環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)對(duì)慢性阻塞性肺疾病急性加重期機(jī)械通氣患者病原菌檢測(cè)的研究

劉東育 趙洪偉 李麗麗 馬慶慶(通信作者)

563000貴州航天醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，貴州遵義

慢阻肺可以分為穩(wěn)定期和急性加重期，慢阻肺的主要癥狀是咳嗽、咳痰、喘息、氣短，在穩(wěn)定期患者癥狀比較輕微，藥物治療能有效對(duì)病癥進(jìn)行抑制。而急性加重期就表現(xiàn)在患者短期內(nèi)出現(xiàn)咳嗽加劇，痰多，喘息加重，咳痰呈膿性痰等并且伴隨著發(fā)熱等炎癥癥狀，這就是臨床所說(shuō)的慢阻肺急性加重期(AECOPD)。AECOPD 的主要原因可以歸結(jié)為感染和空氣污染，其中感染占50%～70%，同時(shí)也有大概1/3 的患者找不出致病因。AECOPD 發(fā)作時(shí)一般常用藥物或增加常用藥物劑量服藥依然達(dá)不到控制病癥的效果。臨床中也常將呼吸困難、咳膿痰等癥狀持續(xù)2 d的病癥判定為急性較重。而因?yàn)榧毙约又仄诔霈F(xiàn)的癥狀與很多疾病容易混淆，如肺炎、氣胸、胸腔積液等癥狀有相似之處，所以在臨床中很容易誤診，最終延誤治療，導(dǎo)致病情加重。同時(shí)我們知道對(duì)于感染的有效抑制使用針對(duì)性的抑菌治療，才能對(duì)病菌起到抑制作用。所以在使用選擇抗菌藥治療前需確認(rèn)病菌的類(lèi)型，再合理適量地運(yùn)用抗菌藥。AECOPD 患者及時(shí)有效的機(jī)械通氣可迅速有效改善通氣狀況[1-5]。但AECOPD 主要由下呼吸道感染引起，及早合理使用抗菌藥是控制病情、提早拔管的關(guān)鍵。所以提前進(jìn)行檢測(cè)，先確定再用藥是非常必要的。為滿足試驗(yàn)要求，本課題選取2017年1月-2019年12月收治的AECOPD 機(jī)械通氣患者的下呼吸道痰標(biāo)本65 份，進(jìn)行病原菌檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

本課題為滿足試驗(yàn)要求挑選的研究對(duì)象全部來(lái)自我院2017年1月-2019年12月收治的AECOPD 機(jī)械通氣患者的下呼吸道痰標(biāo)本65 份，男34 例，女31 例；年齡58～89 歲，平均(72.81±6.64)歲。

方法：對(duì)于行氣管插管的患者，即刻(第1天)留取深部痰液，用一次性配有標(biāo)本收集瓶的無(wú)菌吸痰管通過(guò)氣管插管或者內(nèi)套管進(jìn)行吸引，然后采集下呼吸道的分泌物，裝入標(biāo)本收集瓶，并立即送到細(xì)菌培養(yǎng)室。對(duì)每份標(biāo)本行常規(guī)痰培養(yǎng)并同時(shí)使用LAMP 快速檢測(cè)AECOPD 下呼吸道13 種病原體。第5 天后再次留取深部痰液標(biāo)本送細(xì)菌常規(guī)培養(yǎng)及LAMP快速檢測(cè)下呼吸道13種病原體。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 17.0 軟件處理；配對(duì)的計(jì)數(shù)資料之間兩兩比較采用McNemarχ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 第1天LAMP法與常規(guī)痰培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果比較(n)

表2 第1天LAMP技術(shù)和培養(yǎng)法對(duì)各種病原菌檢出率的比較[n(%)]

結(jié)果

第1天LAMP法與常規(guī)痰培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果比較：LAMP 法的總陽(yáng)性率為61.5%，高于培養(yǎng)法的38.4%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.067，P＜0.05)。見(jiàn)表1。

第1天LAMP技術(shù)和培養(yǎng)法對(duì)各種病原菌檢出率的比較：LAMP 技術(shù)檢測(cè)肺炎鏈球菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌的陽(yáng)性率均高于培養(yǎng)法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

機(jī)械通氣第1 天與第5 天病原菌分析：本組2 個(gè)時(shí)段檢測(cè)的病原菌無(wú)明顯差異，痰培養(yǎng)法不同時(shí)間檢測(cè)出的病原菌比例無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與報(bào)道相符。LAMP 法第5 天檢出病原菌比例明顯升高，達(dá)80%陽(yáng)性率。LAMP 技術(shù)已可檢測(cè)多種病原體，檢出率明顯高于傳統(tǒng)痰培養(yǎng)法。

討論

慢性阻塞性肺疾病是一種慢性氣道炎癥性疾病，是由于慢性支氣管炎，在受到氣流的持續(xù)限制后被診斷為慢阻肺?；加新璺螘?huì)出現(xiàn)慢性咳嗽，在早晨表現(xiàn)明顯，在夜間也有陣發(fā)性咳嗽，是一種終身性疾病。當(dāng)病情急性發(fā)作時(shí)，會(huì)增加痰量，有時(shí)還會(huì)出現(xiàn)膿性痰，嚴(yán)重者可出現(xiàn)氣喘、呼吸困難等癥狀。慢阻肺患者肺功能較差，肺內(nèi)存在慢性炎癥改變。臨床分緩解期和急性加重期。AECOPD 是指慢阻肺患者咳痰喘的癥狀較重，伴或者不伴發(fā)熱。慢阻肺患者肺內(nèi)存在菌群，患者急性加重多因感冒等因素導(dǎo)致免疫力下降。AECOPD是指一種急性起病的過(guò)程，其特征為患者呼吸系統(tǒng)癥狀?lèi)夯绾粑щy、咳嗽、咳痰等癥狀加重，導(dǎo)致需要改變藥物治療。大量研究表明[6-8]，感染是AECOPD的最常見(jiàn)誘因。

痰培養(yǎng)主要是檢查有無(wú)致病菌感染。痰液是氣管、支氣管的分泌物或肺泡內(nèi)的滲出物。正常情況下，肺泡、支氣管和氣管可有少量分泌物，當(dāng)呼吸道黏膜受到刺激時(shí)，分泌物增多，痰量也就增多。通過(guò)痰液檢測(cè)可以發(fā)現(xiàn)許多問(wèn)題，比如致病菌、寄生蟲(chóng)、血液等均能反映呼吸道疾病情況。痰培養(yǎng)尤其適用于呼吸道炎癥、支氣管擴(kuò)張、肺結(jié)核、肺寄生蟲(chóng)病等的診斷。痰培養(yǎng)迄今仍是臨床上應(yīng)用最普遍的病原學(xué)檢測(cè)方法。雖然痰培養(yǎng)能提供病原學(xué)依據(jù)并指導(dǎo)抗菌藥物治療，然而這種方法存在實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)以及特殊細(xì)菌無(wú)法測(cè)出的不足。

本研究是對(duì)診斷AECOPD 進(jìn)行機(jī)械通氣患者不同時(shí)段利用LAMP 技術(shù)進(jìn)行病原體快速診斷體系的研究。LAMP 技術(shù)已經(jīng)檢測(cè)多種病原體，檢出率明顯高于傳統(tǒng)痰培養(yǎng)法。本研究針對(duì)AECOPD機(jī)械通氣患者的下呼吸道常見(jiàn)的13 種病原體設(shè)計(jì)引物，利用含LAMP 技術(shù)的基因芯片進(jìn)行核酸擴(kuò)增，作為快速、準(zhǔn)確的病原體檢測(cè)方法，LAMP 檢測(cè)技術(shù)可在2 h內(nèi)檢測(cè)出感染病原菌，使患者及早得到有效治療，控制病情，提早拔管，縮短ICU住院治療時(shí)間。

LAMP 技術(shù)檢測(cè)的肺炎鏈球菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌，嗜麥芽窄食單胞菌的陽(yáng)性率均高于培養(yǎng)法。

LAMP 技術(shù)檢測(cè)的病原菌與我院院感科提供的院感病原菌(痰培養(yǎng)及血培養(yǎng)結(jié)果)基本符合。該方法的建立為臨床AECOPD 進(jìn)行機(jī)械通氣患者的下呼吸道感染致病菌檢測(cè)，提供了準(zhǔn)確快捷實(shí)用的新途徑。