胱抑素C、β2微球蛋白和視黃醇結(jié)合蛋白的測(cè)定在評(píng)估慢性腎臟疾病損害程度中的應(yīng)用*

杜亞琴 張文松 牟俊杰 甘措 關(guān)欣 劉瑤 鄧菲

(1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院腎臟內(nèi)科，四川 成都 610072；2.成都市金牛區(qū)人民醫(yī)院腎臟內(nèi)科，四川 成都 610082)

慢性腎臟疾病(Chronic kidney disease,CKD)已經(jīng)成為全世界范圍內(nèi)高度重視的公共衛(wèi)生醫(yī)療的問題。有研究指出，包括歐美中在內(nèi)的多個(gè)國(guó)家和地區(qū)的CKD患病率已經(jīng)超過10%。中國(guó)在2012年的一項(xiàng)全國(guó)性流行病學(xué)調(diào)查中顯示全國(guó)慢性腎臟病患病率達(dá)到10.8%[1]。2009年KDIGO指南將CKD患者3期分為3a和3b期，1、2期劃分為早期腎臟損傷階段，3a期往后為中晚期腎臟損傷階段。由于終末期腎病對(duì)患者生命健康的危害，因此延緩疾病進(jìn)程，盡可能避免患者進(jìn)入尿毒癥期是本病的主要治療目的[2]。目前臨床主要通過測(cè)定血清肌酐、尿素氮、尿酸等判斷腎臟損害程度，但肌酐、尿素氮等影響因素較多，對(duì)腎組織損害的反應(yīng)不夠準(zhǔn)確和及時(shí)。有學(xué)者認(rèn)為，胱抑素C(cystatin C, Cyc C)、β2微球蛋白(β2-microglobalin,β-MG)、視黃醇結(jié)合蛋白(Retinal-binding protein,RBP)檢測(cè)方便，可更加靈敏的反映腎功能損害[3-4]。為進(jìn)一步證實(shí)其有效性和可靠性，本研究探討了Cys C、β2-MG、RBP測(cè)定在評(píng)估慢性腎臟疾病(CKD)腎臟損害程度中的可行性，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取2016年6月～2019年3月四川省人民醫(yī)院和成都市金牛區(qū)人民醫(yī)院收治的慢性腎臟疾病患者91例作為觀察組，健康體檢者38例作為對(duì)照組。前者根據(jù)KDIGO的分組標(biāo)準(zhǔn)將患者分為6組(1期、2期、3a期、3b期、4期、5期)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀察組根據(jù)臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查等符合慢性腎炎、腎病綜合征、慢性腎功不全等符合KDIGO關(guān)于慢性腎臟疾病定義標(biāo)準(zhǔn)[5]，對(duì)照組為同年齡段健康體檢者。②年齡≥18歲。③臨床資料完整，兩組研究對(duì)象及(或)家屬簽署知情同意書，研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并肝硬化、肺間質(zhì)纖維化、硬皮病等其他慢性纖維化疾病患者。②合并惡性腫瘤、嚴(yán)重心腦血管疾病、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病患者。③婦女哺乳或妊娠期。④對(duì)照組無急慢性腎臟疾病病史。⑤有腎臟替代治療的病史。

1.2 指標(biāo)檢測(cè)方法 采用酶法和免疫比濁法檢測(cè)血清Cys C、β2-MG、采用免疫比濁法檢測(cè)血清及尿液RBP(嘉興博泰生物科技發(fā)展有限公司)。血清CysC含量>1.00mg/L；β2-MG>3.00mg/L；血清RBP>70 μg/mL；尿液RBP>0.7 μg/m為陽(yáng)性。受檢者留取晨尿，同時(shí)抽取受檢者空腹靜脈血凝固離心后取上清采用貝克曼AU5800及雅培的C16000檢測(cè)腎功能相關(guān)指標(biāo)。

2 結(jié)果

2.1 一般資料比較 對(duì)照組中男性22例，女性16例，年齡24～73歲，平均(55.59±8.62)歲；觀察組中男性47例，女性44例，年齡24～74歲，平均(56.17±8.34)歲。兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

2.2 不同組別患者不同生化指標(biāo)水平比較 不同組別患者年齡、Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平比較存明顯差異(P<0.05)，對(duì)照組患者年齡、Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平明顯低于CKD患者，隨著CKD腎臟損害程度的上升，Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平逐漸升高，5期CKD患者上述指標(biāo)水平最高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同組別患者不同生化指標(biāo)水平比較

2.3 CKD患者Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP與腎功能指標(biāo)相關(guān)性分析 CKD患者尿RBR、血清RBP、Cys C、β2-MG與Urea、Scr呈正相關(guān)，與eGFR呈負(fù)相關(guān)，β2-MG與Scr的相關(guān)程度最高(P<0.001)，見表2。

表2 CKD患者Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP與腎功能指標(biāo)相關(guān)性分析

2.4 Cys C、β2-MG、RBP檢查對(duì)各期CKD的診斷陽(yáng)性率比較 Cys C、β2-MG、血清RBP及尿RBP聯(lián)合檢測(cè)可提高對(duì)早期CKD的診斷陽(yáng)性率，見表3。

表3 Cys C、β2-MG、RBP檢查對(duì)各期CKD的診斷陽(yáng)性率比較[n,n(×10-2)]

3 討論

慢性腎臟疾病包括慢性腎炎、腎病綜合征、狼瘡性腎炎、糖尿病腎病等病程較長(zhǎng)、對(duì)腎功能有所損害的一類疾病，其嚴(yán)重危害人類健康[6-8]，是臨床上常見的慢性疾病。目前臨床上認(rèn)為，腎損害達(dá)到3個(gè)月即可診斷慢性腎臟疾病[9-11]，而本病由于腎組織損害難以逆轉(zhuǎn)，因此無法徹底根除，只有通過早期診斷、治療來阻止腎功能進(jìn)一步惡化。

細(xì)胞外基質(zhì)在腎小球和腎間質(zhì)異常堆積可導(dǎo)致腎小球硬化、腎小管間質(zhì)纖維化，使患者逐漸發(fā)展為終末期腎病，其中最值得注意的是各項(xiàng)因子的變化[12]，RBP實(shí)質(zhì)上是肝細(xì)胞釋放的低分子量蛋白，可于正常健康人體血清、尿液中檢測(cè)出。正常情況下血清中RBP維持在一穩(wěn)定的范圍內(nèi)[(25～70)mg/L]，在終末期腎病患者中，血清RBP水平較正常人升高3.5-5倍。較多文獻(xiàn)報(bào)道，肝細(xì)胞的高爾基體復(fù)合體表面和視黃醇按照50%的比例形成復(fù)合物，在此基礎(chǔ)上，結(jié)合前白蛋白，以三位復(fù)合物的形式防止RBP通過腎小球?yàn)V過膜[13]。在前白蛋白分離通過腎小球?yàn)V過膜前，需要滿足復(fù)合物與靶細(xì)胞的條件，在濾過過程中，僅出現(xiàn)極少量RBP從尿中排出體外?；谏鲜鲆蛩?，較多學(xué)者認(rèn)為尿RBP檢測(cè)可反映近端小管損傷的敏感指標(biāo)，亦有學(xué)者認(rèn)為其在器官纖維化過程中起著反映作用。正常人血液中β2-MG生成量恒定，濃度較低，可自由通過腎小球，最后于近端小管內(nèi)幾乎全部重吸收，其水平不受性別、年齡和代謝因素影響。CKD患者因腎小球?yàn)V過功能受損，血清β2-MG 水平升高，檢測(cè)靈敏度優(yōu)于血肌酐。Cys C是一種半胱氨酸蛋白酶B的特異性抑制劑，有核細(xì)胞以恒定速率產(chǎn)生[14]，機(jī)體體液內(nèi)均有廣泛分布，能自由地通過腎小球?yàn)V過膜并被近曲小管重吸收，相較血肌酐被性別、年齡影響較小[15]，在診斷方面優(yōu)于血肌酐[16]，因此可靈敏、準(zhǔn)確地反映腎小球?yàn)V過功能[17]。

國(guó)內(nèi)目前對(duì)于Cys C、β2-MG、RBP對(duì)于腎臟病損傷的評(píng)估大多針對(duì)糖尿病腎病早期，本研究中我們涉及慢性腎臟病的各個(gè)時(shí)期。在對(duì)比不同組別Cys C、β2-MG、血清及尿RBP水平后，發(fā)現(xiàn)不同組別患者年齡、Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平比較存明顯差異(P<0.05)，對(duì)照組患者年齡、Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平明顯低于CKD患者，同時(shí)隨著CKD腎臟損害程度的上升，Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平逐漸升高，5期CKD患者上述指標(biāo)水平最高(P<0.05)，與馬紅雨等[18]結(jié)果相符。隨后采用Pearson相關(guān)系數(shù)分析得出，CKD患者尿RBR、血清RBP、Cys C、β2-MG與Urea、Scr呈正相關(guān)，與eGFR呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，β2-MG與Scr的相關(guān)程度最高(P<0.001)，與馬紅雨等研究中顯示相關(guān)系數(shù)為0.806相符。

Cys C、β2-MG、RBP與腎功能指標(biāo)的相關(guān)性蛋白酶B表達(dá)減少或活性減弱，其降解重吸收的蛋白質(zhì)的能力下降，蛋白質(zhì)在近曲小管上皮細(xì)胞內(nèi)沉積，損傷上皮細(xì)胞功能，從而導(dǎo)致腎小球硬化、腎間質(zhì)損害。研究表明血清Cys C、β2-MG、RBP可顯著提高慢性腎臟病檢測(cè)的最確性，本研究在對(duì)比Cys C、β2-MG、RBP對(duì)各期CKD的診斷陽(yáng)性率中發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢查在腎臟損傷早期陽(yáng)性診斷率較單一指標(biāo)高，這與古麗鮮·吐爾洪等[19]結(jié)果相似。由此可觀，聯(lián)合檢測(cè)可提高對(duì)早期CKD的診斷有重要意義，可提高診斷 CKD 患者早期腎功能損傷的準(zhǔn)確性。

4 結(jié)論

CKD患者Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平表達(dá)高于健康人群，隨著腎臟損害程度增加而升高。CKD患者上述指標(biāo)與Urea、Scr呈正相關(guān)，與eGFR呈負(fù)相關(guān)，聯(lián)合檢測(cè)提高對(duì)早期CKD的診斷具有重要意義。