血清SARS-CoV-2特異性抗體檢測(cè)研究進(jìn)展

王 維 綜述，周 取，劉文彬 審校

(1.重慶市第六人民醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心，重慶 400060；2.重慶大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院肝膽胰腫瘤科，重慶 400030)

國(guó)內(nèi)最先將新型冠狀病毒(2019-nCoV)引起的下呼吸道感染稱作新型冠狀病毒性肺炎(NCP)，隨后世界衛(wèi)生組織將NCP重新命名為COVID-19，2019-nCoV也被國(guó)際病毒分類學(xué)委員會(huì)改名為SARS-CoV-2[1]。截至2020年10月8日，SARS-CoV-2在全世界范圍內(nèi)累積感染人數(shù)已超過(guò)3 000萬(wàn)，感染所致死亡人數(shù)超過(guò)100萬(wàn)人，波及100多個(gè)國(guó)家。COVID-19疫情的暴發(fā)也引起了研究者的關(guān)注，并迅速?gòu)娜藲獾郎掀ぜ?xì)胞內(nèi)分離確定了病原體[2]。該病毒存在人與人之間傳播的高風(fēng)險(xiǎn)[3]。因此，及時(shí)對(duì)攜帶者或感染者進(jìn)行診斷對(duì)控制疫情和疾病治療都至關(guān)重要。COVID-19患者常見(jiàn)的臨床癥狀包括發(fā)燒、咳嗽、肌痛或乏力，與其他病毒感染癥狀相似，臨床主要依賴于實(shí)驗(yàn)室結(jié)果進(jìn)行診斷。SARS-CoV-2核酸逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)測(cè)試已成為當(dāng)前診斷COVID-19的主要方法，其具有靈敏度高、特異性好、可早期診斷等優(yōu)勢(shì)[4-5]。研究顯示，SARS-CoV-2受體在肺泡上皮細(xì)胞表達(dá)最多，在氣道上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等表達(dá)較低，因此肺泡灌洗液為最佳檢測(cè)標(biāo)本，其次為痰液，而臨床最常見(jiàn)的檢測(cè)標(biāo)本為咽拭子[6]，容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果，影響疾病的診斷和治療。此外，SARS-CoV-2核酸檢測(cè)對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全要求較高，操作煩瑣且檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)[7]，也增加了醫(yī)務(wù)人員職業(yè)暴露的風(fēng)險(xiǎn)。此外，核酸檢測(cè)還易受試劑檢測(cè)性能、人員技術(shù)等多方面影響[8]。因此，SARS-CoV-2核酸檢測(cè)不適用于對(duì)COVID-19的快速診斷和大規(guī)模疾病篩查，迫切需要其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)來(lái)提高診斷效率。隨著對(duì)SARS-CoV-2的流行病學(xué)研究和診療經(jīng)驗(yàn)積累，SARS-CoV-2特異性抗體已經(jīng)與核酸檢測(cè)、病毒基因測(cè)序列一起被列為COVID-19確診的病原學(xué)證據(jù)之一[9]。本文將綜述目前批準(zhǔn)上市廠家的SARS-CoV-2抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)效能評(píng)估，為該檢測(cè)項(xiàng)目的開(kāi)展和方法學(xué)選擇提供理論依據(jù)。

1 SARS-CoV-2抗體檢測(cè)的意義及現(xiàn)狀

在病毒感染后，宿主免疫系統(tǒng)將通過(guò)B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的血清學(xué)特異性抗體，與病原微生物表面的抗原結(jié)合，阻止與靶細(xì)胞受體結(jié)合侵入細(xì)胞。病毒入侵后1周左右開(kāi)始產(chǎn)生免疫球蛋白M(IgM)，其濃度較低，持續(xù)時(shí)間短，是感染急性期較好的標(biāo)志；IgG產(chǎn)生相對(duì)較晚，其濃度高，維持時(shí)間也長(zhǎng)，是感染中、后期及既往感染的重要標(biāo)志物[10-11]。因此，抗體檢測(cè)對(duì)于疾病的輔助診斷和分期都意義重大。目前血清學(xué)特異性抗體檢測(cè)作為感染性疾病的輔助診斷指標(biāo)已運(yùn)用廣泛，如艾滋病病毒、乙型肝炎病毒、梅毒螺旋體等抗體的檢測(cè)。由于疫情進(jìn)展迅速，急需提高診斷效率，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局(CFDA)特為SARS-CoV-2相關(guān)診斷試劑提供綠色通道，應(yīng)急審批了相關(guān)檢測(cè)產(chǎn)品，其中陸續(xù)有膠體金法、化學(xué)發(fā)光法的商品化抗體診斷試劑被批準(zhǔn)上市，但是血清學(xué)特異性抗體作為確診指標(biāo)的準(zhǔn)確性還需要更多的臨床數(shù)據(jù)予以驗(yàn)證。據(jù)CFDA官網(wǎng)顯示，截至2020年3月16日，CFDA共批準(zhǔn)SARS-CoV-2抗體檢測(cè)試劑9個(gè)，包括6家膠體金免疫層析法和3家公司的化學(xué)發(fā)光法SARS-CoV-2特異性抗體檢測(cè)試劑盒，另還有諸如鄭州安圖生物工程有限公司、深圳亞輝龍生物科技有限公司等公司特異性抗體診斷產(chǎn)品已進(jìn)入臨床驗(yàn)證階段。

多數(shù)患者在核酸轉(zhuǎn)陰后抗體在一段時(shí)間內(nèi)將持續(xù)存在，因此，抗體檢測(cè)對(duì)疫情的回顧性診斷和流行病學(xué)調(diào)查具有重要意義。SARS-CoV-2作為一種全新的病毒，其感染后IgM和IgG抗體的消長(zhǎng)情況還鮮有報(bào)道。此外，SARS-CoV-2抗體檢測(cè)還可用于研究隱性攜帶者人群比例，無(wú)癥狀病毒攜帶者是否因體內(nèi)產(chǎn)生抗體而無(wú)癥狀，不同臨床癥狀與機(jī)體產(chǎn)生抗體的關(guān)系和應(yīng)用抗體陽(yáng)性血漿治療重癥COVID-19患者的研究等[12]。

2 膠體金免疫層析技術(shù)檢測(cè)SARS-CoV-2抗體的研究現(xiàn)狀

膠體金免疫層析技術(shù)(膠體金法)是一種將膠體金標(biāo)記技術(shù)、免疫檢測(cè)技術(shù)和層析分析技術(shù)等多種方法有機(jī)結(jié)合在一起的固相標(biāo)記免疫檢測(cè)技術(shù)。其原理為標(biāo)記物與待測(cè)物結(jié)合被相應(yīng)的配體捕獲而濃集顯色，以纖維膜上顯色帶的有無(wú)進(jìn)行定性檢測(cè)。經(jīng)過(guò)30多年的發(fā)展，膠體金免疫層析技術(shù)的不斷成熟，不僅運(yùn)用于激素、疾病相關(guān)蛋白、病原微生物抗原抗體、藥物濃度等的監(jiān)測(cè)[13]，還被廣泛應(yīng)用于電鏡水平研究、光顯微細(xì)胞化學(xué)、免疫沉淀及蛋白質(zhì)染色技術(shù)上，并且被引進(jìn)免疫診斷工業(yè)領(lǐng)域中，尤其是在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域[14]。膠體金法以其操作簡(jiǎn)便、加樣量少、特異性強(qiáng)、反應(yīng)速度快和無(wú)須特殊儀器等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用，已成為目前進(jìn)行快速診斷的主要方法之一。目前上市的膠體金法SARS-CoV-2血清學(xué)特異抗體檢測(cè)試劑盒可定性檢測(cè)人血清、血漿、全血樣本中SARS-CoV-2的IgM和IgG抗體。試劑盒操作簡(jiǎn)單，15 min即可肉眼判讀結(jié)果，能在患者感染的第7天或發(fā)病的第3天檢測(cè)出lgM抗體，可更有效評(píng)估疑似病例，作為核酸檢測(cè)的補(bǔ)充或協(xié)同能夠突破現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)對(duì)場(chǎng)地和操作人員的限制。

由于COVID-19疫情突發(fā)且進(jìn)展迅速，各廠家研發(fā)時(shí)間較短，現(xiàn)市場(chǎng)上的檢測(cè)試劑盒性能良莠不齊。梁穎等[15]對(duì)北京英諾特生物技術(shù)有限公司SARS-CoV-2膠體金檢測(cè)試劑盒進(jìn)行了性能評(píng)估，發(fā)現(xiàn)在236例COVID-19確診組中，英諾特公司試劑檢測(cè)IgM靈敏度為73.31%，特異性為100.00%；檢測(cè)IgG靈敏度為85.59%，特異性為96.61%?？梢?jiàn)該公司SARS-CoV-2抗體檢測(cè)試劑總體符合率較好，其中IgG抗體檢測(cè)靈敏度高于IgM抗體，這可能與IgM本身存在時(shí)間短、含量低相關(guān)。梁穎等[15]也對(duì)北京英諾特和廣州萬(wàn)孚生物技術(shù)有限公司膠體金法SARS-CoV-2抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)性能進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)北京英諾特和廣州萬(wàn)孚這2種檢測(cè)試劑的靈敏度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值和準(zhǔn)確性等檢測(cè)效能指標(biāo)無(wú)顯著差異。但廣州萬(wàn)孚公司試劑只能檢測(cè)SARS-CoV-2總抗體，不能有效區(qū)分IgM和IgG，對(duì)于現(xiàn)癥感染和既往感染無(wú)法鑒別。此外，該研究還發(fā)現(xiàn)英諾特和萬(wàn)孚公司在陰性照組中均檢出2例相同的抗體陽(yáng)性標(biāo)本。隨訪后發(fā)現(xiàn)該2例患者有糖尿病、高血壓等基礎(chǔ)疾病，長(zhǎng)期服用藥物。提示對(duì)于有基礎(chǔ)疾病，長(zhǎng)期服用藥物，或是存在自身免疫性疾病等患者，膠體金法的檢測(cè)抗體結(jié)果需結(jié)合其他確診指標(biāo)進(jìn)行綜合分析。

徐云云等[16]對(duì)北京熱景生物技術(shù)公司膠體金法SARS-CoV-2抗體檢測(cè)試劑進(jìn)行性能驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)該公司IgM抗體試劑靈敏度為81.25%(65/80)，特異性為96.00%(48/50)。但鄧杰倫等[17]同樣采用北京熱景公司膠體金法SARS-CoV-2抗體檢測(cè)試劑進(jìn)行臨床檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)IgM抗體試劑靈敏度僅為50.00%(16/32)，特異性為90.91%(40/44)，與徐云云等[16]的靈敏度驗(yàn)證結(jié)果不同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001 9)。導(dǎo)致兩篇研究結(jié)果不同的原因可能有以下幾個(gè)方面：(1)鄧杰倫等[17]對(duì)該試劑盒進(jìn)行臨床驗(yàn)證時(shí)標(biāo)本數(shù)量較少，存在抽樣誤差；(2)檢測(cè)操作的影響，由于實(shí)驗(yàn)室由多名工作人員操作，加樣量不統(tǒng)一，判定時(shí)間不統(tǒng)一，肉眼判斷也有一定的隨意性；(3)環(huán)境影響，如疫情發(fā)生在冬季，試劑性能受環(huán)境溫度影響大等。

總結(jié)上述CFDA批準(zhǔn)的SARS-CoV-2膠體金法檢測(cè)抗體試劑盒的性能驗(yàn)證結(jié)果(表1)并進(jìn)行分析。因各公司試劑檢測(cè)的抗體種類存在差異，如北京英諾特公司可分別檢測(cè)IgM和IgG，北京熱景公司可檢測(cè)IgM和總抗體，而廣州萬(wàn)孚公司只能檢測(cè)總抗體，故選擇了綜合指標(biāo)(總抗體)對(duì)各試劑盒的診斷效能進(jìn)行評(píng)估。分析后發(fā)現(xiàn)：(1)3家公司的SARS-CoV-2抗體檢測(cè)試劑特異性并無(wú)差異；(2)北京英諾特公司和廣州萬(wàn)孚公司的SARS-CoV-2抗體檢測(cè)靈敏度明顯高于北京熱景公司，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.019 6、0.044 6)。見(jiàn)表2。但此次北京熱景公司統(tǒng)計(jì)樣本量少。北京英諾特公司和廣州萬(wàn)孚公司的SARS-CoV-2抗體檢測(cè)靈敏度無(wú)差異。

總體來(lái)說(shuō)，膠體金法檢測(cè)IgM、IgG和總抗體的靈敏度約為80%，難以避免假陰性結(jié)果產(chǎn)生，分析其原因可能有：(1)COVID-19患者體內(nèi)抗體濃度低于試劑盒檢測(cè)下限；(2)COVID-19患者因個(gè)體免疫應(yīng)答因素產(chǎn)生抗體障礙；(3)IgM抗體在感染后較快產(chǎn)生但卻在2周后開(kāi)始減少并消失，而在進(jìn)行測(cè)試時(shí)很難準(zhǔn)確了解患者的感染時(shí)間，若測(cè)試時(shí)抗體已經(jīng)消失可能無(wú)法檢測(cè)到。因此，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)膠體金法SARS-CoV-2抗體檢測(cè)試劑盒的研究與開(kāi)發(fā)從而提高其診斷敏感性。從上述SARS-CoV-2抗體檢測(cè)試劑性能驗(yàn)證數(shù)據(jù)中可見(jiàn)，各公司檢測(cè)試劑雖靈敏度存在差異，但特異性均較高，可與核酸特異性相近[18]，能滿足臨床要求[19]。

綜上所述，與核酸檢測(cè)相比，膠體金法檢測(cè)SARS-CoV-2抗體簡(jiǎn)單快速，對(duì)設(shè)備硬件要求不高，可進(jìn)行床邊檢測(cè)，也可在診所、實(shí)驗(yàn)室、機(jī)場(chǎng)和火車站、基層醫(yī)院或野外等特定場(chǎng)合開(kāi)展檢測(cè)。對(duì)于篩查無(wú)癥狀SARS-CoV-2攜帶者、疑似患者，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。此外，膠體金法檢測(cè)SARS-CoV-2抗體的另一潛在應(yīng)用是篩查無(wú)癥狀SARS-CoV-2攜帶者，這對(duì)控制COVID-19疫情的傳播至關(guān)重要。然而，膠體金法檢測(cè)試劑受環(huán)境溫度、臨床送檢樣品性狀不一致等因素影響，具體操作規(guī)程有待進(jìn)一步標(biāo)準(zhǔn)化。膠體金法檢測(cè)抗體還存在重復(fù)性欠佳，試劑批間差較大，不能準(zhǔn)確定量，檢測(cè)成分較單一等缺點(diǎn)[20]。因此，在選擇膠體金法進(jìn)行SARS-CoV-2抗體檢測(cè)時(shí)，應(yīng)充分考慮其利弊。未來(lái)膠體金法在提高靈敏度和特異性同時(shí)，也將由定性向定量檢測(cè)和多元檢測(cè)的方向發(fā)展，這種簡(jiǎn)單快速的檢測(cè)技術(shù)將會(huì)得到更加廣泛的應(yīng)用。

表1 3家公司膠體金法檢測(cè)血清 SARS-CoV-2總抗體結(jié)果(n)

表2 3家公司膠體金法檢測(cè)血清 SARS-CoV-2總抗體靈敏度和特異性(%)

3 化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)技術(shù)檢測(cè)SARS-CoV-2抗體的研究現(xiàn)狀

CLIA是目前最先進(jìn)的免疫檢測(cè)技術(shù)之一，具有高靈敏度、快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。CLIA現(xiàn)已廣泛運(yùn)用于檢驗(yàn)科的日常工作中，如各種感染性抗體、激素、腫瘤標(biāo)志物、藥物濃度監(jiān)測(cè)等微量物質(zhì)的檢測(cè)[21]。自COVID-19疫情暴發(fā)，國(guó)內(nèi)多家公司先后研制出SARS-CoV-2抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒，且部分已獲得CFDA批準(zhǔn)。下文將根據(jù)目前公開(kāi)數(shù)據(jù)對(duì)博奧賽斯(天津)生物科技有限公司、深圳亞輝龍公司、廈門(mén)萬(wàn)泰滄海生物技術(shù)有限公司的SARS-CoV-2抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑進(jìn)行臨床診斷效能評(píng)估，為臨床應(yīng)用提供參考。

博奧賽斯(天津)公司在4家醫(yī)療機(jī)構(gòu)對(duì)其公司的SARS-CoV-2 IgM、IgG抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑(磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法)進(jìn)行了臨床研究(數(shù)據(jù)摘自產(chǎn)品說(shuō)明書(shū))。結(jié)果顯示，SARS-CoV-2 IgM抗體檢測(cè)試劑盒靈敏度為88.30%，特異性為99.50%；SARS-CoV-2 IgG抗體檢測(cè)試劑盒臨床靈敏度為87.23%，特異性為99.25%；IgM和IgG抗體檢測(cè)試劑盒聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，靈敏度為94.33%，特異性為99.50%；對(duì)常見(jiàn)15種病毒無(wú)交叉反應(yīng)。該公司試劑用于定性檢測(cè)人血清樣本中SARS-CoV-2 IgM和IgG抗體，其明確指出該試劑僅用作對(duì)新型冠狀病毒核酸檢測(cè)陰性疑似病例的補(bǔ)充檢測(cè)指標(biāo)或疑似病例診斷中與核酸檢測(cè)協(xié)同使用，不適用于一般人群的篩查。

深圳亞輝龍公司對(duì)其SARS-CoV-2 IgM和IgG試劑在13家醫(yī)院進(jìn)行了診斷效能評(píng)估，結(jié)果顯示，IgM試劑靈敏度和特異性分別為86.6%和98.3%；IgG試劑靈敏度和特異性分別為96.3%和97.4%(數(shù)據(jù)來(lái)源：檢驗(yàn)視界網(wǎng))。徐萬(wàn)洲等[22]對(duì)深圳亞輝龍公司試劑進(jìn)行性能驗(yàn)證后發(fā)現(xiàn)：SARS-CoV-2 IgM抗體靈敏度和特異性為70.24%和96.20%；SARS-CoV-2 IgG靈敏度和特異性分別為96.10%和92.41%。李泉等[23]也對(duì)該公司SARS-CoV-2抗體進(jìn)行了臨床評(píng)估，發(fā)現(xiàn)SARS-CoV-2 IgM和IgG抗體臨床靈敏度高達(dá)96%；臨床特異性為100%。該研究認(rèn)為化學(xué)發(fā)光檢測(cè)SARS-CoV-2 IgM和IgG抗體對(duì)COVID-19患者特別是疑似COVID-19患者無(wú)論在確診和排除方面都將是對(duì)核酸檢測(cè)方法不足的補(bǔ)充。另唐鵬等[24]采用廈門(mén)萬(wàn)泰公司Caris200系列檢測(cè)了核酸持續(xù)陽(yáng)性、核酸陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰和核酸陰性疑似患者SARS-CoV-2總抗體水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：核酸持續(xù)陽(yáng)性組，檢測(cè)靈敏度為87.5%，特異性為100.0%；核酸陽(yáng)轉(zhuǎn)陰組，檢測(cè)靈敏度為95.2%，特異性為100.0%；核酸陰性疑似組，檢測(cè)靈敏度為94.9%，特異性為100.0%。作者就目前臨床診療中最棘手的咽拭子核酸持續(xù)陰性的疑似病例進(jìn)行了研究，結(jié)果表明SARS-CoV-2總抗體檢出率高達(dá)94.9%，很大程度彌補(bǔ)了核酸檢測(cè)的假陰性。

化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)系統(tǒng)除靈敏度高外，多數(shù)公司試劑還可對(duì)SARS-CoV-2抗體進(jìn)行定量檢測(cè)，以便提示病情發(fā)展?！缎滦凸跔畈《痉窝自\療方案(試行第七版)》中確診病例中提出“血清新型冠狀病毒特異性IgG抗體恢復(fù)期較急性期4倍及以上升高”，即需要對(duì)抗體進(jìn)行定量檢測(cè)。此外，有研究檢測(cè)了COVID-19患者咽拭子SARS-CoV-2核酸陽(yáng)性和核酸轉(zhuǎn)陰時(shí)血清IgM和IgG抗體的濃度變化，發(fā)現(xiàn)核酸轉(zhuǎn)陰后患者血清IgM抗體濃度明顯低于轉(zhuǎn)陰前，但血清IgG抗體在核酸轉(zhuǎn)陰前后無(wú)明顯差異[16]。通常人體感染病毒后IgM和IgG水平會(huì)發(fā)生規(guī)律變化，若IgM抗體濃度逐漸降低，而IgG抗體濃度持續(xù)陽(yáng)性，說(shuō)明患者已經(jīng)產(chǎn)生相應(yīng)的免疫力，正向痊愈方向發(fā)展。

對(duì)上述化學(xué)發(fā)光法SARS-CoV-2抗體檢測(cè)試劑的性能驗(yàn)證結(jié)果(表3～4)進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)：(1)各公司SARS-CoV-2 IgM和IgG抗體檢測(cè)試劑的特異性并無(wú)差異(表5～6)；(2)廈門(mén)萬(wàn)泰公司和博奧賽斯(天津)公司IgM抗體檢測(cè)靈敏度明顯高于深圳亞輝龍公司，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.000 1)，廈門(mén)萬(wàn)泰公司和博奧賽斯(天津)公司IgM抗體檢測(cè)靈敏度無(wú)差異，但深圳亞輝龍公司IgG抗體檢測(cè)靈敏度明顯高于博奧賽斯(天津)公司，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000 2)。因廈門(mén)萬(wàn)泰公司尚無(wú)IgG抗體靈敏度和特異性的相關(guān)數(shù)據(jù)，未納入統(tǒng)計(jì)，各公司IgM和IgG抗體聯(lián)合檢測(cè)數(shù)據(jù)不全，未納入統(tǒng)計(jì)。

表3 3家公司化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清SARS-CoV-2IgM抗體結(jié)果(n)

表4 2家公司化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清 SARS-CoV-2IgG抗體結(jié)果(n)

表5 3家公司化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清SARS-CoV-2 IgM抗體的靈敏度和特異性(%)

表6 2家公司化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清 SARS-CoV-2 IgG抗體靈敏度和特異性(%)

有研究比較了化學(xué)發(fā)光法和膠體金法檢測(cè)SARS-CoV-2 特異性抗體的靈敏度和特異性，發(fā)現(xiàn)膠體金法和化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)SARS-CoV-2總抗體的臨床特異性無(wú)差異，且僅在核酸陽(yáng)轉(zhuǎn)陰組和疑似組化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)總抗體的靈敏度明顯優(yōu)于膠體金法[24]。根據(jù)現(xiàn)公開(kāi)數(shù)據(jù)，對(duì)兩種方法各公司SARS-CoV-2 IgM抗體檢測(cè)試劑靈敏度和特異性進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)：(1)無(wú)論采用化學(xué)發(fā)光法還是膠體金法，各公司檢測(cè)SARS-CoV-2 IgM抗體的特異性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；(2)僅博奧賽斯(天津)公司化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)SARS-CoV-2 IgM抗體較兩家公司膠體金法靈敏度高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.000 1)。見(jiàn)表7。

表7 5家公司檢測(cè)血清 SARS-CoV-2 IgM抗體靈敏度和特異性(%)

4 小 結(jié)

目前，CFDA批準(zhǔn)上市的SARS-CoV-2血清學(xué)特異抗體檢測(cè)試劑主要差異集中在檢測(cè)靈敏度和檢測(cè)抗體種類上，其性能均可滿足臨床需求。膠體金法和化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)SARS-CoV-2血清學(xué)特異抗體各有優(yōu)缺點(diǎn)。膠體金法操作簡(jiǎn)單，無(wú)須特殊設(shè)備，15～30 min內(nèi)完成檢測(cè)，成本比較低，對(duì)硬件要求不高，可用于基層實(shí)驗(yàn)室和大規(guī)模樣本篩查。膠體金法的缺點(diǎn)是靈敏度較低，只能做定性檢測(cè)。化學(xué)發(fā)光法靈敏度和特異性均較高，能進(jìn)行定量檢測(cè)，可批量操作，但需要特殊儀器，適合在大中型醫(yī)院開(kāi)展。但目前通過(guò)CFDA批準(zhǔn)的SARS-CoV-2抗體化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒為封閉系統(tǒng)，導(dǎo)致其使用受限。實(shí)驗(yàn)室在選擇檢測(cè)方法時(shí)，必須確定其目標(biāo)，快速和敏感的檢測(cè)方法有助于及時(shí)對(duì)患者診療和感控隔離。然而，目前沒(méi)有診斷方法能達(dá)到100%的靈敏度和特異性，同時(shí)都需通過(guò)質(zhì)控方案進(jìn)行控制，以減少假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果的發(fā)生。除建立和遵循檢驗(yàn)前、中、后標(biāo)準(zhǔn)操作程序外，還應(yīng)定期利用陽(yáng)性和陰性質(zhì)控品來(lái)評(píng)估檢測(cè)性能，通過(guò)參加室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)以驗(yàn)證其準(zhǔn)確度。此外，在病毒變異時(shí)，已有檢測(cè)方法的靈敏度可能會(huì)改變，應(yīng)重新評(píng)估其檢測(cè)效能，特別是當(dāng)檢測(cè)結(jié)果與臨床和流行病學(xué)預(yù)期不匹配時(shí)[25-26]。

綜上所述，檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)無(wú)論采用何種檢測(cè)方法，血清特異性抗體檢測(cè)都是目前解決SARS-CoV-2核酸檢測(cè)“假陰性”的一個(gè)行之有效的辦法，甚至有研究顯示將核酸與抗體聯(lián)合檢測(cè)可明顯提高診斷效率。盡管如此，各實(shí)驗(yàn)室在項(xiàng)目開(kāi)展前，應(yīng)充分考慮其檢測(cè)方法學(xué)的利弊，合理評(píng)估各廠家檢驗(yàn)系統(tǒng)的性能。