自噬/芐氯素1調(diào)節(jié)因子1在自噬與凋亡中作用的研究進(jìn)展*

尚畫雨， 付 玉， 馬穰桂， 夏 志

（1成都體育學(xué)院運動醫(yī)學(xué)與健康學(xué)院，四川成都610041；2井岡山大學(xué)體育學(xué)院，江西吉安343009）

細(xì)胞凋亡（Ⅰ型程序性死亡）和自噬性細(xì)胞死亡（Ⅱ型程序性死亡）這2 種細(xì)胞死亡方式可通過一些蛋白的相互作用而介導(dǎo)形成平衡對立狀態(tài)。一方面，細(xì)胞凋亡由胱天蛋白酶（caspase，CASP）依賴性通路經(jīng)內(nèi)源性、外源性或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)途徑予以控制，而死亡信號則可經(jīng)這3 種途徑介導(dǎo)受損或感染細(xì)胞的清除［1-2］。另一方面，細(xì)胞自噬由被稱為貨物受體或自噬受體的特定分子調(diào)控，并通過此類受體與特定底物相互作用，介導(dǎo)自噬體形成。現(xiàn)已證實，在響應(yīng)低氧、饑餓等多種應(yīng)激刺激時，細(xì)胞將啟動自噬機(jī)制降解受損細(xì)胞器（如線粒體），從而防止觸發(fā)凋亡途徑，避免細(xì)胞凋亡或壞死［3］。

自噬/芐氯素 1 調(diào)節(jié)因子 1（autophagy/beclin-1 regulator 1，AMBRA1）是同時參與介導(dǎo)自噬和凋亡的受體蛋白之一。首先，AMBRA1 作為自噬早期階段的調(diào)節(jié)子和自噬體膜標(biāo)志物［如微管相關(guān)蛋白1輕鏈3（microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3）］的關(guān)鍵募集蛋白而介導(dǎo)自噬發(fā)生，同時在自噬過程與凋亡、增殖、分化、發(fā)育及病理改變等諸多細(xì)胞活動之間建立聯(lián)系［4-7］。此外，抗凋亡B 細(xì)胞淋巴瘤/白血病 2（B-cell lymphoma/leukemia 2，Bcl-2）家族成員如 Bcl-xL/BCL2L1（Bcl-2-like 1）［8］、Bcl-2［9］和髓樣細(xì)胞白血病1（myeloid cell leukemia-1，Mcl-1）［10］可有效抑制自噬的生理性活化，且三者均為與AMBRA1 相互作用的分子?；诖耍疚臄M對近年來AMBRA1 蛋白的相關(guān)研究進(jìn)行梳理，并歸納其對自噬及凋亡的調(diào)控作用，以期為AMBRA1 相關(guān)疾?。ㄈ绨┌Y和神經(jīng)退行性疾病等）的新藥研發(fā)提供參考資料。

1 AMBRA1概述

AMBRA1 由 1 300 個氨基酸組成，在腦、肺、腎臟和心臟等組織廣泛高表達(dá)［11］。ambra1基因由 18 個外顯子組成，位于人類11 號染色體和小鼠2 號染色體上，而斑馬魚的ambra1基因則包含19 個外顯子，并編碼兩個同源基因ambra1a和ambra1b［7］。哺乳動物和斑馬魚ambra1外顯子數(shù)目和長度的差異與低序列同源性的C 末端區(qū)域相對應(yīng)；相反，其N 末端區(qū)域高度保守，包含3 個WD40 結(jié)構(gòu)域，在蛋白相互作用中行使支架功能。除上述已知結(jié)構(gòu)域之外，AMBRA1 還被定義為一種本質(zhì)上無序的蛋白，這種可塑性決定了其具有多重互作功能［12］。目前已知AMBRA1 具有多個一致序列，從而可與cullin 4（CUL4）/損 傷 特 異 性 DNA 結(jié) 合 蛋 白 1（damagespecific DNA-binding protein 1，DDB1）、CUL5［13］、蛋白 磷 酸 酶 2A（protein phosphatase 2A，PP2A）［5］、LC3B［14］、腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（tumor necrosis factor receptor-associated factor 6，TRAF6）［15］、動力蛋白輕鏈LC8 type 1（dynein light chain LC8 type 1，DYNLL1）、DYNLL2［16］和 Bcl-2［6］等多種蛋白之間產(chǎn)生相互作用。

AMBRA1 復(fù)雜而未知的結(jié)構(gòu)使其得以參與多個關(guān)鍵的生理和病理過程。例如，AMBRA1 可參與調(diào)節(jié)自噬（包括選擇性自噬），并介導(dǎo)線粒體選擇性自噬過程［14，17］。再如，它可參與包括誘導(dǎo)肌細(xì)胞生成在內(nèi)的多種調(diào)節(jié)機(jī)制［7］，負(fù)性調(diào)節(jié)人類免疫缺陷病毒 1 型（human immunodeficiency virus-1，HIV-1）感染，但在未知機(jī)制下又被病毒拮抗［18］。又如，它可與PP2A 相互作用，一方面在上游哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）被抑制的情況下，通過誘導(dǎo)c-Myc去磷酸化和降解以抑制癌細(xì)胞增殖［5］；另一方面則增加叉頭框蛋白O3（forkhead box O3，F(xiàn)OXO3）的穩(wěn)定性，從而促進(jìn)FOXP3基因表達(dá)和調(diào)節(jié)T 細(xì)胞的正常發(fā)育［19］。此外，它亦可與Bcl-2 家族成員Bcl-2 及Mcl-1 相結(jié)合，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡［6］。

2 AMBRA1參與調(diào)節(jié)自噬

細(xì)胞自噬是一種由囊泡自噬體介導(dǎo)的細(xì)胞自我消化方式，除隨機(jī)降解一些蛋白底物之外，還可選擇性降解特定的細(xì)胞成分（如細(xì)胞器）。其中，選擇性自噬包括線粒體自噬、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬和核糖體自噬等途徑，主要用于保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，通常行使著大掃除的功能［20］。

2.1 細(xì)胞自噬 在基礎(chǔ)條件下，胞質(zhì)內(nèi)AMBRA1可與自噬關(guān)鍵分子beclin-1［4］和Ⅲ型磷脂酰肌醇3-激酶（class Ⅲ phosphatidylinositol 3-kinase，PI3KⅢ/VPS34）相互作用，在由DYNLL1與DYNLL2組成的馬達(dá)復(fù)合物輕鏈上形成PI3KⅢ復(fù)合物。隨后，在Unc-51 樣自噬活化激酶1（Unc-51-like autophagy-activating kinase 1，ULK1）依賴性AMBRA1 磷酸化作用下［21］，該復(fù)合物轉(zhuǎn)運至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并被激活，最終誘導(dǎo)自噬體的形成［22］。因此，AMBRA1 被視為自噬的正性調(diào)節(jié)因子［23］。研究表明，AMBRA1 通過以下 2 種機(jī)制介導(dǎo)自噬途徑的正反饋回路：一方面，通過E3 泛素連接酶TRAF6 介導(dǎo)的K63 泛素化而增加ULK1 穩(wěn)定性并誘 導(dǎo) ULK1 磷 酸 化［15］；另 一方面 ，則通 過 TCEB2［transcription elongation factor B（SⅢ），polypeptide 2（18 kDa，elongin B）］與CUL5 相互作用，抑制CUL5的E3 泛素連接酶活性，致使包含DEP 域的與mTOR相互作用的蛋白（DEP-domain-containing mTOR-interacting protein，DEPTOR）這一CUL5 接頭蛋白得以穩(wěn)定并進(jìn)而抑制mTOR功能表達(dá)［13，24］。

AMBRA1 也是其它E3 泛素連接酶在自噬過程中的重要輔助因子。例如，Antonioli 等［13，24］證實，AMBRA1 通過與E3 泛素連接酶CUL4 動態(tài)互作而調(diào)節(jié)自噬的發(fā)生和終止：在基礎(chǔ)條件下，二者可相互結(jié)合，進(jìn)而募集DDB1 以穩(wěn)定AMBRA1 并促使其泛素化，誘導(dǎo)自噬發(fā)生；在應(yīng)激性條件下，DDB1 則迅速釋放AMBRA1，導(dǎo)致CUL4-AMBRA1 分離，從而增加AMBRA1 池，但是三者之間的分離極為短暫，隨后即可再次結(jié)合并進(jìn)一步降解AMBRA1，導(dǎo)致自噬過程終止。

除對TRAF6、CUL5 和CUL4 的協(xié)同作用之外，AMBRA1亦可作為E3泛素連接酶DDB1和環(huán)指蛋白2（ring finger protein 2，RNF2）的直接底物，參與調(diào)控泛素介導(dǎo)的蛋白酶體降解：如前所述，CUL4-DDB1復(fù)合物在基礎(chǔ)條件下誘導(dǎo)AMBRA1泛素化及其降解以抑制自噬；而在應(yīng)激性自噬誘導(dǎo)條件下，beclin-1的互作蛋白WASH（Wiskott-Aldrich syndrome protein and SCAR homolog）則可招募RNF2 并與之結(jié)合，后者通過Lys48 連接鏈誘導(dǎo)AMBRA1 的Lys45 位點泛素化，進(jìn)而抑制自噬［25］。以上結(jié)果提示，AMBRA1可與 beclin-1、VPS34 及 E3 泛素連接酶 TRAF6、CUL4和CUL5 相互作用，從而誘發(fā)細(xì)胞自噬（圖1）。近期Miki 等［26-27］首次證實，AMBRA1 是α-突觸核蛋白（αsynuclein，α-Syn）的中樞結(jié)合蛋白，該研究組觀察到AMBRA1 過表達(dá)與異常α-Syn 減少之間存在顯著關(guān)聯(lián)，而利用自噬溶酶體抑制劑巴甫洛霉素和siRNA干擾AMBRA1表達(dá)則會引起小鼠原代培養(yǎng)神經(jīng)元胞質(zhì)中α-Syn 異常聚集，同時可見α-Syn 與自噬體標(biāo)志物L(fēng)C3 明顯共定位；此外還觀察到，帕金森?。≒arkinson disease，PD）、路易體癡呆（dementia with Lewy bodies，DLB）和多系統(tǒng)萎縮（multiple system atrophy，MSA）患者腦內(nèi)自噬上游蛋白beclin-1 和VPS34 表達(dá)較健康被試者顯著上調(diào)，而TRAF6 表達(dá)則顯著下調(diào)。以上結(jié)果提示，AMBRA1 可能通過兩種機(jī)制參與內(nèi)源性α-Syn的轉(zhuǎn)換：一是作為互作蛋白直接識別異常的α-Syn；二是作為降解蛋白通過介導(dǎo)自噬而降解異常的α-Syn。

Figure 1.AMBRA1 as a proautophagic protein involved in the regulation of autophagy.圖1 AMBRA1作為促自噬因子參與調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬

2.2 線粒體自噬 作為一種典型的選擇性細(xì)胞自噬，線粒體自噬在線粒體質(zhì)量控制中的清除作用較非特異性細(xì)胞自噬更為顯著，其導(dǎo)致的線粒體選擇性減少可與線粒體生物發(fā)生協(xié)同作用，使得線粒體數(shù)量保持穩(wěn)定。Van Humbeeck 等［17］指出，在線粒體去極化過程中，AMBRA1 與線粒體自噬受體PARKIN（PARK2）的相互作用顯著增強(qiáng)，其被PARKIN等蛋白招募至細(xì)胞核周聚集的線粒體上，形成線粒體聚集體。且此過程可與PI3KⅢ復(fù)合物的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)轉(zhuǎn)位活化協(xié)同配合，誘導(dǎo)線粒體自噬體形成。Strappazzon 等［14，28］和 D′Acunzo 等［29］報道指出，在 PARKIN 依賴的情況下，AMBRA1 可通過其LC3 互作域（LC3-interacting region，LIR）與LC3B 相互作用，且這一過程對于增強(qiáng)PINK1（PTEN-induced putative kinase protein 1）/PARKIN 途徑介導(dǎo)的線粒體自噬是必需的；然而，在不依賴于PARKIN 和p62/sequestosome 1的情況下，線粒體外膜（outer mitochondrial membrane，OMM）上的AMBRA1 定位（AMBRA1-ActA）增加亦可通過其LIR 氨基酸序列與LC3B 蛋白相互作用，使受損線粒體被自噬體包裹進(jìn)而降解清除，表明存在AMBRA1 依賴性線粒體自噬途徑（圖2）。此外，Di Rita 等［30］利用生物信息學(xué)分析技術(shù)觀察到AMBRA1 的自噬誘導(dǎo)作用依賴于E3 泛素連接酶HUWE1 的活化，后者可激活其LIR 氨基酸序列附近的S1014 磷酸化位點，進(jìn)而促進(jìn)該序列與LC3B 相互作用，為后續(xù)氨基酸信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)分子機(jī)制的研究提供了線索，說明HUWE1 可能是AMBRA1 介導(dǎo)線粒體自噬的協(xié)同因子。

Figure 2.AMBRA1 as a receptor protein to mediate mitophagy.圖2 AMBRA1作為受體蛋白介導(dǎo)線粒體自噬

目前，已明確Bcl-2 家族成員對不同線粒體自噬途徑均有抑制作用。例如，Bcl-xL 可抑制FUNDC1（FUN14 domain containing 1）介導(dǎo)的線粒體自噬［8］，而 Bcl-2 則抑制 PARKIN 介導(dǎo)的線粒體自噬［31］。此外，Strappazzon 等［9］證實，定位于線粒體的 Bcl-2 可結(jié)合AMBRA1-ActA 并抑制其促自噬活性，但是Bcl-2 能否抑制AMBRA1 介導(dǎo)的線粒體自噬尚需進(jìn)一步研究確認(rèn)。Strappazzon 等［32］最近的研究結(jié)果顯示，Bcl-2 同源物Mcl-1 過表達(dá)可顯著抑制HUWE1 的線粒體轉(zhuǎn)位，且其表達(dá)在AMBRA1 依賴性線粒體自噬過程中顯著下調(diào)。抑制糖原合成酶激酶3β（glucogen synthase kinase-3β，GSK-3β）可使 Mcl-1 表達(dá)再次上調(diào)，隨即削弱HUWE1 的協(xié)同作用進(jìn)而延遲AMBRA1介導(dǎo)的線粒體自噬。這一結(jié)果提示，Mcl-1可能作為上游應(yīng)激敏感蛋白，在AMBRA1 依賴性線粒體自噬中發(fā)揮負(fù)性調(diào)節(jié)作用，但其具體作用機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究予以闡明。

AMBRA1 亦可能通過介導(dǎo)線粒體自噬而參與C2C12 和 SH-SY5Y 細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)［33-34］。它與目前已知的線粒體自噬受體FUNDC1、Nix/Bnip3L（BCL-2/adenovirus E1B protein-interacting protein 3-like）和 Bnip3 均呈現(xiàn)出如下共同特征：（1）定位于OMM；（2）存在LIR 氨基酸序列；（3）具備在線粒體過表達(dá)而誘導(dǎo)線粒體自噬的能力。但是，迄今尚未明確AMBRA1 作為線粒體自噬受體究竟如何被激活，亦不清楚其與自噬相關(guān)蛋白NDP52、optineurin、TAX1BP1、NBR1 和p62 等泛素化底物是否存在相互作用。此外，Strappazzon 等［14］觀察到，AMBRA1 和LC3B 的共定位作用在羰基氰對三氟甲氧基苯腙（carbonyl cyanidep-trifluoromethoxyphenylhydrazone，F(xiàn)CCP）處理后可顯著增強(qiáng)，而FCCP 如何誘導(dǎo)AMBRA1 與LC3B 發(fā)生明顯共定位亦是有待探明的問題之一。

3 AMBRA1參與調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡是由基因和細(xì)胞因子調(diào)控的細(xì)胞程序性死亡，該過程的紊亂會導(dǎo)致諸如退行性疾病、自免疫疾病和癌癥等多種疾病的發(fā)生。AMBRA1 通過與包括Bcl-2、Mcl-1 等凋亡蛋白在內(nèi)的各種因子互作而調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡。其中，Bcl-2的抗凋亡作用與其線粒體定位密切相關(guān)［35］，但其定位至線粒體的分子機(jī)制尚不明確。在HEK293 細(xì)胞內(nèi)AMBRA1 可通過其線粒體池與Bcl-2 之間動態(tài)互作，誘導(dǎo)線粒體依賴性細(xì)胞凋亡［6］。盡管以上線索提示AMBRA1 可能具有促凋亡活性，但學(xué)界亦有不同研究結(jié)果。Fimia 等［11］報道，ambra1基因缺陷小鼠在出生后不久即因神經(jīng)管閉合缺陷而死亡，并推測可能是由過度的細(xì)胞凋亡所致。Pagliarini 等［36］的研究結(jié)果顯示，在人成纖維2FTGH 細(xì)胞凋亡過程中僅見AMBRA1 被降解，而其互作分子beclin-1 和自噬相關(guān)蛋白5（autophagyrelated protein 5，Atg5）則無顯著變化，提示AMBRA1可能是細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)蛋白水解的優(yōu)先靶點。通過給予AMBRA1siRNA 或過表達(dá)處理，可分別促進(jìn)細(xì)胞凋亡和提升細(xì)胞抗凋亡能力，而與野生型AMBRA1（AMBRA1WT）相比，抗CASP 突變體（AMBRA1D482A）則可致細(xì)胞凋亡率顯著下降。由此可見，AMBRA1 可作為凋亡誘導(dǎo)因子CASP的作用底物而被裂解，最終抑制細(xì)胞凋亡［36］。因此，AMBRA1 在細(xì)胞凋亡中的作用可能具有細(xì)胞類型特異性，但其具體作用（促進(jìn)或抑制）迄今仍不明確。

目前研究證實，隨著OMM 通透性的增加，釋放入胞質(zhì)的細(xì)胞色素C（cytochrome C，Cyt C）可激活凋亡蛋白酶CASP 和CAPN，二者剪切一些促自噬蛋白（如AMBRA1、beclin-1、Atg4D 和Atg5），使其以裂解的形式轉(zhuǎn)位至線粒體，并由于其促存活活性被抑制而加劇細(xì)胞凋亡［6，36-38］。需注意的是，AMBRA1被CASP 剪 切 后 產(chǎn) 生 的 C 末 端片 段（483-1300 aa，AMBRA1CT）可分別與Bcl-2家族的抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1 和 Bcl-xL 相互作用［6］。其中，與 Bcl-2 的相互作用是通過位于AMBRA1CT的BH3 一致序列而實現(xiàn)［6，36］。簡言之，被剪切后的AMBRA1作為一種僅含BH3 序列的蛋白，可通過上述方式與Bcl-2 互作并抑制其抗凋亡活性，最終促進(jìn)細(xì)胞凋亡。以上研究結(jié)果均提示了促自噬因子AMBRA1參與細(xì)胞（線粒體）凋亡途徑的可能機(jī)制（圖3）。

此外，需要指出的是，AMBRA1 必須被剪切才能阻斷Bcl-2 的抗凋亡功能。全長的AMBRA1 可能呈現(xiàn)出BH3 序列在其C 末端被掩蓋的構(gòu)象狀態(tài)，因而無法發(fā)揮對Bcl-2 的負(fù)性調(diào)節(jié)作用［22］。由于AMBRA1 被認(rèn)為是一種無序蛋白，迄今尚未探明其三維結(jié)構(gòu)，故AMBRA1 三維結(jié)構(gòu)解析將有助于評價其在多種互作調(diào)控中的重要性。而且，AMBRA1 和Bcl-2 家族蛋白由于在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體上均同時參與自噬與凋亡過程［35］，因此探明 AMBRA1 的分子構(gòu)象亦將有助于更好地理解其在細(xì)胞生存與死亡交互影響過程中的生物學(xué)功能?？傮w而言，AMBRA1 不僅參與介導(dǎo)細(xì)胞自噬和線粒體自噬，同時還具有促凋亡或抗凋亡活性。首先，胞質(zhì)內(nèi)AMBRA1可與beclin-1、VPS34 及 E3 泛 素 連 接 酶 TRAF6、CUL4 和CUL5 相互作用，從而誘發(fā)細(xì)胞自噬；其次，在PARKIN 依賴或未知情況下，AMBRA1 可轉(zhuǎn)位至線粒體（AMBRA1-ActA），并通過其LIR 氨基酸序列與LC3B相互作用，增強(qiáng)PINK1/PARKIN 介導(dǎo)的線粒體自噬和（或）誘發(fā)AMBRA1 依賴性線粒體自噬［14，28-29］。然而，AMBRA1 的促自噬活性在凋亡過程中受到了CASP 的嚴(yán)格調(diào)控：一方面，由CASP 剪切而產(chǎn)生的裂解形式AMBRA1CT可通過其BH3序列與Bcl-2相互作用，致使Bcl-2 的促存活活性喪失，最終誘導(dǎo)線粒體依賴的細(xì)胞凋亡［6］；另一方面，AMBRA1D482A使細(xì)胞凋亡率較 AMBRA1WT顯著下降［36］，均提示 AMBRA1裂解對誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的重要貢獻(xiàn)。如前所述，從AMBRA1 的全長或分裂形式進(jìn)行考量，該蛋白可能處于自噬與凋亡調(diào)節(jié)的交叉點（圖4）。

Figure 3.AMBRA1 is involved in the regulation of（mitochondrial）apoptosis.MOMP：mitochondrial outer membrane permeabilization.圖3 AMBRA1參與調(diào)節(jié)細(xì)胞（線粒體）凋亡

Figure 4.Regulatory effect of AMBRA1 on（mitochondrial）autophagy and apoptosis.圖4 AMBRA1對細(xì)胞（線粒體）自噬與凋亡的調(diào)節(jié)作用

另外，抗凋亡因子Bcl-2 過表達(dá)是人類腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的常見現(xiàn)象，Bcl-2 可通過與beclin-1 直接聯(lián)系［39］或介導(dǎo)隔離促自噬因子 AMBRA1［9］進(jìn)而抑制細(xì)胞自噬。隨后，AMBRA1 被阻斷并裂解為AMBRA1CT，再通過BH3 序列與Bcl-2 結(jié)合以抑制Bcl-2 表達(dá)，但其是否促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡則仍有待進(jìn)一步研究確認(rèn)。近期大量研究結(jié)果表明，多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展均伴隨著ambra1基因突變和（或）蛋白表達(dá)變化，AMBRA1 不僅是癌癥易感性［40］和預(yù)后機(jī)制［41］中不可或缺的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，還可通過與beclin-1、動力蛋白激活蛋白1（dynactin 1，Dctn1）、干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白3（interferon-induced transmembrane protein 3，IFITM3）、Atg12 及促凋亡蛋白 Bim/BCL2L11等因子相互作用，介導(dǎo)自噬和（或）正性/負(fù)性調(diào)控多種化療藥物（如表柔比星、順鉑、紫杉醇等）誘導(dǎo)的自噬或凋亡過程，從而促進(jìn)或抑制癌細(xì)胞存活、增殖和侵襲（表1）［42-50］。由此可見，AMBRA1可能是維持癌細(xì)胞自噬和凋亡之間平衡的調(diào)節(jié)子：一方面，自噬可能是癌細(xì)胞的一種保護(hù)機(jī)制，可降低化療藥物敏感性，導(dǎo)致癌細(xì)胞耐藥，因而AMBRA1介導(dǎo)的自噬對癌細(xì)胞可能具有保護(hù)作用，是癌細(xì)胞耐藥的潛在機(jī)制；另一方面，AMBRA1 亦可能通過調(diào)控其他信號通路（如AMBRA1-Bcl-2 的相互作用）而發(fā)揮抗癌作用。AMBRA1 的靶向促進(jìn)或抑制可能是調(diào)控癌細(xì)胞化療藥物敏感性的有效方法，但其具體作用及相關(guān)機(jī)制仍有待深入研究［22］。

表1 AMBRA1在多類癌癥中的調(diào)節(jié)作用Table 1.The regulatory role of AMBRA1 in multiple types of cancer

4 小結(jié)與展望

AMBRA1 作為一種多功能蛋白，參與多種信號通路介導(dǎo)的病理生理調(diào)控。通過與Bcl-2、beclin-1、PP2A、c-Myc、Dctn1、IFITM3、Atg12 及 Bim 等因子相互作用，它不僅具有促凋亡或抗凋亡活性，且能介導(dǎo)細(xì)胞（線粒體）自噬的發(fā)生，亦可促進(jìn)或抑制癌細(xì)胞存活、增殖和侵襲。而由于AMBRA1 的全長或裂解形式之間存在一定轉(zhuǎn)換，因此它可能處于自噬與凋亡的交叉點并在其中發(fā)揮重要作用。目前，有如下關(guān)鍵問題尚待闡明：（1）AMBRA1 介導(dǎo)線粒體自噬的分子機(jī)制尚不清楚，需探明是否還有更多的自噬相關(guān)蛋白參與其中；（2）為維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)，是否存在某些特定因子參與調(diào)控AMBRA1-Bcl-2 的結(jié)合或解離；（3）在體內(nèi)、體外不同應(yīng)激狀態(tài)下或癌癥模型中，AMBRA1是否與其它E3泛素連接酶及促凋亡因子存在相互作用，它在自噬和凋亡等過程中的不同調(diào)節(jié)作用究竟如何整合至協(xié)調(diào)反應(yīng)之中；（4）可否利用AMBRA1 在癌癥發(fā)生發(fā)展過程中的雙重作用。厘清上述問題將為AMBRA1作為癌癥輔助診療及預(yù)后評估潛在靶點在臨床轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用提供理論與實驗基礎(chǔ)。