中藥貼膜對兔膝骨性關節(jié)炎關節(jié)液中IL-1、IL-6、THF-α、HA含量水平的影響

徐英杰，尹羽薇，付新，陳巍*，董清平，孫羽佳，張宇馳

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040；2.雞西礦業(yè)集團總醫(yī)院，黑龍江 雞西 158100；3.黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第二醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150001；4.黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

膝關節(jié)是骨性關節(jié)炎(OA)發(fā)病的最常見部位，以膝關節(jié)局部疼痛為主要癥狀，在行走或鍛煉過程中加重，伴有關節(jié)僵硬、觸痛、腫脹、發(fā)熱等多種體征。本病為臨床中老年人群的常見病，多發(fā)病[1]，隨著現(xiàn)代醫(yī)學的進步使人類的預期壽命大大延長，膝骨性關節(jié)炎的發(fā)病率也隨之不斷提高。導師董清平教授從事臨床工作多年，對膝關節(jié)骨性關節(jié)炎的病因和發(fā)病機制有獨到的見解，治療本病積累了許多成功經(jīng)驗，臨癥中運用祖國醫(yī)學理論，將“對癥”與“對因”相結合，總結出經(jīng)驗方外敷治療骨性關節(jié)炎，既能緩解臨床癥狀，又能從根本控制病情發(fā)展，達到標本兼顧的治療作用[2]。本實驗采用現(xiàn)代生產(chǎn)工藝，將導師總結經(jīng)驗方藥物有效成分提取，制成“中藥貼膜”，用于治療經(jīng)Hulht造模方法制備兔膝骨性關節(jié)炎模型，通過檢測治療后實驗動物關節(jié)液中IL-1、IL-6、TNF-α、HA的含量，進一步揭示中醫(yī)藥干預骨性關節(jié)炎關節(jié)退變的作用機理，為臨床治療骨性關節(jié)炎提供一種療效可靠，簡單易行，造價低廉，方便實用的方法。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

新西蘭白兔50只(合格證號SCXK黑2015-003)，3月齡，體質(zhì)量2.0～2.5 kg，由黑龍江中醫(yī)藥大學藥物安全評價中心提供。

1.2 實驗藥物

中藥貼膜由黑龍江中醫(yī)藥大學第一臨床醫(yī)學院制劑室在原方[3]基礎上制備而成，其主要成分為骨碎補、川芎、續(xù)斷、延胡索、冰片等。玻璃酸鈉注射液由上海景峰制藥股份有限公司生產(chǎn)(國藥準字 H20000643)。

1.3 實驗方法

1.3.1 動物模型制備

將白兔正常飼養(yǎng)觀察無異常后，采用Hulht造模法[4]，建立兔右膝關節(jié)骨性關節(jié)炎模型。

1.3.2 動物分組及給藥方法

實驗動物造模成功后，隨機分成模型對照組、治療1組、治療2組、治療3組，每組例數(shù)為10只，再選擇同批次健康白兔作為正常組飼養(yǎng)。各組動物采用以下方式治療：①治療1組采用與中藥貼膜劑成分相同經(jīng)過普通粉碎方法制成藥粉加入促透劑制成敷貼，進行右膝關節(jié)外敷治療，1次/日，12 h/次，治療6周。②治療2組于術后1周開始右膝關節(jié)腔內(nèi)注射玻璃酸鈉0.25 mL，1次 /周，治療5周。③治療3組給予中藥貼膜右膝關節(jié)外敷治療，1次/日，12 h/次，治療6周。④模型對照組應用醫(yī)用橡皮膏，右膝關節(jié)帖敷治療，1次/日，12 h/次，治療6周。⑤正常組給予正常飼養(yǎng)。

1.3.3 Elisa法測定關節(jié)液內(nèi)的IL-1、IL-6、TNF-α含量

治療結束后，所有動物采用空氣栓塞法處死，抽取各組動物治療后右膝關節(jié)關節(jié)液，采用Elisa法測定關節(jié)液內(nèi)的IL-1、IL-6、TNF-α含量，具體操作方法如下：①從冰箱內(nèi)取出標本，待其自然解凍。打開試劑盒，常溫放置，充分混勻試劑，注意避免大量氣泡的產(chǎn)生。②樣品在3 000 rpm條件下離心10 min，取上液待測。嚴格按說明書將標準品系列稀釋，稀釋前標準品需震蕩混勻。洗滌緩沖液并以蒸餾水50倍稀釋。③將標準品和待測樣品做好標記，按順序排列，每個標準品及空白對照均做復孔，樣品根據(jù)數(shù)量盡量做復孔。④加入稀釋好的標準品50 μL和待測樣品50 μL于反應孔。立即加入50 μL的生物素標記的抗體。蓋上模板，輕輕震蕩混勻，37 ℃溫箱溫育45 min。⑤甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，震蕩30 s，甩去洗滌液，用吸水紙拍干，重復此操作4次。每孔加入酶標試劑，輕輕震蕩混勻，37 ℃溫箱溫育30 min。⑥甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，震蕩30 s，甩去洗滌液，用吸水紙拍干，重復此操作4次。⑦每孔加入底物并震蕩混勻，37 ℃溫箱溫育5 min，避免光照。取出酶標板，迅速加入50 μL終止液，在酶標儀上測定各孔OD值。

1.3.4 放射免疫分析法測定關節(jié)液中HA含量

抽取治療后各組實驗動物關節(jié)液，按如下步驟測定關節(jié)液中HA含量：①將成500倍的關節(jié)液稀釋成50 μL與125I標記物混合；將透明質(zhì)酸放射免疫分析試劑盒中各標準品與125I標記物混合。②在37 ℃水浴標本，再加入一抗和二抗各100 μL，離心機離心15 min，轉速3 500 r/min，棄上清液。③用免疫計數(shù)儀測定沉淀物的放射性并加以記錄。

1.3.5 統(tǒng)計學處理方法

2 實驗結果

2.1 Elisa法測定關節(jié)液IL-1、IL-6、TNF-α結果分析

經(jīng)過6周治療后，IL-1檢測結果為正常組兔膝關節(jié)液中IL-1含量較低，僅為8.57 ng/L，模型對照組兔膝關節(jié)液中IL-1含量明顯增高，約為正常組的37.2倍，治療1組IL-1含量較模型對照組低，與模型對照組相比(P<0.01)，治療2組和治療3組在各治療組中含量最低，與治療1組相比有顯著差異(P<0.01)，治療2組、3組IL-1含量比較相差不大(P>0.05)，但均高于正常組(P<0.01)。

IL-6檢測結果為正常組兔膝關節(jié)液中IL-6含量極低僅為0.09 ng/L，模型對照組兔膝關節(jié)液中IL-6含量在各組別中最高，達到248.54 ng/L，與正常組相比有極顯著的差異(P<0.01)。應用傳統(tǒng)中藥治療6周后，治療1組兔膝關節(jié)液中IL-6含量下降至154.14 ng/L，與模型對照組相比有差異(P<0.01)。治療2組、3組治療6周后，膝關節(jié)液中IL-6含量下降明顯，與治療1組相比P<0.01。但治療2組與3組比較相差不大(P>0.05)，高于正常組(P<0.01)。

TNF-α檢測結果顯示，模型對照組膝關節(jié)液中TNF-α含量明顯升高，與正常組相比有顯著差異(P<0.01)，具有統(tǒng)計學意義。應用傳統(tǒng)中藥治療后，治療1組實驗動物膝關節(jié)液TNF-α含量較模型對照組有所降低(P<0.01)，具有統(tǒng)計學意義。應用玻璃酸鈉、中藥貼膜治療后，治療2組、3組實驗動物右膝關節(jié)液TNF-α含量較模型對照組明顯降低(P<0.01)，均優(yōu)于治療1組，其中治療3組膝關節(jié)液TNF-α含量檢測結果低于治療1組(P<0.01)，具有統(tǒng)計學意義。結果見表1。

表1 各組實驗動物關節(jié)液中IL-1、IL-6、TNF-α含量測定結果

2.2 放射免疫分析法測定關節(jié)液HA結果分析

實驗結果顯示，模型對照組關節(jié)液中透明質(zhì)酸含量較空白對照組明顯降低(P<0.01)，應用傳統(tǒng)中藥、玻璃酸鈉、中藥貼膜治療后關節(jié)液中透明質(zhì)酸含量較模型對照組均有提高(P<0.01),具有統(tǒng)計學意義。經(jīng)過玻璃酸鈉及中藥貼膜治療后關節(jié)液中透明質(zhì)酸含量均較治療1組高(P<0.05),具有統(tǒng)計學意義，其中應用玻璃酸鈉治療后關節(jié)液中透明質(zhì)酸含量高于應用中藥貼膜治療(P<0.05)。結果見表2。

表2 各組實驗動物關節(jié)液中HA含量測定結果

3 討論

本實驗應用的中藥貼膜其主要成分為延胡索、川芎、骨碎補、續(xù)斷、冰片。方中延胡索：味辛、苦，性溫。歸肝、脾、心經(jīng)。有活血，行氣，止痛之功效。主治胸脅、脘腹疼痛，經(jīng)閉痛經(jīng)，產(chǎn)后瘀阻，跌撲腫痛之癥。中醫(yī)認為，元胡辛散、苦泄、溫通，既入血分，又入氣分，既能行血中之氣，又能行氣中之血，氣暢血行，通則不痛。《本草綱目》言：“延胡索專治一身上下諸痛，凡氣血瘀滯，不通則痛，若氣行血活，通則不痛，用之中的，妙不可言?！薄侗静萁?jīng)疏》曰：“延胡索，溫則能和暢，和暢則氣行；辛則能潤而走散，走散則血活。血活氣行，故能主破血及產(chǎn)后諸病因血所為者?！币虼?，本品為活血理氣止痛之良藥。臨床證實本品配伍當歸、川芎、桂枝、赤芍等藥物用于治療四肢血滯疼痛有較好的止痛作用，為中藥中止痛良藥[5]。研究證實，延胡索中可分離出多種生物堿，其中延胡索甲素、乙素、丑素、癸素均有鎮(zhèn)痛作用，鎮(zhèn)痛指數(shù)則以乙素較高，丑素次之，甲素較差，但均不及嗎啡[6]。

川芎：味辛，性溫。歸肝、膽、心包經(jīng)。有活血祛瘀，行氣開郁，祛風止痛之功效。主治風寒濕痹，跌打損傷，胸脅疼痛，頭痛眩暈，癰疽瘡瘍等癥?！侗窘?jīng)》記載：“川芎主中風入腦，寒痹、筋攣緩急……”。本品在臨床為活血行氣之首選要藥，被稱為氣中血藥。現(xiàn)代研究表明川芎中含有揮發(fā)油、生物堿、多糖等多種成分，其中主成分為藁本內(nèi)酯、3-丁酜內(nèi)酯、香檜烯、川芎嗪、阿魏酸、瑟丹酸、大黃酸、棕櫚酸、香莢蘭醛和亞油酸等[7]，其中川芎嗪能促進骨折家兔的骨折愈合和血腫的吸收[8]，且在體外實驗顯示對骨細胞增殖有促進作用[9]。

骨碎補：苦，性溫。歸肝、腎經(jīng)。具有溫補腎陽，強筋健骨，益虛損之功。主治跌撲閃挫，筋骨折傷，腎虛腰痛，耳鳴耳聾，牙齒松動等癥，宜浸酒或搗散外用?！堕_寶本草》謂：“骨碎補主破血，止血，補傷折”?！栋Y治要訣》云：“痢后下虛，不善調(diào)養(yǎng)，或遠行，或房勞，或外感，致兩足痿軟，或痛或痹，遂成痢風，宜用獨活寄生湯，吞虎骨四斤丸，仍以骨碎補三分之一同研，取汁，酒解服之，此亦從腎虛骨痿而治也”?，F(xiàn)代研究表明骨碎補提取物中含有柚皮苷，β-谷甾醇，胡蘿卜苷，肉桂酸，咖啡酸，原兒茶酸多種化合物[10],其中柚皮苷灌胃對實驗性老年大鼠骨損傷愈合具有促進作用[11]。骨碎補水煎灌胃，治療兔骨性關節(jié)炎，能夠抑制軟骨細胞凋亡，改善軟骨細胞功能，推遲細胞退行性改變，降低骨關節(jié)病變率[12]，具有刺激骨關節(jié)軟骨細胞代償性增生作用，并能部分改善由于力學應力線改變造成的關節(jié)軟骨退行性變的作用[13]。

續(xù)斷：苦、辛，性微溫。歸肝、腎經(jīng)。具有補肝腎，強筋骨，續(xù)折傷之功效。主治腰膝酸軟，風濕痹痛，崩漏，胎漏，跌撲損傷等癥。其中酒續(xù)斷多用于風濕痹痛，跌撲損傷。本品辛溫破散之性，善能活血祛瘀，既有甘溫補益之功，又有壯骨強筋、續(xù)筋接骨、療傷止痛之能，臨床常用其治療跌打損傷，瘀血腫痛，筋傷骨折。其甘溫助陽，辛以散瘀，兼有補益肝腎，強健壯骨，通利血脈之功用于腰膝酸痛，寒濕痹痛?！侗静菡吩疲骸袄m(xù)斷，用其苦澀。其味苦而重，故能入血分，調(diào)血脈，消腫毒、乳癰、瘰疬、痔痿，治金損跌傷，續(xù)筋骨血脈”。《藥品化義》謂：“續(xù)斷，苦養(yǎng)血脈，辛養(yǎng)皮毛，善理血脈傷損，接續(xù)筋骨斷折，故名續(xù)斷?！薄侗静菡x》曰：“續(xù)斷，其氣溫和，氣味俱厚，故兼入氣血，能宣行百脈，通利關節(jié)，凡經(jīng)絡筋骨血脈諸病，無不主之，而通痹起痿，尤有特長”?，F(xiàn)代研究表明，續(xù)斷中含有皂苷、生物堿、多糖、揮發(fā)油等多種有效成分，其中皂苷能夠能明顯提高間充質(zhì)干細胞(MSCs)分化為成骨細胞的堿性磷酸酶(ALP)活性和骨鈣素的含量[14]，是本品能夠促進骨折愈合、防治骨質(zhì)疏松的機制之一。

冰片：辛、苦，微寒。歸心、脾、肺經(jīng)。具有開竅醒神，清熱止痛之功效。主治熱病神昏，痙厥，中風痰厥，氣郁暴厥，中惡昏迷，目赤，口瘡，咽喉腫痛，耳道流膿等癥。本品芳香走竄，具有良好的止痛作用，能清熱而散郁火消腫而止痛?！稌s醫(yī)鏡》云：“冰片治肢解疼痛”?，F(xiàn)代藥理研究證明冰片主要成分是近乎純粹的右旋龍腦，具有抗炎止痛作用。而且冰片本身又是一種很好的透皮促進劑，川芎配伍冰片后，其所含的川芎嗪透皮吸收性能夠被加強[15]。

IL-1、IL-6和TNF-α在OA軟骨退變中起重要作用，這些細胞因子能夠調(diào)節(jié)和刺激各種酶的活性，從而直接影響關節(jié)軟骨的代謝。在多項研究中表明，大多數(shù)OA患者的滑液中可發(fā)現(xiàn)IL-1、TNF-α和IL-6，這些細胞因子都有明顯的變化，它們通過對局部的刺激，使關節(jié)軟骨退變加重[16]。

Wood等1983年首先在人類的關節(jié)炎病變滑液中發(fā)現(xiàn)了可促進軟骨分解代謝的細胞因子，并通過檢測鑒別出此因子是IL-1；Sabiston等在牛OA動物實驗模型的滑膜中也發(fā)現(xiàn)了IL-1；Herman等在人的OA滑膜中也分離出了IL-1，證實滑膜中確實存在細胞因子。IL-1可由單核巨噬細胞、樹突狀細胞和成纖維細胞分泌，其中以前者為主。在OA中，軟骨細胞上1L-1感受器及IL-1本身的表達都有所增加。IL-1能夠誘導人關節(jié)軟骨細胞基質(zhì)金屬蛋白酶-3表達并增強其活性，還能刺激兔關節(jié)軟骨細胞合成一氧化氮，并誘導基質(zhì)金屬蛋白酶基因表達，再依次促進基質(zhì)金屬蛋白酶-14、9和3合成，在mRNA和蛋白質(zhì)兩個水平上與轉換生長因子-β和IL-4起結抗作用，并與Arg-Gly-Asp(精氨酸-甘氨酸一天冬氨酸)肽和P物質(zhì)協(xié)同作用抑制II型膠原和蛋白聚糖的合成，動物關節(jié)內(nèi)注射重組IL-1可復制出骨關節(jié)炎模型，注射IL-1拮抗劑又可阻斷軟骨基質(zhì)成分的降解[17]。有關研究顯示OA患者關節(jié)液中IL-1水平與骨關節(jié)炎軟骨的破壞程度呈高度正相關[18]，即關節(jié)液IL-1水平越高，關節(jié)軟骨的病變程度越重，因此關節(jié)液IL-1水平能作為一種臨床早期診斷OA的參考性觀測指標。本實驗結果顯示，正常組動物關節(jié)液中IL-1含量較低，而模型對照組實驗動物關節(jié)液中IL-1含量卻明顯增加，表明骨性關節(jié)炎動物模型關節(jié)液中IL-1含量成增高趨勢，傳統(tǒng)中藥外敷治療膝骨性關節(jié)炎也起到了一定的療效，表現(xiàn)為關節(jié)液中IL-1含量較模型對照組減少，但其效果與玻璃酸鈉和中藥貼膜治療后相比有明顯的差別，實驗證實玻璃酸鈉和中藥貼膜可通過減少關節(jié)液內(nèi)IL-1的生成,延緩骨關節(jié)炎病理過程發(fā)展,成為治療膝關節(jié)骨性關節(jié)炎的重要原因。

IL-6主要由淋巴樣和某些非淋巴樣細胞產(chǎn)生，具有多種生物學活性。IL-6可增強IL-1和TNF-α的效應，誘導肝細胞合成多種急性時相反應蛋白。在活動期的OA患者血清及關節(jié)滑液中能檢測到IL-6。OA患者的T細胞、B相胞、滑膜以及軟骨細胞均可產(chǎn)生IL-6，并與疾病活動相關，骨性關節(jié)炎患者TNF-α與IL-6等協(xié)同作用，最終導致滑膜炎和軟骨分解[19]。有研究表明，人膝關節(jié)骨關節(jié)炎患者滑液中IL-6濃度與關節(jié)破壞的X線分級相關[20]，提示IL-6也與骨關節(jié)炎的關節(jié)破壞相關。本實驗結果顯示了模型對照組動物膝關節(jié)液中IL-6含量較正常組明顯增高，在應用不同治療方法后，各治療組動物關節(jié)液中IL-6含量均有一定的下降，其中以玻璃酸鈉和中藥貼膜的治療效果最為明顯。實驗表明，中藥貼膜和玻璃酸鈉均可以通過下調(diào)關節(jié)液中IL-6含量而達到治療骨性關節(jié)炎的作用。

TNF是一類能引起腫瘤組織出血和壞死的細胞因子，主要來源于外周血和滑膜的單核-巨噬細胞，參與免疫應答、抗腫瘤、介導炎癥反應，參與內(nèi)毒素休克及引起惡病質(zhì)等，其中與關節(jié)炎相關的主要包括：誘導血管內(nèi)皮細胞表達黏附分子，增強白細胞對內(nèi)皮細胞的黏附；誘導分泌IL-1、IL-6、IL-8、CSF及基質(zhì)金屬蛋白酶等細胞因子和趨化因子，促進炎癥發(fā)生；激活淋巴細胞和中性粒細胞，是T細胞激活的協(xié)同刺激因子；刺激B細胞產(chǎn)生抗體和誘導成纖維細胞增殖[21]。TNF-α能刺激軟骨組胞產(chǎn)生大量的基質(zhì)金屬蛋白酶并增強其活性[22]，而對金屬蛋白酶抑制因子無影響，使基質(zhì)金屬蛋白酶/金屬蛋白酶抑制因子失平衡。TNF-α也能夠抑制軟骨中II型膠原和蛋白聚糖的合成，使軟骨發(fā)生進行性破壞[23]，但其作用弱于IL-1，且它們之間有協(xié)同作用。本實驗結果也顯示模型對照組實驗動物關節(jié)液中TNF-α含量較正常組明顯增加，表明骨性關節(jié)炎關節(jié)液中TNF-α含量有增高趨勢。各實驗組經(jīng)過治療后，在減少關節(jié)液內(nèi)TNF-α含量都起到了一定的效果，表明各治療藥物都可以通過降低關節(jié)液內(nèi)的TNF-α含量，達到治療骨性關節(jié)炎的目的。在各治療組降低TNF-α含量的作用中，以中藥貼膜的治療效果最為明顯，優(yōu)于玻璃酸鈉和傳統(tǒng)中藥治療。

透明質(zhì)酸(hyaluronic acid,HA)，又稱玻璃酸，于1934年由Meyer等從牛眼玻璃體中分離而得名，它是關節(jié)液和軟骨基質(zhì)的主要組成成分。人體內(nèi)的透明質(zhì)酸主要由纖維母細胞、滑膜細胞和軟骨細胞產(chǎn)生，其主要作用包括：參與細胞外液中電解質(zhì)和水分的調(diào)節(jié)；關節(jié)和細胞間減震及潤滑：屏障和抵御感染；參與修復創(chuàng)傷和鈣化；促進血液凝固；澄清血脂；保持關節(jié)液的穩(wěn)定；支持和穩(wěn)定滑膜細胞和膠原支架；對痛覺的抑制；參與軟骨修復等多種生理功能[24]。在OA發(fā)病過程中，由于基質(zhì)金屬蛋白酶和其他細胞因子的作用，致使關節(jié)滑液中產(chǎn)生較多的自由基，最終導致關節(jié)滑液中透明質(zhì)酸分泌量減少，造成OA患者關節(jié)滑液中透明質(zhì)酸的濃度、分子量和粘彈性均低于正常值。透明質(zhì)酸含量下降使?jié)櫥偷挚箼C械力作用的生物學功能產(chǎn)生障礙，作用于關節(jié)軟骨的應力增加，導致軟骨細胞損傷，滑膜合成透明質(zhì)酸的功能低下；炎癥過程中白細胞呼吸爆發(fā)產(chǎn)生的自由基可降解透明質(zhì)酸，如氧自由基可破壞透明質(zhì)酸黏變區(qū)，改變其性質(zhì)，并使之斷裂，滑膜炎癥滲出增加又可繼續(xù)造成透明質(zhì)酸濃度降低，引發(fā)惡性循環(huán)。此外，骨性關節(jié)炎發(fā)病過程中關節(jié)內(nèi)的積液增多，使關節(jié)內(nèi)的透明質(zhì)酸進一步被稀釋，從而造成關節(jié)內(nèi)的透明質(zhì)酸含量相對降低，也是加重骨性關節(jié)炎的一個重要因素[25]。目前，研究顯示骨性關節(jié)炎患者關節(jié)液中透明質(zhì)酸的含量要明顯低于正常人，因此在治療骨性關節(jié)炎時常常配合采用關節(jié)內(nèi)注射玻璃酸鹽的方法[26]，起到了緩解關節(jié)疼痛，恢復關節(jié)功能的治療作用。研究結果顯示，模型對照組關節(jié)液中透明質(zhì)酸含量明顯低于正常組，表明骨性關節(jié)炎時，關節(jié)液中透明質(zhì)酸處于較低水平。中藥貼膜和玻璃酸鈉都在治療骨性關節(jié)炎過程中有較好的提高關節(jié)內(nèi)透明質(zhì)酸的作用，可以通過增加關節(jié)內(nèi)透明質(zhì)酸含量來達到治療骨性關節(jié)炎的作用。關節(jié)內(nèi)注射玻璃酸鈉后，關節(jié)內(nèi)透明質(zhì)酸含量上升要高于中藥貼膜治療，明顯高于傳統(tǒng)中藥治療，因此注射玻璃酸鈉療法在增加關節(jié)內(nèi)透明質(zhì)酸含量的作用上要優(yōu)于中藥貼膜。

本實驗將配置成功的中藥貼膜貼劑應用于兔骨性關節(jié)炎模型，并將治療結果與應用玻璃酸鈉注射劑治療進行對比研究，結果顯示中藥貼膜和玻璃酸鈉都可以通過減低骨性關節(jié)炎動物模型關節(jié)液中IL-1、IL-6和TNF-α的含量來達到治療骨性關節(jié)炎的目的。在改善關節(jié)液內(nèi)透明質(zhì)酸合成過程方面，研究結果顯示玻璃酸鈉在提高關節(jié)液內(nèi)透明質(zhì)酸的含量要優(yōu)于中藥貼膜，這與玻璃酸鈉本身的藥物性質(zhì)有關，也可能是中藥貼膜在治療過程中要通過透皮吸收等一系列作用后達到治療效果，從而使藥物起效時間延長，亦或許是中藥貼膜在透過皮膚表層組織后，在體內(nèi)代謝還受其他相關因素的控制，從而致使中藥貼膜在促進透明質(zhì)酸生成的作用較玻璃酸鈉低。相比而言，中藥貼膜雖然在促進關節(jié)透明質(zhì)酸生成方面弱于玻璃酸鈉，但卻可以從根本上對關節(jié)軟骨的破壞因素進行(如MMP-1)進行干預[27]，從而從標、本兩方面對骨性關節(jié)炎起到良好的治療作用，其綜合治療結果要優(yōu)于玻璃酸鈉。本實驗證實中藥貼膜在治療骨性關節(jié)炎過程中能夠改善骨性關節(jié)炎動物模型關節(jié)液中IL-1、IL-6、TNF-α、HA等關鍵指標，為預防膝關節(jié)骨性關節(jié)炎的發(fā)生和治療膝關節(jié)骨性關節(jié)炎提供直觀的參考依據(jù)。