不同加熱時間對8種人參單體皂苷含量的影響△

高越，于洋，牛淑靜，陳海蘭，劉同帥，邱智東，位鴻

(1.長春中醫(yī)藥大學 藥學院，吉林 長春 130117；2.吉林省食品藥品審批中心，吉林 長春 130062；3.長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，吉林 長春 130021)

·基礎研究·

不同加熱時間對8種人參單體皂苷含量的影響△

高越1，于洋1，牛淑靜2，陳海蘭1，劉同帥1，邱智東1，位鴻3*

(1.長春中醫(yī)藥大學 藥學院，吉林 長春130117；2.吉林省食品藥品審批中心，吉林 長春130062；3.長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，吉林 長春130021)

目的：研究不同加熱時間對8種人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rh1、Rb1、Ro、Rb2及Rd含量的影響。方法：采用高效液相色譜法測定不同加熱時間的人參藥材中，上述8種人參皂苷的含量。結果：人參皂苷Rg1、Re、Rb1、Ro、Rb2、Rf加熱后含量降低；Rd、Rh1在121℃加熱60、90min時含量升高，120min時含量降低。結論：不同加熱時間對8種人參單體皂苷的含量有影響。

人參皂苷；高效液相色譜法；含量測定

人參為五加科植物人參PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根和根莖。國內外均證明，人參皂苷(Ginsenoside)是人參多種化學成分中最重要的一類活性成分[1-3]，具有大補元氣、補脾益肺、生津止渴、安神益智等功能[4-5]。因此人參皂苷含量的多少是評價人參內在質量的重要指標[6]。本試驗采用高效液相色譜法同時測定不同加熱時間對人參藥材中8種主要皂苷類成分含量的影響，為人參藥材生物轉化研究的質量控制提供參考。

1 儀器與試藥

立式壓力蒸汽滅菌器YXQ-LS-50A(上海博迅實業(yè)有限公司)；安捷倫-1260高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)；DIF-6090型真空干燥箱(上海一恒實驗儀器總廠)；萬分之一電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)；十萬分之一電子天平(德國Sartorius公司)；KQz3200E型超聲波清洗機(天鵬電子新技術有限公司)；SZ-97型自動純水蒸餾器(上海亞榮儀器廠)；HH-4型數顯恒溫水浴鍋(金壇市江南儀器廠)。

人參皂苷標準品(Rg1、Re、Rf、Rh1、Rb1、Ro、Rb2、Rd，中國食品藥品檢定研究院)；甲醇、乙腈為色譜純；水為蒸餾水；其余試劑均為分析純。人參產地為吉林長白山地區(qū)，由長春中醫(yī)藥大學藥學院翁麗麗教授鑒定，符合《中華人民共和國藥典》2010版規(guī)定。

2 方法與結果

2.1 方法

取50 g人參(過10目篩)，121 ℃加熱，加熱時間見表1。采用高效液相色譜法測定不同加熱時間人參皂苷Rg1、Re、Rb1、Rf、Rh1、Ro、Rb2、Rd的含量變化。

2.2 不同加熱時間對8種人參皂苷含量的影響

2.2.1 色譜條件 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以0.4%磷酸水為流動相B，按表2中的規(guī)定進行梯度洗脫；檢測波長為203 nm；柱溫為30 ℃；流速為1.0 mL·min-1。理論板數按人參皂苷Rg1峰計算應不低于6000[7]。

表2 流動相梯度洗脫

2.2.2 對照品溶液的制備 精密稱取對照品人參皂苷Rg1、Re、Rb1、Rf、Rh1、Ro、Rb2及Rd，加甲醇制成質量濃度為0.2 mg·mL-1的混合溶液，搖勻，即得。

2.2.3 供試品溶液的制備 取人參粉末約1 g(過四號篩)，精密稱定，置索氏提取器中，加三氯甲烷加熱回流3 h，棄去三氯甲烷液，藥渣揮干溶劑，連同濾紙筒移入100 mL錐形瓶中，精密加水飽和正丁醇50 mL，密塞，放置過夜，超聲處理(功率為250 W，頻率為50 KHz)30 min，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液25 mL，置蒸發(fā)皿中蒸干，殘渣加甲醇溶解并轉移至5 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得[7]。

2.2.4 測定法 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液10 μL，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。結果見表3、圖1～2。

表3 不同加熱時間8種人參皂苷的含量 /mg·g-1

圖1 不同加熱時間人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rh1、Rb1、Ro、Rb2、Rd的含量變化柱形圖

結果表明：人參皂苷Rg1、Re、Rb1、Ro、Rb2、Rf加熱后含量降低；Rd、Rh1在加熱60、90 min時含量升高，120 min時含量降低。

3 討論

人參經過不同時間加熱，其單體皂苷的含量有明顯的變化。人參皂苷Rg1、Re、Rb1、Ro、Rb2、Rf加熱后含量降低；Rd、Rh1在加熱60、90 min時含量升高，120 min時含量降低。高溫容易使人參中部分一級皂苷內的糖苷鍵斷裂，生成次級苷或構象發(fā)生變化的次級苷，所以通過加熱，人參單體皂苷之間相互轉化。人參經加工后得到的紅參[8]及生曬參的皂苷含量與林下參的皂苷含量不同[9]。人參在陽光下經9次蒸制和8次干燥得到黑人參[10]，其化學成分及獨特的濃厚風味與人參不同。高溫會使人參皂苷發(fā)生轉化，在85～90 ℃多次蒸制得到紅參，在80～120 ℃多次蒸制得到黑人參。加熱滅菌是生產食品、藥品和保健品過程中不可避免的步驟，121 ℃滅菌60 min為固體最佳滅菌溫度及時間。為了試驗方便簡單，采用121 ℃為加熱溫度，測定不同加熱時間對人參皂苷含量的影響。筆者對人參的主要成分經加熱后產生的變化進行了分析，總結出8種人參皂苷的含量變化，為人參藥材生物轉化研究的質量控制提供試驗依據，為人參產品的研發(fā)和使用提供參考。

A.加熱前；B.加熱60 min；C.加熱90 min；D.加熱120 min；1.Rg1；2.Re；3.Rf；4.Rh1；5.Rb1；6.Ro；7.Rb2；8.Rd。圖2 不同加熱時間的HPLC色譜圖對照

[1] 張均田.人參研究的最新進展[J].江蘇大學學報醫(yī)學版，2009，19(3)：185.

[2] 朱嵐銦.人參功效的再認識[J].中醫(yī)臨床研究，2010，2(11)：99.

[3] 王莎莉，李英博，王亞平，等.人參總皂苷對人胚胎神經干細胞增殖及定向誘導為多巴胺能神經元的影響[J].中國中藥雜志，2007，32(13)：1310-1313.

[4] 王利群.中國人參栽培史考[J].人參研究，2001，13(4)：46-48.

[5] 國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T19506-2009地理標志產品吉林長白山人參[S].北京：中國標準出版社，2009：5-51.

[6] 閻正，苑若瑤，王春云，等.人參HPLC指紋圖譜的研究[J].河北大學學報自然科學版，2009，29(3)：278.

[7] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

[8] 集安市吉聚參業(yè)有限公司.紅參加工工藝：中國，CH201310101874.1[P].2013-6-12.

[9] 荊淑芹，姜海平，劉鳳云，等.生曬參紅參林下參中7種人參皂苷含量的比較[J].中華中醫(yī)藥學刊，2009，27(1)：207-209.

[10] 張宇.一種黑人參的加工方法：中國，201310692081.1[P].2014-4-16.

EffectofHeatingonContentofEightKindsofGinsenosidesinRadixGinseng

GAOyue1，YUyang1，NIUShujing2，CHENHailan1，LIUTongshuai1，QIUZhidong1，WEIHong3*

(1.ChangchunUniversityofChineseMedicine，Changchun130117，China；2.Jilinfoodanddrugapprovalcenter，Changchun130062，China；3.TheaffiliatedhospitaltoChangchunUniversityofChineseMedicine，Changchun130021，China)

Objective：To study the effect of heating on content of8kinds of ginsensides Rg1、Re、Rf、 Rh1、Rb1、Ro、Rb2and Rd in Radix Ginseng under different heating time.Methods：The content of8ginsenosides in Radix Ginseng was determined by HPLC.Result：The contents of ginsenosides Rg1，Re，Rb1，Ro，Rb2，Rf were reduced after heating and the contents of Rd，Rh1increased under heating for60or90minutes at121℃，and decreased when heated for120minutes.Conclusion：Different heating time has an effect on the content of eight kinds of ginsenosides.

Ginsenoside；HPLC；determination

2014-09-19)

國家科技支撐計劃項目(2012BAI29B00)

*

位鴻，主任藥師，研究方向：中藥制劑提取工藝及質量；Email：jiwh139@163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.4.009