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    姜荷花組培快繁一次性成苗技術的試驗研究

    2021-03-06 03:50:14李曉亮楊世先董春富張建康王文智楊光炤錢遵姚張軍云
    農(nóng)業(yè)科技通訊 2021年1期
    關鍵詞:成苗球莖外植體

    李曉亮 楊世先 董春富 張建康 王文智 楊光炤 錢遵姚 董 廣 張軍云

    (1.玉溪市農(nóng)業(yè)科學院 云南玉溪653100;2. 通海錦海農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司 云南通海652700)

    姜荷花(Curcuma alismatifolia),屬于姜科姜黃屬的多年生草本植物,是一種熱帶球根花卉,原產(chǎn)于泰國清邁一帶,由于其粉紅色的苞片酷似荷花,且為姜科,故稱姜荷花。姜荷花的花型獨特、花色美麗鮮艷、花期長,深受人們的喜愛,在花卉王國荷蘭享有“熱帶郁金香”的美譽,是一種新型的鮮切花品種,觀賞價值高,品質優(yōu)良,具有很高的經(jīng)濟效益和廣闊的開發(fā)利用前景[1-4]。

    姜荷花的常規(guī)繁殖方法主要是通過分株或球根進行繁殖[3-4],但其存在繁殖速度慢、周期長、系數(shù)低、易受自然環(huán)境變化影響等問題。利用植物組織培養(yǎng)技術,可以解決姜荷花常規(guī)繁殖所面臨的問題,達到在短時間內生產(chǎn)出大量的優(yōu)質種苗的目的。

    姜荷花的組織培養(yǎng)在國內已有研究報道,這些報道的技術步驟主要包括:初代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)[1-4]。為簡化姜荷花的組培流程,降低姜荷花組培生產(chǎn)成本,提高姜荷花的組培效率和質量,對姜荷花組培快繁技術進行試驗研究,旨在集成一套姜荷花的組培快繁一次性成苗技術,為姜荷花組培工廠化育苗提供科學技術依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗地點

    玉溪市農(nóng)業(yè)科學院研和老基地組培室。

    1.2 試驗材料

    盆栽的姜荷花(花色為白色),材料由玉溪紫玉花卉產(chǎn)業(yè)有限公司提供。

    1.3 試驗時間

    2018 年 4月至 2019 年 5月。

    1.4 試驗方法

    1.4.1 外植體選取和預處理 選取生長健壯、無病蟲害的盆栽姜荷花植株作為外植體采集的對象;外植體采集前2 周對姜荷花植株停止?jié)菜┧幨┓?;從花盆中整株取出姜荷花,清除各株球莖部位的基質,在流水下洗凈;用小刀削去球莖的外周層約0.5 cm,從球莖頂部1.5~2.0 cm 處截斷分離植株,剝離頂部的外苞葉2~3 層。

    1.4.2 外植體滅菌 先用洗潔精水浸泡球莖2~3 min,流水沖洗凈,放入 2%的高錳酸鉀(KMnO4)溶液浸泡5~6 min,將球莖于70%的酒精溶液中消毒30 s,取出球莖后于超凈工作臺中用升汞(HgCl2)溶液進行滅菌。設置6 個處理:處理1(0.5% HgCl2滅菌20 min)、處理 2 (0.5% HgCl2滅菌 25 min)、處理 3(0.5% HgCl2滅菌 30 min)、處理 4(1.0% HgCl2滅菌20 min)、處理 5 (1.0% HgCl2滅菌 25 min)、處理 6(1.0% HgCl2滅菌 30 min)。

    1.4.3 初代培養(yǎng) 將滅菌過的外植體接種入4 種處理的初代培養(yǎng)基,分別為處理1(MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L)、處理 2 (MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L)、處理 3(MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L)、處理 4(MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L),培養(yǎng)時間 35~50 d。

    1.4.4 增殖培養(yǎng) 采用1.4.3 初代培養(yǎng)中的4 種培養(yǎng)基進行新生芽的增殖培養(yǎng)。

    1.4.5 成苗培養(yǎng) 將培養(yǎng)獲得的小芽從其基部上1.5 cm 處切掉頂部,剝離外苞葉 1~2 層后,從頂部中間縱切小芽成兩個半芽(若小芽較大,可以進行縱四半切),接種入2 種處理的成苗培養(yǎng)基MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.01 mg/L、MS+6-BA0.8 mg/L+NAA 0.01 mg/L,培養(yǎng)時間 30~40 d。

    1.4.6 培養(yǎng)條件 培養(yǎng)室溫度為(25±2)℃,相對濕度為35%~40%,光強度為2 500~3 000 lx,光照時間為12 h/d。

    2 結果與分析

    2.1 外植體滅菌

    姜荷花的球莖經(jīng)不同的滅菌處理后,細菌污染率為95.43%~98.25%,死亡率為0,各處理間的差異不顯著 (P>0.05),說明了姜荷花的球莖滅菌比較困難,這可能與球莖長期埋在濕潤基質里面有關(表1)。

    2.2 初代培養(yǎng)

    從表2 可以看出,4 種處理的培養(yǎng)基均能100%誘導姜荷花的球莖進行分化,新生芽的個體形態(tài)較好、健壯,每個球莖能誘導出新生芽1.67~3.00 個,各處理間的差異不顯著(P>0.05),說明適合姜荷花初代培養(yǎng)的培養(yǎng)基是MS+6-BA 1.0~2.0 mg/L+NAA 0.2~0.5 mg/L。

    表1 姜荷花外植體滅菌效果

    表2 不同處理對姜荷花初代培養(yǎng)的影響

    2.3 增殖培養(yǎng)

    從表3 可以看出,姜荷花的芽經(jīng)過4 種處理的培養(yǎng)基培養(yǎng)后,新增芽的分化、生長勢效果較好、芽較健壯,增殖系數(shù)為3.21~4.12,各處理間差異不顯著(P>0.05),說明適合姜荷花增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)基是MS+6-BA1.0~2.0 mg/L+NAA0.2~0.5 mg/L。

    表3 不同處理對姜荷花增殖培養(yǎng)的影響

    2.4 成苗培養(yǎng)

    從表4 可以看出,每個半芽經(jīng)過2 種成苗培養(yǎng)基培養(yǎng)后,能分化長成4.27~4.85 棵高為5.46~5.82 cm、生根率為100%且根系發(fā)育較好(生根量3.89~4.01 條、根長 3.52~3.86 cm、根粗 0.59~0.64 mm)的植株,2 種培養(yǎng)基的培養(yǎng)效果差異不顯著(P>0.05),說明適合姜荷花成苗培養(yǎng)的培養(yǎng)基是MS+6-BA0.4~0.8 mg/L+NAA 0.01 mg/L。

    表4 不同處理對姜荷花成苗培養(yǎng)的影響

    3 結論與討論

    本試驗獲得了一套姜荷花組培快繁一次性成苗技術體系,具有以下特點:初代培養(yǎng)和增殖培養(yǎng)共用一套培養(yǎng)基,誘導和增殖效果較好;在成苗培養(yǎng)中,將小芽縱二半切或四半切的處理,增殖系數(shù)提高了2 倍或4 倍,提高了培養(yǎng)效率;成苗培養(yǎng)實現(xiàn)了一套培養(yǎng)基獲得姜荷花的增殖和生根同步進行,省去了單獨進行生根階段的培養(yǎng),較大地降低了生產(chǎn)成本,縮短了培養(yǎng)周期,提高了姜荷花的組培快繁效率。此套技術體系唯一的缺點是姜荷花的外植體滅菌效果不理想,以后需加強這方面的研究。

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