19種農(nóng)藥對食用菌菌絲生長的安全性評價

蔣 寧，駱 昕，曲紹軒，林金盛，侯立娟，李輝平，馬 林

(江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所，江蘇省高效園藝作物遺傳改良重點實驗室，江蘇 南京 210014)

近年來，我國食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，已經(jīng)成為我國栽培業(yè)中的第六大產(chǎn)業(yè)[1]，占世界食用菌總產(chǎn)量的70%以上。在眾多可栽培的食用菌品種中，以季節(jié)性栽培模式的木腐類食用菌為主要品種，這類食用菌由于其出菇環(huán)境潮濕、光線較暗、溫度在20～25℃左右，適宜大多數(shù)病原微生物、腐食性昆蟲、螨蟲的生存，且出菇期需要大量通風(fēng)，空間無法密閉，導(dǎo)致在栽培期容易出現(xiàn)真菌、細菌等病原菌[2-4]和菇蚊、螨蟲等蟲害[5-6]的為害，同時在未被硬化的栽培場所內(nèi)外還容易生長雜草，影響食用菌的生長環(huán)境，因此，除草劑、殺菌劑、殺蟲劑等各類農(nóng)藥會用于季節(jié)性栽培品種的生產(chǎn)過程中。

目前我國在食用菌上登記的農(nóng)藥產(chǎn)品共11個，其中殺菌劑9個(有效成分僅有3種)，殺蟲劑1個，植物生長調(diào)節(jié)劑1個，但已報道的食用菌蟲害種類有90余種[7]，常見病害種類有50多種[8]，現(xiàn)有的農(nóng)藥種類無法滿足實際生產(chǎn)的需要。且在多次食用菌農(nóng)殘檢測中出現(xiàn)了超標情況[9]，迫切需要增加用于食用菌的安全農(nóng)藥產(chǎn)品用于防治栽培期發(fā)生的病蟲害。

一個合格的農(nóng)藥產(chǎn)品除了良好的防治效果和殘留達標，還有一個關(guān)鍵的要求就是要對食用菌無藥害、無抑制，而食用菌作為真菌的一大類，對農(nóng)藥的敏感性比植物更高，尤其是廣譜性的殺菌劑，容易對食用菌的菌絲生長、子實體形成造成影響?；趯r(nóng)藥安全性的考量，本文選擇了常見的19種均未在食用菌上登記使用的農(nóng)藥，包括除草劑、殺菌劑、殺蟲劑三類，由于食用菌的栽培模式與植物差異較大，目前農(nóng)藥的推薦劑量不一定適用于食用菌，因此本試驗希望測定較高濃度農(nóng)藥對香菇、黑木耳、平菇、毛木耳、茶樹菇、秀珍菇等6個產(chǎn)量在國內(nèi)位居前列的食用菌品種菌絲生長的影響，以期對食用菌上的可用農(nóng)藥進行安全性評價，確保其在推薦劑量下對食用菌生長無影響，為下一步開展農(nóng)藥登記提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試農(nóng)藥 所選農(nóng)藥均為常見農(nóng)藥種類及劑型，包括除草劑、殺菌劑及殺蟲劑，均為未登記在食用菌上使用的農(nóng)藥，詳細情況(表1)。

表1 供試農(nóng)藥種類

1.1.2 供試食用菌 黑木耳Auriculariaauricula、毛木耳Auriculariapolytricha、平菇Pleurotusostreatus、秀珍菇Pleurotusgeesteranus、香菇Lentinusedodes和茶樹菇Agrocybeaegerita等6種常見季節(jié)性栽培食用菌品種的菌株均為江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所食用菌研究室保藏菌株。

1.2 試驗方法 采用平皿菌絲生長速率法[10]測定不同農(nóng)藥對食用菌菌絲生長的影響。將19種供試藥劑分別用無菌水按10、50和100倍3個倍數(shù)稀釋，并將藥劑稀釋液分別與PDA培養(yǎng)基按體積比1:9的比例混合，使含藥培養(yǎng)基中藥劑的最終稀釋倍數(shù)為100、500和1 000倍。待培養(yǎng)基凝固后，將直徑7mm的6種食用菌菌餅分別接種于含藥平板中央，菌絲面朝下，蓋上皿蓋，將平皿倒放于25℃恒溫培養(yǎng)箱中靜置黑暗培養(yǎng)。培養(yǎng)基中加入與藥液等量的無菌水作為空白對照，每處理3次重復(fù)。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 待空白對照的菌絲即將長滿平皿時，用十字交叉法測量菌落直徑，計算各處理對菌絲生長的抑菌率。利用Excel軟件計算標準偏差(STDEV.P)，并分別繪制除草劑、殺菌劑和殺蟲劑對食用菌菌絲抑制率的柱形圖。

菌絲生長抑制率[11]=(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對照菌落直徑-菌餅直徑)×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 2種除草劑對食用菌菌絲生長的影響 采用菌絲生長速率法測定了氯氟吡氧乙酸異辛酯和草銨膦兩種除草劑對6種食用菌菌絲生長的影響，結(jié)果(圖1)。2種除草劑稀釋倍數(shù)為100倍時，對所有食用菌品種的菌絲均出現(xiàn)完全抑制的作用；稀釋倍數(shù)為500倍時，除草銨膦對毛木耳菌絲的抑制率為74.12%±4.40%外，其他處理的抑制率均為100%；稀釋倍數(shù)為1 000倍時，草銨膦對黑木耳和香菇菌絲依然表現(xiàn)完全的抑制作用，但對毛木耳菌絲的抑制作用最小，抑制率為14.51%±2.77%。

圖1 2種除草劑對6種食用菌菌絲生長的影響

圖2 8種殺菌劑對6種食用菌菌絲生長的影響

2.2 8種殺菌劑對食用菌菌絲生長的影響 8種殺菌劑對6種食用菌品種的菌絲生長具有不同的抑制作用。從(圖2)中可以看出，三環(huán)唑、噻呋酰胺、四霉素和代森錳鋅稀釋至1 000倍時，依然完全抑制6種食用菌菌絲的生長；嘧菌酯稀釋至1 000倍，對黑木耳和毛木耳的抑制率仍然是100%，對其他4種食用菌的抑制率也均在69%以上；噁霉靈對秀珍菇菌絲的抑制作用最強，稀釋1 000倍仍然完全抑制，對平菇菌絲的抑制作用最小，稀釋1 000倍抑制率為74.12%±1.66%；壬菌銅稀釋至1 000倍時，對茶樹菇菌絲的抑制率較小，抑制率為14.12%±1.66%，對另外5種食用菌菌絲的抑制率在50%以上；霜霉威鹽酸鹽是8種供試殺菌劑中對食用菌菌絲抑制作用最小的，隨著稀釋倍數(shù)的增大，對菌絲的抑制率明顯降低，稀釋至1 000倍時，對黑木耳和香菇菌絲無抑制作用。

2.3 9種殺蟲劑對食用菌菌絲生長的影響 (圖3)結(jié)果可以看出，殺蟲劑對食用菌菌絲的抑制作用略低于除草劑和殺菌劑，但對不同食用菌品種的抑制作用差異較大。木耳類的黑木耳和毛木耳是對殺蟲劑最敏感的品種，茚蟲威、吡蚜酮、噻蟲嗪和噻嗪酮均對其產(chǎn)生了較強的抑制作用，高效氯氟氰菊酯則表現(xiàn)出最低的抑制作用；側(cè)耳類的平菇和秀珍菇對噻蟲嗪表現(xiàn)出較高敏感性，高效氯氟氰菊酯和苦參堿對其菌絲的抑制作用較低，稀釋100倍的抑制率均在50%以下；9種殺蟲劑對香菇菌絲的抑制作用最高的是噻蟲嗪，苦參堿、吡蟲啉和噻嗪酮稀釋1 000倍時對香菇菌絲無抑制作用；吡蚜酮對茶樹菇菌絲的抑制作用最高，烯啶蟲胺稀釋1 000倍時對茶樹菇菌絲無抑制作用。

圖3 9種殺蟲劑對6種食用菌菌絲生長的影響

3 結(jié)論與討論

針對我國食用菌產(chǎn)業(yè)中出現(xiàn)的病蟲害種類多而防治藥劑登記少的問題，本試驗選擇了多種不同作用方式的除草劑、殺菌劑和殺蟲劑開展了對常見食用菌品種菌絲生長的安全性評價。食用菌生產(chǎn)中除草劑的使用相對較少，主要用于出菇大棚周圍環(huán)境的治理，減少病蟲害以雜草為第二寄主越冬越夏。氯氟吡氧乙酸異辛酯屬于有機雜環(huán)類選擇性內(nèi)吸傳導(dǎo)型微毒除草劑[12]，草銨膦屬于有機磷類滅生性低毒除草劑[13]，可用于防除禾本科草和闊葉草。兩種除草劑對食用菌菌絲都有明顯的抑制作用，應(yīng)盡量避免將除草劑噴灑在菌袋上，尤其在黑木耳和香菇上避免使用草銨膦。

殺菌劑的防治對象主要為真菌和細菌類的微生物，而同屬于真菌的食用菌極易受到殺菌劑的影響，因此在食用菌生產(chǎn)中殺菌劑的使用必須慎重。本試驗選擇的8種殺菌劑中，除三環(huán)唑為中等毒性外，其余殺菌劑均為低毒。三環(huán)唑、噻呋酰胺、四霉素和代森錳鋅對食用菌菌絲生長的抑制作用最大，代森錳鋅還對大球蓋菇[14]和金針菇[15]菌絲有明顯的抑制作用。霜霉威鹽酸鹽對于食用菌菌絲生長的抑制作用最小，是一種低毒的氨基甲酸脂類內(nèi)吸性殺菌劑，具有保護和治療作用[16]，對鞭毛菌亞門和半知菌亞門的真菌有較好防效[17]。

在殺蟲劑的篩選中，對食用菌菌絲的藥害相對較小，但對于不同食用菌品種的影響差異較大。本實驗中噻蟲嗪對6種食用菌菌絲均表現(xiàn)出了較高的抑制作用，而邱良妙等研究表明噻蟲嗪對于雙孢蘑菇菌絲的抑制作用較小[18]。同為煙堿類殺蟲劑的吡蟲啉則表現(xiàn)出較低的抑制作用，且對雞腿菇菌絲的抑制作用也較低[19]。茚蟲威對木耳類食用菌的菌絲抑制作用明顯，趙曉娜等試驗結(jié)果顯示濃度降低到15mg/L時，對香菇和秀珍菇菌絲幾乎無抑制作用[20]。擬除蟲菊酯類殺蟲劑是食用菌栽培中最為常用的一種殺蟲劑，也是登記在食用菌上唯一一種殺蟲劑的復(fù)配藥劑之一[21]，本試驗選擇的高效氯氟氰菊酯對6種食用菌品種都表現(xiàn)出較低的抑制作用，且同類殺蟲劑對茶樹菇[22]、平菇[23]、雞腿菇[24]、雙孢蘑菇[25]等其他品種的抑制作用也較低。苦參堿作為9種殺蟲劑中唯一的植物源殺蟲劑，對食用菌品種的抑制作用較小。

同類農(nóng)藥的的長期大量使用，極易出現(xiàn)農(nóng)殘和抗藥性的問題[26]，因此，除了規(guī)范栽培操作流程、改進設(shè)施設(shè)備和使用物理防控方法，從農(nóng)藥對食用菌菌絲生長和子實體形成的安全性、對病原菌和蟲螨害的防治效果及產(chǎn)品使用后的殘留量等方面綜合考慮，盡快篩選并登記適宜在食用菌上使用的殺菌劑和殺蟲劑，將在很大程度上降低病蟲害對食用菌產(chǎn)業(yè)的影響，提高食用菌產(chǎn)品的安全。