微柱卡與試管法在新生兒溶血三項試驗中的應(yīng)用效果

穆耶賽爾·艾尼

（喀什地區(qū)第二人民醫(yī)院，新疆 喀什）

0 引言

新生兒溶血病又被稱之為母子血型不合疾病，實質(zhì)是同族免疫性溶血，這會使胎兒在母體中或出生后出現(xiàn)大量紅血球破壞，此類疾病是致使新生兒出現(xiàn)黃疸和貧血的主要原因之一，并且隨著黃疸的加重會增加病情發(fā)展，誘發(fā)呼吸衰竭、心力衰竭等表現(xiàn)，并且還有部分嚴(yán)重病癥者可能直接出現(xiàn)死胎等表現(xiàn)[1-2]。本次研究為了探尋溶血三項試驗的有效檢測方式特別選取2019 年10 月至2020 年10 月90 例疑似溶血病新生兒進(jìn)行研究觀察，最終得到了較為科學(xué)有效的成效，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

經(jīng)我院倫理委員批準(zhǔn)后，特別選取2019 年10 月至2020 年10 月于我院進(jìn)行溶血三項試驗的90 例疑似溶血病新生兒作為本次研究的主要對象，其中有男48 例，女42 例，年齡為0.5～8 d，平均（4.59±0.69）d，新生兒出現(xiàn)黃疸、貧血以及血紅蛋白降低等疑似溶血病的表現(xiàn)，本次研究全部操作過程均按照嚴(yán)格的規(guī)范流程實施，在倫理委員會的監(jiān)督下保證此次研究順利完成的情況下，并且確保實驗結(jié)果的規(guī)范性以及可信度，本次研究入選的新生兒家屬必須知情并簽署同意書。

1.2 方法

1.2.1 儀器配備

儀器：全自動血型儀器、正反定型血型試劑卡、自動判讀機(jī)、離心機(jī)、恒溫水箱以及移液器。

試劑：1% 木瓜酶、PBS 緩沖液、0.9% 生理鹽水、0.2% 半胱氨酸溶液。

1.2.2 試管法

（1）使用生理鹽水將受檢的紅細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)洗滌3 次以上配置為3% 的紅細(xì)胞懸液，取其中1 滴加入抗人球蛋白試劑，進(jìn)行離心處理；（2）再另取3 支無菌干燥試管，分別滴入兩滴新生兒血清，然后分別標(biāo)識A、B、O 不同試劑，放入恒溫水箱之中將溫度調(diào)節(jié)到37 ℃，大約孵育1 h 左右再使用生理鹽水進(jìn)行沖洗，然后加入抗人球蛋白試劑進(jìn)行離心處理后觀察。

1.2.3 微柱卡

（1）抽取新生兒靜脈血進(jìn)行離心處理，將其中紅細(xì)胞進(jìn)行壓積，同樣使用生理鹽水將受檢的紅細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)洗滌3次以上配置為1%的紅細(xì)胞懸液，將懸液放置于微柱凝膠孔之中，再次離心后放入自動判讀機(jī)進(jìn)行判讀結(jié)果，如若紅細(xì)胞最終凝聚在凝膠帶上部則表示為（+）；（2）在微柱凝膠卡中分別加入A、B 以及O 三種紅細(xì)胞，然后加入同劑量的新生兒血清，在37 ℃的恒溫水箱中孵育15 min，最后離心觀察結(jié)果即可；（3）將洗滌4 次以上的紅細(xì)胞同等量的生理鹽水進(jìn)行融合放置于干燥試管之中，在56 ℃的恒溫水箱中孵育10 min，進(jìn)行離心操作后取上層清液為放散液備用，然后分別在3 個微柱凝膠之中放入等量的放散液以及A、B 以及O 三種紅細(xì)胞，再次放入37 ℃的恒溫水箱中孵育15 min，取出后進(jìn)行低速離心后即可觀察性質(zhì)。

1.3 效果判定

直抗實驗、放散實驗以及游離實驗均為（+）均可判定為陽性，如若檢驗結(jié)果出現(xiàn)差異則以放散實驗結(jié)果為診斷標(biāo)準(zhǔn)[3-4]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 15.0 軟件包建立相關(guān)數(shù)據(jù)庫，然后進(jìn)行數(shù)據(jù)計算分析，計量資料均以（±s）表示，采用t檢驗；計數(shù)資料采用（%）表示，采用χ2進(jìn)行檢驗，P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

通過不同方式進(jìn)行檢測后，微柱卡在直抗實驗、放散實驗、游離實驗以及ABO-HDFN 等均優(yōu)于試管法，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；其他抗體-HDFN 的檢驗中兩組檢驗方式無明顯差異（P＞0.05），具體見表1。

表1 對比兩種檢驗方式不同試驗結(jié)果[n(%)]

3 討論

新生兒溶血病實質(zhì)是屬于免疫性溶血性疾病之一，母體同胎兒之間的紅細(xì)胞IgG 血型不合從而誘發(fā)免疫疾病的出現(xiàn)，此類疾病出現(xiàn)的主要因素是由于夫妻血型不合或者母體同胎兒在妊娠時段中出現(xiàn)血液成分交換[5-6]。通常在妊娠時段病癥便會開始出現(xiàn)，可造成流產(chǎn)、死胎等表現(xiàn)，存活的新生兒容易出現(xiàn)黃疸、貧血以及智力低下等表現(xiàn)。

溶血三項試驗是能夠有效判斷此類疾病的方式，即是直抗實驗、放散實驗以及游離實驗，以上檢驗聯(lián)合臨床表現(xiàn)通?？梢源_診疾病。最早是使用試管抗球蛋白進(jìn)行檢驗，此類檢查方式是早期應(yīng)用較為廣泛的技術(shù)，但是手工操作過程較為復(fù)雜，并且容易受到血清、離心處理以及時長等多種因素的影響，并且很難反復(fù)使用，需要較多的標(biāo)本用量。而微柱卡是一個固定的使用方式以及用量，很容易達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化的目的，對于實驗人力、物力要求相對較小，并且操作簡單容易普及，是利用凝膠顆粒對于分子進(jìn)行排阻和表現(xiàn)，因此最終結(jié)果能夠直觀得到。并且微柱卡在一層層的檢驗操作之中極大程度避免了人為的參與，就減少影響最終結(jié)果的可能，增加了最終結(jié)果的真實性和可靠性[7-8]。

綜上所述，使用微柱卡在新生兒溶血三項試驗之中的應(yīng)用效果更加明顯，操作以及判定更加簡便標(biāo)準(zhǔn)，具有極強(qiáng)的敏感性、特異性，連較弱的抗體都能夠顯示出，為臨床進(jìn)行治療溶血疾病的過程中提供了真實有效的支持，能夠做到早診斷、早治療，值得在臨床之中廣泛應(yīng)用并推廣。