地塞米松鼓室內(nèi)注射對分泌性中耳炎外周血和中耳積液中CD4+、CD8+T細(xì)胞、IL-2、IL-4水平的影響

趙興泉 鐘渠 劉柯 顧珊珊 何武斌 王春艷

[摘要] 目的 探討地塞米松鼓室內(nèi)注射對分泌性中耳炎外周血和中耳積液中輔助性T細(xì)胞（CD4+T細(xì)胞）、細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CD8+T細(xì)胞）、白細(xì)胞介素2（IL-2）、白細(xì)胞介素4（IL-4）水平的影響。 方法 選取2018年4月至2020年6月在川北醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院就診的分泌性中耳炎患者作為研究對象，其中急性患者作為研究A組60例，慢性患者作為研究B組60例，以同期正常體檢的體檢者60名作為對照組。A組、B組患者均給予地塞米松鼓室內(nèi)注射進(jìn)行治療。記錄并比較三組研究對象聽力外周血和中耳積液中CD4+、CD8+T細(xì)胞、IL-2、IL-4水平。 結(jié)果治療前，A、B兩組患者CD4+、CD4+/CD8+及聽力水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;但CD4+、CD4+/CD8+均明顯低于對照組（P<0.05）。治療后，A、B兩組均明顯提高（P<0.05），但CD4+、CD4+/CD8+仍明顯低于對照組（P<0.05），CD8+指標(biāo)在治療前后均明顯高于對照組（P<0.05）;治療前，A組患者血清IL-2、IL-4水平明顯高于B組（P<0.05），且均明顯高于對照組（P<0.05）;治療后，A、B兩組均明顯降低，但仍明顯高于對照組（P<0.05）。 結(jié)論 分泌性中耳炎采用鼓室內(nèi)注射地塞米松治療，能明顯改善患者的免疫力和聽力水平，通過比較患者外周血和中耳積液中IL-2、IL-4水平差異，可作為診斷急性及慢性中耳炎的臨床依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 地塞米松;分泌性中耳炎;白細(xì)胞介素-2;白細(xì)胞介素-4;輔助性T細(xì)胞;細(xì)胞毒性T細(xì)胞

[中圖分類號] R764.21? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2021）36-0013-04

Effect of intratympanic injection of dexamethasone on levels of CD4+ T cells， CD8+ T cells， IL-2 and IL-4 in peripheral blood and middle ear effusion of secretory otitis media

ZHAO Xingquan1? ?ZHONG Qu1? ?LIU Ke2? ?GU Shanshan2? ?HE Wubin1? ?WANG Chunyan1

1.Department of Otorhinolaryngology， Sichuan Mianyang 404 Hospital， Mianyang? ?621000， China; 2.Department of Otorhinolaryngology， the Second Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College， Nanchong? ?621000

[Abstract] Objective To explore the effect of intratympanic injection of dexamethasone on levels of CD4+ T cells， CD8+ T cells， IL-2 and IL-4 in peripheral blood and middle ear effusion of secretory otitis media. Methods Patients with secretory otitis media who were treated in the Second Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College from April 2018 to June 2020 were selected as the research subjects， and outpatients with secretory otitis media who were treated in the Department of Otorolaryngology were selected as the research subjects. Acute patients were included in the study group A （60 cases）， chronic patients were included in the study group B （60 cases）， and normal physical examination subjects were included in the control group （60 cases）. Patients in group A and group B were treated with intratympanic injection of dexamethasone. The levels of CD4+ T cells， CD8+ T cells， IL-2 and IL-4 in peripheral blood and middle ear effusions of the three groups were recorded and compared. Results Before treatment， no significant differences were observed in CD4+， CD4+/CD8+ and hearing levels between group A and B（P>0.05）， but their CD4+ and CD4+/CD8+ were significantly lower than those in the control group（P<0.05）. After treatment， CD4+ and CD4+/CD8+ in group A and B were significantly lower than those in the control group（P<0.05）. The CD8+ index was significantly higher than that of the control group before and after treatment（P<0.05）， and significantly decreased after treatment， but still significantly higher than that of the control group. Serum IL-2 and IL-4 levels in group A were significantly higher than those in group B， and both of them were significantly higher than those in the control group（P<0.05）. After treatment， serum IL-2 and IL-4 levels in group A and group B were significantly decreased， but still significantly higher than those in the control group （P<0.05）. Conclusion The treatment of secretory otitis media with intratympanic injection of dexamethasone can significantly improve the patients' immunity and hearing level. By comparing the levels of IL-2 and IL-4 in peripheral blood and middle ear effusion of patients， it can be used as the clinical basis for the diagnosis of acute and chronic otitis media.

[Key words] Dexamethasone; Secretory otitis media; IL-2; IL-4; Th cell; Cytotoxic T cell

分泌性中耳炎（Secretory otitis media，SOM）是耳鼻喉科多見的中耳非化膿性疾病，臨床表現(xiàn)主要有聽力下降、耳悶脹感、鼓室積液及耳鳴等癥狀[1]。其可分為兩種類型為急性和慢性，易發(fā)于成年人和兒童[2]。研究發(fā)現(xiàn)急性分泌性中耳炎患者的中耳黏膜中，可觀察到肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞增多，以及Th2型細(xì)胞因子表達(dá)水平增高的現(xiàn)象[3-4]。若病程持續(xù)8周以上未痊愈者則考慮為慢性分泌性中耳炎，它是由急性分泌性中耳炎反復(fù)發(fā)作，慢慢不愈轉(zhuǎn)化而來，但也有部分慢性分泌性中耳炎發(fā)生過程中不經(jīng)過急性中耳炎[5]。相關(guān)研究表明急性分泌性中耳炎患者IL-12、TNF-α、IFN-B、IL-4等細(xì)胞因子受到細(xì)菌感染后有下降的趨勢[6]。因此本研究通過探討地塞米松對中耳炎患者外周血和中耳積液中CD4+、CD8+T細(xì)胞、IL-2、IL-4水平的影響，以探究其檢測意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年4月至2020年6月在四川綿陽四0四醫(yī)院就診的分泌性中耳炎患者作為研究對象，以耳鼻喉科接受治療的分泌性中耳炎門診和住院患者作為研究對象，其中急性患者60例作為研究A組;慢性患者60例作為研究B組;以同期正常體檢的健康人群60名作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合中耳炎診斷標(biāo)準(zhǔn)者;②入院前10 d內(nèi)未接受過相關(guān)治療者;③精神良好，意識清醒者;④本人及家屬知情同意并簽署知情告知書者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①服用過耳毒性藥物或有家族遺傳耳聾者;②患有化膿性中耳炎者;③有地塞米松藥物禁忌證者;④不愿謹(jǐn)遵醫(yī)囑，無法配合完成研究者。其中對照組男33名，女27名，年齡18～55歲，平均（38.6±16.3）歲。研究A組男30例，女30例，年齡20～60歲，平均（40.5±20.2）歲，病程0.6～2.5年，平均（1.3±0.6）年;研究B組男28例，女32例，年齡18～65歲，平均（41.5±23.2）歲，病程1～2年，平均（1.5±0.5）年。兩組患者在性別、年齡、病程比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)過醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且在征得患者本人及家屬的同意下進(jìn)行。

1.2 方法

注射地塞米松：注射藥物前先抽取患者鼓室內(nèi)的積液，然后給予研究A組、研究B組患者進(jìn)行鼓室內(nèi)注射地塞米松（石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H20052358）5 mg/mL，完成注射后要求患者頭向?qū)?cè)45°方向轉(zhuǎn)，保持30 min，每周治療2次。治療3周。治療期間均給予患者1%麻黃素滴鼻，及抗生素治療。

采集血樣標(biāo)本：①所有受試者于清晨空腹抽取靜脈血5 mL，室溫下靜置約20 min，采用離心泵以3000 r/min的轉(zhuǎn)速離心30 min后，放于試管中提取血清。②采用流式細(xì)胞儀（美國貝克曼公司，型號為FC500）檢測受試者血清CD4+、CD8+及CD4+/CD8+。③采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司）檢測外周血和中耳積液中的細(xì)胞因子IL-2、IL-4、水平。

1.3 觀察指標(biāo)

通過貝克曼FC500型流式細(xì)胞儀及運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）研究分析分泌性中耳炎患者外周血及中耳積液中T細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）和細(xì)胞因子（IL-2、IL-4）免疫相關(guān)指標(biāo)表達(dá)的差異及患者聽力水平的變化。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2 檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前后研究組患者與對照組免疫功能比較

治療前，A、B研究組患者CD4+、CD4+/CD8+比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但均明顯低于對照組（P<0.05），治療后，A、B兩研究組均明顯升高（P<0.05），但仍明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而CD8+指標(biāo)在治療前后均明顯高于對照組（P<0.05），治療后明顯降低（P<0.05），但仍明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 治療前后研究組患者與對照組血清IL-2、IL-4水平比較

治療前，研究A組患者血清IL-2、IL-4水平明顯高于研究B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且均明顯高于對照組（P<0.05），治療后，A、B兩研究組均明顯降低（P<0.05），但仍明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 兩組研究組患者治療前后聽力水平比較

治療前，A、B兩研究組患者聽力水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），治療后，兩組患者其聽力水平均明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

分泌性中耳炎的病理特征主要由于外界空氣不能順利進(jìn)入中耳，其原因?yàn)檠使墓艹霈F(xiàn)功能障礙，而中耳內(nèi)之前所存氣體被粘膜不斷吸收，導(dǎo)致中耳腔內(nèi)形成相對性負(fù)壓，打破了原有中耳腔內(nèi)氣壓的平衡[7]。因此治療分泌性中耳炎，其根本在于保證咽鼓管通氣順暢，使中耳腔內(nèi)氣壓恢復(fù)至平衡狀態(tài)。目前治療分泌性中耳炎主要有藥物治療、手術(shù)治療及物理治療[8]。常用的藥物治療包括：抗生素（如哇諾酮類藥物、大環(huán)內(nèi)酯類藥物等）、促表面活性物質(zhì)合成劑（鹽酸氨澳索口服液、片劑或膠囊）、抗過敏藥物（地塞米松或潑尼松口服）及中西醫(yī)結(jié)合治療等。手術(shù)治療主要用于急性分泌性中耳炎，其手術(shù)方式較多，主要包括激光鼓膜造孔術(shù)、鼓膜穿刺抽液、鼓膜切開置管術(shù)及鼓室成型術(shù)等。物理治療主要包括耳內(nèi)微波治療、耳正負(fù)壓治療及鼓室內(nèi)給氧等，但其治療時(shí)期較長，要求患者密切配合，但對兒童而言，其耐心差，治療效果不佳[9-10]。雖然治療分泌性中耳炎的方法較多，但想要取得良好的治療效果，單一的治療方式均不能達(dá)到預(yù)期，因此臨床上常采用多種方式聯(lián)合治療。可是，治療的前提是有準(zhǔn)確的診斷依據(jù)。隨著醫(yī)學(xué)的進(jìn)步，對分子生物學(xué)、免疫學(xué)的研究也有了一定的進(jìn)展，從而對中耳炎免疫方面的認(rèn)知加深，逐漸接受了中耳是一種免疫防御系統(tǒng)，且是獨(dú)立的。在其黏膜上皮存有較多的淋巴組織，主要包含在不同發(fā)育階段的T淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞及吞噬細(xì)胞等，具有與外周淋巴器官相似的免疫調(diào)節(jié)機(jī)能，對各種變應(yīng)原能發(fā)揮體液免疫和細(xì)胞免疫作用[11]。

相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[12]，T淋巴細(xì)胞亞群在分泌性中耳炎患者體內(nèi)表達(dá)異常，而T細(xì)胞想要發(fā)揮其免疫功能必須由CD4+、CD8+共同完成。CD4+具有體液免疫和輔助細(xì)胞免疫的作用，而CD8+能有效地抑制T細(xì)胞的增殖及抗體的合成分泌，兩者的相互作用共同維持機(jī)體的正常免疫反應(yīng)，另CD8+細(xì)胞具有殺傷作用，因CD8+細(xì)胞增多可對機(jī)體的免疫應(yīng)答產(chǎn)生影響。因此可根據(jù)CD4+、CD8+、CD4+/CD8+指標(biāo)變化來診斷分泌性中耳炎類型[13]。另有患者耳積液中的細(xì)胞因子IL-2、IL-4具有免疫激活功能，它不僅與分泌性中耳炎的發(fā)病有關(guān)，同時(shí)有研究發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞亞群和細(xì)胞因子的變化可用于診斷分泌性中耳炎的分類[14]。

地塞米松屬于腎上腺皮質(zhì)激素類藥物，它能抑制巨噬細(xì)胞對抗原的吞噬和處理，從而破壞淋巴細(xì)胞，阻止細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)使病情得到緩解[15-16]。分泌性中耳炎其發(fā)病的基礎(chǔ)是免疫反應(yīng)，本文通過鼓室內(nèi)注射地塞米松進(jìn)行治療，直接抑制了中耳免疫反應(yīng)的諸多環(huán)節(jié)，以達(dá)到治療的目的[17]。

本研究通過探討地塞米松對中耳炎患者外周血和中耳積液中CD4+、CD8+T細(xì)胞、IL-2、IL-4水平的影響，以探究其檢測意義。研究結(jié)果表明，治療前，急性分泌性中耳炎和慢性分泌性中耳炎患者CD4+、CD4+/CD8+相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但均明顯低于健康體檢者，治療后，急性分泌性中耳炎和慢性分泌性中耳炎患者均明顯升高（P<0.05），但仍明顯低于健康體檢者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而CD8+指標(biāo)在治療前后均明顯高于健康體檢者，治療后明顯降低，但仍明顯高于健康體檢者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;治療前，急性分泌性中耳炎患者血清IL-2、IL-4水平明顯高于慢性分泌性中耳炎患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且均明顯高于健康體檢者，治療后，急性分泌性中耳炎和慢性分泌性中耳炎患者均明顯降低（P<0.05），但仍明顯高于健康體檢者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療前，急性分泌性中耳炎和慢性分泌性中耳炎患者聽力水平無明顯差異，治療后，兩組患者其聽力水平均明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述，分泌性中耳炎患者采用鼓室內(nèi)注射地塞米松進(jìn)行治療，能提高患者的免疫力和聽力水平，通過對比患者外周血和中耳積液中IL-2、IL-4水平差異，可作為診斷急性及慢性中耳炎的臨床依據(jù)。臨床意義大，值得推廣應(yīng)用。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 李秀國，張慧，張媛媛，等.分泌性中耳炎合并腺樣體肥大的外科治療方法比較[J].中華耳科學(xué)雜志，2019，17（3）：347-352.

[2] 崔世會(huì)，孫貴虎，郭爽，等.糖皮質(zhì)激素在急性分泌性中耳炎治療中的作用分析[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2020，26（28）：148-149.

[3] 劉利敏，高震，賈賢浩，等.頑固性分泌性中耳炎及相關(guān)后遺癥的手術(shù)治療效果分析[J].中華耳科學(xué)雜志，2020， 18（3）：438-442.

[4] 徐春爽，白文忠，李艷.兩種治療方法對分泌性中耳炎患兒的療效分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2020，30（4）：596-599.

[5] Li YQ，Chen YB，Yin GD，et al.Effect of balloon dilation eustachian tuboplasty combined with tympanic tube insertion in the treatment of chronic recurrent secretory otitis media[J].Eur Arch Otorhinolaryngol，2019，276（10）：2715-2720.

[6] 張蕾.分泌性中耳炎應(yīng)用糖皮質(zhì)激素聯(lián)合鹽酸氨溴索治療的效果觀察[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2020，26（11）：30-32.

[7] 余力生，鄭宏偉，韓琳.分泌性中耳炎與中耳通氣系統(tǒng)[J].中華耳科學(xué)雜志，2020，18（3）：428-430.

[8] Xiao RD，Li M，Xue FL，et al.Effects of dexamethasone combined with ambroxol hydrochloride on T-Cell subsets and hearing in patients with secretory otitis media[J].Pak J Pharm Sci，2019，32（3S）：1437-1440.

[9] 楊軍，李姝娜.規(guī)范兒童分泌性中耳炎的治療[J].臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2020，34（3）：199-202.

[10] 李熙星，陳雨濛，張光遠(yuǎn)，等.類固醇激素治療兒童分泌性中耳炎的臨床研究進(jìn)展[J].中華耳科學(xué)雜志，2020， 18（3）：459-463.

[11] 王虎云.頭孢唑啉鈉聯(lián)合地塞米松治療急慢性分泌性中耳炎的體會(huì)[J].中西醫(yī)結(jié)合心血管病電子雜志，2018， 6（20）：177.

[12] 柳蔭，楊娜.腺樣體肥大并發(fā)分泌性中耳炎兒童的淋巴細(xì)胞亞群分布[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2017，33（14）：2376-2379.

[13] 陳沛維，趙春麗，王丹妮，等.Th17/Treg細(xì)胞介導(dǎo)的分泌性中耳炎發(fā)病機(jī)制研究[J].中華耳科學(xué)雜志，2020， 18（3）：431-437.

[14] 遲作華，劉振，肖平.Tregs及IL-6、IL-10、TNF在急性分泌性中耳炎患者中的變化及意義[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2016，32（2）：255-257.

[15] 呂唯.鼓膜穿刺術(shù)+地塞米松磷酸鈉注射液鼓室沖洗對分泌性中耳炎患者聽力恢復(fù)的影響[J].中國實(shí)用醫(yī)藥，2020，15（17）：12-15.

[16] 祁永梅.甲潑尼龍與地塞米松治療過敏性休克患者的臨床療效[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2019，57（14）：92-95.

[17] 劉聰.鼓室內(nèi)注射鹽酸氨溴索聯(lián)合地塞米松治療分泌性中耳炎的臨床效果[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2019，17（27）：46-48.

（收稿日期：2021-01-29）