術(shù)前血清腫瘤標(biāo)志物水平對(duì)浸潤(rùn)性膀胱癌根治術(shù)后生存率的預(yù)測(cè)價(jià)值*

張姝越 劉吉文 蔣鑫 黃婷 文楊

(中國(guó)人民解放軍西部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院泌尿外科，四川 成都 610000)

膀胱癌是發(fā)生于膀胱黏膜的泌尿系惡性腫瘤，其臨床病理類型包括膀胱尿路上皮癌、鱗狀細(xì)胞癌、腺癌等[1]。膀胱尿路上皮癌是最常見(jiàn)的膀胱癌，根據(jù)其侵犯黏膜的深度可分為肌層浸潤(rùn)性膀胱癌(Muscle invasive bladder cancer，MIBC)和非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌(Non-muscle invasive bladder cancer，NMIBC)[2]。目前，MIBC是指腫瘤穿透黏膜層浸潤(rùn)到肌層，臨床主要采用膀胱切除根治術(shù)進(jìn)行治療，但術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率較高，預(yù)后較差[3]。尋找新的能夠預(yù)測(cè)MIBC預(yù)后生存的分子標(biāo)志物，正確評(píng)估MIBC患者的病情具有重要意義。因此，本研究分析了術(shù)前血清腫瘤標(biāo)志物血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)、血清趨化因子配體5[Chemokine(C-X-C motif)ligands，CXCL5]和基質(zhì)金屬蛋白酶9(Matrix metalloproteinase 9，MMP9)的表達(dá)對(duì)MIBC患者根治術(shù)后生存的影響，旨在明確其在MIBC預(yù)后中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年11月～2015年11月在本院行膀胱癌根治術(shù)的82例MIBC患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)手術(shù)病理組織學(xué)確診為MIBC。②均獲得患者及其家屬知情同意，經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核。排除標(biāo)準(zhǔn)：①并發(fā)其它惡性腫瘤者。②合并明顯肝腎功能不全、心、腦血管疾病者。③合并精神系統(tǒng)疾病者。另選擇同期在該院體檢的41名健康者為健康對(duì)照組。

1.2 試劑與儀器 VEGF、CXCL5和MMP9酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)試劑盒購(gòu)自上海晶抗生物工程有限公司；多功能酶標(biāo)檢測(cè)儀(iMark)購(gòu)自美國(guó)Bio-Rad公司；高速離心機(jī)(AVANTI J-15)購(gòu)自美國(guó)Beckman Coulter公司。

1.3 治療方法 所有納入患者均進(jìn)行根治性膀胱切除術(shù)治療，切除膀胱，配合盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù)。術(shù)后給予常規(guī)補(bǔ)液、抗生素預(yù)防感染。

1.4 檢測(cè)指標(biāo) 術(shù)前，對(duì)所有入選MIBC患者空腹抽血3 mL，離心(3500 r/min，10 min)分離血清，采用ELISA檢測(cè)所有血清樣品中VEGF、CXCL5和MMP-9表達(dá)水平，嚴(yán)格參照試劑盒說(shuō)明操作。

1.5 隨訪 患者自術(shù)后第1 d開(kāi)始經(jīng)門診復(fù)查或電話隨訪，1年內(nèi)每3個(gè)月經(jīng)門診復(fù)查1次，2年內(nèi)半年經(jīng)門診復(fù)查1次，之后至少每年復(fù)查一次，隨訪截止2018年12月，共計(jì)隨訪36個(gè)月。隨訪記錄患者復(fù)發(fā)、死亡、生存或其他等，復(fù)發(fā)為患者治療后經(jīng)膀胱鏡活檢證實(shí)為膀胱癌再發(fā)。

2 結(jié)果

2.1 一般資料比較 納入患者中男性52例，女性30例，年齡25～75歲，平均(57.36±10.24)歲，根據(jù)組織學(xué)分級(jí)[9]：G1期8例，G2期40例，G3期34例；腫瘤直徑≤5cm 32例，直徑>5 cm 50例；T分期：T2期45例，T3期31例，T4期6例；合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移36例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移46例。對(duì)照組中男26例，女15例，年齡26～75歲，平均(57.84±10.39)歲。兩組一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

2.2 MIBC患者術(shù)前血清中VEGF、CXCL5和MMP-9表達(dá)水平 與對(duì)照組相比，MIBC患者術(shù)前血清中VEGF、CXCL5和MMP-9的表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 MIBC患者血清中VEGF、CXCL5和MMP-9表達(dá)水平

2.3 不同基本特征MIBC患者術(shù)前血清中VEGF、CXCL5和MMP-9的表達(dá) MIBC患者術(shù)前血清CXCL5、VEGF和MMP-9的表達(dá)水平與患者腫瘤直徑、分化程度、T分期以及是否合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 不同基本特征MIBC患者術(shù)前血清中VEGF、CXCL5和MMP-9的表達(dá)

2.4 術(shù)前VEGF、CXCL5和MMP-9的表達(dá)與MIBC患者根治術(shù)后的預(yù)后分析 采用中位數(shù)法，將患者分為VEGF高表達(dá)組和低表達(dá)組各41例；CXCL5高表達(dá)組和低表達(dá)組各41例；MMP-9高表達(dá)組和低表達(dá)組各41例。MIBC患者術(shù)前血清中VEGF低表達(dá)患者生3年總生存率和無(wú)病生存率顯著高于VEGF高表達(dá)患者(73.17% vs 51.22%，Log-rank2=4.548，P=0.033；56.10% vs 34.15%，Log-rank2=4.701，P=0.030)，見(jiàn)圖1A、B。MIBC患者術(shù)前血清中CXCL5低表達(dá)患者3年總生存率和無(wú)病生存率顯著高于CXCL5高表達(dá)患者(75.61% vs 48.78%，Log-rank2=6.639，P=0.010；58.54% vs 31.71%，Log-rank2=7.212，P=0.007)，見(jiàn)圖1C、D。MIBC患者術(shù)前血清中MMP-9高表達(dá)患者生3年總生存率和無(wú)病生存率顯著低于MMP-9低表達(dá)患者(75.61% vs 48.78%，Log-rank2=6.340，P=0.012；56.10% vs 34.15%，Log-rank2=5.037，P=0.025)，見(jiàn)圖1E、F。

圖1 VEGF、CXCL5和MMP-9的表達(dá)與MIBC患者根治術(shù)后的預(yù)后分析

2.5 術(shù)前VEGF、CXCL5和MMP-9表達(dá)的相關(guān)性分析 MIBC患者術(shù)前血清VEGF、CXCL5水平均與MMP-9的表達(dá)呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.594，P<0.001；r=0.658，P<0.001)。

3 討論

MIBC是一種復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移率較高的膀胱癌，根治性膀胱切除術(shù)是其主要的治療手段。研究顯示，MIBC患者術(shù)后復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移率高，尋找相關(guān)的分子標(biāo)志物，正確評(píng)估患者預(yù)后，具有重要意義[4]，VEGF、CXCL5、MMP9均與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)[5-6]，但其對(duì)MIBC根治術(shù)后生存的影響報(bào)道較少。因此，本研究分析了術(shù)前VEGF、CXCL5、MMP9的表達(dá)對(duì)MIBC患者根治術(shù)后生存的影響，以期正確評(píng)估患者預(yù)后，指導(dǎo)臨床治療。

本研究中，術(shù)前VEGF水平與膀胱癌患者的病理分期、組織類型、臨床分期等有關(guān)，VEGF高表達(dá)可以顯著降低MIBC患者根治術(shù)后的3年生存率。VEGF是血管內(nèi)皮細(xì)胞特異的有絲分裂原，可以有效的促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，增加血管通透性，改變細(xì)胞外基質(zhì)，促進(jìn)腫瘤血管的新生[7]。周浴等[8]研究顯示，VEGF與膀胱癌的臨床病理特征相關(guān)，可以在一定程度上反映膀胱癌患者病情發(fā)展，與本研究結(jié)果基本一致，證實(shí)VEGF與膀胱癌患者的惡性發(fā)展密切相關(guān)，有望作為其預(yù)后評(píng)估的標(biāo)識(shí)物。熊鶯等[9]研究顯示，VEGF可以促進(jìn)腫瘤血管的新生，調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖侵襲、遷移等多種惡性生物學(xué)行為，影響膀胱癌患者的預(yù)后生存，提示VEGF可能通過(guò)調(diào)控膀胱癌的惡性增殖和轉(zhuǎn)移，推進(jìn)MIBC患者的惡性發(fā)展，影響患者的術(shù)后生存。本研究中，術(shù)前CXCL5高表達(dá)可以顯著降低MIBC患者根治術(shù)后的3年生存率。CXCL5為趨化因子C-X-C/α亞族的一員，與腫瘤血管的新生密切相關(guān)，參與多種腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)行為[10]。倪鋒等[11]研究顯示，CXCL5高表達(dá)與膀胱癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示CXCL5可以作為評(píng)估MIBC患者根治術(shù)后生存的標(biāo)志物。本研究中，術(shù)前MMP-9高表達(dá)可以顯著降低MIBC患者根治術(shù)后的3年生存率。MMP-9屬于MMP家族，可以分解呼吸道和肺內(nèi)的結(jié)構(gòu)復(fù)合物，降解和重塑細(xì)胞外基質(zhì)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移和血管生成[12]。陳娟等[13]研究顯示，MMP-9參與調(diào)控膀胱癌的惡性生物學(xué)行為，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移，提示MMP-9高表達(dá)可能通過(guò)促進(jìn)MIBC的轉(zhuǎn)移，從而降低根治性膀胱切除術(shù)后的生存率。

本研究中，MIBC患者血清VEGF與MMP-9的表達(dá)呈顯著正相關(guān)關(guān)系。臨床研究顯示，MMP-9和VEGF可以發(fā)生協(xié)同作用，共同促進(jìn)腫瘤血管的新生，調(diào)控非小細(xì)胞肺癌的生物學(xué)行為[14]，與本研究結(jié)果基本一致，提示MMP-9和VEGF可能共同參與調(diào)控MIBC的生物學(xué)行為，推進(jìn)MIBC的惡性發(fā)展，但其作用機(jī)制目前尚不清楚，有待于進(jìn)一步研究。本研究中，MIBC患者血清MMP-9與CXCL5的表達(dá)呈顯著正相關(guān)關(guān)系。已有研究顯示，MMP-9與CXCL5在膀胱癌細(xì)胞中的表達(dá)呈顯著正相關(guān)關(guān)系，可以共同調(diào)控膀胱癌細(xì)胞血管的新生[15-16]，與本研究結(jié)果基本一致，提示MMP-9、CXCL5、VEGF可能通過(guò)某種信號(hào)途徑共同調(diào)節(jié)MIBC的發(fā)生發(fā)展，臨床可根據(jù)MIBC患者術(shù)前的MMP-9、CXCL5、VEGF水平，評(píng)估患者預(yù)后生存，指導(dǎo)臨床治療，通過(guò)聯(lián)合術(shù)前新輔助化療、術(shù)后放化療等延長(zhǎng)患者的生存期。

4 結(jié)論

術(shù)前VEGF、CXCL5或MMP-9高表達(dá)MIBC患者根治術(shù)后的3年生存率明顯降低，且VEGF和CXCL5均與MMP-9的表達(dá)呈顯著正相關(guān)關(guān)系，提示MMP-9、CXCL5、VEGF可能通過(guò)共同調(diào)節(jié)MIBC的惡性發(fā)展，但其相互作用機(jī)制尚不清楚，有待于進(jìn)一步研究。本研究不足之處為樣本量較少，可能會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生一定的影響，但本研究為臨床MIBC的預(yù)后提供了一定的理論依據(jù)。