氣相色譜法測(cè)定尿塞通片中有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量

程似錦，李 恒，喻 悅*

(1.長江職業(yè)學(xué)院 醫(yī)藥護(hù)理學(xué)院，湖北 武漢 430064；2.武漢藥品醫(yī)療器械檢驗(yàn)所，湖北 武漢 430075)

尿塞通片由丹參、澤蘭、紅花、赤芍、陳皮、澤瀉、敗醬等藥味制成，具有理氣活血、通淋散結(jié)的功效，臨床用于氣滯血瘀、下焦?jié)駸崴碌妮p、中度“癃閉”，癥見排尿不暢、尿流變細(xì)、尿頻、尿急，前列腺增生見上述癥狀者[1-3]。丹參、赤芍為尿塞通片主藥之一，市面上流通的丹參、赤芍藥材商品絕大多數(shù)為人工種植品[4-6]。有機(jī)氯類農(nóng)藥是廣泛應(yīng)用的殺蟲劑，由于其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難于分解，殘留期長，對(duì)環(huán)境污染嚴(yán)重；其通過食物進(jìn)入人體，在肝、腎、心臟等組織內(nèi)蓄積，在人體內(nèi)累積造成慢性中毒[7-10]。有關(guān)中成藥中有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量檢測(cè)的報(bào)道不多[11-12]，準(zhǔn)確測(cè)定中成藥中有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量，對(duì)安全用藥具有重要意義。根據(jù)總局要求，筆者參照文獻(xiàn)[13-15]，結(jié)合《中國藥典》2015版四部通則“農(nóng)藥殘留量測(cè)定法”[16]，對(duì)抽檢8個(gè)廠家生產(chǎn)的尿塞通片進(jìn)行有機(jī)氯類農(nóng)藥限量檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 7890A氣相色譜儀，梅特勒XS105DU型電子天平，HY-5回旋振蕩器，SK250LHC超聲清洗器。

1.2 試藥

尿塞通片，國家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)的樣品，來自8個(gè)廠家98批次，見表1。有機(jī)氯農(nóng)藥混合對(duì)照品溶液(中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：610005-201501，規(guī)格：10 μg/mL)；定位用有機(jī)氯農(nóng)藥對(duì)照品溶液由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所提供。本次共測(cè)定16種有機(jī)氯類農(nóng)藥，有機(jī)氯農(nóng)藥混合對(duì)照品名稱、濃度及批號(hào)見表2。正己烷為色譜純，丙酮、二氯甲烷為分析純。水為娃哈哈純凈水。

表1 98批次樣品來源

續(xù)表1

續(xù)表1

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

分析柱：鍵合交聯(lián)14%氰丙基苯基二甲基硅氧烷為固定液(DB-1701)的毛細(xì)管柱 J&W 122-0732(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；驗(yàn)證柱：鍵合交聯(lián)5%苯基甲基硅氧烷為固定液(DB-5)的毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，63Ni-ECD電子捕獲檢測(cè)器。進(jìn)樣口溫度：230 ℃；ECD檢測(cè)器溫度：300 ℃；柱溫：55 ℃，保持0.5 min，60 ℃/min至160 ℃，5 ℃/min至210 ℃，保持3 min，10 ℃/min至240 ℃，保持3 min，10 ℃/min至280 ℃，保持5 min；脈沖不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1 μL；載氣流速：1.5 mL/min，恒壓模式。理論塔板數(shù)按α-六六六計(jì)算應(yīng)不低于1×106，兩個(gè)相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5[16]。

2.2 溶液制備

2.2.1 混合對(duì)照品儲(chǔ)備液制備 精密量取有機(jī)氯農(nóng)藥混合對(duì)照品溶液1 mL，置10 mL量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得(每1 mL含農(nóng)藥1 μg)。

2.2.2 混合對(duì)照品溶液制備 精密量取上述對(duì)照品儲(chǔ)備液，用正己烷稀釋成每1 mL含0 ng、1 ng(線性1)、2 ng(線性2)、5 ng(線性3)、10 ng(線性4)、20 ng(線性5)、50 ng(線性6)、100 ng(線性7)的系列濃度溶液。

2.2.3 供試品溶液制備 取尿塞通片10片，研細(xì)，精密稱取粉末約5 g，置具塞錐形瓶中，加水30 mL，振搖10 min，精密加入丙酮50 mL，稱定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱定重量，用丙酮補(bǔ)足減失的重量，再加氯化鈉約8 g，精密加入二氯甲烷25 mL，稱定重量，超聲處理15 min，放冷，再稱定重量，用二氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，振搖使氯化鈉充分溶解，靜置，離心(3 000 r·min-1)3 min，使完全分層，將有機(jī)相移入裝有適量無水硫酸鈉的具塞錐形瓶中，放置30 min。

表2 有機(jī)氯類農(nóng)藥混合對(duì)照品名稱、濃度及批號(hào)

精密量取15 mL，于40 ℃水浴上減壓濃縮至約1 mL，加正己烷約5 mL，減壓濃縮至近干，用正己烷溶解并轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，小心加入硫酸1mL，振搖1 min，離心(3 000 r·min-1)10 min，分取上清液，加水1 mL，振搖，取上清液，即得。

2.3 線性及范圍

分別精密吸取系列濃度混合對(duì)照品溶液(配制方法見“2.2.2 ”混合對(duì)照品溶液制備)，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，計(jì)算，即得。各待測(cè)成分線性關(guān)系良好，見表3。

表3 16種農(nóng)藥線性試驗(yàn)結(jié)果

2.4 精密度試驗(yàn)

吸取線性5 ( 20 ng/mL)的有機(jī)氯農(nóng)藥混合對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算對(duì)照品峰面積RSD為0.31%～1.72%，結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.5 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取君碧莎樣品(批號(hào)：20150901)1批，取本品10片，研細(xì)，取粉末約5 g，精密稱定，并精密加入對(duì)照品儲(chǔ)備液(1 μg/mL)0.5 mL，置具塞錐形瓶中，自“加水30 mL”起，同供試品溶液制備操作，并計(jì)算隨行回收率，結(jié)果回收率在61%～112%。結(jié)果見表4。

表4 16種對(duì)照品加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.6 產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果

采用本方法共測(cè)定了8個(gè)廠家98批次尿塞通片樣品，結(jié)果16種待測(cè)農(nóng)藥均未檢出，有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量合格率為100%。有機(jī)氯農(nóng)殘檢查典型色譜見圖1。

3 討論

我國是中藥材使用大國，野生中藥材已不能滿足市場(chǎng)需要，絕大多數(shù)中藥材為人工種植。中藥材在栽培種植過程中常常遭受病蟲害的侵蝕，施用農(nóng)藥成為了提高產(chǎn)量的一項(xiàng)栽培措施。但是施用農(nóng)藥后的殘留不僅直接降低了藥材本身的質(zhì)量，而且間接影響了用藥安全性。本次試驗(yàn)測(cè)定了8個(gè)廠家共98批次尿塞通片樣品，結(jié)果16種待測(cè)農(nóng)藥均未檢出，有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量合格率為100%。本試驗(yàn)采用的前處理方法為磺化法，此方法對(duì)復(fù)雜制劑的基質(zhì)凈化效果好，色譜圖干擾較少，適合有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定；且采用了對(duì)鹵代烴選擇性好、靈敏度高的電化學(xué)檢測(cè)器，所建立的檢測(cè)方法準(zhǔn)確、可行，可用于尿塞通片中有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定。

1.六氯苯；2.α-BHC；3.PCNB；4.γ-BHC；5.七氯；6.艾氏劑；7.β-BHC；8.δ-BHC；9.氧化氯丹；10.反式環(huán)氧七氯；11.反式氯丹；12.順式氯丹；13. p,p′-DDE；14.O,P′-DDT；15. p,p′-DDD；16. p,p′-DDT