耿祥飛 王 鵬 劉鵬杰 王樹(shù)新
(1. 北京萊艾特科技發(fā)展有限公司,北京 100193)(2. 中國(guó)科學(xué)院微生物研究所,北京 100101)(3. 北京蘭博泰斯生物科技有限公司,北京 100193)(4. 蘇州猴皇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備科技有限公司,蘇州 215143)
依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),SPF級(jí)小鼠應(yīng)飼養(yǎng)于屏障設(shè)施中,而且對(duì)屏障設(shè)施中的溫度、相對(duì)濕度、換氣次數(shù)、空氣潔凈度、菌落數(shù)、壓差、噪音等技術(shù)指標(biāo)及飼養(yǎng)籠具均有要求。目前,常用的小鼠飼養(yǎng)籠具有兩種,即:1 敞開(kāi)式平板架(以房間為獨(dú)立單元);2密閉式籠具(以獨(dú)立籠盒為飼養(yǎng)單元)。其中,密閉式籠具有中央排氣通風(fēng)籠盒系統(tǒng)(Exhaust Ventilation central Cages,簡(jiǎn)稱(chēng)EVC)和獨(dú)立通氣籠盒系統(tǒng)(Individual Ventilated Cages,簡(jiǎn)稱(chēng)IVC)等[1]。
EVC主機(jī)頂端的風(fēng)機(jī)將籠盒內(nèi)的廢氣從排氣口經(jīng)過(guò)濾器排出,連接機(jī)架排風(fēng)管道與屏障環(huán)境內(nèi)的中央排氣通風(fēng)系統(tǒng)進(jìn)行排風(fēng),并將清潔空氣從飼養(yǎng)籠盒的進(jìn)氣口過(guò)濾后送入每個(gè)籠盒內(nèi)。并且,飼養(yǎng)籠盒形成微負(fù)壓,相互獨(dú)立且無(wú)交叉污染,可適用于飼養(yǎng)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物[2]。IVC由送風(fēng)機(jī)經(jīng)過(guò)初級(jí)、高效過(guò)濾器向飼養(yǎng)籠盒內(nèi)送入清潔空氣,再由排風(fēng)機(jī)將籠盒內(nèi)的空氣排放出去,形成一送一排的空氣流通過(guò)程。通過(guò)調(diào)節(jié)送、排風(fēng)量,可使飼養(yǎng)籠盒內(nèi)形成微正壓或微負(fù)壓。籠盒相互獨(dú)立、無(wú)交叉污染,適用于飼養(yǎng)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物[3]。綜上所述,EVC和IVC屬于同一類(lèi)飼養(yǎng)籠具[4-5],但表現(xiàn)形式存在一定的差異[6]。本文將對(duì)EVC和IVC的相關(guān)參數(shù)進(jìn)行對(duì)比,為飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物籠具選擇提供相關(guān)的數(shù)據(jù)支持。
1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:SPF級(jí)小鼠,購(gòu)自斯貝福(北京)生物技術(shù)有限公司,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(京)2019-0010,溫度20~25 ℃,相對(duì)濕度40%~70%,明暗交替12 h/12 h。
1.1.2受試籠具:EVC和IVC購(gòu)自蘇州猴皇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備科技有限公司。
1.1.3測(cè)試儀器設(shè)備:便攜式氨氣檢測(cè)儀(ADKS-1-NH3)購(gòu)自EDKORS,?,斦斩扔?jì)(AS803)和?,旓L(fēng)速風(fēng)量測(cè)試儀(AS8556)購(gòu)自東莞萬(wàn)創(chuàng)電子制品有限公司,溫濕度計(jì)(TH604F)購(gòu)自廣東美德時(shí)儀器儀表有限公司,噪音測(cè)試儀(DSM D2),購(gòu)自中國(guó)德力西控股集團(tuán)等。
分別比較EVC和IVC以下5方面指標(biāo):
(1)飼養(yǎng)空間:如籠架占地面積和空間等;(2)使用操作流程:換籠流程、清洗流程、損壞率、整體消毒清潔流程等;(3)小鼠飼養(yǎng)環(huán)境:換氣次數(shù)和風(fēng)速、氨濃度、噪音及籠盒內(nèi)噪音分貝;(4)斷電或機(jī)械故障;(5)報(bào)警系統(tǒng)。
EVC和IVC的共同點(diǎn):獨(dú)立通氣系統(tǒng),具有良好的隔離防護(hù)功能,確保籠盒與籠盒、系統(tǒng)與環(huán)境之間的有效隔離,避免交叉污染?;\盒都采用PPSU(聚亞苯基砜樹(shù)脂)材質(zhì),耐高溫高壓。
氨氣檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖1所示,其它指標(biāo)具體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1所列。
圖1 IVC和EVC氨濃度對(duì)比
表1 EVC和IVC系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果
飼養(yǎng)空間: EVC小鼠籠架的占地面積約1 000×1 000(mm),100籠;IVC小鼠籠架采用固定式長(zhǎng)方形籠架,一般采用主機(jī)1拖N的形式,其中主機(jī)尺寸380 × 550(mm),籠架(7籠/層×8層=56籠)尺寸1 400×500(mm),因此,相同空間EVC的飼養(yǎng)量至少是IVC的兩倍,即:飼養(yǎng)相同數(shù)量的小鼠,EVC可節(jié)省一半以上的空間,并節(jié)約建設(shè)屏障設(shè)施的巨大投資[8]。
換籠流程:IVC籠盒由底盒、不銹鋼網(wǎng)蓋、籠盒蓋及水瓶組成,籠盒蓋后端設(shè)有塑料進(jìn)、排氣閥門(mén),頂部設(shè)有生命窗口,前后設(shè)有外撥式搭扣用于固定底盒與盒蓋以及外置式水瓶。換籠流程:取下水瓶→打開(kāi)籠盒蓋→移開(kāi)不銹鋼網(wǎng)蓋→抓取小鼠→蓋上不銹鋼網(wǎng)蓋加料→蓋上籠盒蓋→放入水瓶,共7個(gè)分解動(dòng)作。EVC籠盒由底盒、不銹鋼料槽、籠盒蓋及水瓶組成,底盒前后設(shè)有進(jìn)排氣過(guò)濾器,籠盒蓋左右兩側(cè)設(shè)有卡扣用于固定底盒和盒蓋以及內(nèi)置式水瓶。換籠流程:打開(kāi)籠盒蓋→抓取小鼠→更換水瓶→加料→蓋上籠盒蓋,共5個(gè)分解動(dòng)作。
清洗:IVC底盒、網(wǎng)蓋及水瓶直接清洗,而籠盒蓋需要拆下生命窗口濾材清洗。EVC籠盒蓋、料槽、水瓶直接清洗,底盒含濾膜也可以獨(dú)立整體清洗[4, 9]。
損壞率:EVC籠盒取放時(shí),接觸點(diǎn)為排氣口的過(guò)濾器(由不銹鋼和過(guò)濾棉組成),結(jié)實(shí)耐用、不易損壞,周損壞率在6%左右,比IVC低一倍以上。IVC籠盒在取放時(shí),須與籠架上的進(jìn)、排氣口閥門(mén)接觸,但籠盒蓋后端的塑料進(jìn)、排氣閥門(mén)在使用中易損壞,生命窗口濾材耗損相當(dāng)嚴(yán)重(13%/周),更換頻率高。
整體消毒與清潔:EVC籠架由底盤(pán)、旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)盤(pán)、柱子及頂置主機(jī)組成,底盤(pán)、頂置主機(jī)及柱子表面平整,旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)盤(pán)上下間距大及排風(fēng)口也較大,清洗方便[9-10]。IVC籠架是由架框和若干根送排氣管道焊接而成,與總送、排氣管道匯總連接,結(jié)構(gòu)復(fù)雜。尤其是籠架后側(cè),清洗費(fèi)時(shí)費(fèi)力,擦拭時(shí)還容易劃破手套,進(jìn)、排風(fēng)口口徑很小,清洗需使用很細(xì)的試管刷[9,11]。
空氣潔凈度:EVC和IVC的新風(fēng)均是采用飼養(yǎng)間新風(fēng),潔凈度標(biāo)準(zhǔn)為10 000級(jí)。EVC再次過(guò)濾空氣的保障是籠盒上的亞高效過(guò)濾器,而IVC系統(tǒng)的再次過(guò)濾保障是主機(jī)內(nèi)的初高效二級(jí)過(guò)濾。與EVC比較,IVC系統(tǒng)更加嚴(yán)格。針對(duì)于屏障設(shè)施的管理要求,進(jìn)入屏障設(shè)施的所有人員、物品均需嚴(yán)格控制,因此潔凈度問(wèn)題還受到人員的管理與墊料、飼料、飲水等配套物品的是否滅菌的影響。
換氣次數(shù)和風(fēng)速:換氣次數(shù)高,形成更大的氣流(風(fēng)速),會(huì)讓動(dòng)物迅速失水,并有吹冷風(fēng)的感覺(jué)[12],不利于小鼠健康(國(guó)標(biāo)規(guī)定風(fēng)速小于0.2 m/s[7])。EVC和IVC均可根據(jù)籠架上實(shí)時(shí)飼養(yǎng)籠盒的數(shù)量,設(shè)定的換氣次數(shù),籠盒內(nèi)風(fēng)速控制在國(guó)標(biāo)規(guī)定的風(fēng)速內(nèi)。
氨濃度:分別進(jìn)行兩次連續(xù)6 d籠盒內(nèi)氨氣濃度檢測(cè)。EVC和IVC分別放置10籠小鼠,每籠5只,且房間檢測(cè)面積均為12.75 m2。兩次檢測(cè)的前4 d,EVC飼養(yǎng)籠盒內(nèi)的氨氣濃度都處于較低水平,但在第5天開(kāi)始出現(xiàn)較高氨氣濃度,接近國(guó)標(biāo)14 mg/m3;IVC在飼養(yǎng)到第三天時(shí),籠盒內(nèi)能聞到明顯氨氣,說(shuō)明濃度已經(jīng)很高,第4天就超過(guò)了國(guó)標(biāo)要求的最低標(biāo)準(zhǔn)[13-14]。IVC在換氣次數(shù)高的前提下,籠盒內(nèi)的氨濃度反而比EVC高,說(shuō)明籠盒內(nèi)空氣流動(dòng)不均勻,換氣不完全。因此,與IVC系統(tǒng)比較, EVC系統(tǒng)的房間內(nèi)氨濃度會(huì)更低。
噪音:EVC籠盒內(nèi)61.5~63.7 db,IVC籠盒51~59 db。噪音主要是屏障系統(tǒng)本身形成,且IVC籠盒內(nèi)隔音效果比EVC好。
斷電或機(jī)械故障:EVC排風(fēng)口徑較大且中央排風(fēng)管整體向上,具有煙囪效應(yīng)。即使在電力故障時(shí),系統(tǒng)在煙囪效應(yīng)下,仍可繼續(xù)工作, 48 h內(nèi)動(dòng)物不會(huì)窒息死亡[15]。IVC風(fēng)管口徑較小且結(jié)構(gòu)復(fù)雜,一經(jīng)斷電或機(jī)械故障,需要額外備用電源來(lái)維持風(fēng)機(jī)正常運(yùn)行以保證籠盒內(nèi)正常換氣,否則需要打開(kāi)籠盒蓋的生命窗口進(jìn)行換氣。因此,在遇到斷電或機(jī)械故障時(shí),EVC換氣更優(yōu)。
報(bào)警系統(tǒng):EVC和IVC均裝有獨(dú)立的報(bào)警系統(tǒng)。報(bào)警系統(tǒng)主機(jī)上都有獨(dú)立顯示屏,顯示小鼠籠盒內(nèi)壓差及溫、濕度,一旦超過(guò)設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)值,系統(tǒng)就會(huì)發(fā)出報(bào)警信號(hào)到管理者手機(jī)上[2]。
綜上,根據(jù)上述參數(shù)比較,可知在屏障設(shè)施中,使用EVC系統(tǒng)更加節(jié)能、環(huán)保且綠色的優(yōu)化方案。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)2021年6期