不同類型急性白血病外周血T淋巴細(xì)胞亞群、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞等在不同時(shí)期的變化分析

董奎良，姚洋，劉嬌媛

（大石橋市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 大石橋 115100）

急性白血病是造血干細(xì)胞的惡性克隆性疾病，疾病的發(fā)生受機(jī)體免疫功能狀態(tài)的影響,會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)貧血、出血、感染癥狀，甚至?xí)＜盎颊呱黐1]。有資料報(bào)道稱，免疫功能水平會(huì)對(duì)急性白血病的治療與轉(zhuǎn)歸產(chǎn)生明顯影響[2]。為分析機(jī)體免疫功能變化對(duì)于急性白血病的意義，本研究選取38 例急性淋巴細(xì)胞白血病患者，45 例急性髓系白血病患者與45 名健康者為研究對(duì)象，旨在探討不同類型急性白血病外周血T、B淋巴細(xì)胞與NK細(xì)胞的變化規(guī)律，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年3月至2019年6月本院收治的38 例急性淋巴細(xì)胞白血病患者（ALL 組）及45 例急性髓系白血病患者（AML組），并取同時(shí)期在本院接受體檢的健康者45名（對(duì)照組）為研究對(duì)象。ALL組男22例，女16例，年齡22～68歲，平均（41.9±5.6）歲；包括T型4例，B型34例。AML組男27 例，女18 例；年齡20～71 歲，平均（42.3±5.8）歲。對(duì)照組男25例，女20例；年齡18～65歲，平均（41.2±5.4）歲。3 組臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性，本研究獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：急性白血病經(jīng)臨床綜合檢查確診；對(duì)本研究?jī)?nèi)容知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：機(jī)體存在其他惡性腫瘤疾病者；合并其他免疫相關(guān)疾病者。

1.2 方法 采集3組晨起空腹靜脈血2～3 mL，應(yīng)用EDTA管進(jìn)行抗凝，取2支流失試管（12 mm×75 mm），在管體表面做好標(biāo)記，其中一支為對(duì)照管，另一支為測(cè)定管，采用同型對(duì)照抗體20 μL 加入到對(duì)照管內(nèi)，采用6 色標(biāo)記CD3FITC/CD16+56PE/CD4PE-cy7/CD8APCcy7/CD45PercP/CD19APC 各20 μL加入測(cè)定管內(nèi)，向各管內(nèi)加入100 μL外周血，充分混合均勻后，放置于遮光室內(nèi)常溫孵育15～20 min，應(yīng)用自動(dòng)裂解儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行裂解、固定、洗滌，然后采用美國(guó)Olympus公司生產(chǎn)的HKD560 型上流失細(xì)胞儀開(kāi)展檢測(cè)；同時(shí)，按照《NCCN 臨床實(shí)踐指南》的推薦方案對(duì)急性白血病患者開(kāi)展治療。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以“”表示，比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3 組淋巴細(xì)胞亞群水平比較 ALL 組與AML 組治療前CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK細(xì)胞陽(yáng)性率與CD4+/CD8+均低于對(duì)照組（P＜0.05）；治療前，AML組CD3-CD19+細(xì)胞陽(yáng)性率低于對(duì)照組（P＜0.05），CD3-CD19+細(xì)胞陽(yáng)性率高于對(duì)照組（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 3組淋巴細(xì)胞亞群水平比較（，%）Table 1 Comparison of lymphocyte subsets in three groups(,%)

表1 3組淋巴細(xì)胞亞群水平比較（，%）Table 1 Comparison of lymphocyte subsets in three groups(,%)

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05

組別ALL組（n=38）AML組（n=45）對(duì)照組（n=45）CD3+40.91±10.68a 39.82±10.23a 68.73±2.35 CD3+CD8+19.83±5.11a 19.22±4.13a 28.63±2.15 CD3+CD4+21.38±7.15a 20.13±8.22a 37.29±1.76 CD4+/CD8+0.89±0.32a 0.99±0.35a 1.60±0.25 CD3-CD19+35.71±8.4a0 3.48±1.55a 10.85±2.36 NK 7.66±4.28a 6.50±3.18a 15.61±2.48 Treg 18.84±5.50a 17.68±2.89a 7.25±2.21

2.2 急性白血病患者治療前后淋巴細(xì)胞亞群水平比較 治療后，ALL組與AML組CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK細(xì)胞陽(yáng)性率與CD4+/CD8+值高于治療前（P＜0.05）；治療后，AML 的CD3-CD19+細(xì)胞陽(yáng)性率高于治療前（P＜0.05），ALL 組CD3-CD19+細(xì)胞陽(yáng)性率低于治療前（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 急性白血病患者治療前后淋巴細(xì)胞亞群水平比較（，%）Table 2 Comparison of lymphocyte subsets in patients with acute leukemia before and after treatment(,%)

表2 急性白血病患者治療前后淋巴細(xì)胞亞群水平比較（，%）Table 2 Comparison of lymphocyte subsets in patients with acute leukemia before and after treatment(,%)

注：與治療前比較，aP＜0.05

組別ALL組（n=38）AML組（n=45）NK 7.66±4.28 12.10±2.38a 6.50±3.18 14.35±3.40a時(shí)間治療前治療后治療前治療后CD3+40.91±10.68 77.60±8.50a 39.82±10.23 58.61±4.58a CD3+CD8+19.83±5.11 22.50±2.36a 19.22±4.13 22.61±2.85a CD3+CD4+21.38±7.15 30.48±2.40a 20.13±8.22 33.05±2.42a CD4+/CD8+0.89±0.32 1.50±0.22a 0.99±0.35 1.30±0.21a CD3-CD19+35.71±8.40 4.51±1.88a 3.48±1.55 7.81±2.55a Treg 18.84±5.50 10.25±1.23a 17.68±2.89 10.33±2.32a

3 討論

急性白血病屬于惡性血液疾病，由于機(jī)體造血功能受到抑制，外周血淋巴細(xì)胞及功能會(huì)出現(xiàn)異常，并影響機(jī)體免疫功能。根據(jù)表面抗原表達(dá)所具備的差異，可將外周血淋巴細(xì)胞分為B 淋巴細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞與NK 細(xì)胞等類型，其所具備的免疫效應(yīng)存在差異，可使機(jī)體免疫內(nèi)環(huán)境維持在穩(wěn)定狀態(tài)[3]。外周T淋巴細(xì)胞亞群可反映細(xì)胞免疫功能狀態(tài)，但由于僅成熟淋巴細(xì)胞可對(duì)CD4+和CD8+進(jìn)行表達(dá)，因此，CD4+/CD8+比值可直接反映機(jī)體免疫功能狀態(tài)[4]。有資料報(bào)道稱，當(dāng)惡性血液病患者具備輸血指征時(shí)，為其采用紅細(xì)胞輸注后，患者機(jī)體T 淋巴細(xì)胞亞群水平會(huì)出血明顯改變[5]。CD3-CD16+CD56+的NK細(xì)胞可直接殺滅病毒感染細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞，發(fā)揮抗腫瘤作用，并可分泌細(xì)胞因子，從而使多種免疫細(xì)胞得到活化，并提升機(jī)體免疫功能[6]。本研究結(jié)果顯示，ALL組與AML 組治療前CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK 細(xì)胞陽(yáng)性率與CD4+/CD8+值均低于對(duì)照組，提示急性白血病的發(fā)生會(huì)使機(jī)體免疫功能明顯降低，抑制機(jī)體抗腫瘤效應(yīng)，使其保持在免疫抑制的狀態(tài)[7]。治療后，急性白血病患者CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK 細(xì)胞陽(yáng)性率與CD4+/CD8+值均高于治療前，提示經(jīng)過(guò)治療后，可使急性白血病患者的機(jī)體細(xì)胞免疫功能增強(qiáng)。

CD19屬于B細(xì)胞表面膜抗原，可對(duì)體液免疫應(yīng)答進(jìn)行介導(dǎo)，在體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用，并可分泌多種細(xì)胞因子，從而在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用[8]。本研究結(jié)果顯示，AML組患者體液免疫功能顯著降低，在實(shí)施治療后得到改善，而ALL組患者的CD3-CD19+升高明顯，分析其原因，可能與研究對(duì)象中B細(xì)胞性病變占比較高有關(guān)，在實(shí)施治療后該指標(biāo)顯著降低，是否受到幼稚細(xì)胞減少的影響仍需開(kāi)展進(jìn)一步研究[9-10]。

綜上所述，外周血T 淋巴細(xì)胞亞群、B 淋巴細(xì)胞和NK 細(xì)胞可有效評(píng)估不同類型急性白血病的病情嚴(yán)重度、治療效果與預(yù)后情況。