微柱凝膠法、凝聚胺法及鹽水法在交叉配血中的效果評價(jià)

曹 敏，龐曉蕾

（江陰臨港醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 無錫 214443）

臨床上搶救病人的一種重要方式就是輸血，而交叉配血?jiǎng)t是給患者輸血前的常規(guī)檢查項(xiàng)目。傳統(tǒng)的交叉配血方式為鹽水法，但隨著科技進(jìn)步，微柱凝膠法、凝聚胺法在臨床也逐漸得到應(yīng)用[1]。為保證患者的輸血安全，本次研究通過對80例血樣標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行微柱凝膠法、凝聚胺法及鹽水法的交叉配血，比較這3種交叉配血方式的應(yīng)用效果，現(xiàn)作出以下報(bào)道。

1 資料與方法

1.1 資料

選取我院2018年3月-2020年3月80例血樣標(biāo)本進(jìn)行本次試驗(yàn)。80例血樣標(biāo)本提供者中，男性43例，女性37例，年齡19-57歲，平均（38.06±2.15）歲，其中12例有既往輸血史。所有供血者均為無償獻(xiàn)血者，且在知情并自愿的前提下簽署知情同意書。

1.2 方法

本次研究選擇儀器為TD-A型血型血清學(xué)用離心機(jī)、FYQ型免疫微柱孵育器以及CX-21奧林巴斯生物顯微鏡。凝聚胺法試劑選用（臺(tái)資）珠海貝索生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，微柱凝膠法試劑選用長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品。

所有血樣標(biāo)本均進(jìn)行微柱凝膠法、凝聚胺法及鹽水法3種交叉配血方法。鹽水法嚴(yán)格按照說明書和《輸血技術(shù)學(xué)》[2]操作即可。微柱凝膠法：為受血者和供血者的血樣標(biāo)本均用生理鹽水配制0.5%～1%紅細(xì)胞懸液，將患者姓名仔細(xì)標(biāo)注于配血卡上，取2支試管標(biāo)注主側(cè)、次側(cè)，將50 μL供血者紅細(xì)胞懸液和受血者血漿加入主側(cè)，再在次側(cè)也加入50 μL供血者紅細(xì)胞懸液和受血者血漿。將孵育器溫度調(diào)至37℃，孵育15 min，再用離心機(jī)離心3 min，速度為900 r/min，最后再用1500 r/min的速度離心2 min。若凝膠管底部沉積有紅細(xì)胞，則為無凝集，若凝膠管膠上、中部聚集有紅細(xì)胞，則為凝集陽性。凝聚胺法：為受血者、供血者的血樣標(biāo)本分別用生理鹽水配制3%-5%紅細(xì)胞懸液，取2支試管標(biāo)注主側(cè)、次側(cè)，將2滴受血者血清、1滴供血者紅細(xì)胞懸液加入主側(cè)試管，將1滴受血者紅細(xì)胞懸液、2滴供血者血清加入次側(cè)試管。將0.7 mL低離子介質(zhì)溶液加入2支試管中，并混勻，使用離心機(jī)離心15min，速度為3000 r/min，棄上清液，讓管底僅殘留0.1 mL左右，搖動(dòng)試管并觀察是否凝集，無凝集則重做，2支試管均加入2滴重懸液，搖動(dòng)后將其置于顯微鏡下仔細(xì)觀察。非特異性凝集表現(xiàn)為30s內(nèi)紅細(xì)胞散開，反之則為陽性，表現(xiàn)為因血型抗原、抗體引發(fā)特異性凝集。

1.3 觀察指標(biāo)

比較微柱凝膠法、凝聚胺法及鹽水法在交叉配血中的陽性檢出率和耗時(shí)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)

本次研究所有結(jié)果數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0 for Windows進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，3種方法的耗時(shí)采用t檢驗(yàn)，以“”表示，陽性檢出率采用x2檢驗(yàn)，以[n（%）]表示，P＜0.05表示數(shù)據(jù)差異顯著。

2 結(jié) 果

比較3種交叉配血方法的陽性檢出率和耗時(shí)：鹽水法的陽性檢出率為86.25%，凝聚胺法陽性檢出率為92.50%，微柱凝膠法陽性檢出率為98.75%，微柱凝膠法的陽性檢出率顯著高于鹽水法和凝聚胺法，P＜0.05；但凝聚胺法的耗時(shí)則明顯低于鹽水法和微柱凝膠法，P＜0.05。見表1。

表1 比較3種交叉配血方法的陽性檢出率和耗時(shí)[（）；n（%）]

表1 比較3種交叉配血方法的陽性檢出率和耗時(shí)[（）；n（%）]

注：3組比較，P＜0.05。

方法 n 陽性檢出情況 耗時(shí)（min）主測陽性 次測陽性 陽性檢出率鹽水法 80 5 64 86.25（69/80） 22.67±2.94凝聚胺法 80 6 68 92.50（74/80） 13.18±3.22微柱凝膠法 80 9 70 98.75（79/80） 31.47±3.43 t/x2 9.009 18.619 P 0.011 0.001

3 討 論

鹽水法中的紅細(xì)胞上抗原決定簇可以與相應(yīng)抗原結(jié)合部位相結(jié)合，形成凝集塊，在IgM抗體的檢出試驗(yàn)中有較高應(yīng)用價(jià)值，且操作相對簡單，耗時(shí)不長。但該方法中紅細(xì)胞間的距離為25 nm左右，IgM抗體分子上相鄰Fab端的最短距離在35 nm以上，IgG則在25 nm以下，IgG抗體在鹽水介質(zhì)中無法與相應(yīng)抗體的紅細(xì)胞進(jìn)行凝集，因此該交叉配血方法的陽性檢出率會(huì)相對較低，且會(huì)出現(xiàn)溶血性輸血反應(yīng)。

凝聚胺法中的凝聚胺是高價(jià)陽離子季胺鹽多聚物，可在溶解后產(chǎn)生一定量的正電荷，使紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷得到中和，縮小紅細(xì)胞間距，從而出現(xiàn)可逆非特異性凝集，但若是與抗體致敏紅細(xì)胞凝集，則會(huì)出現(xiàn)不可逆凝集，進(jìn)而判斷受血者與供血者的血液是否可以結(jié)合[3]。凝聚胺法的陽性檢出率不低，且耗時(shí)短，是一種快速、簡便的方法，但凝聚胺法無法檢測-k抗體。若患者有反復(fù)輸血史、妊娠史，或有溶血性貧血，自身免疫性抗體、紅細(xì)胞上抗原較弱，則使用凝聚胺法可能出現(xiàn)漏檢。

微柱凝膠法是一項(xiàng)等待完善和推廣的新型技術(shù)，在臨床上已逐漸得到應(yīng)用。該方法操作也較為簡單，易對結(jié)果進(jìn)行判定，且具有高特異性、敏感性、可重復(fù)性，試驗(yàn)過程中對試驗(yàn)人員的依賴性小，結(jié)果能夠得到長期保存，在對患者的后續(xù)治療中可隨時(shí)復(fù)查檢查結(jié)果[4]。將待檢紅細(xì)胞鹽水懸液加入抗球蛋白試劑中時(shí)，若紅細(xì)胞表面抗體球蛋白與試劑中的抗體出現(xiàn)特異性反應(yīng)，則可凝集，再經(jīng)離心后觀察紅細(xì)胞是否聚集于凝膠上或中部，以此判斷是否為陽性，若聚集于底部，則為陰性。該方法能夠有效降低人為誤差幾率，結(jié)果更加準(zhǔn)確。但該方法因需借助離心機(jī)和孵育器，耗時(shí)通常為30 min左右，不適合用于急診配血中。

本次研究結(jié)果顯示，微柱凝膠法的陽性檢出率顯著高于鹽水法和凝聚胺法，但凝聚胺法的耗時(shí)則明顯低于鹽水法和微柱凝膠法，P＜0.05。表明微柱凝膠法的檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確，可在實(shí)際工作中廣泛應(yīng)用，但因其耗時(shí)較長，在急診配血工作中則更推薦使用凝聚胺法。