妊娠期糖尿病患者不同孕周血漿Visfatin表達(dá)檢測(cè)

胡麗燕，杜秀萍

(山西省兒童醫(yī)院山西省婦幼保健院婦產(chǎn)科，山西 太原 030000)

妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)表現(xiàn)為妊娠前糖代謝或糖耐量正常，妊娠期出現(xiàn)糖耐量降低。近年來(lái)GDM發(fā)病率不斷升高，超過(guò)15%的孕婦被診斷為GDM[1]。GDM可引起血管病變、影響母嬰結(jié)局，如導(dǎo)致早產(chǎn)、胎兒宮內(nèi)窘迫、流產(chǎn)、高血壓相關(guān)疾病等。目前，GDM具體發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，可能與胰島素抵抗(insulin resistance,IR)及胰島β細(xì)胞功能受損有關(guān)[2]。早期篩查并定期隨訪(fǎng)、監(jiān)測(cè)對(duì)提高GDM患者妊娠期安全，改善妊娠結(jié)局有重要意義。目前常用的糖化血紅蛋白(hemoglobin A1c，HbA1c)、口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(oral glucose tolerance test,OGTT)、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、餐后2 h血糖(2 h postprandial plasma glucose,2 hPG)等雖然可檢測(cè)GDM患者血糖變化及糖耐量受損情況，但需多次抽血，為有創(chuàng)檢測(cè)，不易被孕婦接受。另外，上述檢測(cè)需要患者服用葡萄糖，部分患者不愿配合，阻礙其廣泛應(yīng)用。Visfatin是由內(nèi)臟脂肪細(xì)胞分泌的肽類(lèi)激素，具有促進(jìn)脂肪分化及脂肪細(xì)胞成熟的作用。最新研究認(rèn)為[3]，Visfatin具有胰島素樣作用，可改善IR，發(fā)揮降血糖的功能。研究顯示[4]，GDM患者血漿Visfatin顯著高于正常孕婦，且血漿Visfatin與胎兒宮內(nèi)發(fā)育有關(guān)。國(guó)外研究顯示[5]，不同孕周的GDM患者血漿Visfatin含量存在差異。目前，不同孕周血漿Visfatin含量與GDM患者IR的關(guān)系研究的較少。本研究通過(guò)檢測(cè)GDM患者不同孕周血漿Visfatin水平變化，分析其臨床意義。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年5月—2019年5月我院診治孕24～26周的GDM患者40例，同期OGTT試驗(yàn)正常的孕24～26周孕婦40例為正常糖耐量(normal glucose tolerance,NGT)組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①GDM的診斷符合2015年制訂的標(biāo)準(zhǔn)[6]：FPG≥5.1 mmol/L，1 hPG≥10.0 mmol/L，2 hPG≥8.5 mmol/L，任一項(xiàng)滿(mǎn)足者均可診斷為GDM；②年齡20～35歲；③孕婦均為單胎自然妊娠，且既往身體健康；④GDM患者血糖的控制水平符合指南[7]；餐前及餐后2 h血糖值分別≤5.3、6.7 mmol/L，特殊情況下可測(cè)餐后1 h血糖 (≤7.8 mmol/L)；夜間血糖不低于3.3 mmol/L；妊娠期HbA1c宜<5.5%。⑥均知情同意，愿意配合該研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并腫瘤者；②合并妊娠期高血壓、多囊卵巢綜合征等；③合并潰瘍性腸炎或全身感染者；④肝腎功能不全者；⑤近期使用糖皮質(zhì)激素治療者；⑥肥胖、中心性肥胖患者。GDM組和NGT組年齡、孕前體重指數(shù)、產(chǎn)次等比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性，見(jiàn)表1。

本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)，研究對(duì)象均簽署知情同意書(shū)。

表1 2組一般資料比較 Table 1 Comparison of general data between two groups

1.2方法

1.2.1血液采集 分別于孕24～26周、31～33周、38～40周采集2組孕婦晨起空腹靜脈血5 mL，加入抗凝劑抗凝后3 500 r/min離心12 min分離血漿，-20 ℃保存。

1.2.2血漿Visfatin含量檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)2組血漿Visfatin含量，試劑盒購(gòu)自美國(guó)Sigma公司，具體步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。根據(jù)孕24～26周血漿Visfatin含量中位數(shù)，將GDM組分為高Visfatin亞組和低Visfatin亞組各20例。

1.2.32組血漿FPG、HbA1c、空腹胰島素(fasting insulin,FINS)及血脂檢測(cè) 采用SE2001全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)BD公司)檢測(cè)2組血漿FPG、HbA1c、FINS、三酰甘油(triglyceride,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平，并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR)=FPG×FINS/22.5[7]。

1.2.4新生兒發(fā)育狀況評(píng)估 記錄新生兒體質(zhì)量、身長(zhǎng)，計(jì)算新生兒ponderal指數(shù)(ponderal index,PI)=體重(g)/身長(zhǎng)(cm)3×100[8]。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、單因素方差分析、SNK-q檢驗(yàn)；Pearson相關(guān)法分析血漿Visfatin與HOMA-IR的相關(guān)性。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1GDM組與NGT組不同孕周血漿Visfatin水平比較 GDM組高Visfatin亞組、低Visfatin亞組及NGT組血漿Visfatin水平隨孕周增加而升高，兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。GDM組高Visfatin亞組孕24～26周血漿Visfatin高于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組高于NGT組(P<0.05)，高Visfatin亞組、低Visfatin亞組孕31～33周、38～40周血漿Visfatin與NGT組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 GDM組與NGT組不同孕周血漿Visfatin水平比較 Table 2 Comparison of plasma Visfatin levels in GDM group and NGT group at different gestational weeks

2.2GDM組與NGT組孕24～26周糖代謝和脂類(lèi)代謝比較 GDM組高Visfatin亞組孕24～26周FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR及TG、TC、LDL-C均高于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組高于NGT組(P<0.05)，GDM組高Visfatin亞組孕24～26周血漿HDL-C低于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組低于NGT組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3組孕31～33周與38～40周FPG、 HbA1c比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表3～5。

表3 GDM組與NGT組孕24～26周糖代謝指標(biāo)比較Table 3 Comparison of gestational glucose metabolism indicators between GDM group and NGT group at 24-26 weeks of gestation

表4 GDM組與NGT組孕31～33周與38～40周FPG、 HbA1c比較 Table 4 Comparison of FPG,HbA1c between GDM group and NGT group at 24-26 weeks and 38-40 weeks of gestation

表5 GDM組與NGT組孕24～26周脂類(lèi)代謝指標(biāo)檢測(cè) Table 5 Detection of lipid metabolism indicators in the GDM group and the NGT group at 24-26 weeks of gestation

2.3GDM組孕24～26周血漿Visfatin水平與HOMA-IR的相關(guān)性分析 GDM組孕24～26周血漿Visfatin與孕24～26周HOMA-IR(r=0.429,P=0.036)、31～33周HOMA-IR(r=0.568,P=0.025)、孕38～40周HOMA-IR(r=0.672,P=0.003)均呈明顯正相關(guān)，見(jiàn)表6，圖1～3。

2.4GDM組與NGT組胎兒宮內(nèi)發(fā)育狀況比較 GDM組高Visfatin亞組新生兒體重、PI均高于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組高于NGT組，兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表7。

表6 GDM組孕24～26周血漿Visfatin水平與HOMA-IR的Pearson相關(guān)性分析Table 6 Pearson Correlation analysis between plasma Visfatin at 24-26 weeks of gestation and HOMA-IR in GDM group

圖1 孕24～26周血漿Visfatin與孕24～26周HOMA-IR相關(guān)的散點(diǎn)圖Figure 1 Scatter plot of plasma Visfatin at 24-26 weeks of gestation and HOMA-IR at 24-26 weeks of gestation

表7 GDM組與NGT組胎兒宮內(nèi)發(fā)育狀況比較 Table 7 Comparison of fetal intrauterine development status between GDM group and NGT group

3 討 論

GDM可影響母嬰妊娠結(jié)局，因此早期有針對(duì)性干預(yù)對(duì)改善母體及新生兒遠(yuǎn)期預(yù)后有重要意義。目前，IR及胰島β細(xì)胞功能低下在GDM發(fā)生中的作用已得到公認(rèn)。肥胖尤其腹型肥胖是引起IR的重要因素。GDM與肥胖均存在脂類(lèi)代謝紊亂、糖耐量受損等病理基礎(chǔ)，而此過(guò)程與脂肪細(xì)胞因子的分泌密切相關(guān)。Visfatin屬于脂肪細(xì)胞因子家族，可促進(jìn)脂肪聚集、通過(guò)自分泌和旁分泌促進(jìn)脂肪細(xì)胞成熟，促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)和脂質(zhì)聚積，是調(diào)節(jié)機(jī)體物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和能量代謝的重要因子，因此血漿一定量的Visfatin對(duì)人體生長(zhǎng)發(fā)育和營(yíng)養(yǎng)的維持有重要作用?？电萚9]對(duì)妊娠期女性血漿Visfatin進(jìn)行監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，血漿Visfatin水平在不同孕期中出現(xiàn)波動(dòng)，隨著孕周增加，其含量呈增加趨勢(shì)。可能的原因是隨著妊娠程度的增加，機(jī)體各種組織對(duì)胰島素的敏感性降低，Visfatin具有胰島素樣作用，為了保證孕期母體及胎兒的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)，通過(guò)升高Visfatin水平來(lái)增強(qiáng)胰島素的作用[10]。本研究NGT組隨著孕周增加血漿Visfatin水平而升高，與文獻(xiàn)[9]報(bào)道相符。

血漿Visfatin與GDM發(fā)病的相關(guān)性尚未闡明。李麗等[4]對(duì)100例GDM患者和100例正常妊娠孕婦血漿Visfatin檢測(cè)可知，GDM患者血漿Visfatin明顯高于正常妊娠孕婦。付穎等[11]研究表明，GDM患者血漿、臍血及胎盤(pán)組織Visfatin水平均高于糖耐量正常孕婦，且其含量可影響胎兒宮內(nèi)發(fā)育。國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道[5]，隨GDM患者孕周增加，血漿Visfatin含量逐漸增高，且在孕晚期達(dá)到最高。本研究發(fā)現(xiàn)，GDM組高Visfatin亞組、低Visfatin亞組及NGT組血漿Visfatin水平均隨孕周增加而升高，但僅孕24～26周血漿Visfatin水平在各組間存在差異，3組孕31～33周、38～40周血漿Visfatin比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與文獻(xiàn)報(bào)道相符[12]。原因如下：①雖然正常孕婦也可出現(xiàn)IR，但在GDM患者中IR程度更嚴(yán)重，導(dǎo)致血糖明顯升高，在此應(yīng)激環(huán)境下，機(jī)體為了保證正常的物質(zhì)代謝，代償性上調(diào)血漿Visfatin，這可能是GDM患者孕24～26周血漿Visfatin高于NGT組的原因，且增高的漿Visfatin并不足以完全抵消IR，因此出現(xiàn)高血漿Visfatin與IR并存；②隨著妊娠進(jìn)展，胎兒附屬物也可分泌Visfatin，導(dǎo)致其血漿含量升高，且妊娠晚期不規(guī)則宮縮可刺激羊膜分泌Visfatin，綜合原因造成NGT孕婦與GDM孕婦無(wú)明顯差異。

GDM患者呈現(xiàn)明顯的糖耐量減低以及脂肪代謝紊亂，糖代謝異常主要表現(xiàn)為FPG升高以及FINS代償性增高；脂類(lèi)代謝紊亂體現(xiàn)為T(mén)G升高、HDL-C降低。本研究GDM組高Visfatin亞組孕24～26周FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR及TG、TC、LDL-C均高于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組高于NGT組，GDM組高Visfatin亞組孕24～26周血漿HDL-C低于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組低于NGT組，符合GDM患者糖類(lèi)和脂類(lèi)代謝紊亂的表現(xiàn)，且Visfatin含量越高脂類(lèi)代謝紊亂越明顯，與文獻(xiàn)報(bào)道相符[13]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，Visfatin可通過(guò)誘導(dǎo)肝臟胰島素受體的酪氨酸磷酸化，導(dǎo)致大量TG在大鼠脂肪細(xì)胞聚積，引起大鼠肥胖[14]；而肥胖可降低蛋白酪氨酸磷酸酶活性，導(dǎo)致胰島素受體去磷酸化，以致激活胰島素的信號(hào)通路受抑制，引起IR。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸可促進(jìn)脂聯(lián)素活性，增強(qiáng)組織器官對(duì)胰島素的敏感性，而Visfatin是煙酰胺腺嘌呤二核苷酸合成的限速酶，可通過(guò)煙酰胺腺嘌呤二核苷酸影響IR。目前，在小鼠細(xì)胞模型[15]及肥胖[16]患者中，觀(guān)察到血漿Visfatin與胰島素敏感性有關(guān)。文獻(xiàn)報(bào)道，血漿Visfatin升高可影響糖類(lèi)脂類(lèi)代謝，且與IR呈正相關(guān)[12,17]。本研究結(jié)果顯示，GDM組孕24～26周血漿Visfatin與孕24～26周、31～33周、38～40周HOMA-IR均呈明顯正相關(guān)?？赡苁怯捎谠诟哐堑挠绊懴?，母體各種靶組織逐漸出現(xiàn)生物合成失調(diào)、功能受損，孕24～26周可反映組織損傷程度。

葡萄糖不僅是母體各種代謝的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，且葡萄糖可通過(guò)胎盤(pán)屏障，為胎兒生長(zhǎng)發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)。GDM影響糖類(lèi)代謝，因此可影響胎兒在宮內(nèi)的發(fā)育。文獻(xiàn)報(bào)道，GDM可增加早產(chǎn)兒、巨大兒、胎兒先天性畸形發(fā)生率[18]。血漿Visfatin水平升高能引起胎盤(pán)組織和臍血Visfatin水平增加，且其含量與血漿中相當(dāng)，呈明顯正相關(guān)。譚琴等[12]研究發(fā)現(xiàn)，GDM患者血漿和臍血Visfatin含量均升高，且可引起胎兒肥胖。本研究發(fā)現(xiàn)，GDM組高Visfatin亞組新生兒體質(zhì)量、PI均高于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組高于NGT組，可能是由于GDM患者血漿高Visfatin引起胎盤(pán)組織Visfatin升高，Visfatin可通過(guò)脂聯(lián)素等多種途徑促進(jìn)糖類(lèi)轉(zhuǎn)運(yùn)和脂質(zhì)代謝，導(dǎo)致胎兒體質(zhì)量增加及PI升高，進(jìn)一步導(dǎo)致巨大兒、及難產(chǎn)發(fā)生[9,19]。

血漿Visfatin含量隨孕周增加而升高，GDM患者孕24～26周血漿Visfatin含量高于NGT孕婦；孕24～26周Visfatin與GDM患者糖類(lèi)和脂質(zhì)代謝紊亂有關(guān)，并促進(jìn)胎兒宮內(nèi)發(fā)育。檢測(cè)孕24～26周血漿Visfatin有助于GDM患者糖類(lèi)及脂質(zhì)代謝紊亂及病情嚴(yán)重程度的評(píng)估。本研究不足：樣本量較小，且為單中心研究；未進(jìn)行多因素分析。因此，孕24～26周血漿Visfatin對(duì)GDM患者妊娠結(jié)局的影響，確切結(jié)論需大樣本量、多中心研究證實(shí)。