB 含量[11]的結(jié)果一致。
本試驗(yàn)表1 顯示,低、中LFI 的奶牛產(chǎn)后首次發(fā)情天數(shù)顯著晚于高LFI 的奶牛,產(chǎn)后50d 內(nèi)奶牛發(fā)情次數(shù),高、中、低LFI 的奶牛不同組之間存在顯著差異,這表明低LFI 與奶牛繁殖性能降低之間存在密切關(guān)系。研究表明,圍產(chǎn)期低LFI 奶牛繁殖相關(guān)疾病發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢(shì),最終降低奶牛繁殖效率[11]。并且,不同組LFI 的奶牛圍產(chǎn)期泌乳量中低LFI 的奶牛日平均泌乳量顯著較低,這表明LFI 降低會(huì)降低奶牛泌乳性能,最終表現(xiàn)為奶牛生產(chǎn)性能下降。另外,Esposito G 等[12]與Li P等[13]報(bào)道,泌乳早期高體況奶牛容易發(fā)生酮病,本試驗(yàn)中與高LFI 的奶牛相比,低LFI 的奶牛體況顯著較高。因此,文獻(xiàn)報(bào)道和本試驗(yàn)都證實(shí)了低LFI 的奶牛發(fā)生酮病幾率明顯增高。
綜上所述,奶牛產(chǎn)后肝功指數(shù)越低或負(fù)值越大,表明肝功障礙程度越高,會(huì)導(dǎo)致奶牛產(chǎn)后能量代謝障礙、泌乳性能和繁殖性能下降。因此,加強(qiáng)奶牛產(chǎn)后肝功監(jiān)測(cè)對(duì)提高奶牛繁殖力和牧場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益具有重要意義。