新疆漢族人群MIF 共受體CD44 基因rs13347 多態(tài)性與急性冠脈綜合征的相關(guān)性探討

張金宇 趙倩 門(mén)莉 陳清杰 楊毅寧（通訊作者）

（1 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院康復(fù)醫(yī)學(xué)科 新疆 烏魯木齊 830054）

（2 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟中心 新疆 烏魯木齊 830054）

目前我國(guó)心血管病引起的死亡排在總死亡原因前列[1]，而急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome,ACS）是冠心?。╟oronary artery disease，CAD）的一種重要類(lèi)型，其病死率居心血管疾病死亡之首，已成為當(dāng)今危害人類(lèi)生命健康的“頭號(hào)殺手”[2]。ACS 相關(guān)病情發(fā)展過(guò)程都有炎癥反應(yīng)的伴隨[3]，而巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（macrophage migration inhibitor factor，MIF）是第一個(gè)被認(rèn)為是慢性炎癥和自身免疫性疾病重要介質(zhì)的細(xì)胞因子[4]。MIF 表達(dá)增加可以介導(dǎo)炎癥細(xì)胞的生成且MIF 是重要的促炎性因子和趨化因子，它可起到讓巨噬細(xì)胞等炎癥免疫細(xì)胞聚集于動(dòng)脈粥樣硬化斑塊處進(jìn)而引起相關(guān)的炎癥反應(yīng)[5]。MIF 通過(guò)CD44/CD74 共受體從而發(fā)揮抑制巨噬細(xì)胞凋亡及促進(jìn)炎癥相關(guān)作用，CD44 基因編碼在人類(lèi)第11 號(hào)染色體短臂上，由19個(gè)內(nèi)含子和20 個(gè)外顯子構(gòu)成[6]。CD44 作為多種生長(zhǎng)因子及細(xì)胞因子的受體，擁有細(xì)胞內(nèi)、外和跨膜結(jié)構(gòu)域，屬于跨膜糖蛋白的一種。

目前，CD44 rs13347 基因多態(tài)性與ACS 相關(guān)性的研究并不多，我們以測(cè)定單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）相關(guān)分型的方法，研究新疆漢族人群CD44 rs13347 基因多態(tài)性與ACS 的關(guān)系，更全面了解冠心病發(fā)生發(fā)展中相關(guān)基因所發(fā)揮的作用，為未來(lái)冠心病個(gè)體治療奠定基礎(chǔ)。

1.資料與方法

1.1 一般資料

采用病例-對(duì)照研究的方法。納入人群均為2016 年1 月—2019 年12 月在我院住院患者。病例組納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）診斷標(biāo)準(zhǔn)參照世界衛(wèi)生組織及中華醫(yī)學(xué)會(huì)對(duì)ACS 的診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）年齡≥18 歲；（3）癥狀發(fā)生至入院時(shí)間≤12h；（4）接受急診冠脈造影+PCI 治療；（5）簽署知情同意書(shū)；ACS 組主要包括ST段抬高型心肌梗死、非ST 段抬高型心肌梗死和不穩(wěn)定性心絞痛三類(lèi)人群。共納入病例組580 例，男性397 例，女性183 例，平均年齡（57.57±11.50）歲。

對(duì)照組選自同期因胸痛來(lái)我院行冠脈造影術(shù)并提示未見(jiàn)冠脈狹窄未診斷冠心病的患者，均為漢族人群，納入標(biāo)準(zhǔn)為：根據(jù)我院心臟中心行冠脈造影無(wú)異常的患者中，從中篩選年齡、性別均與病例組相匹配，通過(guò)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牟∈吩?xún)問(wèn)、查體、心電圖、心超檢查及有關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查，對(duì)照組共計(jì)508 例，男性339 例，女性169 例，平均年齡（57.09±10.00）歲。

病例組及對(duì)照組排除標(biāo)準(zhǔn)：臨床資料或者血樣不全者，或同時(shí)患有主動(dòng)脈夾層、繼發(fā)性高血壓、免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病、先心病、風(fēng)心病、心臟瓣膜病、慢性炎癥性疾病、多器官功能衰竭及病史描述不清及精神狀態(tài)異常不能配合者予以排除。

1.2 采 集血樣、血生化指標(biāo)檢測(cè)及DNA 抽提

研究對(duì)象空腹禁食12h 以上，抽取靜脈血6mL，血液生化指標(biāo)均由新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心統(tǒng)一檢測(cè)。DNA的提取采用全血基因組提取試劑盒（天根生化有限公司生產(chǎn)），按照說(shuō)明書(shū)步驟提取外周靜脈血DNA。

1.3 基因分型

本實(shí)驗(yàn)采用上海天昊生物科技有限公司的SNPscanTM 多重SNP 分型試劑盒進(jìn)行分型。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析處理，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，行t 檢驗(yàn)，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組一般資料及血生化指標(biāo)的比較

病例組和對(duì)照組在性別、年齡構(gòu)成上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。病例組和對(duì)照組體重指數(shù)（BMI）、飲酒無(wú)顯著差異（P＞0.05），病例組白細(xì)胞、血小板、肌酐、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白、高血壓、糖尿病、吸煙高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05），對(duì)照組高密度脂蛋白高于病例組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05），見(jiàn)表l。

表1 兩組一般資料及血生化指標(biāo)比較（±s）

表1 兩組一般資料及血生化指標(biāo)比較（±s）

注：BMI：體重指數(shù)；WBC：白細(xì)胞；PLT：血小板；Cr：肌酐；TG：甘油三酯；TC：總膽固醇；HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇

2.2 Hardy-Weinberg 平衡檢驗(yàn)

病例組和對(duì)照組CD44 基因rs13347 基因型分布均符合Hardy-Weinberg 平衡，P ＞0.05，具有群體代表性。

2.3 病例組和對(duì)照組兩組基因型和等位基因頻率分布

rs13347 三種基因型在病例組人群中的分布頻率分別為：CC 型41.03%，CT 型48.10%，TT 型10.86%；在對(duì)照組人群中的分布頻率分別為：CC 型48.23%，CT 型44.09%,TT 型7.68%,TT基因型在病例組中的分布頻率顯著高于對(duì)照組，兩組基因型分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.030）。Rs13347 位點(diǎn)C、T 等位基因在病例組人群中的分布頻率分別為：C 等位基因65.1%，T 等位基因34.9%，在對(duì)照組人群中的分布頻率分別為：C 等位基因70.3%，T 等位基因29.7%,兩組等位基因分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.010）。

2.4 多因素回歸分析

為了剔除混雜因素的干擾，采用非條件Logistic 回歸分析，將是否為ACS 作為因變量，性別（1=男性，2=女性）、年齡（歲）、高密度脂蛋白（mmol/L）、低密度脂蛋白（mmol/L）、高血壓（0=未患高血壓，1=患高血壓）、糖尿?。?=未患糖尿病，1=患糖尿?。?、吸煙（0=不吸煙，1=吸煙）及rs13347 多態(tài)性為自變量，rs13347 基因多態(tài)性仍和ACS 的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，攜帶TT 基因型vs CT 基因型vs CC 基因型患ACS 風(fēng)險(xiǎn)高1.384 倍，（OR=1.384，95% CI=1.126 ～1.702，P=0.002），見(jiàn)表2。

表2 CD44 基因rs13347 多態(tài)性與急性冠脈綜合征風(fēng)險(xiǎn)性的關(guān)系

3.討論

心血管疾病，尤其是冠心病已成為危害人類(lèi)健康的主要?dú)⑹?，在我?guó)乃至全世界已成為成年人發(fā)病和死亡的重要原因。ACS 是一種多因素疾病，除了傳統(tǒng)的危險(xiǎn)因素外，遺傳基因的變異也被認(rèn)為是一種重要的發(fā)病機(jī)制。

MIF 作為有效的促炎細(xì)胞因子和趨化因子在多種炎性疾病發(fā)生發(fā)展中起著重要作用，如敗血癥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和動(dòng)脈粥樣硬化[7-9]。分泌至細(xì)胞外的MIF 與其細(xì)胞膜受體CD74 結(jié)合，并與細(xì)胞內(nèi)的糖原蛋白受體CD44 相互作用，激活Src-家族蛋白激酶以及下游信號(hào)通路[10-11]。

針對(duì)新疆漢族人群，進(jìn)行病例對(duì)照研究，探究CD44 rs13347 基因多態(tài)性與ACS 相關(guān)性。我們的研究先對(duì)人群進(jìn)行Hardy-Weinberg 平衡，說(shuō)明群體基因遺傳平衡。在病例組和對(duì)照組兩組年齡及性別構(gòu)成比匹配，統(tǒng)計(jì)學(xué)分別為P=0.516，P=0.470。分析相關(guān)因素，結(jié)果顯示白細(xì)胞、血小板、肌酐、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高血壓、糖尿病、吸煙史均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P ＜0.05），其中高密度脂蛋白為對(duì)照組高，其余為病例組高于對(duì)照組（P ＜0.05）。為分析CD44 rs13347 基因多態(tài)性與ACS 有關(guān)聯(lián)。Logistic 回歸分析在調(diào)整了相關(guān)混雜因素后，攜帶TT 基因型vs CT 基因型vs CC 基因型患急性冠脈綜合征風(fēng)險(xiǎn)高1.384 倍（OR=1.384，95% CI=1.126 ～1.702，P=0.002），說(shuō)明MIF 共受體CD44 基因rs13347 位點(diǎn)TT 基因型及T 等位基因可能增加新疆漢族人群急性冠脈綜合征發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。

綜述所述，CD44 基因多態(tài)性與新疆漢族人群ACS 的相關(guān)性研究，在未來(lái)的治療中，也許可以作為調(diào)控MIF-CD44/CD74 通路而減少炎癥反應(yīng)從而減少ACS 的風(fēng)險(xiǎn)的奠基。但納入女性樣本量略小，后續(xù)應(yīng)加大女性ACS 患者樣本量，進(jìn)一步驗(yàn)證本結(jié)果，指導(dǎo)臨床。