邢界紅,趙愛國,鮑福貴,劉慶玲
(內(nèi)蒙古蒙藥股份有限公司,內(nèi)蒙古 通遼 028007)
香青蘭,蒙古語名為“昂凱魯莫勒·畢日陽古”,維吾爾語名為“Badranjibuya qini”,也叫“Badranjibuya (巴德然吉布牙)”;“Huxbuymerzenjux(霍西布依買爾贊主西)”,為唇形科植物Dracocephalum moldavical L.的干燥地上部分。系蒙古族和維吾爾族習(xí)用藥材。
香青蘭廣泛用于復(fù)方成藥中,如蒙藥調(diào)元大補(bǔ)二十五味湯散、清肝七味散、牛黃十三味丸、哈敦海魯木勒九味丸、利肝和胃丸、寒水石二十一味散等,同時也是蒙醫(yī)院制劑常用藥材。其蒙藥功效為“瀉肝火,清胃熱,止血,愈傷,燥‘協(xié)日烏素’。用于肝、胃熱,食物中毒,胃出血,游痛癥,‘巴木’病”。
香青蘭的藥源提供完全靠野生資源,生藥來源的無序與混雜,難以保障中藥材質(zhì)量的穩(wěn)定性與有效性。隨著香青蘭的化學(xué)成分和藥理活性研究的深入,香青蘭藥用潛力大大提升,對國民健康建設(shè)、老年病的預(yù)防與治療、中藥現(xiàn)代化的發(fā)展有著重要作用。香青蘭使用量的不斷增長,導(dǎo)致野生香青蘭資源逐漸枯竭,另外長期的采挖也對環(huán)境造成了破壞,香青蘭的人工撫育栽培迫在眉睫。
本研究是研究香青蘭的規(guī)范化種植技術(shù)。
本研究參考成功的引種馴化、野生變家種的藥用植物例子,經(jīng)查閱大量文獻(xiàn),結(jié)合本地的實(shí)際情況和資源,對通遼市庫倫旗三家子鎮(zhèn)境內(nèi)生長的道地野生香青蘭進(jìn)行了引種馴化工作。
香青蘭人工栽培采用有性繁殖,即種子繁殖方法。
1.1.1種子處理
篩選:先用篩子篩除草籽草棍等雜質(zhì),再用簸箕簸除不成熟的種子。
曬種:將篩選好的種子攤在塑料布上,在日光下曬1~2天。
浸種:將日曬后的種子浸入40℃清水中,浸10小時后將種子撈出瀝水。如浸種量大,可將撈出的種子倒入布袋中,將袋嘴扎緊,在滾筒洗衣機(jī)內(nèi)將水甩干,再將種子倒在尼龍網(wǎng)上,在日光下晾曬至表皮干爽時即可播種。浸種對香青蘭種子發(fā)芽和出苗時間都有明顯影響。春播時,我們在2塊小區(qū)內(nèi)分別進(jìn)行浸種與未浸種的種植試驗(yàn),結(jié)果見表1。
表1 浸種對香青蘭出苗的影響
由表1可以看出,浸種對香青蘭出苗率影響不是很明顯,但對出苗時間影響較大。所以,播前浸種是有必要的。
1.1.2整地
選擇土層深厚、排水良好的沙質(zhì)壤土地塊,將土地翻耕耙細(xì)。有機(jī)質(zhì)含量過低的沙土地畝可施入2000~3000公斤農(nóng)家肥,用懸耕機(jī)將糞肥拌入沙土中。
1.1.3播種
按行距45~60cm開溝,用手撒或用點(diǎn)葫蘆將種子均勻播入溝內(nèi)。復(fù)土不能超過1cm,用石磙輕輕鎮(zhèn)壓,隨后澆水。播種量畝0.5~1kg。
氣溫和復(fù)土厚度是影響香青蘭出苗時間的兩個重要因素。我們于6月28日播種,復(fù)土不超過0.5cm,到7月13日已陸續(xù)出苗,歷時15天。到7月19日已基本出全苗,歷時約21天。出苗較快的原因,一是當(dāng)時的氣溫較高,日平均氣溫在21~26℃左右;二是復(fù)土不超過0.5cm,且大風(fēng)季節(jié)已過,未形成風(fēng)淤沙掩苗的情況。
1.1.4田間管理
香青蘭在春播和出苗時各澆一次水,此后視降雨情況適當(dāng)澆水即可。但在追施氮肥、現(xiàn)蕾、盛花期、入冬前和初春苗返青時要適當(dāng)澆水。
定苗:苗高5cm左右時定苗,株距25cm。缺苗處要及時補(bǔ)苗、澆水。
追肥:苗高20cm左右時追施一次氮肥,畝施肥量10~15kg。2020年我們選擇2塊人工栽培田和1塊自然落籽并半野生管理的香青蘭地塊進(jìn)行試驗(yàn),結(jié)果表明,追肥對香青蘭產(chǎn)量有較明顯的影響。見表2。
表2 追施氮肥對香青蘭產(chǎn)量的影響
采收:當(dāng)種子大部分成熟時即可收割,及時采收種子并將藥材晾干。
尚未發(fā)現(xiàn)香青蘭有明顯的病蟲害。如地塊積水,易造成香青蘭爛根死亡。春季澆返青水要等到地化通之后再澆。
采用反相高效液相色譜法,梯度洗脫,對采自內(nèi)蒙古、吉林、黑龍江的5批野生香青蘭藥材與本企業(yè)人工栽培香青蘭藥材進(jìn)行了指紋圖譜對比分析,結(jié)果本企業(yè)人工栽培香青蘭藥材指指紋圖譜與5批野生香青蘭藥材建立的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜進(jìn)行相似度比較,相似度在90%以上,符合指紋圖譜要求,說明本企業(yè)人工栽培香青蘭藥材與野生香青蘭藥材黃酮類成分上無顯著差異。
2.1.1儀器、試劑和樣品
島津 LC-10AT高效液相色譜儀,組件:LC-10ATvp雙泵,帶梯度混合器,檢測器:SPD-10Avp,柱溫箱:CTO-2A,自動進(jìn)樣器:SIL-HTA。水為高純水,乙腈為色譜純,鹽酸、甲醇為分析純。試驗(yàn)用藥材:5批野生香青蘭藥材和1批本企業(yè)人工栽培香青蘭藥材(見表3),將6批香青蘭分別取陰干的地上部分,粉碎,過2號篩,備用。
表3 香青蘭藥材樣品的來源
2.1.2實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果
2.1.2.1色譜條件
色譜柱:Diamonsil(鉆石)C18(250×4.6mm,5μm);流動相:A為水,B為90%乙腈,進(jìn)行梯度洗脫;流速為每分鐘1.0mL;檢測波長:360nm;柱溫:30℃;記錄時間:70分鐘。理論板數(shù)按指紋圖譜中44.2min峰計(jì)算,應(yīng)不低于200000。
2.1.2.2供試品溶液的制備
取本品,粉碎,取約1.0g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入2.5mol/L鹽酸甲醇溶液25mL,密塞,稱定重量,加熱回流30min,放冷,再稱定重量,用2.5mol/L鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量,搖勻,0.45μm濾膜過濾,即得。
2.1.2.3測定方法
精密吸取供試品溶液10μL,注入液相色譜儀,測定,即得。供試品色譜指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)對照色譜指紋圖譜比較,并經(jīng)計(jì)算機(jī)模擬相似度計(jì)算軟件計(jì)算,相似度應(yīng)為0.90~1.00之間。
2.1.2.45批野生香青蘭藥材和本企業(yè)1批人工栽培香青蘭藥材指紋圖譜的測定、相似度比較
分別取表1所列5批野生香青蘭藥材和本企業(yè)1批人工栽培香青蘭藥材,按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液,進(jìn)行色譜指紋圖譜的測定,以序號為1野生香青蘭藥材圖譜作為參照模板,以9.2、13.3、15.9、17.4、18.7、22.1、24.9、29.2、30.9、31.8、34.2、44.2min左右的峰作為多點(diǎn)校正峰,時間窗0.50,中位數(shù)法,自動匹配后,生成標(biāo)準(zhǔn)對照色譜指紋圖譜(見附圖),并計(jì)算相似度,從表4可見,5批野生香青蘭藥材色譜指紋圖譜與本企業(yè)1批人工栽培香青蘭藥材的指紋圖譜相似度均在0.90~1.00之間,符合指紋圖譜要求。
圖1 5批野生香青蘭藥材(S1~S5)、人工栽培香青蘭藥材(S6)和對照(R)指紋圖譜
表4 野生香青蘭與栽培香青蘭指紋圖譜相似度表
我公司在奈曼旗治安鎮(zhèn)腰營子村栽培的香青蘭與原產(chǎn)地庫倫旗野生香青蘭在植物形態(tài)形狀上無根本差異,但在植株高度、莖直徑、葉長、葉寬、種子千粒重等方面存在差別。見表5。
表5 人工栽培、人工栽培田自然落籽半野生管理與原產(chǎn)地野生品種性狀對比 單位:mm
從表5可以看出,人工栽培香青蘭在株高、莖基直徑、葉長、葉寬、種子千粒重等方面均優(yōu)于野生香青蘭。人工栽培田自然落籽并在半野生狀態(tài)下生產(chǎn)的香青蘭的幾個性狀均低于原產(chǎn)地野生香青蘭,更低于人工栽培的香青蘭。
本研究將采集的野生香青蘭種子進(jìn)行人工栽培試驗(yàn),經(jīng)過1個生產(chǎn)周期的研究,已成功收獲香青蘭干品藥材。經(jīng)公司化驗(yàn)室對基地收割的香青蘭干品藥材質(zhì)量檢測證實(shí),藥材符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求,香青蘭野生變家種試驗(yàn)是成功的。