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    膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法與電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)CEA和AFP的結(jié)果對(duì)比

    2021-01-14 07:59:16諶秋華陳燕玲謝聯(lián)斌
    關(guān)鍵詞:濁法膠乳分析法

    諶秋華,陳燕玲,謝聯(lián)斌

    (中國(guó)人民解放軍廬山康復(fù)療養(yǎng)中心a.檢驗(yàn)科;b.腫瘤科,江西 九江 332000)

    癌胚抗原(CEA)是首先從結(jié)腸癌和胚胎組織中提取出的一種腫瘤相關(guān)抗原,屬于細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)蛋白,存在于細(xì)胞漿中,可通過(guò)細(xì)胞膜分泌到細(xì)胞外進(jìn)入血液中[1]。臨床實(shí)踐證實(shí),CEA可以作為結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌以及其他多種惡性腫瘤的特異性標(biāo)志物,在惡性腫瘤的鑒別診斷、病情監(jiān)測(cè)、療效評(píng)價(jià)等方面均具有重要的臨床價(jià)值[2]。甲胎蛋白(AFP)是一種糖蛋白,屬于白蛋白家族,在胎兒血液循環(huán)中的水平較高,出生后2~3個(gè)月時(shí)AFP被白蛋白替代,血液中水平較低[3]。AFP具有多種生物學(xué)功能,如免疫抑制、淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡等,其與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),可作為多種腫瘤的陽(yáng)性檢測(cè)參考指標(biāo)[4]。本研究比較膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法與電化學(xué)發(fā)光免疫分析法對(duì)CEA和AFP的檢測(cè)結(jié)果,旨在為臨床血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)方法的選擇提供參考。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    本研究210名受試者為中國(guó)人民解放軍廬山康復(fù)療養(yǎng)中心2015年7月至2020年4月期間收治的124例結(jié)直腸癌患者和在此期間來(lái)院進(jìn)行體檢的86例健康人群。其中男125例,女85例;年齡26~76歲,中位年齡47.4歲;消化系統(tǒng)腫瘤73例,呼吸系統(tǒng)腫瘤51例。本研究符合知情同意原則。

    1.2 檢測(cè)方法

    1.2.1 膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法

    清晨空腹收集受試者全血標(biāo)本,收集血清后,應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀(日本HITACHI公司生產(chǎn),型號(hào):7180)進(jìn)行膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法檢測(cè)。CEA、AFP膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法檢測(cè)試劑盒均購(gòu)于北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司,檢測(cè)操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。檢測(cè)儀器的狀態(tài)和質(zhì)量控制情況均良好。

    1.2.2 電化學(xué)發(fā)光免疫分析法

    清晨空腹收集受試者全血標(biāo)本,收集血清后,應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光儀(德國(guó)ROCHE公司生產(chǎn),型號(hào):Cobas e 411)進(jìn)行電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)。CEA、AFP電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)試劑盒均購(gòu)于德國(guó)ROCHE公司,檢測(cè)操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。檢測(cè)儀器的狀態(tài)和質(zhì)量控制情況均良好。

    1.3 觀察指標(biāo)

    分別比較應(yīng)用膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法、電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)血清中CEA、AFP的水平。將兩種檢測(cè)方法的CEA、AFP檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析。分別對(duì)兩種檢測(cè)方法檢測(cè)血清中CEA、AFP水平診斷腫瘤的受試者工作特征曲線(ROC曲線)進(jìn)行分析,統(tǒng)計(jì)ROC曲線下面積(AUC)。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    2 結(jié)果

    2.1 兩種檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果比較

    兩種檢測(cè)方法所得CEA、AFP值比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

    表1 兩種檢測(cè)方法CEA、AFP值的比較

    2.2 兩種檢測(cè)方法檢測(cè)CEA、AFP的相關(guān)性分析

    Pearson直線相關(guān)性分析結(jié)果顯示,兩種方法檢測(cè)所得CEA、AFP值呈正相關(guān)(r=0.733、0.669,P<0.01)。見(jiàn)圖1—2。

    2.3 兩種檢測(cè)方法檢測(cè)CEA、AFP診斷腫瘤的ROC曲線

    分別將CEA、AFP納入腫瘤診斷的ROC曲線分析中。膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法檢測(cè)CEA、AFP的結(jié)果在診斷腫瘤中的AUC分別為0.674、0.655,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001),見(jiàn)表2、圖3A。電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)CEA、AFP的結(jié)果在診斷腫瘤中的AUC分別為0.606、0.639,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。見(jiàn)表3、圖3B。

    表2 膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法AUC統(tǒng)計(jì)結(jié)果

    表3 電化學(xué)發(fā)光免疫分析法AUC統(tǒng)計(jì)結(jié)果

    3 討論

    臨床檢驗(yàn)學(xué)中檢測(cè)血清中CEA、AFP的方法較多,如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、電化學(xué)發(fā)光免疫分析法、膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法等。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的操作比較簡(jiǎn)單,費(fèi)用較低,臨床可廣泛應(yīng)用,特別適用于基層醫(yī)院對(duì)腫瘤患者的篩查,但該方法的檢測(cè)敏感性較低,準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性并不十分理想,因此檢測(cè)的結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)之間存在一定的差距[5]。電化學(xué)發(fā)光免疫分析法起源于20世紀(jì)90年代,本質(zhì)上是一種新型標(biāo)記免疫分析方法,實(shí)驗(yàn)原理是基于抗原和抗體的特異性反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)的一種手段,通過(guò)將一些容易測(cè)定又具有高度敏感性的物質(zhì)標(biāo)記到特異性抗原或抗體分子上,再通過(guò)這些標(biāo)記物的增強(qiáng)放大效應(yīng)來(lái)顯示反應(yīng)體系中抗原或抗體的性質(zhì)與含量[6-7]。電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的檢測(cè)速度較快,檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度較高,應(yīng)用廣泛,且實(shí)驗(yàn)的過(guò)程具有較高的自動(dòng)化的特點(diǎn),因此在臨床相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)中應(yīng)用較為廣泛[8-9]。然而,電化學(xué)發(fā)光免疫分析法所使用的設(shè)備和試劑目前均需進(jìn)口,因此價(jià)格較為昂貴,導(dǎo)致臨床應(yīng)用存在一定的局限性。膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法是將液相內(nèi)的沉淀反應(yīng)與現(xiàn)代光學(xué)儀器和自動(dòng)分析技術(shù)相結(jié)合的一種指標(biāo)分析技術(shù)[10-11]。當(dāng)抗原、抗體在特定的電解質(zhì)溶液中進(jìn)行反應(yīng)時(shí),將形成小分子免疫復(fù)合物(免疫復(fù)合物微粒),導(dǎo)致反應(yīng)液出現(xiàn)一定的濁度,經(jīng)過(guò)相關(guān)的儀器檢測(cè)后,可通過(guò)吸光度來(lái)進(jìn)行分析(待測(cè)抗原量與反應(yīng)溶液的濁度呈正相關(guān)關(guān)系),與相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)照后,即可計(jì)算得出血清中相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)的水平[12-13]。膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法具有操作簡(jiǎn)單、反應(yīng)迅速、成本低廉的優(yōu)勢(shì),檢測(cè)過(guò)程不需要使用價(jià)格昂貴的儀器,實(shí)驗(yàn)試劑無(wú)需進(jìn)口,因此在臨床上值得推廣使用[14]。

    本研究結(jié)果中,分別應(yīng)用膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法、電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)血清中CEA、AFP水平,檢測(cè)結(jié)果顯示兩種檢測(cè)方法檢測(cè)得到的血清CEA、AFP濃度比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。相關(guān)性分析結(jié)果也顯示,膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法與電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)血清中CEA、AFP的結(jié)果均具有明顯正相關(guān)關(guān)系(r=0.733、0.669,P<0.01)。以上均說(shuō)明膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法在血清CEA、AFP濃度的檢測(cè)方面,其檢測(cè)結(jié)果與電化學(xué)發(fā)光免疫分析法相比較基本相當(dāng)。在臨床腫瘤的診斷中,筆者分別將CEA、AFP納入腫瘤診斷的ROC曲線分析中,分析結(jié)果發(fā)現(xiàn):兩種檢測(cè)方法檢測(cè)血清中CEA的結(jié)果在腫瘤診斷中的AUC值分別為0.674、0.606,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);兩種檢測(cè)方法檢測(cè)血清中AFP的結(jié)果在腫瘤診斷中的AUC值分別為0.655、0.639,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。提示分別使用膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法與電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)血清中CEA、AFP的結(jié)果,在腫瘤診斷中的價(jià)值基本一致。

    綜上所述,膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法對(duì)血清CEA、AFP的檢測(cè)結(jié)果與電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的檢測(cè)結(jié)果基本一致,且具有操作簡(jiǎn)單、成本低廉的優(yōu)點(diǎn),其檢測(cè)結(jié)果可以為臨床腫瘤的診斷提供參考。

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