中藥宏觀質(zhì)量的評價與控制理論體系的建立與應(yīng)用研究

劉文龍，趙 靖，李原華，賀福元，劉志軍，張喜利*，葛金文

1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南 長沙 410208

2.中藥成藥性與制劑制備湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南 長沙 410208

3.常德市第一中醫(yī)醫(yī)院，湖南 常德 415000

4.湖南中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院，湖南 長沙 410208

中醫(yī)藥人要“傳承精華、守正創(chuàng)新”，就必須直擊中藥（包括中藥材、中藥飲片、中藥復(fù)方制劑）的質(zhì)量問題，故其質(zhì)量研究長期被列為國家中藥發(fā)展戰(zhàn)略的核心問題之一。近年來，許多學(xué)者已經(jīng)從規(guī)范管理、產(chǎn)地、栽培條件、采收季節(jié)、炮制加工方法、制劑工藝和儲存條件等諸多方面對中藥的質(zhì)量和穩(wěn)定性進(jìn)行了大量的研究，有化學(xué)成分評價控制理論、成分效應(yīng)評價控制理論、基于臨床療效評價控制理論和質(zhì)量標(biāo)志物控制理論等，均取得了顯著的成效[1-36]。

中藥不同于西藥，大多數(shù)為動、植物藥，均來源于自然界生命體，其形成過程遵循生命現(xiàn)象自然法則。那么，藥用植物體在生長過程中為了維持有機(jī)體正常生存條件和抵御外界不利環(huán)境因素而進(jìn)行著一系列的代謝活動與應(yīng)激反應(yīng)，從而在原植物體內(nèi)鬼斧神工、天然合成了中藥化學(xué)成分群。根據(jù)達(dá)爾文進(jìn)化論觀點(diǎn)，自然界的生物都是在“遺傳”的基礎(chǔ)上不斷地“變異”以適應(yīng)周圍生存環(huán)境。就中藥而言，在不同生長環(huán)境下，藥用植物體所發(fā)生的變異不一樣，中藥所含化學(xué)成分群各異，表現(xiàn)為質(zhì)量變異（道地藥材應(yīng)運(yùn)而生）。那么要評價控制中藥（活體）質(zhì)量，就不能只生搬硬套西藥（死體）的辦法，應(yīng)創(chuàng)建一種適宜中藥特點(diǎn)的質(zhì)量評價與控制系統(tǒng)。目前的中藥質(zhì)量研究體系主要存在以下幾個突出問題：（1）脫離中醫(yī)藥基本理論談中藥質(zhì)量。中藥應(yīng)與中醫(yī)證型相關(guān)聯(lián)與對應(yīng)，注重多成分多靶點(diǎn)綜合作用以實(shí)現(xiàn)宏觀調(diào)控。因此中藥質(zhì)量評價控制體系不能唯成分論；（2）脫離生命現(xiàn)象本質(zhì)談中藥質(zhì)量。中藥本身就是一個生命體，其生長形成過程遵循達(dá)爾文進(jìn)化論等自然規(guī)律。其質(zhì)量除了受生產(chǎn)各環(huán)節(jié)的人為因素外，還受基因變異、環(huán)境和Hardy-Weinberg 平衡群體影響。

針對上述2 個突出問題，本文根據(jù)中藥“天人合一”自然屬性，提出并創(chuàng)建了適宜中醫(yī)藥基本理論的中藥宏觀質(zhì)量評價控制的理論、方法與技術(shù)體系，實(shí)現(xiàn)了中藥質(zhì)量評價與控制的微觀與宏觀、中藥與西藥相結(jié)合的新體系。該體系應(yīng)具有中醫(yī)藥學(xué)科“自然”與“社會”屬性的學(xué)科特征，并能最終能實(shí)現(xiàn)中、西藥學(xué)科理論的統(tǒng)一。中藥與人體都是自然界生命體，循生物演變軌跡，透析出自然屬性的生命本質(zhì)規(guī)律，生命本質(zhì)規(guī)律是進(jìn)行中藥質(zhì)量理論詮釋的“不二法則”。在梳理近10年本團(tuán)隊的研究成果后，初步形成了一套中藥宏觀質(zhì)量評價與控制理論體系：基于中藥材基因的多樣性、中藥原植物體內(nèi)的節(jié)點(diǎn)代謝和代謝網(wǎng)絡(luò)等特點(diǎn)，運(yùn)用整體觀念、統(tǒng)計遺傳學(xué)、信息熵原理和中藥化學(xué)合成途徑等，從全新視角構(gòu)建中藥宏觀質(zhì)量的評價與控制方法。

1 提出并創(chuàng)立了中藥提取“一次最小投料量”理論體系及中藥宏觀質(zhì)量評價控制方法

中藥大多來源于動、植物體，這些生物群居生長。群居中藥植株個體間必然存在一定差異性，即中藥原生物個體間呈現(xiàn)多樣性。因此單一個體或數(shù)株個體質(zhì)量難以代表群居的整體質(zhì)量狀況。據(jù)此，引用統(tǒng)計遺傳學(xué)中生物進(jìn)化Hardy-Weinberg 定律即群體（繼代）隨機(jī)交配，在不產(chǎn)生選擇、突變和遷移的情況下，基因頻率與基因型頻率每代保持不變。如果以Hardy-Weinberg 平衡群體作為中藥材質(zhì)量穩(wěn)定性的研究對象，那么這個平衡群體的質(zhì)量足以代表某一群居群體的整體質(zhì)量。故以“Hardy-Weinberg 平衡群體”為中藥材提取中的“最小投料單元（量）”，那么中藥材批間提取浸膏得率應(yīng)該能得以穩(wěn)定。為此，運(yùn)用信息熵原理和統(tǒng)計學(xué)概率分布原理，從魚腥草藥材基因多態(tài)性分析的隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（random amplified polymorphic DNA，RAPD）、簡單序列重復(fù)區(qū)間擴(kuò)增多態(tài)性（inter simple sequence repeat，ISSR）標(biāo)記所攜帶的信息量，以及中藥材指紋圖譜所承載的信息量3 個角度出發(fā)、建立能探測“Hardy-Weinberg 平衡群體”的“一次最小投料量”數(shù)學(xué)模型及理論體系。本理論體系揭示并利用影響中藥材質(zhì)量的內(nèi)因，實(shí)現(xiàn)中藥材提取浸膏得率的穩(wěn)定性控制，最終控制中成藥的質(zhì)量穩(wěn)定性，中藥提取“一次最小投料量”理論體系見圖1。

1.1 揭示了生物遺傳多態(tài)性對中藥材質(zhì)量穩(wěn)定性影響的規(guī)律

圖1 中藥提取“一次最小投料量”理論體系Fig.1 Theoretical system of “minimum amount of material for extraction” of traditional Chinese medicine

根據(jù)遺傳學(xué)、遺傳藥理學(xué)、分子生物學(xué)原理，結(jié)合中醫(yī)藥學(xué)科屬性與中藥藥效物質(zhì)作用的本質(zhì)，分析中藥材質(zhì)量穩(wěn)定性規(guī)律應(yīng)遵循生物多態(tài)性規(guī)律的科學(xué)內(nèi)涵；同時根據(jù)中藥現(xiàn)代化的要求，提出了中藥材質(zhì)量控制的現(xiàn)代化模式及其研究方法。與西藥相比，中藥為自然界的產(chǎn)物，多由動植物組成，其有效成分為一個有機(jī)整體，在初生、次生代謝酶系，特別是細(xì)胞色素P450 酶系的作用下合成，進(jìn)入人體內(nèi)能被人體的代謝酶系代謝并與原植物代謝酶相似的人體內(nèi)受體酶靶點(diǎn)產(chǎn)生誘導(dǎo)、抑制和不可逆等反應(yīng)。按質(zhì)量作用定律，人體必然向與中藥藥性相同的方向移動，達(dá)到中醫(yī)學(xué)反治互補(bǔ)的效應(yīng)作用，體現(xiàn)“網(wǎng)通虹勢”現(xiàn)象，中藥與人體的作用本質(zhì)是雙重遺傳藥理學(xué)的作用。中藥材質(zhì)量穩(wěn)定性規(guī)律研究首先應(yīng)遵循中藥材自身的生物多態(tài)性規(guī)律，其次應(yīng)受人體遺傳藥理學(xué)個性化用藥原理指導(dǎo)。中藥及人體的遺傳多態(tài)性是客觀存在，不同地域的植株成分信息熵變頻率的正態(tài)概率分布曲線的均值與方差不同，在滿足各品種單次投藥量的前提下，中藥材的質(zhì)量是穩(wěn)定的，體現(xiàn)Hardy-Weinberg 平衡時的群體質(zhì)量。采用Ramagli 改進(jìn)的Bradford 法、SDS-PAGE 凝膠電泳法和雙波長薄層掃描法3 種方法對魚腥草植株間的蛋白質(zhì)進(jìn)行多樣性研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，53 株蛋白條帶相對分子質(zhì)量大多集中在6500～972 000，其蛋白種類差異性不明顯，主要表現(xiàn)為條帶顏色深淺不一；蛋白電泳條帶的掃描圖的總量統(tǒng)計矩參數(shù)總量零階矩（總量曲線下的總響應(yīng)面積，area under curve of total quantum，AUCT）、總量一階矩（總量色譜保留時間平均值，亦為總量中心矩或數(shù)學(xué)期望，meanchromatographic retention time of total quantum，MCRTT）和總量二階矩（總量色譜平均保留時間方差，variance of mean chromatographic retention time of total quantum，VCRTT）的RSD 值分別為40.92%、6.01%、18.57%。由此可見，同一中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（good agricultural practice，GAP）下不同植株鮮魚腥草個體間蛋白質(zhì)種類變化不大，但相應(yīng)的含量顯示出豐富的多樣性[37-40]。此外魚腥草的ISSR 和RAPD 分子標(biāo)記多樣性研究結(jié)果也揭示了這一現(xiàn)象。

1.2 闡明了藥用原植物體內(nèi)存在遺傳基因多態(tài)性和基因變異

以魚腥草為模型中藥，對同一GAP 產(chǎn)地46 株魚腥草進(jìn)行 ISSR 和 RAPD 分子標(biāo)記，應(yīng)用NTSYS2PC 軟件進(jìn)行聚類分析。結(jié)果篩選出的9 條ISSR 引物和8 條RAPD 引物，擴(kuò)增后分別得到134、101 條帶，其中呈多態(tài)性的條帶數(shù)為115、72 條，多態(tài)比率為85.8%、71.3%，平均遺傳相似系數(shù)為0.678 6、0.694 7。2 種分子標(biāo)記結(jié)果均揭示了同一GAP 產(chǎn)地魚腥草株間基因多態(tài)性規(guī)律，闡明了引起同一GAP 產(chǎn)地魚腥草株間質(zhì)量不穩(wěn)定的內(nèi)在原因，揭示同一GAP 產(chǎn)地魚腥草株間的基因多態(tài)性規(guī)律，為中藥材質(zhì)量穩(wěn)定性控制和中藥穩(wěn)態(tài)提取工藝中最小投料量的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)[41]。

1.3 符合Hardy-Weinberg 平衡中藥群體指紋圖譜信息熵一次投料量數(shù)學(xué)模型的建立及實(shí)驗(yàn)研究

運(yùn)用信息熵及遺傳統(tǒng)計學(xué)原理，以同一GAP 產(chǎn)地魚腥草植株間揮發(fā)油GC 指紋圖譜信息量變異系數(shù)為樞紐，建立中藥穩(wěn)態(tài)提取工藝中平衡群體的數(shù)學(xué)模型，并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。建立了適宜中藥及制劑穩(wěn)態(tài)提取工藝中平衡群體的數(shù)學(xué)模型，以同一產(chǎn)地魚腥草為模型藥物獲得該產(chǎn)地的遺傳平衡群體為29 683 株（約118.7 kg）。在GAP 質(zhì)控模式下，進(jìn)一步用魚腥草的株間Hardy-Weinberg 平衡群體來控制其質(zhì)量穩(wěn)定性，為中藥穩(wěn)態(tài)提取工藝的建立及質(zhì)量控制奠定新的理論與實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，建立中藥材穩(wěn)態(tài)提取工藝中平衡群體的數(shù)學(xué)模型并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證；以不同產(chǎn)地大黃醇提物的HPLC 指紋圖譜信息熵變異系數(shù)為指標(biāo)研究其平衡群體一次投料量，反映中藥材Hardy-Weinberg 平衡群體制劑與化學(xué)質(zhì)量控制的數(shù)學(xué)模型。大黃醇浸出物在3.251～4.189 μg 時絕對值與相對信息熵都較大；不同產(chǎn)地的大黃指紋圖譜總量統(tǒng)計矩參數(shù)MCRTT 的RSD 值為7.249%，VCRTT 的RSD 值為15.32%，絕對信息熵為1.064×109，RSD 值為37.23%，大黃制劑質(zhì)量控制一次投料量共需4542 g；化學(xué)質(zhì)量控制需18 168 g。魚腥草揮發(fā)油采用GC 測定，指紋圖譜的絕對信息量為2.472×107mV·s，RSD 值為90.46%，相對信息量為5.353×106(mV·s)/μg，RSD 值為80.96%；穩(wěn)態(tài)質(zhì)量控制一次投料量共需43 600 g（合9544 株）。從中藥多態(tài)性表達(dá)的另一種形式中藥基因多態(tài)性出發(fā)，應(yīng)用DNA 擴(kuò)增的多態(tài)性條帶所攜帶的信息熵探討魚腥草一次最小投料量。采用了ISSR 分子標(biāo)記對同一GAP 產(chǎn)地魚腥草進(jìn)行多態(tài)性分析，將擴(kuò)增的條帶信息轉(zhuǎn)化成信息熵，運(yùn)用數(shù)學(xué)模型測算魚腥草的最小一次投料量。將篩選出的9 條ISSR 引物對同一GAP 產(chǎn)地46 株魚腥草的DNA 樣品進(jìn)行擴(kuò)增，得到134 條總條帶，其信息熵為0.365 6～0.978 6，RSD 值為14.75%，一次投料量為11.22 kg（863 株）。從基因多態(tài)性角度測算出了魚腥草的另一個“最小投料量”，這個量與從指紋圖譜角度得到的量存在較大差別，這為探索適宜臨床療效的、能真正指導(dǎo)臨床合理用藥的“一次投料量”奠定基礎(chǔ)，最終實(shí)現(xiàn)單味中藥劑型改革[42-44]。

1.4 符合中藥多成分體系宏觀質(zhì)量表征的數(shù)學(xué)模型建立及實(shí)驗(yàn)研究

根據(jù)生物熱力學(xué)定律建立中藥材成分宏觀狀態(tài)函數(shù)關(guān)系式，并以大黃藥材醇浸出物為對象，先測定燃燒焓，再建立指紋圖譜，測定信息熵與信息量，再計算生物熵和表觀平衡常數(shù)。本研究建立了中藥成分的表觀平衡常數(shù)、生物熱焓、Gibbs 自由能與生物熵等中藥成分質(zhì)量宏觀狀態(tài)函數(shù)模型。10 批大黃的總物質(zhì)的量濃度為0.153 4 mmol/g，RSD 值為28.26%；平均表觀平衡常數(shù)為0.039 65，RSD 值為6.020%；標(biāo)準(zhǔn)自由能為8005 J/mol，RSD 值為1.860%；生物熱焓為-2.408×107J/mol，RSD 值為42.32%；生物熵為-8.078×104J/K，RSD 值為42.31%。建立宏觀狀態(tài)數(shù)學(xué)模型與微觀成分濃度相統(tǒng)一的中藥材成分質(zhì)量表征體系。中藥宏觀質(zhì)量表征數(shù)學(xué)模型能表征中藥多成分動態(tài)體系的內(nèi)在質(zhì)量，可達(dá)到遠(yuǎn)如森林近似樹的綜合作用結(jié)果[45]。

2 提出并創(chuàng)立了中藥“原植物代謝網(wǎng)絡(luò)”構(gòu)建及中藥宏觀質(zhì)量的評價控制方法

中藥質(zhì)量成分控制模式仍效仿西藥只檢測其中一種或幾種成分的含量，將被測成分的含量與預(yù)先設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)閾值相比較以判定中藥質(zhì)量優(yōu)劣。這種質(zhì)量控制模式屬于“點(diǎn)”控制模式，在實(shí)施過程中難以科學(xué)、合理地選擇指標(biāo)性被測成分，況且一兩種成分也難以代表臨床療效。同時，每一味中藥通常會組方于多個復(fù)方中，承擔(dān)“君臣佐使”不同角色以發(fā)揮不同作用，其溶出的成分群一定會存在差異。因此應(yīng)遵循中藥多成分多靶點(diǎn)綜合效應(yīng)特點(diǎn)，建立基于中藥原植物體內(nèi)代謝途徑或網(wǎng)絡(luò)“面”質(zhì)控模式，結(jié)合前期發(fā)現(xiàn)的中藥成分在生物體內(nèi)的“網(wǎng)通虹勢”代謝規(guī)律，最終繪制出中藥植物代謝網(wǎng)絡(luò)圖，并測算出各中藥成分的平衡系數(shù)，再結(jié)合目前的“點(diǎn)”控制模式，即可實(shí)現(xiàn)“一測多算”“一測多評”和“一測多控”的“面”控制模式。植物代謝途徑與網(wǎng)通虹勢見圖2。

圖2 植物代謝途徑與網(wǎng)通虹勢Fig.2 Metabolic pathways and network-mediated rainbow potential in plants

2.1 探究中藥質(zhì)量標(biāo)志物與“網(wǎng)通虹勢”代謝規(guī)律

中藥復(fù)方療效是建立在單味中藥基礎(chǔ)上按中醫(yī)藥基礎(chǔ)理論依法組方遣藥治病的結(jié)果，其作用體現(xiàn)多成分、多靶點(diǎn)、綜合效應(yīng)的特點(diǎn)，其物質(zhì)基礎(chǔ)研究不易，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)難以建立，質(zhì)量標(biāo)志物難以確定，無法嚴(yán)格監(jiān)控中藥加工全過程中的質(zhì)量，且中藥質(zhì)量標(biāo)志物的確定對中藥藥效物質(zhì)研究、中藥材鑒別及中藥制藥工程等影響深遠(yuǎn)；中藥與生物體的“網(wǎng)通虹勢”代謝規(guī)律將中藥多成分的零散作用規(guī)律視為同母核群體的整體作用，可溝通微觀單成分個體與宏觀成分群整體，揭示中藥在生物體內(nèi)代謝物質(zhì)、信息交流基本規(guī)律，進(jìn)而揭示中藥復(fù)方對人體的作用規(guī)律。通過系統(tǒng)分析中藥質(zhì)量標(biāo)志物對中藥開發(fā)的指導(dǎo)作用及其與“網(wǎng)通虹勢”代謝規(guī)律的關(guān)系，嘗試為中藥質(zhì)量標(biāo)志物的確定提供思路。將大鼠分別iv 魚腥草注射液和新魚腥草素鈉注射液后，血漿中檢測出8 種共同代謝產(chǎn)物，而尿液中檢出39 種；口服給藥后，血漿中檢測出16 種共同代謝產(chǎn)物，而尿液中檢出12 種。魚腥草注射液經(jīng)iv和口服2 種不同給藥形式后，血漿和尿液中分別檢測出9、11 種共同代謝產(chǎn)物，而新魚腥草素鈉注射液分別檢出8、17 種。由此可見，魚腥草注射液和新魚腥草素鈉注射液iv 與口服后，在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物相同或相似，與原制劑揮發(fā)油成分結(jié)構(gòu)類型相同，代謝途徑相同。中藥成分在生物體內(nèi)代謝存在“網(wǎng)通性”。此外，原魚腥草揮發(fā)油共45 種成分，大鼠口服魚腥草揮發(fā)油與甲基正壬酮后血液中分別出現(xiàn)了53、69 種代謝產(chǎn)物，大鼠注射魚腥草揮發(fā)油與甲基正壬酮后，血液中分別出現(xiàn)了52、42 種代謝產(chǎn)物；單成分與多成分給藥，口服與注射給藥，均產(chǎn)生了相同相似的代謝產(chǎn)物，α-蒎烯、β-月桂烯為各組共有的代謝產(chǎn)物，其中魚腥草揮發(fā)油口服與注射血樣出現(xiàn)共有代謝產(chǎn)物分別為18、13 個，分別占34%、25%；甲基正壬酮口服與注射血樣出現(xiàn)共有代謝產(chǎn)物分別為17、15 個，分別占24.6%、35.7%，平均為29.8%，近1/3 的代謝產(chǎn)物為共同代謝產(chǎn)物。因此魚腥草揮發(fā)油和甲基正壬酮在大鼠體內(nèi)的代謝存在網(wǎng)通性，中藥各成分之間的代謝與原藥材成分代謝途徑相關(guān)。

2.2 開展藥用原植物體內(nèi)代謝酶及多樣性研究

采用3 種方法從3 個角度對蕺菜植株間的蛋白質(zhì)進(jìn)行多樣性研究，即采用Ramagli 改進(jìn)的Bradford法、SDS-PAGE 凝膠電泳法和雙波長薄層掃描法分別研究其總蛋白含量多樣性、蛋白種類差異性及各種類的含量變異性。發(fā)現(xiàn)53 株蕺菜蛋白條帶的相對分子質(zhì)量大多集中在6.5～97.2，蛋白種類差異性不明顯，主要表現(xiàn)為條帶顏色深淺不一；蛋白電泳條帶掃描圖的AUCT、MCRTT 和VCRTT 的RSD值分別為40.92%、6.01%、18.57%。本研究揭示了同一GAP 產(chǎn)地同一批次的鮮蕺菜植株間的蛋白質(zhì)多樣性，為蕺菜“節(jié)點(diǎn)代謝網(wǎng)絡(luò)”的構(gòu)建奠定基礎(chǔ)，也進(jìn)一步拓展了中藥質(zhì)量的穩(wěn)定性研究。

2.3 中藥燃燒焓、信息熵及生物熵的穩(wěn)定性揭示其成分間的“虹勢性”

根據(jù)生物熱力學(xué)定律建立中藥材的信息熵等狀態(tài)函數(shù)關(guān)系式，并以大黃藥材醇浸出物為對象，建立指紋圖譜，計算生物熵和表觀平衡常數(shù)，探討諸狀態(tài)函數(shù)的穩(wěn)定性，驗(yàn)證“虹熱性”規(guī)律。結(jié)果表明，全國9 個產(chǎn)地的大黃醇浸出物的相似度為0.079～0.677；色譜峰面積的RSD 值為21.11%～92.51%；而燃燒焓、信息熵、信息量、生物熵、表觀平衡常數(shù)的RSD 值分別為2.259%、4.228%、20.190%、-2.254%、13.340%。全國各地大黃醇浸出物的燃燒焓、信息熵、生物熵是穩(wěn)定的，由中藥成分的燃燒焓等參數(shù)可構(gòu)成中藥成分的宏觀物質(zhì)質(zhì)量體系。本研究根據(jù)生物物理學(xué)原理探討生物間代謝的“虹勢性”普遍規(guī)律，為建立完整的中藥物質(zhì)質(zhì)量控制方法奠定理論基礎(chǔ)。

2.4 探究了溶度參數(shù)、譜效學(xué)、拓?fù)渲笖?shù)等與中藥宏觀質(zhì)量的聯(lián)系

金銀花和山銀花在《中國藥典》2015年版中的性味與歸經(jīng)、功能與主治、用法與用量上無差異，自《中國藥典》2005年版將金銀花和山銀花分列，紛爭不斷。通過查閱國內(nèi)外文獻(xiàn)，從金銀花和山銀花的用藥沿革、鑒別、化學(xué)成分、藥理作用及質(zhì)量控制等方面入手，探討金銀花和山銀花的異同及質(zhì)量控制的關(guān)鍵問題；為解決金銀花和山銀花的分合問題，促進(jìn)中藥材產(chǎn)業(yè)的發(fā)展奠定基礎(chǔ)。以補(bǔ)陽還五湯為模型藥方，探索有效成分群（部位）溶度參數(shù)的變化規(guī)律。方法用均勻設(shè)計、星點(diǎn)設(shè)計安排實(shí)驗(yàn)方案，用改良反相氣相色譜法測定溶度參數(shù)值，用SPSS 軟件擬合曲線方程。結(jié)果得出有效成分黃芪甲苷（X1）、阿魏酸（X2）、芍藥苷（X3）、川芎嗪（X4）的溶度參數(shù)的遞推方程為Y＝-69.016＋435.277X1X2＋336.966X2X4＋487.702X3X4－54.575X12－59.696X2X3（r＝1.000，P＜0.01）；有效部位總苷類（X1）、總生物堿（X2）、總多糖（X3）的溶度參數(shù)的遞推方程為Y＝21.822＋10.562X1＋51.512X2－37.078X3＋163.820X1X2－155.569X1X3－506.750X2X3－9.385X12＋19.864X22＋413.446X32（r＝0.866，P＜0.01）。本研究建立的遞推規(guī)律方程揭露了中藥單一成分與復(fù)雜體系間的必然聯(lián)系及遞推規(guī)律，為中藥復(fù)方溶出規(guī)律研究奠定了基礎(chǔ)。

2.5 創(chuàng)立一種羰基化合物的親和色譜介質(zhì)及其制備方法

一種羰基化合物的親和色譜介質(zhì)及其制備方法具體為以柱色譜硅膠為原料，在酸性環(huán)境中利用柱色譜硅膠分子中的羥基與硅烷偶聯(lián)劑進(jìn)行偶聯(lián)，再經(jīng)強(qiáng)酸水解得到表面含有羥基的活化硅膠，后加入含羰基的中藥單一成分進(jìn)一步反應(yīng)，即得羰基類中藥成分的親和色譜介質(zhì)。本法所得羰基化合物的親和色譜介質(zhì)可有效用于中藥含羰基類化合物的親和色譜柱層析分離分析，達(dá)到良好的效果[46-50]。如用本法成功制備了魚腥草中甲基正壬酮的親和色譜介質(zhì)，并應(yīng)用于甲基正壬酮的節(jié)點(diǎn)代謝網(wǎng)絡(luò)研究。

3 結(jié)語

本文根據(jù)中藥生命體的自然屬性，結(jié)合復(fù)雜多變的中藥多成分體系特點(diǎn)，提出并建立了中藥宏觀質(zhì)量評價與控制的理論、方法與技術(shù)體系，實(shí)現(xiàn)了中藥質(zhì)量研究體系從“點(diǎn)”向“面”的轉(zhuǎn)變，也實(shí)現(xiàn)中藥與西藥的質(zhì)量研究理論體系的統(tǒng)一。

本理論體系廓清中西藥區(qū)別，在中醫(yī)藥基本理論指導(dǎo)下研究中藥“活體”的質(zhì)量及其規(guī)律，即“循生物演化軌跡，析中藥質(zhì)量屬性”能實(shí)現(xiàn)中藥的自然屬性與生命規(guī)律的統(tǒng)一，故具有很大的創(chuàng)新性、前瞻性、先進(jìn)性與可行性，將對中醫(yī)藥現(xiàn)代化起到較大的推動作用。

所存在的主要問題主要有：（1）中藥質(zhì)量與生命科學(xué)息息相關(guān)，要闡釋清楚中醫(yī)藥治病的生命科學(xué)機(jī)制還有一定的困難；（2）中藥成分復(fù)雜、且多變不一，用簡單的現(xiàn)有方法難以評價與控制，大量的數(shù)學(xué)知識、手段與模型還有待進(jìn)一步突破；（3）有關(guān)生命科學(xué)的中醫(yī)藥理論研究還很緩慢，希望加快研究步伐。

本文先從基因多樣性被動地解決中藥材提取時浸膏得率不穩(wěn)定、通過最小一次投料量理論體系控制其浸膏得率以解決中藥質(zhì)量穩(wěn)定性問題；再根據(jù)中藥原植物體內(nèi)中藥化學(xué)代謝途徑、節(jié)點(diǎn)代謝或代謝網(wǎng)絡(luò)，主動地“面”控制中藥質(zhì)量以達(dá)穩(wěn)定。近年來，本團(tuán)隊在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步提出了運(yùn)用中藥成分的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)、拓?fù)渲笖?shù)以及中藥超分子氣析理論構(gòu)建中藥的宏觀質(zhì)量，如此，全新的中藥質(zhì)量評價與控制體系將更加完善，助力推進(jìn)中藥現(xiàn)代化研究進(jìn)程。

本法已成功應(yīng)用了2 家企業(yè)單位的產(chǎn)品（驢膠補(bǔ)血顆粒、六味地黃丸）于生產(chǎn)中，用于系列中藥配方顆粒和中藥經(jīng)典名方的開發(fā)，促進(jìn)對藥材提取工藝進(jìn)行改進(jìn)及產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升，節(jié)約了生產(chǎn)成本；顯著提升產(chǎn)品的質(zhì)量及其行業(yè)競爭力；為人民群眾提供了質(zhì)量穩(wěn)定、可控、安全、有效的傳統(tǒng)中藥，產(chǎn)生了較好的經(jīng)濟(jì)和社會效益。此外，本理論體系還推廣應(yīng)用到中藥新藥研究之中，對推動中醫(yī)藥事業(yè)、中藥新藥研究、開發(fā)與申報，保護(hù)與擴(kuò)大中藥資源、生態(tài)環(huán)境與品種、提升人民健康水平等方面將產(chǎn)生重要的作用。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突