不同水平三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰生長(zhǎng)及肝功能指標(biāo)的影響

王振勇

（遼寧禾豐牧業(yè)股份有限公司，遼寧沈陽(yáng)110164）

隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的高度集約化發(fā)展，水產(chǎn)養(yǎng)殖面臨越來(lái)越多的應(yīng)激因素，如水質(zhì)污染、有害物質(zhì)侵襲、飼養(yǎng)管理不當(dāng)?shù)?，這些不同程度應(yīng)激因素導(dǎo)致水生動(dòng)物的抵抗能力下降，腸炎等疾病頻發(fā)，給生產(chǎn)帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

丁酸鈉或者三丁酸甘油酯作為一種綠色新型飼料添加劑，在畜禽生產(chǎn)中是一種有效的替代抗生素方案。無(wú)論是丁酸鈉還是三丁酸甘油酯，在動(dòng)物腸道中發(fā)揮作用的是丁酸。丁酸是腸道中存在的一種短鏈脂肪酸，在調(diào)節(jié)胃腸機(jī)能、腸道pH、胃腸道微生態(tài)平衡以及誘食方面發(fā)揮重要作用。然而丁酸極易揮發(fā)，在體內(nèi)吸收代謝迅速，半衰期很短，目前生產(chǎn)實(shí)踐中大多是以丁酸鈉或者三丁酸甘油酯的形式添加。同時(shí)丁酸鈉易吸潮結(jié)塊且有特殊臭味，不利于其廣泛應(yīng)用。而三丁酸甘油酯口服耐受性比丁酸鈉更好，可以直接作用于腸道，物理性質(zhì)穩(wěn)定，適合各類飼料加工的生產(chǎn)工藝。

目前三丁酸甘油酯在畜禽養(yǎng)殖中已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用，在水產(chǎn)上也有研究報(bào)道。喬麗紅等[1]將添加0、250、500、1 000 mg/kg 三丁酸甘油酯的試驗(yàn)飼料投喂建鯉，42 d后發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組建鯉的增重率與對(duì)照組相比分別提高了5.93%、9.19%、13.21%，提高了肥滿度，降低了餌料系數(shù)，且腸道中超氧化物歧化酶（SOD）和一氧化氮合酶活性增強(qiáng)，降低了丙二醛和一氧化氮的含量，從表觀層面說(shuō)明三丁酸甘油酯能夠提高建鯉生長(zhǎng)性能和肝體比，增強(qiáng)腸道抗氧化能力。唐啟峰等[2]在南美白對(duì)蝦飼料中分別添加0.5、1.0 g/kg 和1.5 g/kg三丁酸甘油酯，研究結(jié)果顯示各試驗(yàn)組的南美白對(duì)蝦增重顯著提高，餌料系數(shù)顯著降低，腸道有益菌群數(shù)量增加，致病性弧菌數(shù)量明顯減少，說(shuō)明三丁酸甘油酯能夠促進(jìn)腸道有益菌的生長(zhǎng)，降低疾病暴發(fā)率。翟秋玲等[3]的研究表明三丁酸甘油酯不僅能夠提高菊黃東方鲀生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)腸道消化酶活力和有益菌的數(shù)量，還能提高腸道絨毛高度和寬度。姜鶯穎等[4]的研究表明添加1 kg/t三丁酸甘油酯可以顯著提高異育銀鯽生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)肝胰臟中轉(zhuǎn)氨酶活性，提高機(jī)體抗嗜水氣單胞菌感染能力，提高魚(yú)體免疫力。

丁酸鈉易吸潮結(jié)塊且有特殊臭味，不利于其廣泛應(yīng)用。三丁酸甘油酯是丁酸和甘油酯化后的產(chǎn)物，屬于丁酸鹽，其可順利過(guò)胃而不被胃酸分解，在腸道中經(jīng)胰脂肪酶分解，釋放出三個(gè)游離的丁酸分子，作用于各組織器官被吸收利用。三丁酸甘油酯作為丁酸的前體物，具有脂肪香味、代謝緩慢半衰期長(zhǎng)[5]、安全無(wú)毒副作用，在促進(jìn)動(dòng)物腸道健康發(fā)育、加快營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收、提高機(jī)體免疫力、預(yù)防疾病和調(diào)節(jié)機(jī)體代謝等方面發(fā)揮著重要的作用[6-7]，已被大量應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中。

三丁酸甘油酯在畜禽生產(chǎn)中得到了廣泛應(yīng)用，在水產(chǎn)中應(yīng)用較少。本文旨在研究三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰生長(zhǎng)及其肝功能指標(biāo)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

在印尼實(shí)嘉金豐車間進(jìn)行試驗(yàn)飼料的生產(chǎn)?；A(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，在基礎(chǔ)日糧中分別添加三丁酸甘油酯0、0.05%、0.075%、0.1%(純度50%),配制成4種試驗(yàn)飼料。

1.2 試驗(yàn)時(shí)間與試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)于2019年5月13日～2019年7月21日進(jìn)行。試驗(yàn)動(dòng)物選擇胡子鯰魚(yú)種。

表1 基礎(chǔ)日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）(%)

1.3 試驗(yàn)地點(diǎn)及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在公司池塘內(nèi)設(shè)置的網(wǎng)箱中進(jìn)行，網(wǎng)箱規(guī)格1 m3。試驗(yàn)魚(yú)初始平均體重約5.26 g，水溫26.5～28.6 ℃，水質(zhì)pH 7.5～8.5，溶氧4～6 mg/L，氨氮0.02～0.2 mg/L。共設(shè)置4 個(gè)處理組，每個(gè)處理組4 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)200尾魚(yú)。對(duì)照組為基礎(chǔ)日糧配方，開(kāi)始試驗(yàn)前用對(duì)照組飼料預(yù)飼喂14 d，正式試驗(yàn)8 周，各試驗(yàn)組分別飼喂4種試驗(yàn)飼料，每天飼喂3次。

1.4 樣品采集測(cè)定

試驗(yàn)期觀察、記錄胡子鯰死亡數(shù)，計(jì)算成活率。試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)每箱稱重，計(jì)算增重。記錄每天的攝餌量，同時(shí)每次飼喂后用虹吸的方法收集殘餌。試驗(yàn)結(jié)束后將所有的殘餌收集在一起，按烘干基礎(chǔ)條件烘干，計(jì)算攝餌量和餌料系數(shù)[8]。

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)處理隨機(jī)取25尾魚(yú)，稱取體重和測(cè)量體長(zhǎng)，分離內(nèi)臟后，稱取其重量，再?gòu)膬?nèi)臟中分離出肝胰臟并稱其重量，計(jì)算肥滿度、臟體指數(shù)、肝體指數(shù)[8]。

1.4.1 生長(zhǎng)性能

成活率（SR，%）=末尾數(shù)/初尾數(shù)×100

特定生長(zhǎng)率（SGR，%/d）=（Ln 試驗(yàn)平均末重-Ln試驗(yàn)平均始重）/試驗(yàn)天數(shù)×100

攝餌量（g/尾）=總投餌量（g/尾）-總殘餌量（g/尾）餌料系數(shù)（FCR）=攝餌量（g/尾）/增重（g/尾）

1.4.2 形體指標(biāo)

肥滿度（CF，g/cm3）=100×體重（g）/[體長(zhǎng)（cm）]3

臟體指數(shù)（%）=100×內(nèi)臟總重（g）/體重（g）

肝體指數(shù)（%）=100×肝胰重（g/尾）/體重（g/尾）

1.4.3 肝功能指標(biāo)

肝臟和血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活性均采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測(cè)定，具體操作流程：準(zhǔn)確稱取組織重量，按重量(g)∶體積(mL)=1∶9 的比例，加入9 倍體積的生理鹽水，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2 500 r/min，離心10 min，取上清液待測(cè)。將基質(zhì)液20 μL（37 ℃已預(yù)溫）與待測(cè)樣品5 μL 混勻后放入測(cè)定孔中，講基質(zhì)液20 μL（37 ℃已預(yù)溫）放入對(duì)照孔中，37 ℃水浴30 min。將2，4-二硝基苯肼液20 μL放入測(cè)定孔中，將2，4-二硝基苯肼液20 μL 與待測(cè)樣品5 μL 混勻后放入對(duì)照孔中，37 ℃水浴30 min。輕輕水平搖勻96孔板，室溫放置15 min 后，在510 nm 波長(zhǎng)下用酶標(biāo)儀測(cè)各孔OD值，查標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得相應(yīng)AST或ALT活性。

1.5 數(shù)據(jù)分析

結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，數(shù)據(jù)處理與分析采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析和差異顯著性比較，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 不同水平三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰生長(zhǎng)性能影響(見(jiàn)表2)

表2 不同水平三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰生長(zhǎng)性能影響

由表2可知，三丁酸甘油酯影響胡子鯰的試驗(yàn)?zāi)┲?、特定生長(zhǎng)率、餌料系數(shù)和成活率。三丁酸甘油酯0.05%和0.075%添加組試驗(yàn)?zāi)┲?、特定生長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），餌料系數(shù)顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）；對(duì)照組和0.1%添加組試驗(yàn)?zāi)┲亍⑻囟ㄉL(zhǎng)率和餌料系數(shù)均為差異不顯著（P＞0.05）；三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組成活率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），三丁酸甘油酯0.05%，0.075%和0.1%添加組，三組間成活率差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 不同水平三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰形體指標(biāo)的影響(見(jiàn)表3)

由表3 可知，與對(duì)照組相比，添加三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組肥滿度、臟體指數(shù)和肝體指數(shù)顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；而添加三丁酸甘油酯的三個(gè)試驗(yàn)組間肥滿度、臟體指數(shù)和肝體指數(shù)無(wú)顯著變化（P＞0.05）。

表3 不同水平三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰形體指標(biāo)影響

2.3 不同水平三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰肝功能指標(biāo)的影響(見(jiàn)表4)

表4 不同水平三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰肝功能指標(biāo)的影響

AST、ALT 在肝臟中合成，若肝臟異常時(shí)，肝臟中的AST、ALT 就會(huì)釋放到血清中，使血清AST 和ALT含量升高。本試驗(yàn)中試驗(yàn)組與對(duì)照組血清AST、ALT活性遠(yuǎn)小于肝胰臟AST，ALT 活性，表明魚(yú)體的肝胰臟功能正常，肝胰臟細(xì)胞沒(méi)有受到明顯的損傷；各試驗(yàn)組肝胰臟中的AST 和ALT 與對(duì)照組相比均無(wú)顯著性差異，試驗(yàn)組血清中AST 和ALT 活性顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）；三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組，三組間血清中AST 和ALT 活性差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 不同水平三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰生長(zhǎng)性能影響

魚(yú)類的生長(zhǎng)受到內(nèi)在因素與外在因素的制約，外在因素包括飼料、水溫、溶氧量、光照、鹽度、pH、飼養(yǎng)密度、水流和水質(zhì)等因素影響。本試驗(yàn)中，排除水溫、水質(zhì)等環(huán)境因素的影響外，三丁酸甘油酯是唯一的差異性影響因素。

研究表明，三丁酸甘油酯能夠提高畜禽生長(zhǎng)性能。劉統(tǒng)等[9]研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬飼糧中添加0.1%、0.2%三丁酸甘油酯均能有效改善仔豬日增重，降低料重比[9]。Antongiovanni等[10]將0.2%、0.35%、0.5%、1%三丁酸甘油酯添加到肉雞日糧中，肉雞體重均明顯增加。喬麗紅等[1]添加250、500、1 000 mg/kg 三丁酸甘油酯使建鯉增重率和特定生長(zhǎng)率均有不同程度提高，其中添加1 000 mg/kg 三丁酸甘油酯組達(dá)到顯著水平。本試驗(yàn)在飼料中添加不同水平的三丁酸甘油酯使得胡子鯰生長(zhǎng)性能得到不同程度的提高，其中添加0.05%試驗(yàn)組在試驗(yàn)?zāi)┲?、特定生長(zhǎng)率、餌料系數(shù)和成活率等生長(zhǎng)性能指標(biāo)方面都達(dá)到顯著改善水平，而添加三丁酸甘油酯三個(gè)處理間各指標(biāo)差異不顯著。三丁酸甘油酯作為一種重要的短鏈脂肪酸，具有脂肪香味，可提高日糧適口性。日糧酸化后可刺激味蕾，使唾液分泌增多，增進(jìn)食欲，經(jīng)胰脂肪酶分解后釋放出丁酸。一方面可降低胃腸道pH，提高消化酶活性，進(jìn)而提高飼料轉(zhuǎn)化率；另一方面，丁酸在pH為4～6時(shí)不易被分解，可直接穿過(guò)胃和小腸進(jìn)入后腸，被腸上皮細(xì)胞吸收利用，成為重要能量來(lái)源，促進(jìn)腸道的生長(zhǎng)發(fā)育，提高生長(zhǎng)性能[11]。

3.2 不同水平三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰形體指標(biāo)的影響

肥滿度是用體重和體長(zhǎng)的關(guān)系來(lái)表明魚(yú)體的體型生長(zhǎng)狀況。本研究結(jié)果顯示三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組肥滿度顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；當(dāng)三丁酸甘油酯添加量達(dá)到0.05%以后，三個(gè)處理間肥滿度無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

魚(yú)類屬于變溫、低等動(dòng)物，其最主要的免疫器官是胸腺、腎臟和脾臟[12]。免疫器官指數(shù)的高低也直接反映免疫器官發(fā)育程度，數(shù)值越高，則免疫功能越強(qiáng)，抵御致病菌入侵的能力越強(qiáng)，機(jī)體的免疫力越強(qiáng)[13]。臟體指數(shù)和肝體指數(shù)是衡量魚(yú)類內(nèi)臟及肝胰臟生長(zhǎng)發(fā)育狀況的重要指標(biāo)之一。本研究結(jié)果顯示三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組臟體指數(shù)和肝體指數(shù)顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；當(dāng)三丁酸甘油酯添加量達(dá)到0.05%以后，三個(gè)處理間臟體指數(shù)和肝體指數(shù)無(wú)顯著變化（P＞0.05）。

本研究表明適量添加三丁酸甘油酯可以提高胡子鯰肥滿度，增加臟體指數(shù)和肝體指數(shù)，從而提高胡子鯰生長(zhǎng)性能，促進(jìn)胡子鯰免疫器官的發(fā)育。

3.3 不同水平三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰肝功能的影響

ALT 和AST 是反映肝功能是否正常的重要指標(biāo)[14]，也是反映機(jī)體氨基酸代謝情況的重要酶，主要存在于肝細(xì)胞中，在機(jī)體蛋白質(zhì)代謝中起著重要作用[15]。當(dāng)肝臟受到損傷時(shí)，組織內(nèi)這種酶的活性就會(huì)降低。大量ALT、AST 滲入了血液，肝臟的ALT、AST 活性會(huì)明顯下降，而血液中ALT、AST 的活性升高。

本試驗(yàn)中試驗(yàn)組與對(duì)照組血清AST、ALT 活性遠(yuǎn)小于肝胰臟AST、ALT 活性，表明魚(yú)體的肝胰臟功能正常，肝胰臟細(xì)胞沒(méi)有受到明顯的損傷；各試驗(yàn)組肝胰臟中的AST 和ALT 與對(duì)照組相比均無(wú)顯著性差異，試驗(yàn)組血清中AST 和ALT 活性顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）；三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組，三組間血清中AST 和ALT 活性差異不顯著（P＞0.05），表明本試驗(yàn)劑量的三丁酸甘油酯在長(zhǎng)期投喂過(guò)程中不會(huì)對(duì)胡子鯰的肝胰臟造成損傷，且可保護(hù)肝功能，提高轉(zhuǎn)氨酶的轉(zhuǎn)運(yùn)水平，加快氨基酸的代謝過(guò)程。

4 結(jié)論

本文通過(guò)為期8周的生長(zhǎng)試驗(yàn)，研究表明不同含量的三丁酸甘油酯對(duì)胡子鯰生長(zhǎng)性能、形體指標(biāo)及肝功能的影響。結(jié)果表明，添加0.05%的三丁酸甘油酯不僅能提高胡子鯰增重、特定生長(zhǎng)率、成活率以及魚(yú)體肥滿度，降低餌料系數(shù)，而且不會(huì)對(duì)肝胰臟造成負(fù)擔(dān)，還能降低血清中轉(zhuǎn)氨酶活性，提高臟體指數(shù)和肝體脂數(shù)，保護(hù)肝功能。