一種溫敏型凝膠子宮灌注液的制備及藥物濃度的監(jiān)測

于 洋，華成云，許 穎，馮云云，劉 宇，黃顯會

(華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，廣東廣州510642)

子宮內(nèi)膜炎是母豬在生產(chǎn)過程中或產(chǎn)后受到大腸埃希菌、鏈球菌、葡萄球菌等病原微生物侵襲而引發(fā)的炎癥[1]?；疾『髸?dǎo)致母豬泌乳量減少、發(fā)情周期紊亂、屢配不孕，增大母豬的淘汰率[2]，給養(yǎng)豬場帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失，因此選擇合適的藥物和給藥途徑治療母豬子宮內(nèi)膜炎十分重要。多西環(huán)素是四環(huán)素類廣譜抗菌藥，目前在獸醫(yī)臨床上主要用于治療畜禽由大腸埃希菌、沙門氏菌、支原體等病原微生物感染的疾病[3]，與其他同類藥物相比具有抗菌活性強(qiáng)、體內(nèi)分布廣、生物利用度高等優(yōu)點[4]。有研究指出，多西環(huán)素對奶牛子宮內(nèi)膜炎有很好的治療效果[5]，而且組織穿透能力強(qiáng)，因此常用于治療子宮內(nèi)膜炎等器官深部感染性炎癥。

子宮內(nèi)膜炎是發(fā)生在子宮這種深部器官的炎癥，若采取肌肉注射的方式，藥物很難到達(dá)作用部位起到治療效果，因此一般采用子宮灌注的方式對母豬子宮內(nèi)膜炎進(jìn)行治療。但普通的子宮灌注液到達(dá)子宮內(nèi)時為液體狀態(tài)，易流動導(dǎo)致藥物損失，從而降低治療效果，因此研制出一種定位準(zhǔn)確且能減少藥物損失的制劑尤為重要。溫度敏感型原位凝膠是一種新型給藥系統(tǒng)，以液體狀態(tài)給藥后，受給藥部位溫度的變化能發(fā)生相轉(zhuǎn)變形成半固體凝膠[6]，目前已廣泛應(yīng)用于鼻腔[7-9]、眼部[10-11]、陰道[12]等部位給藥。與傳統(tǒng)子宮灌注液相比，溫度敏感型原位凝膠子宮灌注液到達(dá)子宮后變?yōu)榘牍腆w狀態(tài)，更易黏附在子宮內(nèi)，不易流失，在提高患病部位局部藥物濃度的同時還具有緩釋效果。

本研究選擇溫敏型原位凝膠給藥系統(tǒng)，以多西環(huán)素為主藥、泊洛沙姆407(P407)和泊洛沙姆188(P188)為主要的溫敏材料，經(jīng)處方篩選和優(yōu)化后，研制出一種多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液，對其進(jìn)行了體外溶蝕考察和質(zhì)量評價，并對給藥后該制劑在子宮內(nèi)的藥物濃度進(jìn)行了監(jiān)測，為臨床使用多西環(huán)素治療母豬子宮內(nèi)膜炎提供新途徑。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑

多西環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品：w為90.5%，批號YD171101008，由中國獸藥藥品監(jiān)察所提供；多西環(huán)素原料藥：w為90.9%，批號YD180201030，由揚州聯(lián)博藥業(yè)有限公司提供；P407：批號WPWL404B，由德國BASF公司提供；P188：批號WPWL537B，由德國BASF公司提供；乙腈：色譜純，批號LOT122269，由Fisher Scientific公司提供；甲醇：色譜純，批號LOT120511，由Fisher Scientific公司提供；9 g/L 生理鹽水：批號D17070602，由四川科倫藥業(yè)股份有限公司提供；PBS緩沖液：批號LOT8118291，由Fisher Scientific公司提供；鹽酸、冰乙酸、乙酸銨、氯化鎂等均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器

分析天平：AUX120型，日本SHIMADZU(島津)公司；藥品穩(wěn)定性試驗箱：Blue pard 型，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；高效液相色譜儀：島津SIL-20A，Shimadzu 公司；恒溫水浴振蕩器：SHA-C 型，常州澳華儀器有限公司；pH 計：PHSJ-25型，上海雷磁儀器廠；渦旋儀：XW-80A 型，上海滬西分析儀器廠有限公司；磁力攪拌器：MSI 型，馬來西亞IKA 公司。

1.3 多西環(huán)素溫敏型原位凝膠的制備

1.3.1 處方篩選 以多西環(huán)素為主藥、P407和P188為溫敏材料，對抗氧化劑、金屬絡(luò)合劑、pH調(diào)節(jié)劑等輔料進(jìn)行初步篩選。多西環(huán)素溫敏凝膠一般在pH 4.0左右的環(huán)境中穩(wěn)定，用于弱酸性環(huán)境的常見抗氧化劑有亞硫酸氫鈉和焦亞硫酸鈉，常見金屬絡(luò)合劑有氧化鎂、氯化鎂、氯化鈣、乙二胺四乙酸二鈉等。通過單因素試驗最終確定金屬絡(luò)合劑為氯化鎂，抗氧化劑為亞硫酸氫鈉，pH 調(diào)節(jié)劑為乙醇胺。

選擇合適溫度的泊洛沙姆溶液，對泊洛沙姆溶液、金屬絡(luò)合劑、抗氧化劑、p H 調(diào)節(jié)劑的不同比例進(jìn)行4因素3水平的正交試驗，按照L9(34)正交表設(shè)計試驗方案，選擇出各輔料合適的用量，確定最佳處方。

1.3.2制備工藝 采用“冷法”工藝[13]制備。按照處方量稱取多西環(huán)素原料藥1 g、P407 10 g、P188 2.5 g、氯化鎂2.3 g 和亞硫酸氫鈉0.1 g；將P407和P188加入到34 mL 4℃的超純水中攪拌均勻，4℃條件下靜置24 h 待P407和P188充分溶脹形成澄清溶液，得到空白凝膠溶液；隨后將多西環(huán)素原料藥和其他輔料加入到配制好的空白凝膠溶液中，渦旋，超聲攪拌使其充分溶解；用乙醇胺調(diào)節(jié)溶液pH，放置于4℃條件下，待氣泡除去，形成的澄清溶液即為多西環(huán)素溫敏型原位凝膠。

1.3.3膠凝溫度的測定 采用倒置試管法[13]測定。取2～3 mL多西環(huán)素溫敏型原位凝膠置于玻璃試管中，插入溫度計，將玻璃試管放入恒溫水浴鍋中，緩慢升溫；將試管倒置，試管中溶液不再流動時的溫度即為膠凝溫度。

1.3.4性狀觀察 觀察并記錄多西環(huán)素溫敏型原位凝膠的形態(tài)及顏色變化。

1.4 多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液藥物含量測定

參照《中華人民共和國獸藥典(2015版)》[14]高效液相色譜法測定。色譜條件：色譜柱為Phenomenex/Kinetex EVO C18柱(4.6 mm×250 mm，5μm)；流動相為醋酸鹽緩沖液(0.25 mol/L 醋酸銨溶液、0.10 mol/L乙二胺四乙酸二鈉和三乙胺按照體積比100∶10∶1配制，用冰醋酸或氨水調(diào)節(jié)p H至8.8)和乙腈，體積比為84∶16；檢測波長280 nm；流速1 mL/min；柱溫35℃；進(jìn)樣量20μL。測定方法：精密稱取多西環(huán)素(w為2%)溫敏型原位凝膠子宮灌注液0.5 g，置于100 mL 棕色容量瓶中，加0.01 mol/L鹽酸溶液溶解并標(biāo)定至100 mL，搖勻，制備成質(zhì)量濃度為100μg/mL的多西環(huán)素溶液，作為供試溶液；精密稱取多西環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品110.45 mg 于100 mL棕色容量瓶中，加0.01 mol/L 鹽酸溶液溶解并定容至刻度，搖勻，4 ℃保存，制得質(zhì)量濃度為1000 μg/mL的多西環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)儲備液；精密量取20μL供試品溶液，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖；將標(biāo)準(zhǔn)儲備液用0.01 mol/L鹽酸溶液稀釋10倍后，精密量取20μL，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖；按外標(biāo)法以峰面積計算供試品中多西環(huán)素的含量。

1.5 體外溶蝕及多西環(huán)素釋放測定

1.5.1體外溶蝕 采用無膜溶出模型[15]研究多西環(huán)素溫敏凝膠子宮灌注液的溶蝕及藥物的體外釋放情況。精密稱取多西環(huán)素溫敏凝膠子宮灌注液5 g，加入預(yù)先稱質(zhì)量的玻璃試管中，稱質(zhì)量，在(37±0.5)℃條件下平衡5 min，完全形成凝膠后加入2 mL 37℃的釋放介質(zhì)，在恒溫水浴振蕩器中以100 r/min 振蕩，分別在1、2、4、6、8、12、24、36、48 h 后立即傾倒出全部釋放介質(zhì)，稱質(zhì)量并記錄；然后重新于(37±0.5)℃條件下平衡5 min，加入2 mL 37℃的釋放介質(zhì)，如此反復(fù)操作，直至溶蝕完。釋放介質(zhì)分別為pH=7.2的PBS緩沖溶液和9 g/L生理鹽水，每種釋放介質(zhì)設(shè)置3個平行管，取平均值。相鄰時間點的樣品質(zhì)量差即為此期間的凝膠溶蝕量。各時間點多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液的累積溶蝕率(M)按公式(1)進(jìn)行計算。

式中，Mt為t時刻多西環(huán)素溫敏原位凝膠累積溶蝕量，g；M0為多西環(huán)素溫敏原位凝膠初始質(zhì)量，g。

1.5.2體外釋藥 取不同時間點的溶蝕液，全部倒入100 mL 容量瓶中，用0.01 mol/L的鹽酸溶液稀釋定容至100 mL，經(jīng)0.22μm 濾膜過濾，制備成供試品溶液，按照“1.4”色譜條件上機(jī)檢測進(jìn)行藥物含量測定，并將每次測得的多西環(huán)素釋放量累加后與凝膠中多西環(huán)素的總質(zhì)量相比，按公式(2)計算多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液的累積釋藥率(Q)。

式中，Qt為t時刻多西環(huán)素溫敏型原位凝膠中多西環(huán)素的累積釋放量，g；Q0為多西環(huán)素溫敏型原位凝膠中多西環(huán)素的總質(zhì)量，g。

1.5.3溶蝕行為與釋藥行為的關(guān)系 將多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液的累積溶蝕量、多西環(huán)素累積釋放量與時間按照零級動力學(xué)方程、一級動力學(xué)方程和Higuchi 動力學(xué)方程進(jìn)行擬合，探究最佳溶蝕及釋藥模型。隨后以凝膠制劑的累積溶蝕率為橫坐標(biāo)、多西環(huán)素累積釋放率為縱坐標(biāo)作圖，探究制劑溶蝕與釋藥行為之間的關(guān)系。

1.6 多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液穩(wěn)定性試驗

1.6.1影響因素試驗 強(qiáng)光照射試驗：將3批多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液放置于藥品穩(wěn)定性試驗箱中，光照強(qiáng)度為(4500±500)lx，在第0、5、10天取樣，觀察其外觀性狀、p H、膠凝溫度，按照“1.4”色譜條件上機(jī)檢測多西環(huán)素含量變化。

高溫試驗：將3批多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液放置于密閉潔凈恒溫箱中，恒溫箱溫度為40℃，在第0、5、10天取樣，觀察其外觀性狀、pH、膠凝溫度，按照“1.4”色譜條件上機(jī)檢測多西環(huán)素含量變化。

高濕試驗：將3批多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液放置于密閉潔凈容器中，容器環(huán)境條件為25℃、相對濕度90%，在第0、5、10天取樣，觀察其外觀性狀、pH、膠凝溫度，按照“1.4”色譜條件上機(jī)檢測多西環(huán)素含量變化。

1.6.2加速試驗 將3批多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液放置于人工氣候培養(yǎng)箱中進(jìn)行180 d試驗，培養(yǎng)箱環(huán)境條件為(30±2)℃、相對濕度(65±5)%，試驗期間第0、30、60、90、180天取樣，觀察其外觀性狀、p H、膠凝溫度，按照“1.4”色譜條件上機(jī)檢測多西環(huán)素含量變化。

1.6.3長期穩(wěn)定性試驗 將3批多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液放置于人工氣候培養(yǎng)箱中進(jìn)行180 d 試驗，培養(yǎng)箱環(huán)境條件為(25±2)℃、相對濕度(60±10)%，分別于第0、90、180天取樣，考察其外觀性狀、pH、膠凝溫度，按照“1.4”色譜條件上機(jī)檢測多西環(huán)素含量變化。

1.7 母豬子宮內(nèi)藥物濃度監(jiān)測試驗

1.7.1給藥與采樣 試驗動物：5頭二元雜母豬，體質(zhì)量均200 kg 以上，自由采食和飲水。

給藥方法：采用子宮灌注的方式給藥，灌注液制劑的給藥劑量為50 g/頭，在第1次給藥后，間隔1 d 進(jìn)行第2次給藥。

取樣方法：分別于第1次給藥12、24、36 h 后，第2次給藥前；第2次給藥8、12、24、36、48、72、96 h后進(jìn)行采樣。用深部輸精管深入子宮頸處，灌入20 mL滅菌水，抽動20次深部輸精管，3 min 后用注射器吸取樣品，做好記號，放入?20℃冰箱中保存。

1.7.2樣品前處理方法 取母豬子宮試液解凍，混勻。精密吸取0.5 mL 于2 mL 離心管中，加入1 mL 甲醇，渦旋混勻5 min 后振蕩10 min，4℃、12 000 r/min 離心10 min，吸取上清液，經(jīng)0.22μm 微孔濾膜過濾至2 mL 棕色進(jìn)樣瓶中，按照“1.4”色譜條件上機(jī)檢測。

2 結(jié)果與分析

2.1 處方篩選結(jié)果

通過單因素分析試驗篩選各輔料合適的用量范圍，選擇對制劑穩(wěn)定性影響較大的4個因素作為考察因素進(jìn)行正交試驗，每個因素考察3個水平。以多西環(huán)素的含量變化作為主要評價指標(biāo)，25℃避光條件下，在制備制劑后的第0和7天取樣測定制劑中多西環(huán)素的含量，計算多西環(huán)素的含量變化。正交試驗設(shè)計和具體結(jié)果見表1。其中，平均值1、2、3分別代表了4個考察因素為1、2、3水平時多西環(huán)素含量變化的綜合平均值，極差代表了各因素對制劑穩(wěn)定性的影響幅度。

根據(jù)極差越大影響程度越大的原則，通過極差分析，各因素對制劑穩(wěn)定性的影響程度依次為抗氧化劑＞金屬絡(luò)合劑＞pH調(diào)節(jié)劑＞泊洛沙姆溶液。對各均值進(jìn)行分析，均值越小代表含量變化越小，制劑越穩(wěn)定，得到各因素的最佳水平分別為泊洛沙姆溶液：18%（w）P407、3%（w）P188；絡(luò)合物摩爾比：5∶1＞3∶1＞1∶1；亞硫酸氫鈉含量（w）：0.20%＞0.10%＞0.15%；pH：4.0＞3.0＞初始pH。因此，該制劑的最佳處方配比應(yīng)為18%（w）P407、3%（w）P188，金屬絡(luò)合劑氯化鎂與多西環(huán)素的摩爾比例為5∶1，亞硫酸氫鈉含量（w）為0.20%，pH 為4.0。但18%（w）P407和3%（w）P188的機(jī)械強(qiáng)度較弱，形成凝膠后溶蝕較快，達(dá)不到很好的緩釋作用，且通過極差分析結(jié)果可知，泊洛沙姆溶液對該制劑穩(wěn)定性的影響非常小，綜合對各因素的考察結(jié)果，最后選用了20%（w）P407和5%（w）P188，該比例形成的凝膠機(jī)械強(qiáng)度更大緩釋效果也更明顯。經(jīng)優(yōu)化最終組方確定如下：50 g制劑含P407 10 g、P188 2.5 g、氯化鎂2.3 g、亞硫酸氫鈉0.1 g，用乙醇胺調(diào)pH 至4.0±0.2，余量為超純水。

表1 正交試驗設(shè)計和結(jié)果1）Table 1 Design and result of orthogonal experiment

2.2 膠凝溫度及性狀觀察

多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液室溫條件下為均勻淡黃色澄清液體(圖1a)，室溫放置180 d顏色未發(fā)生改變，也未有沉淀出現(xiàn)。膠凝溫度大約在30℃，當(dāng)溫度超過30℃時呈現(xiàn)半固體凝膠狀態(tài)，如圖1b所示。

圖2 體外溶蝕與釋藥結(jié)果Fig.2 Results of in vitro dissolution and drug release

圖1 多西環(huán)素溫敏凝膠性狀Fig.1 Characteristics of doxycycline thermo-sensitive gel

2.3 體外溶蝕與釋藥

多西環(huán)素溫敏凝膠在PBS緩沖液和生理鹽水中的溶蝕及釋藥情況見圖2a、2b。無論在PBS緩沖液還是生理鹽水中，多西環(huán)素溫敏凝膠累積溶蝕和累積釋藥時間均達(dá)48 h，證明該制劑緩釋效果良好。

制劑累積溶蝕率與累積釋藥率對時間的擬合結(jié)果顯示，在釋放介質(zhì)中制劑溶蝕與釋藥均符合零級動力學(xué)過程，與時間有良好的線性關(guān)系，得到的線性方程為：PBS溶液釋放介質(zhì)中，y=0.990 8x+1.399 1,R2=0.9996；生理鹽水釋放介質(zhì)中，y=0.987 7x+2.087 4，R2=0.999 4。累積釋藥率與制劑累積溶蝕率進(jìn)行線性回歸，由圖2c可知，在2種釋放介質(zhì)中，制劑累積溶蝕率和累積釋藥率均具有良好的線性關(guān)系，累積釋藥率隨制劑累積溶蝕率的增加而增加，制劑溶蝕決定了釋藥情況。

2.4 穩(wěn)定性試驗

2.4.1影響因素試驗 在強(qiáng)光照射和高濕條件下多西環(huán)素溫敏原位凝膠均較穩(wěn)定，但高溫對制劑中的多西環(huán)素含量影響較大。

2.4.2加速試驗和長期穩(wěn)定性試驗 加速試驗和長期穩(wěn)定性試驗結(jié)果分別見表2和表3。在180 d加速試驗和長期穩(wěn)定性試驗中，多西環(huán)素溫敏凝膠的pH及膠凝溫度均未有明顯變化，多西環(huán)素含量穩(wěn)定，證明該制劑較為穩(wěn)定。

2.5 母豬子宮藥物濃度監(jiān)測

監(jiān)測結(jié)果顯示，給藥后母豬子宮內(nèi)的藥物質(zhì)量濃度始終維持在一個很高的水平，其中第1次給藥36 h 后子宮內(nèi)藥物質(zhì)量濃度最低，為44.05μg/mL，第2次給藥12 h 后最高，為472.91μg/mL，另外第2次給藥96 h 后子宮內(nèi)藥物質(zhì)量濃度仍能保持在很高的水平，表明該制劑緩釋效果良好，具體數(shù)據(jù)見表4。

表 2多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液加速試驗結(jié)果Table2 Resultsof acceleration test of doxycycline thermo-sensitive in situ gel uterine perfusate

表3 多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液長期穩(wěn)定性試驗結(jié)果Table 3 Results of long-term stability test of doxycyclinethermo-sensitive in situ gel uterineperfusate

表4 多西環(huán)素溫敏型原位凝膠子宮灌注液在母豬子宮內(nèi)的藥物質(zhì)量濃度Table 4 Drug massconcentration of doxycycline thermo-sensitive in situ gel uterineperfusate in sow uterusρ/(μg·mL?1)

3 討論

P407具有良好的溫度敏感性和生物相容性，是制備溫度敏感型原位凝膠理想的輔料[16]，但僅使用P407會使制得的凝膠機(jī)械強(qiáng)度低，膠凝溫度低，溶蝕快，作用時間短。有研究表明在P407中加入P188可以顯著改善凝膠的機(jī)械強(qiáng)度和膠凝溫度[17-18]，因此本試驗加入P188作為膠凝溫度調(diào)節(jié)劑來改善膠凝溫度。同時P407和P188比例的選擇也是整個處方設(shè)計的關(guān)鍵，有研究指出在原位凝膠給藥體系中P407最佳質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%[19-20]，綜合各方面因素，最終選擇20%(w)P407和5%(w)P108作為凝膠基質(zhì)，在改善膠凝溫度的同時還可以增強(qiáng)機(jī)械強(qiáng)度達(dá)到緩釋效果。另外，作為主藥的多西環(huán)素具有不穩(wěn)定和易氧化的特點，因此處方中加入了氯化鎂作為金屬絡(luò)合劑、亞硫酸氫鈉作為抗氧化劑增強(qiáng)多西環(huán)素溫敏型原位凝膠的穩(wěn)定性。

泊洛沙姆凝膠常用的制備方法有“熱法”和“冷法”[21]。與“熱法”相比，“冷法”雖然制備時間較長，但不會使不耐高溫的藥物受損?？紤]到多西環(huán)素不耐高溫，所以本試驗采用“冷法”制備凝膠。

《中華人民共和國藥典》[22]對原位凝膠體外溶蝕量和釋藥量的考察方法并未給出明確的規(guī)定，目前常用的評價模型有2種，即有膜溶出模型和無膜溶出模型[23]。本試驗制備的藥物凝膠進(jìn)入體內(nèi)后將與子宮黏膜直接接觸，相比于有膜溶出模型，無膜溶出模型解除了半透膜對藥物的阻滯作用，能更準(zhǔn)確地模擬藥物凝膠在子宮內(nèi)真實的溶蝕和釋放情況。因此，本試驗采用無膜溶出模型考察凝膠的體外溶蝕量和釋藥量。

對藥物進(jìn)行用藥部位濃度的監(jiān)測，可以大致了解藥物在用藥部位的濃度隨時間變化的情況，為后期進(jìn)行臨床藥動學(xué)和藥效學(xué)研究提供科學(xué)的參考依據(jù)，因此本研究對制備的藥物凝膠在母豬子宮內(nèi)的藥物濃度進(jìn)行了監(jiān)測。考慮到子宮內(nèi)黏液量有限，為了方便取樣，最終優(yōu)化了試驗方案，在子宮內(nèi)灌注20 mL 滅菌水后取樣。

病原菌感染是豬子宮內(nèi)膜炎的主要病因，但引發(fā)該病的病原微生物較為復(fù)雜，有研究對子宮內(nèi)膜炎的致病病菌進(jìn)行了分離鑒定，發(fā)現(xiàn)大腸埃希菌、鏈球菌、葡萄球菌和沙門氏菌為主要的致病菌[24-25]。多西環(huán)素作為廣譜抗菌藥，對以上4種細(xì)菌均有一定的抑制作用，王春陽[26]研究發(fā)現(xiàn)多西環(huán)素對大腸埃希菌、鏈球菌、葡萄球菌、沙門氏菌的最小抑菌濃度(Minimal inhibitory concentration，MIC)分別為16、2、4、32μg/mL。本次試驗制備的多西環(huán)素凝膠在第2次給藥96 h 后藥物在子宮內(nèi)的質(zhì)量濃度為68.54μg/mL，大于多西環(huán)素對以上4種致病菌的MIC值，表明該制劑在第2次給藥96 h 后對豬子宮內(nèi)膜炎主要致病菌仍具有良好的抑制作用，緩釋效果明顯。此外，傳統(tǒng)的液體子宮灌注劑雖具有給藥方便的優(yōu)點，但液體制劑進(jìn)入子宮后易流失，導(dǎo)致藥物在子宮內(nèi)的濃度會有較大的波動，不能有效地停留在患病部位發(fā)揮治療作用，而且作用時間短，需要多次給藥才能達(dá)到治療效果，大大增加對子宮的刺激。本研究將藥物制備成凝膠灌注劑，既保留了傳統(tǒng)液體制劑給藥方便的優(yōu)點，同時藥物到達(dá)子宮后可由液態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槟z狀態(tài)，長時間黏附在子宮內(nèi)發(fā)揮治療作用。藥物濃度監(jiān)測結(jié)果顯示在第2次給藥96 h 后子宮內(nèi)仍保持較高的藥物濃度，有效減少給藥次數(shù)，在治療母豬子宮內(nèi)膜炎的同時還能減弱對子宮的刺激。

4 結(jié)論

本研究成功制備了一種可用于治療母豬子宮內(nèi)膜炎的多西環(huán)素溫敏型原位凝膠，制備方法簡單，性狀穩(wěn)定，符合《獸藥研究技術(shù)指導(dǎo)原則匯編》[27]中的獸用化學(xué)藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則的要求。與傳統(tǒng)給藥劑型相比，制劑到達(dá)子宮后能黏附在子宮內(nèi)，減少藥物損失，同時還具有緩釋效果。多西環(huán)素溫敏型原位凝膠制劑的成功研制為新獸藥的進(jìn)一步研究提供了科學(xué)依據(jù)，同時也為臨床使用多西環(huán)素治療母豬子宮內(nèi)膜炎提供了一種新途徑。