• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    膽汁酸譜在肺炎和肺癌鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值

    2021-02-05 07:48:32徐潤灝張舒林
    檢驗(yàn)醫(yī)學(xué) 2021年1期
    關(guān)鍵詞:肺癌血清

    徐潤灝,鄒 琛,張 潔,李 敏,張舒林

    (1.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院,上海 200025;2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科,上海 200001)

    肺癌是我國最常見的惡性腫瘤之一,占惡性腫瘤死亡人數(shù)的25%[1]。血清學(xué)檢查相對(duì)于其他檢查手段,具有簡單、快速、無痛、微創(chuàng)等特點(diǎn),適用于肺癌的初篩及輔助診斷。膽汁酸按結(jié)構(gòu)可分為游離膽汁酸和結(jié)合膽汁酸,按來源又可分為初級(jí)膽汁酸和次級(jí)膽汁酸。初級(jí)膽汁酸是肝細(xì)胞以膽固醇為原料直接合成的膽汁酸,包括膽酸(cholic acid,CA)、鵝脫氧膽酸(chenodeoxycholic acid,CDCA)及相應(yīng)的結(jié)合膽汁酸;次級(jí)膽汁酸由初級(jí)膽汁酸隨膽汁進(jìn)入腸道,在回腸、結(jié)腸上段由腸道菌、酶催化,脫去羥基轉(zhuǎn)化而成,包括脫氧膽酸(deoxycholicacid,DCA)、石膽酸(lithocholic acid,LCA)、熊脫氧膽酸(ursodeoxycholic acid,UDCA)及相應(yīng)的結(jié)合膽汁酸。根據(jù)以往的認(rèn)知,由于膽汁酸主要存在于腸肝循環(huán)系統(tǒng)中,因此關(guān)于膽汁酸譜的研究多與肝膽疾病、腸道疾病相關(guān),與肺部疾病相關(guān)的報(bào)道極少。近年來,有研究結(jié)果顯示,在一些呼吸系統(tǒng)疾病患者中,其支氣管肺泡灌洗液內(nèi)含有較高水平的膽汁酸[2],且合并胃食管反流病的概率也相當(dāng)高[3]。還有研究結(jié)果顯示,法尼醇X受體(farnesoid X receptor,F(xiàn)XR)、G蛋白偶聯(lián)受體5(takeda G protein-coupled receptor 5,TGR5)等膽汁酸受體在肺組織中有不同程度地表達(dá)[4-5],這些膽汁酸受體在肺部參與多種信號(hào)通路的激活[6-9],且在肺癌組織中表達(dá)上調(diào)[8-9]。為此,本研究擬探討血清膽汁酸譜在肺癌中的價(jià)值。

    1 材料和方法

    1.1 研究對(duì)象

    選取2018年9月—2019年6月上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診為原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌的患者108例(肺癌組),其中男75例、女33例,年齡39~84歲;根據(jù)臨床進(jìn)展分為早中期(Ⅰ~Ⅲ期53例)、晚期(Ⅳ期51例);根據(jù)病理分期分為鱗癌(34例)、腺癌(74例);排除已知伴有肝、腸等消化道器官轉(zhuǎn)移的患者。選取經(jīng)檢查排除肺部腫瘤,診斷為肺炎的患者80例(肺炎組),其中男41例、女39例,年齡25~92歲。所有患者均排除肝功能異常、腸道炎癥、膽囊結(jié)石以及腸道切除等病癥,并排除服用過膽汁酸受體激動(dòng)劑及免疫抑制劑者。另選取上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院體檢中心健康體檢者106名(正常對(duì)照組),其中男62名、女44名,年齡41~84歲,入組標(biāo)準(zhǔn):胃腸道功能未見異常,且排除糖尿病、高血壓、慢性肝膽疾病及肝、腎功能等異常。

    1.2 方法

    1.2.1 樣本采集 采用含促凝劑的真空采血管采集所有對(duì)象空腹靜脈血4 mL,2 h內(nèi)16 000×g離心10 min,分離血清。

    1.2.2 膽汁酸譜檢測 采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(liquid chromatography tandemmass spectrometry,LC-MS/MS)檢測膽汁酸譜,包括5種游離膽汁酸(CA、CDCA、DCA、LCA、UDCA)及10種結(jié)合膽汁酸[甘氨膽酸(glycocholic acid,GCA)、甘氨鵝脫氧膽酸(glycochenodeoxycholic acid,GCDCA)、甘氨脫氧膽酸(glycodeoxycholic acid,GDCA)、甘氨石膽酸(glycolithocholic acid,GLCA)、甘氨熊脫氧膽酸(glycoursodeoxycholic acid,GUDCA)、?;悄懰幔╰aurocholic acid,TCA)、?;蛆Z脫氧膽酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)、牛磺脫氧膽酸(taurodeoxycholic acid,TDCA)、?;鞘懰幔╰aurolithocholic acid,TLCA)、?;切苊撗跄懰幔╰auroursodeoxycholic acid,TUDCA)],檢測儀器為API3200MD三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀(美國ABSciex公司)及Shimadzu 20AD液相色譜儀(日本島津公司),試劑購自上??闪γ匪镝t(yī)藥科技有限公司。

    1.2.3 總膽汁酸(total bile acid,TBA)檢測 采用酶循環(huán)法檢測TBA。檢測儀器為7600全自動(dòng)生化分析儀(日本日立公司),試劑購自四川邁克生物股份有限公司。

    1.2.4 腫瘤標(biāo)志物檢測 采用cobas e801全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀(瑞士羅氏公司)及配套試劑(電化學(xué)發(fā)光法)檢測糖類抗原(carbohydrate antigen,CA)125、CA19-9、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、細(xì)胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment,CYFRA 21-1)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用SPSS 22.0軟件及MedCalc 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用K-S檢驗(yàn)進(jìn)行正態(tài)性分布檢驗(yàn)。呈非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)(M)[四分位數(shù)(P25~P75)]表示,組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。采用逐步法二元Logistic回歸分析進(jìn)行相關(guān)性分析并篩選優(yōu)化診斷指標(biāo),根據(jù)Logistic回歸分析結(jié)果,以訓(xùn)練樣本建立診斷模型;以模型Y為新變量,采用受試者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲線評(píng)估診斷模型鑒別診斷肺炎與肺癌的效能,以驗(yàn)證樣本加以驗(yàn)證。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 肺炎組、肺癌組及正常對(duì)照組之間血清膽汁酸譜的比較

    與正常對(duì)照組比較,肺炎組血清游離膽汁酸DCA、LCA、UDCA水平及結(jié)合膽汁酸GDCA、GLCA、TDCA、TLCA水平降低(P<0.01),血清結(jié)合膽汁酸GCDCA、TCDCA水平升高(P<0.01);肺癌組血清游離膽汁酸CA、CDCA水平及結(jié)合膽汁酸GCDCA、TCDCA水平升高(P<0.01),血清結(jié)合膽汁酸TDCA、TLCA水平降低(P<0.01)。血清TBA水平3組之間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。肺癌組血清游離膽汁酸CA、CDCA、DCA、LCA、UDCA及結(jié)合膽汁酸GDCA、GLCA高于肺炎組(P<0.01)。見表1、表2。

    2.2 不同類型及不同分期肺癌患者血清膽汁酸譜的比較

    早中期肺癌組與晚期肺癌組之間、肺鱗癌組和肺腺癌組之間血清TBA及5種游離膽汁酸、10種結(jié)合膽汁酸差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3~表6。

    2.3 肺炎組與肺癌組血清腫瘤標(biāo)志物的比較

    肺癌組血清CEA、CYFRA21-1、NSE水平均明顯高于肺炎組(P<0.01、P<0.05),2個(gè)組之間血清CA125、CA19-9水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表7。

    2.4 膽汁酸譜及腫瘤標(biāo)志物鑒別診斷肺炎與肺癌的價(jià)值

    采用ROC曲線分析肺炎組與肺癌組之間有差異的7種膽汁酸和2種腫瘤標(biāo)志物。結(jié)果顯示,DCA、UDCA、CEA鑒別診斷肺炎與肺癌的曲線下面積(area under curve,AUC)分別為0.781、0.707、0.704,敏感性分別為73.2%、86.1%和62.0%,特異性分別為77.5%、50.0%和72.5%。其他指標(biāo)的AUC均<0.7。見表8。

    表1 肺炎組、肺癌組及正常對(duì)照組之間血清TBA及5種游離膽汁酸水平的比較 M(P25~P75)

    表2 肺炎組、肺癌組及正常對(duì)照組之間血清結(jié)合膽汁酸水平的比較 M(P25~P75)

    表3 早中期肺癌組及晚期肺癌組之間血清TBA及游離膽汁酸水平的比較 M(P25~P75)

    表4 早中期肺癌組及晚期肺癌組之間血清結(jié)合膽汁酸水平的比較 M(P25~P75)

    表5 肺鱗癌組及肺腺癌組之間血清TBA及游離膽汁酸水平的比較 M(P25~P75)

    表6 肺鱗癌組及肺腺癌組之間血清結(jié)合膽汁酸水平的比較 M(P25~P75)

    表7 肺炎組與肺癌組血清5種腫瘤標(biāo)志物水平的比較 M(P25~P75)

    表8 7種膽汁酸和2種腫瘤標(biāo)志物鑒別診斷肺炎與肺癌的價(jià)值

    2.5 肺炎與肺癌鑒別診斷模型的建立

    2.5.1 診斷模型建立 隨機(jī)抽取樣本量的70%組成訓(xùn)練樣本,其中肺炎患者56例、肺癌患者76例。將2個(gè)組之間有差異的9項(xiàng)指標(biāo)(CA、CDCA、DCA、LCA、UDCA、GDCA、GLCA、CEA、CYFRA21-1)納入逐步法二元Logistic回歸分析。結(jié)果顯示,DCA、CDCA、CYFRA-211是鑒別診斷肺炎和肺癌的主要影響因素,見表9。據(jù)此建立診斷模型Y=1/(1+e-LogitP),式中LogitP=0.007×DCA+0.001×CDCA+0.176×CYFRA21-1-2.293,模型系數(shù)綜合檢驗(yàn)和Hosmer-Lemeshow檢驗(yàn)結(jié)果顯示,模型擬合度良好(χ2=62.10,P<0.05;χ2=5.58,P>0.05)。

    2.5.2 診斷模型Y鑒別診斷肺炎與肺癌的效能分析 ROC曲線分析結(jié)果顯示,診斷模型Y鑒別診斷肺炎與肺癌的AUC(95%CI)為0.873(0.804~0.925),最佳臨界值為0.52,敏感性CT)也存在過度診斷、輻射量大等不足[12]。因此,血清學(xué)標(biāo)志物對(duì)肺癌和肺炎的輔助鑒別診斷至關(guān)重要?,F(xiàn)階段肺癌的血清學(xué)篩查和診斷主要依靠CEA、NSE等腫瘤標(biāo)志物,這些腫瘤標(biāo)志物在區(qū)分肺癌患者與健康人時(shí)具有較高的敏感性和特異性[11],但由于大部分腫瘤標(biāo)志物在肺部炎癥時(shí)也會(huì)有不同程度地升高,因此在對(duì)肺癌和肺炎進(jìn)行鑒別診斷時(shí)往往不能達(dá)到令人滿意的效果[13]。

    表9 訓(xùn)練樣本9項(xiàng)指標(biāo)逐步法二元logistic回歸分析結(jié)果

    膽汁酸是膽汁的重要成分,各類游離膽汁酸是FXR、TGR5等膽汁酸受體的主要配體[14],游離膽汁酸的改變會(huì)進(jìn)一步導(dǎo)致結(jié)合膽汁酸的改變。本研究結(jié)果顯示,與正常對(duì)照組比較,肺癌患者血清膽汁酸譜以初級(jí)游離膽汁酸CA、CDCA升高為主要特征,與LIU等[8]的研究結(jié)果基本一致。對(duì)膽汁酸受體的最新研究結(jié)果表明,肺癌患者血清游離膽汁酸水平與癌組織中膽汁酸受體的表達(dá)呈明顯正相關(guān),一些游離膽汁酸可活化肺癌細(xì)胞中的膽汁酸受體,使其表達(dá)升高,而在高于正常水平的情況下,膽汁酸受體能進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤的增殖[8],如FXR能通過激活細(xì)胞周期蛋白-D1促進(jìn)肺部腫瘤的增殖[9],TGR5能通過激活兩面神激酶2(janus kinase 2,JAK2)/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信號(hào)通路刺激肺部腫瘤細(xì)胞的增殖[8]。因此,高水平的游離膽汁酸可能是推動(dòng)肺癌進(jìn)展的原因之一。此外,本研究結(jié)果顯示,肺炎患者血清膽汁酸譜以次級(jí)游離膽汁酸DCA、LCA、UDCA降低為主要特征。在動(dòng)物模型中,膽汁酸受體激動(dòng)劑已被證實(shí)是治療肺部炎癥性纖維化的可能手段[15],膽汁酸受體TGR5可為89.3%,特異性為75.4%,符合率為82.4%。見圖1。

    2.5.3 診斷模型Y的驗(yàn)證 將剩余樣本(肺炎24例、肺癌32例)作為驗(yàn)證樣本,代入診斷模型Y進(jìn)行驗(yàn)證。共檢出18例肺炎患者和25例肺癌患者,總符合率為76.8%,與ROC曲線分析結(jié)果基本符合。

    圖1 診斷模型Y鑒別診斷肺炎與肺癌的ROC曲線

    3 討論

    目前,臨床病理分期,即TNM分期仍是預(yù)測肺癌患者生存時(shí)間最主要的指標(biāo)[1],而高誤診率是肺癌確診時(shí)分期晚、預(yù)后差的主要原因之一。有研究結(jié)果顯示,在我國部分地區(qū),40歲以下人群中肺癌的誤診率可達(dá)50%以上,且主要誤診為肺炎[10]。這是由于肺癌的早期癥狀多為咳嗽、呼吸困難、發(fā)熱等,與肺炎極為相似。胸部X線檢查由于缺乏特異性,常被阻塞性肺炎和肺不張等掩蓋了肺部腫瘤病變的特征[11]。電子計(jì)算機(jī)斷層掃描(computed tomography,通過抑制核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信號(hào)通路的激活來達(dá)到抑制肺部炎癥的效果[6],同時(shí)FXR還可通過抑制脂多糖促進(jìn)的肺部某些促炎細(xì)胞因子的分泌,達(dá)到抑制炎癥的作用,但此過程中會(huì)大量消耗膽汁酸受體[7,16],這可能是一些游離膽汁酸水平降低的原因。

    本研究對(duì)肺癌組和肺炎組的膽汁酸譜進(jìn)行了比較,同時(shí)還納入了5種臨床常用的腫瘤標(biāo)志物,對(duì)膽汁酸譜和常用腫瘤標(biāo)志物的診斷效能進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示,肺癌組與肺炎組之間有5種游離膽汁酸(CA、CDCA、DCA、LCA、UDCA)、2種結(jié)合膽汁酸(GDCA、GLCA)及2種腫瘤標(biāo)志物(CEA、CYFRA21-1)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),單個(gè)指標(biāo)中鑒別診斷效能最好的是DCA,AUC為0.781,敏感性為73.2%,特異性為77.5%。將上述9項(xiàng)指標(biāo)納入逐步法二元Logistic回歸分析,聯(lián)合診斷的最優(yōu)組合是CDCA、DCA、CYFRA21-1,其中CDCA是FXR最有效的內(nèi)源性配體[17];在所有穩(wěn)定參與腸肝循環(huán)的膽汁酸中,DCA是TGR5最強(qiáng)的天然激動(dòng)劑[18];CYFRA21-1是對(duì)非小細(xì)胞肺癌最敏感的腫瘤標(biāo)志物。3項(xiàng)指標(biāo)組成的診斷模型鑒別診斷肺炎與肺癌的敏感性為89.3%,特異性為75.4%,AUC為0.873,診斷效能明顯優(yōu)于單項(xiàng)指標(biāo)。

    本研究結(jié)果顯示,肺炎組、肺癌組與正常對(duì)照組之間血清TBA水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。這可能是由于膽汁酸的合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝過程復(fù)雜,受多種因素調(diào)節(jié),在不同疾病狀態(tài)下膽汁酸的組分呈現(xiàn)不同的改變,而總量卻保持不變所致。肺鱗癌組與肺腺癌組之間、早中期肺癌組與晚期肺癌組之間血清膽汁酸譜差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。因此,血清膽汁酸譜無法區(qū)分肺癌的分期和類型。

    由于本研究未對(duì)小細(xì)胞肺癌與其他良性肺部疾病,如肺結(jié)核等的膽汁酸譜進(jìn)行分析,也尚未納入鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原、胃泌素釋放肽前體等與肺部腫瘤相關(guān)的標(biāo)志物,因此后續(xù)研究將進(jìn)一步擴(kuò)展驗(yàn)證,繼續(xù)揭示膽汁酸譜在肺癌和其他肺部疾病中的作用和意義。

    綜上所述,血清膽汁酸譜的變化與肺部疾病的有一定關(guān)系,膽汁酸譜有成為肺癌診斷標(biāo)志物的潛能。但目前關(guān)于肺癌血清膽汁酸譜的研究很少,因此本研究的結(jié)論和診斷模型還需大樣本、多中心研究加以驗(yàn)證。

    猜你喜歡
    肺癌血清
    中醫(yī)防治肺癌術(shù)后并發(fā)癥
    對(duì)比增強(qiáng)磁敏感加權(quán)成像對(duì)肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤檢出的研究
    血清免疫球蛋白測定的臨床意義
    中老年保健(2021年3期)2021-08-22 06:50:04
    慢性腎臟病患者血清HIF-1α的表達(dá)及臨床意義
    慢性鼻-鼻竇炎患者血清IgE、IL-5及HMGB1的表達(dá)及其臨床意義
    血清IL-6、APC、CRP在膿毒癥患者中的表達(dá)及臨床意義
    血清HBV前基因組RNA的研究進(jìn)展
    PFTK1在人非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義
    microRNA-205在人非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義
    基于肺癌CT的決策樹模型在肺癌診斷中的應(yīng)用
    亚洲专区中文字幕在线| 日韩视频在线欧美| 国产又色又爽无遮挡免| 麻豆av在线久日| 99热网站在线观看| 一本久久精品| www.自偷自拍.com| 国产精品九九99| 欧美精品一区二区免费开放| 各种免费的搞黄视频| 久久 成人 亚洲| 男人爽女人下面视频在线观看| 一个人免费看片子| 性色av乱码一区二区三区2| 99久久国产精品久久久| 91精品国产国语对白视频| 一区二区三区激情视频| 宅男免费午夜| 国产色视频综合| 中文字幕最新亚洲高清| 成人国产一区最新在线观看| 99国产精品免费福利视频| 免费看十八禁软件| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 欧美av亚洲av综合av国产av| 黄频高清免费视频| 亚洲国产欧美在线一区| 欧美日韩精品网址| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 丝袜人妻中文字幕| 两个人看的免费小视频| 亚洲三区欧美一区| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 欧美精品一区二区免费开放| av国产精品久久久久影院| 亚洲精品在线美女| 岛国毛片在线播放| 色婷婷av一区二区三区视频| 国产精品久久久久成人av| 精品人妻1区二区| 久久精品人人爽人人爽视色| 99久久精品国产亚洲精品| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 免费在线观看影片大全网站| 成年人免费黄色播放视频| 亚洲人成电影观看| 十分钟在线观看高清视频www| tocl精华| 视频区图区小说| 亚洲五月婷婷丁香| 在线观看免费日韩欧美大片| 桃红色精品国产亚洲av| tocl精华| 一级片'在线观看视频| 黄色怎么调成土黄色| 窝窝影院91人妻| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 丝袜美足系列| 一级毛片女人18水好多| 一区二区三区乱码不卡18| 精品福利观看| 99久久综合免费| 国精品久久久久久国模美| av在线播放精品| 色播在线永久视频| 国产日韩欧美视频二区| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产精品一区二区精品视频观看| 久久久久久免费高清国产稀缺| 精品人妻1区二区| 十八禁网站网址无遮挡| 久久久久国内视频| 亚洲成国产人片在线观看| av天堂久久9| netflix在线观看网站| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 成人国产一区最新在线观看| 一区二区日韩欧美中文字幕| 啦啦啦 在线观看视频| 高清黄色对白视频在线免费看| 久久香蕉激情| 亚洲国产欧美在线一区| 日日爽夜夜爽网站| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 桃花免费在线播放| 水蜜桃什么品种好| 国产一区二区三区综合在线观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产成人a∨麻豆精品| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 一本久久精品| 国产91精品成人一区二区三区 | 我的亚洲天堂| 91成人精品电影| 在线看a的网站| 亚洲avbb在线观看| 蜜桃国产av成人99| 国产亚洲精品久久久久5区| av网站在线播放免费| 手机成人av网站| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 欧美另类一区| 国产高清视频在线播放一区 | 9色porny在线观看| 亚洲av成人一区二区三| 麻豆乱淫一区二区| 久久人人97超碰香蕉20202| 精品人妻在线不人妻| 成年美女黄网站色视频大全免费| 精品福利永久在线观看| 午夜福利在线观看吧| 女警被强在线播放| 高清av免费在线| 国产一区二区 视频在线| 一本久久精品| 欧美日韩亚洲高清精品| 少妇被粗大的猛进出69影院| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 夜夜夜夜夜久久久久| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 妹子高潮喷水视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 啦啦啦免费观看视频1| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国产三级黄色录像| 精品免费久久久久久久清纯 | 多毛熟女@视频| 看免费av毛片| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产欧美日韩一区二区三 | 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 制服人妻中文乱码| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 欧美精品人与动牲交sv欧美| 日本vs欧美在线观看视频| 久久热在线av| 一二三四在线观看免费中文在| 欧美成人午夜精品| 嫩草影视91久久| 两个人免费观看高清视频| 国产91精品成人一区二区三区 | videosex国产| 91av网站免费观看| 麻豆av在线久日| 免费不卡黄色视频| 黄色a级毛片大全视频| 午夜日韩欧美国产| 在线观看www视频免费| 一个人免费看片子| 久久中文看片网| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产一区二区三区av在线| 国产成人啪精品午夜网站| 一本综合久久免费| 中文字幕制服av| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲黑人精品在线| 欧美激情高清一区二区三区| 成在线人永久免费视频| 两性夫妻黄色片| 婷婷丁香在线五月| 精品一区二区三区av网在线观看 | 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 亚洲熟女精品中文字幕| 国产97色在线日韩免费| 精品第一国产精品| 亚洲成人手机| 欧美精品亚洲一区二区| 在线观看人妻少妇| 国产91精品成人一区二区三区 | 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 久久久国产一区二区| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产精品久久久久久精品古装| 国产主播在线观看一区二区| 国产成人精品无人区| 亚洲免费av在线视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲精品国产av蜜桃| 亚洲精品美女久久av网站| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 精品卡一卡二卡四卡免费| 动漫黄色视频在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 久久久久国产一级毛片高清牌| 大片免费播放器 马上看| 日本91视频免费播放| 久久亚洲国产成人精品v| 性高湖久久久久久久久免费观看| 高清黄色对白视频在线免费看| 在线av久久热| 老司机影院成人| 亚洲全国av大片| 午夜福利,免费看| 国产精品 国内视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 久久ye,这里只有精品| 亚洲 欧美一区二区三区| 美女福利国产在线| 青春草亚洲视频在线观看| 人妻久久中文字幕网| 少妇人妻久久综合中文| 国产精品 国内视频| 欧美xxⅹ黑人| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产91精品成人一区二区三区 | 看免费av毛片| 国产av国产精品国产| 国产99久久九九免费精品| 国产人伦9x9x在线观看| 亚洲精品乱久久久久久| 又大又爽又粗| 亚洲熟女精品中文字幕| 大香蕉久久成人网| 在线观看免费日韩欧美大片| av超薄肉色丝袜交足视频| 国产男女超爽视频在线观看| 精品久久久精品久久久| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 免费在线观看完整版高清| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美黄色淫秽网站| 久久热在线av| 一级黄色大片毛片| 国产91精品成人一区二区三区 | 国产成人一区二区三区免费视频网站| 精品少妇内射三级| 亚洲五月色婷婷综合| 午夜视频精品福利| 欧美激情 高清一区二区三区| 久久精品亚洲av国产电影网| 两个人看的免费小视频| 热re99久久精品国产66热6| 一二三四社区在线视频社区8| 国产一区二区三区av在线| 黑人欧美特级aaaaaa片| 色婷婷久久久亚洲欧美| 十八禁高潮呻吟视频| 免费观看人在逋| 久久久久国产一级毛片高清牌| 欧美性长视频在线观看| 精品一区二区三卡| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 老汉色∧v一级毛片| 高清视频免费观看一区二区| 51午夜福利影视在线观看| 人妻久久中文字幕网| 亚洲av片天天在线观看| 成人av一区二区三区在线看 | 国产97色在线日韩免费| xxxhd国产人妻xxx| 美女视频免费永久观看网站| 久久久水蜜桃国产精品网| 国产欧美日韩一区二区精品| 黄色毛片三级朝国网站| 国产成人欧美| 精品少妇黑人巨大在线播放| 大香蕉久久成人网| 十分钟在线观看高清视频www| netflix在线观看网站| 男女午夜视频在线观看| 国产成人精品无人区| 欧美中文综合在线视频| 99国产精品一区二区三区| av在线老鸭窝| 欧美激情高清一区二区三区| 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 9热在线视频观看99| 两个人免费观看高清视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 精品欧美一区二区三区在线| 欧美性长视频在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 狠狠狠狠99中文字幕| 午夜成年电影在线免费观看| 国产精品免费视频内射| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 女人精品久久久久毛片| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 亚洲中文av在线| 国产极品粉嫩免费观看在线| 午夜福利视频精品| 乱人伦中国视频| cao死你这个sao货| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 不卡av一区二区三区| 精品人妻在线不人妻| 久久久国产成人免费| 无限看片的www在线观看| 他把我摸到了高潮在线观看 | 一区二区三区精品91| 成人国语在线视频| 黄色毛片三级朝国网站| 涩涩av久久男人的天堂| 久久久久久久久久久久大奶| av在线播放精品| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 成年美女黄网站色视频大全免费| 高清在线国产一区| 免费在线观看影片大全网站| 香蕉丝袜av| 成年女人毛片免费观看观看9 | 国产xxxxx性猛交| 亚洲av国产av综合av卡| 亚洲色图综合在线观看| 无遮挡黄片免费观看| 中国美女看黄片| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 午夜福利视频在线观看免费| 久久久久久久久久久久大奶| 青青草视频在线视频观看| 国产淫语在线视频| 国产激情久久老熟女| 亚洲成人免费av在线播放| 精品国产一区二区久久| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 视频区图区小说| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 欧美精品一区二区大全| 9热在线视频观看99| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲专区字幕在线| 亚洲第一青青草原| 一区二区av电影网| 久久影院123| 老司机靠b影院| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 青春草亚洲视频在线观看| 亚洲成人免费av在线播放| 一级片免费观看大全| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 日本91视频免费播放| 69av精品久久久久久 | 99久久综合免费| 不卡一级毛片| 啦啦啦 在线观看视频| 又大又爽又粗| 多毛熟女@视频| 久久久国产精品麻豆| 一级,二级,三级黄色视频| 91麻豆av在线| 又黄又粗又硬又大视频| 成年av动漫网址| 日韩三级视频一区二区三区| 国产黄色免费在线视频| 成人三级做爰电影| 国产精品久久久久久精品古装| www.av在线官网国产| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 狂野欧美激情性bbbbbb| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 桃花免费在线播放| 麻豆乱淫一区二区| 99精国产麻豆久久婷婷| 青春草亚洲视频在线观看| 国产亚洲精品第一综合不卡| 成人手机av| 久久久精品区二区三区| 久9热在线精品视频| 婷婷成人精品国产| 国产av又大| 超碰97精品在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 久久久久国产精品人妻一区二区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 天堂俺去俺来也www色官网| 免费人妻精品一区二区三区视频| 999精品在线视频| 一区在线观看完整版| 婷婷成人精品国产| 国产国语露脸激情在线看| 成人国产一区最新在线观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 午夜福利视频在线观看免费| 久久久国产一区二区| 男女无遮挡免费网站观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 精品一区二区三卡| 国产精品 欧美亚洲| 国产免费av片在线观看野外av| 亚洲欧洲日产国产| 宅男免费午夜| av国产精品久久久久影院| 国产精品九九99| 中文字幕高清在线视频| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 久久久久网色| 丝袜人妻中文字幕| 蜜桃国产av成人99| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 丝袜喷水一区| 一级片'在线观看视频| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 他把我摸到了高潮在线观看 | 欧美成人午夜精品| 波多野结衣一区麻豆| 午夜精品国产一区二区电影| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 午夜福利视频在线观看免费| 美女扒开内裤让男人捅视频| 热99久久久久精品小说推荐| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 99久久综合免费| 欧美激情高清一区二区三区| 无限看片的www在线观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 黑人猛操日本美女一级片| 午夜视频精品福利| 51午夜福利影视在线观看| 咕卡用的链子| 美女午夜性视频免费| 精品国产乱码久久久久久男人| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 精品视频人人做人人爽| 国产成人欧美在线观看 | 久久久久国产一级毛片高清牌| 韩国精品一区二区三区| 国产精品偷伦视频观看了| av不卡在线播放| kizo精华| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 99久久综合免费| 蜜桃在线观看..| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产深夜福利视频在线观看| 成年美女黄网站色视频大全免费| av在线播放精品| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 午夜福利视频精品| 亚洲av美国av| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲第一av免费看| 男女下面插进去视频免费观看| 亚洲情色 制服丝袜| 欧美激情极品国产一区二区三区| 一本大道久久a久久精品| 国产成人精品久久二区二区91| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲天堂av无毛| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲综合色网址| 国产91精品成人一区二区三区 | 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 最黄视频免费看| 在线观看人妻少妇| 老司机福利观看| 国产精品久久久av美女十八| 亚洲国产av影院在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 天堂中文最新版在线下载| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产不卡av网站在线观看| 亚洲av男天堂| 动漫黄色视频在线观看| 老司机影院毛片| 人人澡人人妻人| h视频一区二区三区| 久久久久视频综合| 亚洲成人免费av在线播放| 国产区一区二久久| 亚洲成人免费av在线播放| 99热网站在线观看| 97在线人人人人妻| 国产成人免费观看mmmm| 日本五十路高清| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产精品久久久久久精品古装| 免费高清在线观看视频在线观看| 免费日韩欧美在线观看| 午夜福利免费观看在线| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 午夜福利,免费看| av天堂久久9| 国产不卡av网站在线观看| 男女高潮啪啪啪动态图| 丝瓜视频免费看黄片| 大型av网站在线播放| 国产日韩欧美视频二区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产片内射在线| 亚洲中文av在线| netflix在线观看网站| 国产精品一区二区在线观看99| 国产成人免费无遮挡视频| 成年美女黄网站色视频大全免费| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产黄频视频在线观看| 国产精品久久久久久精品古装| 99久久国产精品久久久| 一区二区日韩欧美中文字幕| av国产精品久久久久影院| 国产伦人伦偷精品视频| 性色av一级| 夜夜夜夜夜久久久久| 他把我摸到了高潮在线观看 | 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 欧美久久黑人一区二区| 国产有黄有色有爽视频| 天堂俺去俺来也www色官网| 日本vs欧美在线观看视频| 少妇被粗大的猛进出69影院| 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲国产欧美一区二区综合| 中文字幕制服av| 大片电影免费在线观看免费| 亚洲久久久国产精品| 中文字幕精品免费在线观看视频| 久久精品亚洲av国产电影网| 亚洲成人免费av在线播放| 成人影院久久| 国产精品av久久久久免费| 麻豆乱淫一区二区| 国产区一区二久久| 人妻一区二区av| 中文字幕精品免费在线观看视频| 久久九九热精品免费| 欧美av亚洲av综合av国产av| 色视频在线一区二区三区| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲熟女毛片儿| 最新在线观看一区二区三区| 午夜福利,免费看| 亚洲精品国产av成人精品| 国产精品偷伦视频观看了| 精品亚洲成国产av| 欧美久久黑人一区二区| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲精品一二三| 一本综合久久免费| 成年人黄色毛片网站| 天天影视国产精品| 日日夜夜操网爽| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 亚洲中文字幕日韩| 桃花免费在线播放| 男女床上黄色一级片免费看| 老司机影院成人| 精品熟女少妇八av免费久了| 国产主播在线观看一区二区| 国产成人精品久久二区二区免费| 18在线观看网站| 十八禁高潮呻吟视频| 国产一区二区 视频在线| 国产伦人伦偷精品视频| 少妇粗大呻吟视频| 欧美中文综合在线视频| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 天堂中文最新版在线下载| 999精品在线视频| 人妻久久中文字幕网| 美女高潮到喷水免费观看| 久热爱精品视频在线9| 精品一区二区三区四区五区乱码| 宅男免费午夜| 99国产精品一区二区三区| 中文字幕人妻熟女乱码| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产精品偷伦视频观看了| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 国产黄色免费在线视频| 免费黄频网站在线观看国产| xxxhd国产人妻xxx| 一级片免费观看大全| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 中文字幕制服av| 亚洲avbb在线观看| 国产男女超爽视频在线观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 午夜激情久久久久久久| 91成年电影在线观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 美女高潮到喷水免费观看| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 国产精品亚洲av一区麻豆| 一二三四社区在线视频社区8| 午夜激情av网站| 最新在线观看一区二区三区| 国产一区二区三区综合在线观看| 无限看片的www在线观看| 亚洲人成电影观看| 男人舔女人的私密视频| 在线av久久热| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 国产在线视频一区二区|