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    熱應(yīng)激對科爾沁牛與科爾沁肉??寡趸δ艿挠绊?/h1>
    2021-03-04 06:57:04鄭海英吳佳琦包雨鑫高麗娟付明山
    中國牛業(yè)科學(xué) 2021年6期
    關(guān)鍵詞:科爾沁肉牛直腸

    鄭海英,吳佳琦, 包雨鑫, 王 梓, 高麗娟, 郭 煜, 付明山, 于 明

    (內(nèi)蒙古通遼市農(nóng)牧科學(xué)研究所,內(nèi)蒙古 通遼 028000)

    熱應(yīng)激(heat stress)主要指動物機(jī)體在高環(huán)境溫度中熱平衡破壞,其自身的散熱功能受阻,使體溫升高而導(dǎo)致產(chǎn)生非特異性的生理防御應(yīng)答反應(yīng)[1-2]。通遼屬于內(nèi)蒙古中東部地區(qū),常常出現(xiàn)極端的高溫天氣,最高溫度可達(dá)到40 ℃以上,科爾沁牛和科爾沁肉牛處于夏季炎熱的環(huán)境下,極容易受到熱應(yīng)激侵害,使其生產(chǎn)性能、繁殖性能以及自身的免疫嚴(yán)重下降,影響著養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益。

    科爾沁牛是以西門塔爾牛為父本,蒙古牛、三河牛以及蒙古牛的雜種母牛為母本,采用育成雜交方法培育而成乳肉兼用的品種??茽柷呷馀J且钥茽柷吲槟副?,北美西門塔爾(偏肉用型)為父本,在雜交二代選擇理想型的公、母牛進(jìn)行橫交固定、自群繁育,經(jīng)過選育提高,培育的具有肉用性能優(yōu)良、適應(yīng)性強(qiáng)的肉牛新品種[3]。

    研究旨在用酶聯(lián)免疫法對熱應(yīng)激和非應(yīng)激期間科爾沁牛和科爾沁肉牛血清中的超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH)和總抗氧化能力(T-AOC)4個(gè)指標(biāo)進(jìn)行檢測,分析在同等因素下科爾沁牛和科爾沁肉牛抗氧化能力的差異,以期為當(dāng)?shù)睾Y選出具有較強(qiáng)耐熱性的肉牛提供參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    在內(nèi)蒙古自治區(qū)通遼市某養(yǎng)殖場選擇體況相近、身體健康,選擇同一飼養(yǎng)環(huán)境條件下體況相近,體重約(563±38) kg,18月齡身體健康的科爾沁牛和科爾沁肉牛母牛各20頭作為試驗(yàn)組。試驗(yàn)分為2個(gè)階段,即夏季(2019年7月28日—8月3日)和春季(2020年4月11—17日)。

    1.2 溫濕度及溫濕度指數(shù)測定

    本試驗(yàn)在通遼周邊地區(qū)養(yǎng)殖場進(jìn)行,試驗(yàn)全期在試驗(yàn)牛群的中間和兩端與牛體等高處,距離地面約1.5 m懸掛溫濕度表,記錄8:00、14:00的溫度和相對濕度。根據(jù)Berman[4]報(bào)道的方法計(jì)算牛舍THI,計(jì)算公式為:

    THI=(1.8×T+32)-(0.55-0.55×RH)×(1.8×T-26)

    式中:T為攝氏溫度(℃);RH為相對濕度(%)。

    1.3 生理指標(biāo)

    直腸溫度用獸用體溫計(jì)對科爾沁牛和科爾沁肉牛進(jìn)行測定,測定時(shí)間為5 min;呼吸頻率是利用秒表計(jì)時(shí)1 min,在1 min內(nèi)測定牛腹部鼓動的次數(shù)。

    1.4 血清采樣

    試驗(yàn)對每頭牛進(jìn)行頸靜脈采血5 mL,靜置30 min后,用離心機(jī)3 000 r/min進(jìn)行離心15 min,分離出血清后保存在-20 ℃冰箱,以備進(jìn)行血清生化指標(biāo)的測定。

    1.5 血清生化指標(biāo)測定

    血清生化指標(biāo)有SOD、MDA、GSH和T-AOC4個(gè)指標(biāo),試劑盒均采購于上海寶曼生物科技有限公司,按照說明書操作,并用酶標(biāo)儀進(jìn)行測定。

    1.6 統(tǒng)計(jì)分析

    試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析并進(jìn)行顯著性檢驗(yàn),以P<0.05為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn),試驗(yàn)結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 溫濕度及溫濕度指數(shù)

    牛舍環(huán)境溫度和濕度的THI以此來判斷牛熱應(yīng)激的重要指標(biāo),通常情況下THI≤72為無熱應(yīng)激狀態(tài);72≤THI≤79為輕度熱應(yīng)激狀態(tài);7988為重度熱應(yīng)激狀態(tài)[5]。通過連續(xù)7 d對牛舍環(huán)境溫度和濕度的測定,圖1結(jié)果顯示熱應(yīng)激夏季環(huán)境溫濕指數(shù)THI,夏季外界環(huán)境最高氣溫達(dá)到40 ℃,平均氣溫約為31.35 ℃,THI在試驗(yàn)期間平均為80.67,數(shù)據(jù)說明此階段科爾沁牛和科爾沁肉牛正在遭受中度熱應(yīng)激狀態(tài),符合試驗(yàn)要求,可以進(jìn)行下一步試驗(yàn);圖2顯示熱應(yīng)激春季環(huán)境溫濕指數(shù)THI,非應(yīng)激春季這段時(shí)間外界環(huán)境最高溫度21 ℃,平均氣溫約為11.85 ℃,THI為55.26,此狀態(tài)未達(dá)到應(yīng)激狀態(tài),可以作為非應(yīng)激,以此比較熱應(yīng)激狀態(tài)和非應(yīng)激狀態(tài)下的科爾沁牛和科爾沁肉牛的抗氧化功能指標(biāo)。

    圖1 夏季外界環(huán)境溫濕指數(shù)THI

    圖2 春季外界環(huán)境溫濕度THI

    2.2 生理指標(biāo)

    表1顯示了熱應(yīng)激期間和非應(yīng)激期間科爾沁牛和科爾沁肉牛生理指標(biāo)的比較結(jié)果。從結(jié)果可以看出熱應(yīng)激期間,科爾沁牛的直腸溫度顯著高于科爾沁肉牛(P<0.05),呼吸頻率差異不顯著(P>0.05);非應(yīng)激期間,科爾沁牛和科爾沁肉牛的生理指標(biāo)無差異;熱應(yīng)激與非應(yīng)激相比,科爾沁牛呼吸頻率和直腸溫度均極顯著高于非應(yīng)激(P<0.01),科爾沁肉牛的呼吸頻率極顯著高非應(yīng)激(P<0.01),直腸溫度差異不顯著(P>0.05)。

    表1 熱應(yīng)激和非應(yīng)激科爾沁牛和科爾沁肉牛生理指標(biāo)

    2.3 抗氧化指標(biāo)

    表2顯示了科爾沁牛和科爾沁肉牛血清抗氧化指標(biāo)測定結(jié)果,可以看出在熱應(yīng)激狀態(tài)下,科爾沁肉牛血清中的SOD、GSH含量差異顯著高于科爾沁牛(P<0.05),T-AOC含量有比科爾沁牛有升高趨勢,但差異不顯著(P>0.05),MDA含量極顯著低于科爾沁牛(P<0.01);在非應(yīng)激期間科爾沁肉牛和科爾沁牛差異不顯著(P>0.05);熱應(yīng)激下科爾沁牛和科爾沁肉牛血清中的SOD、GSH、T-AOC含量較非應(yīng)激狀態(tài)極顯著降低(P<0.01),科爾沁牛的MDA含量較非應(yīng)激狀態(tài)極顯著升高(P<0.01),科爾沁肉牛的MDA含量較非應(yīng)激狀態(tài)顯著升高(P<0.05)。

    表2 科爾沁牛和科爾沁肉牛血清抗氧化指標(biāo)測定結(jié)果

    3 討論

    3.1 熱應(yīng)激與生理指標(biāo)

    直腸溫度和呼吸頻率是衡量家畜對外界環(huán)境是否適應(yīng)的意向重要的生理指標(biāo),當(dāng)處于熱應(yīng)激時(shí)可通過增加呼吸次數(shù)散發(fā)熱量,當(dāng)呼吸代償仍不能有效維持正常體溫時(shí),直腸溫度才會升高[6]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示熱應(yīng)激期間科爾沁牛的直腸溫度顯著高于科爾沁肉牛的,說明在高溫環(huán)境中,科爾沁肉牛的體溫調(diào)節(jié)能力強(qiáng)于科爾沁牛,改良后獲得更好的耐熱性,更能適應(yīng)高熱環(huán)境。此外,在非應(yīng)激期間,科爾沁牛和科爾沁肉牛的直腸溫度和呼吸頻率無顯著差異,主要是這兩種牛均可以通過自身的各種調(diào)節(jié)機(jī)制使體內(nèi)的各個(gè)系統(tǒng)和器官的功能活動相互協(xié)調(diào),達(dá)到機(jī)體的生理功能相對穩(wěn)態(tài),因此直腸溫度和呼吸頻率都在正常的范圍內(nèi),無顯著差異。

    3.2 熱應(yīng)激與抗氧化指標(biāo)

    肉牛的舒適度為5 ℃~25 ℃,當(dāng)環(huán)境溫度、濕度以及太陽輻射等超過肉牛的舒適區(qū)后,便會出現(xiàn)熱應(yīng)激反應(yīng),血清中SOD是生物體內(nèi)重要的抗氧化酶,也是生物體內(nèi)清除自由基、抗氧化損傷和調(diào)節(jié)機(jī)體氧化還原狀態(tài)的首要物質(zhì)[7]。其主要作用是催化超氧陰離子和自由基的歧化反應(yīng),可對抗與阻斷因氧自由基對細(xì)胞造成的損害,對機(jī)體其保護(hù)作用,SOD活性高低可以反應(yīng)機(jī)體內(nèi)活性氧自由基的清除水平[8]。肉牛處于熱應(yīng)激狀態(tài)下其機(jī)體活性氧與自由基增加,為了維持內(nèi)環(huán)境氧化和抗氧化體系的平衡,肉牛血液中的大量抗氧化酶被消耗,導(dǎo)致T-AOC,SOD,GSH活性下降,機(jī)體發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng),引起MDA增加[9]。

    正常情況下機(jī)體細(xì)胞內(nèi)的活性自由基處于一個(gè)低水平的動態(tài)平衡狀態(tài),機(jī)體在氧化-抗氧化間維持相對恒定的氧化還原狀態(tài),以維持機(jī)體的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。當(dāng)處于高溫環(huán)境出現(xiàn)熱應(yīng)激時(shí)候,氧化還原態(tài)失衡,細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生過多的活性氧化自由基大大超過了動物機(jī)體的清除能力,不僅引起細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化,生成MDA和乙烷等,還會影響基因的轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)、酶和生物大分子的活性、細(xì)胞和器官的功能,以及細(xì)胞的增殖、分化、凋亡、壞死等許多生理病理過程[10-12]。T-AOC代表機(jī)體受外界刺激時(shí)整個(gè)機(jī)體的抗氧化能力,其機(jī)體的降低常常導(dǎo)致其他疾病的發(fā)生。MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的重要產(chǎn)物,其含量可以反映體抗氧化潛在能力的重要參數(shù),也能間接反映組織過氧化損傷程度[13]。GSH活性下降,免疫活性細(xì)胞中的過氧化的產(chǎn)物堆積,可導(dǎo)致細(xì)胞功能下降,進(jìn)而影響機(jī)體的免疫力[14]。

    試驗(yàn)研究表明,在熱應(yīng)激狀態(tài)下,科爾沁肉牛血清中的SOD、GSH含量差異顯著高于科爾沁牛(P<0.05),T-AOC含量有比科爾沁牛有升高趨勢,但差異不顯著(P>0.05),MDA含量顯著低于科爾沁牛(P<0.05),說明發(fā)生熱應(yīng)激時(shí)的科爾沁肉牛體內(nèi)的抗氧化酶能夠更好更快地清除體內(nèi)產(chǎn)生過量的自由基,使脂質(zhì)過氧化作用降低且減少脂質(zhì)過氧化物MDA含量,減少與類脂、蛋白質(zhì)形成交聯(lián)物,保護(hù)酶的結(jié)構(gòu)和功能的完整性,有效保護(hù)了氧化酶的活性,從而使機(jī)體對熱應(yīng)激具有較強(qiáng)的抵抗力。對科爾沁肉牛的抗氧化能力并未產(chǎn)生較大的影響,因此能夠證明在熱應(yīng)激狀態(tài)下科爾沁肉牛比科爾沁牛更具有較好的抗氧化能力。在非應(yīng)激期間科爾沁肉牛中的抗氧化指標(biāo)比科爾沁牛有提高的趨勢,但差異不顯著,說明在未處于高溫?zé)釕?yīng)激狀態(tài)下,兩種品種的牛其體內(nèi)生產(chǎn)的自由基均發(fā)揮著生物學(xué)作用,維持機(jī)體的氧化與抗氧化平衡。熱應(yīng)激狀態(tài)下的科爾沁牛和科爾沁肉牛血清中的MDA含量較非應(yīng)激狀態(tài)下升高,這可能是受到高溫應(yīng)激時(shí)機(jī)體發(fā)生代謝絮亂,從而影響動物機(jī)體內(nèi)的SOD含量減少,使其T-AOC活力下降,因此消除自由基能力減弱,總抗氧化能力降低。非應(yīng)激期間,科爾沁肉牛的MDA含量低于科爾沁牛,說明非應(yīng)激期間科爾沁牛肉牛體內(nèi)的氧自由基質(zhì)量分?jǐn)?shù)低,導(dǎo)致機(jī)體氧化損傷也較科爾沁牛低,因此細(xì)胞受損程度較科爾沁牛弱。

    4 結(jié) 論

    試驗(yàn)采用酶聯(lián)免疫吸附測定方法對地方特色的科爾沁牛和科爾沁肉牛分析熱應(yīng)激對其抗氧化功能的影響,所測得的指標(biāo)表明了在熱應(yīng)激狀態(tài)下,科爾沁肉牛比科爾沁牛具有較好的抗氧化功能,證實(shí)了科爾沁肉牛比科爾沁牛更具有較強(qiáng)耐熱應(yīng)激能力,為當(dāng)?shù)睾Y選出具有較強(qiáng)耐熱性能的肉牛提供參考依據(jù)。

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