禽痘病毒的診斷與防控

宋玉紅/內(nèi)蒙古赤峰市巴林右旗動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 025150

1 流行病學(xué)

在禽痘暴發(fā)期間，金絲雀和其他雀鳥的死亡率可達(dá)80%至100%。這與雞和火雞的死亡率普遍較低形成鮮明對比。病毒的傳播可通過皮膚損傷發(fā)生，吸血性昆蟲如蚊子和螨蟲傳播。受感染的鳥類產(chǎn)生的氣溶膠，或攝入受污染的食物或水，也被認(rèn)為是傳播的來源。這種疾病最常見的特征是皮膚增生性病變，包括表皮上皮增生，導(dǎo)致增生，疣狀突起。上述癥狀主要局限于身體中沒有羽毛的部位，如腿、腳、眼瞼和喙基部。在恢復(fù)和愈合后疤痕通?？梢姟Ｒ吧B類的死亡率通常很低，這取決于增殖性病變的數(shù)量和大小。然而，如果感染發(fā)生在皮膚無羽毛區(qū)，繼發(fā)性細(xì)菌感染，死亡率可能很高。另一種較不常見的APV 感染形式是白喉型，在消化道和上呼吸道粘膜中以纖維壞死和增殖性病變的形式出現(xiàn)，其死亡率一般高于皮膚癥狀。盡管宿主和病毒株種類繁多，但受感染的家禽的相關(guān)病理仍然相同，臨床癥狀因病毒的毒力、宿主的易感性、病變的分布和類型而異。APV與禽逆轉(zhuǎn)錄病毒、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒之間存在一定的關(guān)系。由前病毒整合到APV 基因組中同時(shí)引起的網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥可能在疾病暴發(fā)時(shí)APV 感染中起著重要的作用。眾所周知，網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒感染會導(dǎo)致免疫抑制。在受影響的鳥類中。在APV 感染導(dǎo)致網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒可能會加劇疾病的發(fā)展。盡管一些哺乳動(dòng)物細(xì)胞系似乎能夠支持APV 的復(fù)制，但沒有證據(jù)表明APV 在人類身上引起了臨床疾病。

2 臨床診斷

感染臨床特征顯示多種皮膚病變，從丘疹到結(jié)節(jié)不等。在剖檢過程中，皮膚和喉的病變通常懷疑為APV 感染。

2.1 實(shí)驗(yàn)室診斷

2.1.1 組織病理學(xué)和電鏡對于疑似APV 感染，可以用剖檢來檢測，尤其是口腔出現(xiàn)白喉形態(tài)。此外，用經(jīng)典的Wright’s Giemsa 染色對組織切片進(jìn)行組織學(xué)檢查，可以發(fā)現(xiàn)典型的大、實(shí)或環(huán)狀嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體，稱為Bollinger 小體。透射電鏡（TEM）也確認(rèn)出APV 感染，有包涵體內(nèi)典型的APV 顆粒。用2%磷鎢酸（Pta）對感染細(xì)胞進(jìn)行負(fù)染電鏡也可鑒定APV。這些方法通常用來實(shí)驗(yàn)室鑒定APV。

2.1.2 病毒分離將典型APV 的臨床標(biāo)本的勻漿接種到雞胚上，是診斷APV 的標(biāo)準(zhǔn)方法，盡管有些APV 株在雞胚上不容易生長。雞胚首先用70%的酒精擦拭消毒，然后在氣室上的打一個(gè)小孔，在雞胚的另一側(cè)打另一個(gè)孔，形成一個(gè)假氣囊，然后用橡膠球負(fù)壓降低氣壓。用無菌一次性1mL 注射器對感染樣本進(jìn)行接種，接種量約為0.1～0.2mL。雞胚在37℃下孵育5d，每天用檢查胚胎死亡情況。接種后3～5d，在膜上可觀察到大小為0.5至1.5mm 的斑點(diǎn)狀病變。另一種分離APV 的方法需要對臨床樣本進(jìn)行切除和勻漿，并將勻漿上清液接種到細(xì)胞上培養(yǎng)，如CEF 細(xì)胞。細(xì)胞病變通常在接種后4～6d 內(nèi)形成，這取決于病毒分離物和感染的多重性。

2.1.3 分子生物學(xué)檢測針對特定基因的PCR、限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）、Southernblot 雜交等方法正在越來越多地用于檢測和鑒定APV。PCR技術(shù)對病毒核酸檢測是敏感和特異，可以提高對許多病毒病原體的診斷敏感性。

2.1.4 血清學(xué)分析傳統(tǒng)的瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散的血清學(xué)檢測技術(shù)在全球范圍內(nèi)廣泛用于家禽APV 的監(jiān)測和疾病控制工作。這種檢測在對大量的血清進(jìn)行檢測時(shí)，與其他檢測方法如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）相比，靈敏度似乎較低。ELSIA 是一種快速、簡便的檢測抗APV 抗體的方法，特別是當(dāng)大量的血清檢測時(shí)，比中和試驗(yàn)更靈敏。

3 防治

控制家禽APV，需要在保持治療效果的同時(shí)保持低成本的策略。預(yù)防可以通過疫苗接種來實(shí)現(xiàn)。已研制出重組和活的改良疫苗，用于預(yù)防雞、鴿子、火雞和鵪鶉感染?，F(xiàn)有疫苗是非常有效的，這無疑對預(yù)防家禽養(yǎng)殖中的疾病作出了巨大貢獻(xiàn)。由于不同的APV是從鳥類物種中分離出來的，而且由于只有少數(shù)幾個(gè)分離物已被鑒定，因此開發(fā)針對所有物種的分類群特異性疫苗一直是困難的。因此，現(xiàn)有的疫苗往往是在試驗(yàn)的基礎(chǔ)上使用的，需要對這些病毒的分子生物學(xué)、病理學(xué)和流行病學(xué)有更多的了解，才能研制出能夠有效保護(hù)各種鳥類的疫苗。與大多數(shù)病毒感染一樣，沒有針對禽類痘病毒感染的專門治療方法?？捎玫闹委煼椒òㄊ褂玫飧视驮谄つw增生的皮膚損傷處使用，以幫助愈合，控制繼發(fā)性細(xì)菌感染的抗生素以及使用維生素A 幫助皮膚愈合。

雞痘被認(rèn)為是一種痘病，容易傳播。雞痘疫苗是最早引進(jìn)的家禽疫苗之一。雞痘疫苗往往分為兩種類型：雞胚起源型（CEO）和組織培養(yǎng)型（TCO）。一般來說，TCO 比CEO 更弱，這可能是由于更廣泛的傳代。因此，雖然TCO 疫苗可以用于雛雞，但CEO 疫苗的殘留致病性較高，該疫苗在雛鳥出生幾周后才能使用。然而，TCO 疫苗的更弱的免疫反應(yīng)意味著不會提供持久的保護(hù)，因此蛋雞和育種者需要在6周時(shí)使用CEO 疫苗。TCO 應(yīng)用于日齡雛雞更實(shí)用，特別是在使用半自動(dòng)注射器的情況下。

商用重組雞痘病毒載體疫苗現(xiàn)已上市，例如針對禽類腦脊髓炎，禽流感，傳染性喉氣管炎，支原體和新城疫。許多其他重組疫苗正在開發(fā)中。但使用適當(dāng)減毒的疫苗載體是很重要的，特別是在接種疫苗后避免出現(xiàn)并發(fā)癥。

4 結(jié)語

APV 是一種對家禽產(chǎn)業(yè)和野生鳥類具有經(jīng)濟(jì)重要性的疾病。因此，需要預(yù)防措施，例如疫苗接種。許多重組APV 結(jié)構(gòu)已獲準(zhǔn)用于獸醫(yī)領(lǐng)域，目前正在測試一系列候選疫苗，以用于預(yù)防動(dòng)物和人類多種傳染病的疫苗。因此，重組APV 載體疫苗在不久的將來也有可能被用于治療人類疾病。使用APV 而不是痘病毒或其他哺乳動(dòng)物病毒作為載體的主要安全理由是，APV不是人畜共患病，不能在哺乳動(dòng)物中進(jìn)行完整的復(fù)制周期。然而，最近的研究表明，雞痘病毒能夠在一些已建立的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中復(fù)制和產(chǎn)生后代病毒。新的分子工具使限制病毒進(jìn)入某些宿主的因素和機(jī)制得到了更好的解決，例如艾滋病毒和非典病毒。宿主機(jī)制、致病性、宿主免疫和病毒免疫策略對于APV 作為載體在多種屬靶向疫苗中的應(yīng)用具有重要意義。