• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    蕓薹屬種內(nèi)與種間雜種遺傳學(xué)特征

    2021-01-07 07:32:58朱永生李漢仁陳紀(jì)鵬
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2021年24期

    朱永生 李漢仁 陳紀(jì)鵬

    摘要:蕓薹屬包括多種蔬菜和油料作物,是與人類生產(chǎn)、生活關(guān)系最密切的一個屬。為了研究白菜型油菜與其近緣種間的雜交親和性及雜種后代的遺傳特征,采用剝蕾去雄和人工授粉方法進(jìn)行小白菜與甘藍(lán)型油菜種間雜交AACC×AcAc以及小白菜與黃芽白不同栽培種間雜交AcAc×AhAh,并分析雜種后代的表型、花粉育性和細(xì)胞學(xué)等遺傳特征。結(jié)果表明,AACC×AcAc雜交組合雜交授粉親和性差,在授粉后出現(xiàn)胚發(fā)育夭亡現(xiàn)象,以較低的比例獲得了雜種后代,雜種后代表現(xiàn)出生物產(chǎn)量高、生命力旺盛、生長勢較強(qiáng)等特點。雜交組合AcAc×AhAh獲得雜種后代的比例較高,雜種后代植株較矮小。AACC×AcAc雜種后代花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂過程中有單價體、不均等分離等異常現(xiàn)象出現(xiàn),與之相應(yīng)其花粉育性和結(jié)實率也較差。AcAc×AhAh雜種后代花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂過程中染色體聯(lián)會正常,所有染色體都形成二價體,后期I染色體也是均等分離,因此花粉育性好,結(jié)實率高。蕓薹屬雜種后代合成及其遺傳特征研究有助于蕓薹屬栽培植物遺傳資源拓展和新品種培育。

    關(guān)鍵詞:白菜型油菜;甘藍(lán)型油菜;遠(yuǎn)緣雜交;細(xì)胞遺傳

    中圖分類號:S634.303 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號:1002-1302(2021)24-0085-05

    收稿日期:2021-03-27

    基金項目:國家自然科學(xué)基金(編號:31460357);江西省自然科學(xué)基金(編號:20202BABL205017);江西省教育廳科研項目(編號:GJJ170908)。

    作者簡介:朱永生(2000—),男,江西新干人,主要從事植物遺傳育種研究。E-mail: 2991753843@qq.com。

    通信作者:陳紀(jì)鵬,博士,副教授,主要從事油菜遠(yuǎn)緣雜交和細(xì)胞遺傳研究。E-mail:chensi20020606@163.com。

    隨著現(xiàn)代育技術(shù)的不斷發(fā)展,蕓薹屬植物中現(xiàn)有的遺傳資源卻越來越稀少,而遠(yuǎn)緣雜交在近緣物種基因資源拓展、改良植物新品種和創(chuàng)造植物新類型方面具有重要作用[1-2]。蕓薹屬植物雜交后代常表現(xiàn)出較高的生物產(chǎn)量、旺盛的生長活力、生長勢強(qiáng)等雜種優(yōu)勢,并可將近緣種的優(yōu)良基因引入栽培種[3-5]。當(dāng)前蕓薹屬栽培種由于不斷地進(jìn)行人工選擇以及氣候環(huán)境的影響,導(dǎo)致其種內(nèi)的遺傳多樣性顯著減少,而用于品種選育的親本資源也不斷下降。采用不同栽培種間雜交以及不同種間雜交甚至親緣關(guān)系更遠(yuǎn)的雜交,合成蕓薹屬遠(yuǎn)緣雜種,即為蕓薹屬栽培種,創(chuàng)造新的遺傳類型、轉(zhuǎn)入有利基因用于植物的遺傳改良、提高栽培種的品質(zhì)及產(chǎn)量[6-9]。

    蕓薹屬植物種類繁多,物種豐富廣泛,包含很多的亞種、變種和栽培種,是重要的蔬菜、油料和藥用植物。甘藍(lán)型油菜是重要的油料作物之一,起源于歐洲,培育年限較短,遺傳基礎(chǔ)較窄,但是它角果大、籽粒大、結(jié)籽數(shù)多。白菜型油菜栽培歷史悠久,遺傳資源非常豐富,具有耐貧瘠、耐旱、耐寒等特性,可根據(jù)這些物種之間的差異,來豐富我國油菜育種的遺傳基礎(chǔ)[10]。利用甘藍(lán)型油菜與白菜型油菜二者進(jìn)行種間雜交和種內(nèi)雜交豐富甘藍(lán)型油菜的遺傳資源是當(dāng)前常用的育種方法[11,12]。本試驗采用人工去雄和輔助授粉的方式進(jìn)行甘藍(lán)型油菜與小白菜雜交和小白菜與黃芽白之間雜交,并結(jié)合胚培養(yǎng)的方式獲得雜種后代,觀察雜種后代的遺傳學(xué)特征,創(chuàng)建蕓薹屬育種新材料。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    采用甘藍(lán)型油菜湘油15(Brassica napus var. xiangyou15)與白菜型油菜栽培種小白菜(B. rapa var. chinensis)進(jìn)行種間雜交獲取種間雜種后代AACC×AcAc。以小白菜和黃芽白(B. rapa var. huangyabai)做親本進(jìn)行不同栽培種間雜交獲取種內(nèi)雜種AcAc×AhAh。于2017年10月上旬在田間種植上述親本材料。由于白菜型油菜生育期較短,所以白菜型油菜適當(dāng)晚播以使父母本花期相遇。

    1.2 人工雜交

    第2年春季油菜盛花期,采用人工去雄和輔助授粉的方法進(jìn)行雜交。選擇晴朗天氣,對母本進(jìn)行人工剝蕾去雄,并立即用牛皮紙袋套上,別好回形針,做好標(biāo)記,同時對父本也用牛皮紙?zhí)缀茫苑乐够ǚ郾晃廴?。?天上午取前1 d套好袋且剛剛開放的父本花朵對前1 d去雄的母本進(jìn)行授粉,授粉之后再用紙袋套好,做好標(biāo)記。后期進(jìn)行胚培養(yǎng)或收獲種子,以獲得雜種數(shù)與授粉花雜數(shù)之比作為親和指數(shù),代表雜交親和性。

    1.3 胚培養(yǎng)

    授粉大約15 d左右(具體時間視雜種胚發(fā)育時期確定),從母本植株上取下授粉后膨大的角果進(jìn)行胚培養(yǎng)。先用70%乙醇對角果表面消毒 2~3 min,然后浸入0.1%的氯化汞溶液中浸泡 15 min,從氯化汞溶液中取出后用無菌水漂洗3次,將角果表面殘留的有害藥劑洗凈。在超凈工作臺的無菌環(huán)境下,輕輕將角果剝開后,從胚珠中取出幼胚接種于MS培養(yǎng)基表面,置于20 ℃,光周期為 12 h/24 h 的環(huán)境下培養(yǎng)。待幼胚長出芽時,把芽轉(zhuǎn)接種在 MS+0.25 mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA的培養(yǎng)基擴(kuò)繁。最后將幼苗轉(zhuǎn)入MS培養(yǎng)基中生根培養(yǎng),待幼芽的根長出較多后移栽到田間。

    1.4 雜種后代花粉育性觀察

    在雜種植株盛花期觀察雜種植株花粉育性。在天氣晴朗的上午取雜種植株剛開放的花藥,每株2枚放在載玻片上,滴醋酸洋紅染色液,再用攝子將花藥壓破使花粉粒散出,并去除花藥壁殘片。蓋上蓋玻片,輕輕按壓后置于顯微鏡下觀察。有活力的花粉粒在顯微鏡下是大而圓的,而且著色比較深,而不育的花粉則表現(xiàn)為小而癟,不容易被染色,顏色較淺,從而可以區(qū)分可育花粉和不育花粉。每個雜交組合選10株進(jìn)行花粉育性觀察,每株觀察花粉至少100粒,統(tǒng)計可育花粉所占的比例。

    1.5 雜種后代減數(shù)分裂細(xì)胞學(xué)觀察

    為了觀察花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂,在雜種植株初花期摘取其幼嫩花蕾,用卡諾固定液(無水乙醇與冰乙酸體積比為3 ∶1混合溶液)進(jìn)行處理,處理時間≥24 h,處理完成后浸泡于75%乙醇中并貯藏于-20 ℃的冷凍箱中備用。觀察時取出備用的幼嫩花蕾放入盛有清水的培養(yǎng)皿中清洗殘留花蕾表面的乙醇,接著用鑷子從花蕾中取出1~2個花藥放于盛有1 mol/L HCl溶液的燒杯中,并在溫度為60 ℃水溫中水浴加熱水解2 min,然后取出花藥用清水漂洗去HCl,最后將處理完成的花藥放于蓋玻片上并用鑷子將花藥壓破使花粉母細(xì)胞散出,再用卡寶品紅進(jìn)行染色,蓋上蓋玻片并壓片,放于高倍顯微鏡下觀察花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂。將所觀察到的花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂圖片拍照保存。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 雜交親和性比較

    通過人工去雄、輔助授粉和胚培養(yǎng),在以小白菜為母本、黃芽白為父本的雜交組合(AcAc×AhAh)以較高的親和指數(shù)(1.91)獲得雜種后代植株。而以甘藍(lán)型油菜為母本、小白菜為父本的雜交組合(AACC×AcAc)親和指數(shù)只有0.29)。AcAc×AhAh組合通過人工授粉進(jìn)行雜交,觀察雜交親和性,共調(diào)查225莢,在這些莢中空莢的數(shù)目有13個,占總數(shù)的 5.7%,有種子的莢中平均每莢結(jié)籽數(shù)目有1~5粒,占總數(shù)的8.7%籽粒不飽滿,不能正常發(fā)芽。AACC×AcAc組合授粉的花朵只有不到50%種子發(fā)育形成角果,其他的由于沒有繼續(xù)發(fā)育而凋落。發(fā)育的種子也有較多不飽滿不能正常發(fā)芽,雜交成功率較低(表1)。

    授粉后15 d左右,取部分角果進(jìn)行胚培養(yǎng),培養(yǎng)5 d后幼胚開始成長出濃密的白色根毛,10 d左右就開始形成真葉,但多數(shù)幼苗生長畸形。生長 20~30 d時剪幼芽繼代培養(yǎng)便獲得生長旺盛的幼苗。移栽前30 d轉(zhuǎn)入不加任何激素的MS生根培養(yǎng)基,全部幼苗都能正常生根。AcAc×AhAh組合和AACC×AcAc組合分別以0.80和0.62的成功率獲得雜種植株(表2)。

    2.2 雜種后代形態(tài)學(xué)特征

    AACC×AcAc雜交后代植株的葉片形態(tài)和葉片大小接近甘藍(lán)型油菜,苗期葉裂比甘藍(lán)型油菜更深,葉的長度長于甘藍(lán)型油菜,葉的顏色與甘藍(lán)型油菜相似,在葉片表面還覆蓋了一層薄薄的蠟質(zhì)(圖1-A、B)。雜種植株花呈黃色,形態(tài)與甘藍(lán)型油菜相似,開花較早,花期與親本相比較長。推測可能是由于雜種結(jié)實率低,在生長過程中生殖生長時間短從而消耗營養(yǎng)較少。雜種植株雌蕊外觀形態(tài)發(fā)育正常,但雄蕊發(fā)育不完全,花絲短,花藥中花粉含量少,可育花比例低(圖1-C)。成熟期雜種植株形態(tài)與甘藍(lán)型油菜相似,分枝較多,生長旺盛,表現(xiàn)出一定的雜種優(yōu)勢;花期較長,田間自由授粉情況下能產(chǎn)生少量種子,每個角果5~10粒種子發(fā)育成熟。

    AcAc×AhAh雜交組合中,雜種植株的葉片形態(tài)和大小與親本相似,有些雜種植株表面都覆蓋一層長毛,表面粗糙(圖2-A、圖2-B、圖2-C)。雜種植株株高接近雙親,第一分枝高度卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于兩親本,一級分支數(shù)高于兩親本,每株角果數(shù)介于兩親本之間,大部分種子都能發(fā)育成熟(表3)。

    2.3 花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂

    AACC×AcAc雜交后代雖然營養(yǎng)生長旺盛,在形態(tài)上表現(xiàn)出較強(qiáng)的雜種優(yōu)勢,但花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂過程中出現(xiàn)較多的染色體行為異常。如染色體聯(lián)會時出現(xiàn)單價體,后期有的細(xì)胞出現(xiàn)落后染色體或染色體橋(圖1-D)。因此,雜種后代花粉育性較低,而且自交結(jié)實率低。而AcAc×AhAh雜種后代花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂各個階段染色體行為表現(xiàn)正常,花粉形成過程正常,花粉粒育性良好(圖2D)。從圖2-E可以看出,花粉母細(xì)胞處于減數(shù)第一次分裂后期,細(xì)胞的染色分別移向細(xì)胞的兩級,沒有出現(xiàn)染色體落后現(xiàn)象,染色均等分離,細(xì)胞的兩級均得到一個完整的染色體組。

    3 結(jié)論與討論

    隨著現(xiàn)代生物技術(shù)在遺傳育種中應(yīng)用越來越廣泛,克服遠(yuǎn)緣雜交中生殖隔離,并不斷獲得新品種,為蕓薹屬植物遺傳改良提供了豐富的資源基礎(chǔ)[13-15]。為了利用作物種間優(yōu)良的遺傳資源,用小白菜與黃芽白、小白菜與甘藍(lán)型油菜進(jìn)行雜交,并且通過人工去雄、輔助授粉和胚培養(yǎng)等輔助方法獲得了后代雜種。黃芽白和小白菜進(jìn)行雜交,親和性好,結(jié)實正常,雜交種子沒有出現(xiàn)結(jié)籽異常的現(xiàn)象,表明小白菜型油菜種內(nèi)不同栽培種之間雜交容易進(jìn)行。而甘藍(lán)型油菜與小白菜之間雜交親和性較差。在眾多植物遠(yuǎn)緣雜交中,兩親本的染色體數(shù)目的多少也會影響雜交的親和性[16]。母本選擇染色體數(shù)量多的雜交后代更容易獲得[17-18]。在本試驗中,小白菜與甘藍(lán)型油菜間雜交的組合中,選用染色體少的小白菜做母本,染色體數(shù)量多的甘藍(lán)型油菜做父本,授粉后20 d進(jìn)行統(tǒng)計,出現(xiàn)了雜交結(jié)籽異常的情況,雜交不親和,結(jié)籽粒少,莢內(nèi)發(fā)芽數(shù)多等情況,還有些胚乳出現(xiàn)嚴(yán)重敗壞的現(xiàn)象,胚死亡而沒有得到雜種種子。而在以甘藍(lán)型油菜為母本的反交組合中,兩親本的親和性表現(xiàn)較好。外界環(huán)境因素是影響油菜遠(yuǎn)緣雜交親和性大小的因素之一[19]。外界環(huán)境因素也會對油菜雜交產(chǎn)生一定的影響,長日照高溫之所以會提高植物雜交親和力,主要是長日照高溫促進(jìn)植物受精作用,使得植株受精過程中的生理生化反應(yīng)得以改變[20]。隨著現(xiàn)代科學(xué)和生物科技的不斷發(fā)展,較好地克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,并為油菜育種提供了另一方法與途徑。選用的雜交組合不一樣,雜交后代的親和性也不同[21]。雜交親本的選擇和外界環(huán)境因素共同作用影響雜交親和性,在棉花雜交中也出現(xiàn)類似情況[22]。

    遠(yuǎn)緣雜交不親合表現(xiàn)在有性繁殖過程的多個環(huán)節(jié)。花粉管生長遲緩且畸形,導(dǎo)致花粉無法到達(dá)胚珠而出現(xiàn)受精受阻的現(xiàn)象;還有一種原因可能是因為在人工雜交的過程中,花粉的黏合性比較差,花粉很難一直保持在柱頭上;受精后因為遠(yuǎn)緣雜交的植株之間產(chǎn)生的不親和性,胚乳又表現(xiàn)出敗壞,最終出現(xiàn)胚死亡的現(xiàn)象??偟膩碚f,一般情況下的人工雜交難以獲得成功,因此,胚培養(yǎng)是克服雜種幼胚夭亡最有效的方法,許多遠(yuǎn)緣雜種通過人工雜交結(jié)合胚培養(yǎng)而獲得[22]。

    參考文獻(xiàn):

    [1]Garg H,Banga S S,Bansal P,et al. Hybridizing Brassica rapa with wild crucifers Diplotaxis erucoides and Brassica maurorum[J]. Euphytica,2007,156(3):417-424.

    [2]Girke A,Schierholt A,Becker H C. Extending the rapeseed genepool with resynthesized Brassica napus L. Ⅰ:Genetic diversity[J]. Genetic Resources and Crop Evolution,2012,59(7):1441-1447.

    [3]王國槐,官春云,陳社員. 十字花科種間雜交親和性雄性不育細(xì)胞質(zhì)遺傳效應(yīng)[J]. 中國油料作物學(xué)報,2005,27(2):66-68.

    [4]王國槐,官春云,陳社員,等. 十字花科蕓薹屬種間雜種營養(yǎng)優(yōu)勢的利用研究[J]. 作物學(xué)報,2003,29(1):54-58.

    [5]Karim M M,Siddika A,Tonu N N,et al. Production of high yield short duration Brassica napus by interspecific hybridization between B.oleracea and B. rapa[J]. Breeding Science,2014,63(5):495-502.

    [6]Wei W H,Li Y C,Wang L J,et al. Development of a novel Sinapis arvensis disomic addition line in Brassica napus containing the restorer gene for Nsa CMS and improved resistance to Sclerotinia sclerotiorum and pod shattering[J]. Theoretical and Applied Genetics,2010,120(6):1089-1097.

    [7]Sosnowska K,Cegielska-Taras T. Application of in vitro pollination of opened ovaries to obtain Brassica oleracea L.×B. rapa L. hybrids[J]. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant,2014,50(2):257-262.

    [8]Prakash S,Bhat S R,Quiros C F,et al. Brassica and its close allies:cytogenetics and evolution[M]//Plant Breeding Reviews.Hoboken:John Wiley & Sons,Inc.,2009.

    [9]Malek M A,Ismail M R,Rafii M Y,et al. Synthetic Brassica napus L.:development and studies on morphological characters,yield attributes,and yield[J]. Scientific World Journal,2012,2012:416901.

    [10]王學(xué)芳,田建華,張耀文,等. 甘白雜交創(chuàng)制早熟油菜新種質(zhì)的研究[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報,2017,33(32):28-33.

    [11]Rahman H. Review:breeding spring canola (Brassica napus L.) by the use of exotic germplasm[J]. Canadian Journal of Plant Science,2013,93(3):363-373.

    [12]Seyis F. Towards a canola quality resynthesized rapeseed (B. napus L.) B. olaracea genotypes as a basic resource[J]. Eur J Plant Sci Biotechnol,2013,7(1):33-37.

    [13]Gu H H,Zhao Z Q,Sheng X G,et al. Efficient doubled haploid production in microspore culture of loose-curd cauliflower (Brassica oleracea var.botrytis)[J]. Euphytica,2014,195(3):467-475.

    [14]趙志剛.芥菜型油菜、白菜型油菜種間雜種的小孢子培養(yǎng)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,41(12):80-82.

    [15]萬麗麗,王轉(zhuǎn)茸,范志雄,等. 單倍體誘導(dǎo)創(chuàng)建二倍體技術(shù)在油菜遺傳育種中的研究進(jìn)展[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2020,48(10):38-45.

    [16]郭曉燦,韓佳慧,童未名,等. 蘿卜與蕓薹屬遠(yuǎn)緣雜交不親和性克服及DNA甲基化的研究進(jìn)展[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2019,47(22):12-17.

    [17]趙 彤,謝 晉,殷 婷,等. 芥甘雜種后代F1和F2形態(tài)學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報,2020,33(8):1623-1631.

    [18]虎滿林,余青蘭,尚國霞,等. 白菜型油菜遺傳物質(zhì)滲入甘藍(lán)型油菜的研究[J]. 分子植物育種,2016,14(5):1223-1229.

    [19]戴興臨,程春明,潘 斌,等. 油菜與蔊菜遠(yuǎn)緣雜交親和性研究初報[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報,2001,13(1):60-61.

    [20]劉忠松. 油菜遠(yuǎn)緣雜交的遺傳育種研究Ⅱ.甘藍(lán)型油菜與芥菜型油菜雜交的親和性及其雜種一代[J]. 中國油料,1994,16(3):1-5,10.

    [21]劉曉霞. 甘藍(lán)型油菜雜交親和性的研究[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué),2007(5):39-41.

    [22]郝良光,夏紹南,陳俊英,等. 雜交組合與正反交后代優(yōu)勢比較分析[J]. 江西棉花,2005,27(3):7-12.

    [23]陳紀(jì)鵬,劉小林,胡月清. 甘藍(lán)型油菜與黑芥種間雜種基因組親緣關(guān)系研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2015,43(6):87-90.

    99热网站在线观看| h视频一区二区三区| av视频免费观看在线观看| 国产一区二区激情短视频 | 久久久国产一区二区| 日韩欧美精品免费久久| 97在线人人人人妻| 99re6热这里在线精品视频| 男女下面插进去视频免费观看 | 人妻 亚洲 视频| 国产av精品麻豆| 视频区图区小说| 国产成人av激情在线播放| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲国产欧美在线一区| 在现免费观看毛片| tube8黄色片| 亚洲人成77777在线视频| 99香蕉大伊视频| 在线观看美女被高潮喷水网站| 99热全是精品| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 国产麻豆69| 亚洲色图综合在线观看| 99久久人妻综合| 伦理电影大哥的女人| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产成人a∨麻豆精品| 久久久久久久大尺度免费视频| 人妻一区二区av| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 欧美另类一区| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产淫语在线视频| 这个男人来自地球电影免费观看 | 大码成人一级视频| 久久久久国产精品人妻一区二区| 日韩在线高清观看一区二区三区| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲中文av在线| 看非洲黑人一级黄片| 视频中文字幕在线观看| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 人体艺术视频欧美日本| 最近最新中文字幕免费大全7| 午夜老司机福利剧场| 伊人久久国产一区二区| 黑丝袜美女国产一区| 大片免费播放器 马上看| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲丝袜综合中文字幕| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 搡老乐熟女国产| 亚洲人与动物交配视频| 午夜福利,免费看| 在线观看免费日韩欧美大片| 中国国产av一级| 欧美成人午夜精品| 色5月婷婷丁香| av视频免费观看在线观看| 男女无遮挡免费网站观看| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产成人免费观看mmmm| 在线观看免费高清a一片| 亚洲美女搞黄在线观看| 大话2 男鬼变身卡| 国产片内射在线| 中文字幕av电影在线播放| 欧美成人精品欧美一级黄| 免费看光身美女| 最黄视频免费看| 天美传媒精品一区二区| 中文字幕免费在线视频6| www.av在线官网国产| 日韩精品有码人妻一区| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 一级,二级,三级黄色视频| www.熟女人妻精品国产 | 午夜av观看不卡| 精品少妇久久久久久888优播| 黄色 视频免费看| 国产一区二区三区综合在线观看 | 精品国产一区二区三区四区第35| 一区二区三区精品91| 人人澡人人妻人| 韩国av在线不卡| 久久av网站| 亚洲熟女精品中文字幕| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久久久久人妻| 久久国产精品大桥未久av| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 在线观看一区二区三区激情| 男女啪啪激烈高潮av片| 国精品久久久久久国模美| 久久人人97超碰香蕉20202| 免费av不卡在线播放| 我的女老师完整版在线观看| 少妇人妻精品综合一区二区| 久久久久国产网址| 亚洲av.av天堂| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 伦精品一区二区三区| 国产 一区精品| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲av在线观看美女高潮| 最近中文字幕2019免费版| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡 | 人妻 亚洲 视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 91在线精品国自产拍蜜月| 高清毛片免费看| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 久久热在线av| 熟妇人妻不卡中文字幕| 永久网站在线| 丰满迷人的少妇在线观看| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 熟女电影av网| 在线观看三级黄色| 香蕉精品网在线| 色94色欧美一区二区| 日韩三级伦理在线观看| 妹子高潮喷水视频| 日本-黄色视频高清免费观看| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 三级国产精品片| 国产欧美亚洲国产| 777米奇影视久久| 少妇人妻精品综合一区二区| 久久国产精品大桥未久av| 国产亚洲欧美精品永久| 天堂俺去俺来也www色官网| 黄色一级大片看看| 2018国产大陆天天弄谢| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 久久ye,这里只有精品| 久久久久久久大尺度免费视频| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲av在线观看美女高潮| 成人毛片60女人毛片免费| 久久ye,这里只有精品| 三上悠亚av全集在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 久久久精品94久久精品| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 一级片免费观看大全| 免费大片18禁| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 乱人伦中国视频| 男女免费视频国产| 久久人人爽av亚洲精品天堂| tube8黄色片| 亚洲av国产av综合av卡| 性色avwww在线观看| 午夜免费观看性视频| 日本av免费视频播放| videossex国产| h视频一区二区三区| 免费观看a级毛片全部| 亚洲综合精品二区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 国产伦理片在线播放av一区| 国产一区亚洲一区在线观看| 18禁观看日本| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 又黄又粗又硬又大视频| 97超碰精品成人国产| 视频区图区小说| 精品一区二区三区视频在线| 色94色欧美一区二区| 日韩av免费高清视频| 丝袜在线中文字幕| 国产成人精品无人区| 两个人看的免费小视频| 一级爰片在线观看| 少妇人妻 视频| 国产精品一区www在线观看| 十八禁网站网址无遮挡| 一级毛片电影观看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 大香蕉久久成人网| 亚洲精品日本国产第一区| 国产探花极品一区二区| 精品久久蜜臀av无| 国产精品蜜桃在线观看| 久久免费观看电影| 99久久精品国产国产毛片| 色5月婷婷丁香| 精品一区二区免费观看| 人妻系列 视频| 成人免费观看视频高清| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 免费黄网站久久成人精品| 制服丝袜香蕉在线| 嫩草影院入口| 精品少妇黑人巨大在线播放| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 亚洲国产精品国产精品| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲四区av| 十八禁网站网址无遮挡| 黑人猛操日本美女一级片| 中文字幕免费在线视频6| 欧美xxⅹ黑人| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 精品国产露脸久久av麻豆| 国产片内射在线| 精品人妻一区二区三区麻豆| 看非洲黑人一级黄片| 国产精品一区www在线观看| 女性生殖器流出的白浆| 久久热在线av| av视频免费观看在线观看| 国产一区二区在线观看av| 韩国av在线不卡| 全区人妻精品视频| 嫩草影院入口| 看免费成人av毛片| 亚洲欧洲日产国产| 乱码一卡2卡4卡精品| 欧美精品一区二区免费开放| 亚洲国产精品成人久久小说| av有码第一页| 日本av手机在线免费观看| 一个人免费看片子| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 高清欧美精品videossex| 亚洲,欧美,日韩| 午夜激情久久久久久久| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 老女人水多毛片| av播播在线观看一区| 国产亚洲精品久久久com| 在线天堂中文资源库| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 女性生殖器流出的白浆| av天堂久久9| tube8黄色片| 最黄视频免费看| 少妇人妻精品综合一区二区| 交换朋友夫妻互换小说| 久久午夜福利片| 亚洲,欧美精品.| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 男人舔女人的私密视频| av免费观看日本| 水蜜桃什么品种好| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国内精品宾馆在线| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产综合精华液| 美女中出高潮动态图| 搡女人真爽免费视频火全软件| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 永久网站在线| 春色校园在线视频观看| 波野结衣二区三区在线| 久久97久久精品| 热99久久久久精品小说推荐| 97在线视频观看| 丁香六月天网| 日本午夜av视频| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| av.在线天堂| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产午夜精品一二区理论片| 少妇的逼好多水| 新久久久久国产一级毛片| 美女主播在线视频| 蜜桃国产av成人99| 国产精品成人在线| 亚洲五月色婷婷综合| 天堂中文最新版在线下载| 毛片一级片免费看久久久久| 国产欧美亚洲国产| 久久97久久精品| 熟女av电影| 午夜久久久在线观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 精品国产乱码久久久久久小说| 99热这里只有是精品在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 在现免费观看毛片| 亚洲欧美精品自产自拍| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 国产老妇伦熟女老妇高清| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产1区2区3区精品| 尾随美女入室| 青春草亚洲视频在线观看| 在线观看免费视频网站a站| 亚洲成国产人片在线观看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 18禁动态无遮挡网站| 2022亚洲国产成人精品| 国产日韩欧美视频二区| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美精品一区二区大全| 成年人午夜在线观看视频| 插逼视频在线观看| 精品久久久精品久久久| 色网站视频免费| 午夜福利视频精品| 久久久国产精品麻豆| xxxhd国产人妻xxx| 久久久久国产网址| 国产成人免费无遮挡视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 久久久久久久精品精品| 国产精品不卡视频一区二区| 久久影院123| 精品人妻在线不人妻| 黑人高潮一二区| 高清在线视频一区二区三区| 国产成人91sexporn| 自线自在国产av| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产成人aa在线观看| 国产福利在线免费观看视频| 9热在线视频观看99| 在线看a的网站| 我要看黄色一级片免费的| 精品国产一区二区三区久久久樱花| av卡一久久| 五月开心婷婷网| 久久97久久精品| 免费看光身美女| 午夜免费鲁丝| 亚洲久久久国产精品| 搡老乐熟女国产| 另类亚洲欧美激情| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 精品一品国产午夜福利视频| 一级毛片电影观看| 熟女av电影| 久久ye,这里只有精品| 少妇的逼水好多| 男女高潮啪啪啪动态图| 中国美白少妇内射xxxbb| 欧美精品av麻豆av| 欧美人与善性xxx| 亚洲国产精品一区三区| 十八禁网站网址无遮挡| 国产成人免费无遮挡视频| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 美女中出高潮动态图| 777米奇影视久久| 日本欧美视频一区| 有码 亚洲区| 午夜免费观看性视频| 男女边吃奶边做爰视频| 18+在线观看网站| 国产精品一区二区在线不卡| 午夜福利,免费看| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 午夜福利,免费看| 人人澡人人妻人| 99re6热这里在线精品视频| 日本av手机在线免费观看| 国产在线视频一区二区| 美女福利国产在线| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 18在线观看网站| 一边摸一边做爽爽视频免费| 成人黄色视频免费在线看| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产一区二区在线观看av| av黄色大香蕉| 久久久久视频综合| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美另类一区| 久久久久久久久久成人| 国精品久久久久久国模美| 成人免费观看视频高清| 亚洲欧美清纯卡通| 美女大奶头黄色视频| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产精品一国产av| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产日韩欧美在线精品| 97在线视频观看| 18禁国产床啪视频网站| 一级片'在线观看视频| 午夜福利乱码中文字幕| 制服人妻中文乱码| 捣出白浆h1v1| 丰满少妇做爰视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| 下体分泌物呈黄色| 国产精品偷伦视频观看了| 久热久热在线精品观看| 搡女人真爽免费视频火全软件| 日日啪夜夜爽| 日韩av免费高清视频| 国产精品国产av在线观看| 搡老乐熟女国产| 亚洲欧美成人精品一区二区| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 成年人免费黄色播放视频| 毛片一级片免费看久久久久| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 老司机亚洲免费影院| 久久久亚洲精品成人影院| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 欧美日韩视频精品一区| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲成国产人片在线观看| 国产淫语在线视频| 国产精品女同一区二区软件| 久久鲁丝午夜福利片| 精品卡一卡二卡四卡免费| 欧美日韩综合久久久久久| 色婷婷久久久亚洲欧美| av在线观看视频网站免费| 欧美xxxx性猛交bbbb| av播播在线观看一区| 飞空精品影院首页| 美女国产视频在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 欧美精品高潮呻吟av久久| 一级a做视频免费观看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 卡戴珊不雅视频在线播放| 大陆偷拍与自拍| 最近手机中文字幕大全| 视频在线观看一区二区三区| 如何舔出高潮| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 美女中出高潮动态图| 国产精品一区二区在线不卡| 女性生殖器流出的白浆| 色婷婷久久久亚洲欧美| 只有这里有精品99| 老熟女久久久| 国产精品免费大片| 91精品三级在线观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 欧美精品一区二区大全| 婷婷成人精品国产| 国产一区二区在线观看av| 日韩欧美精品免费久久| 制服丝袜香蕉在线| 韩国高清视频一区二区三区| 一区二区av电影网| 夜夜爽夜夜爽视频| 国产高清国产精品国产三级| 黄色一级大片看看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 婷婷色麻豆天堂久久| 国产精品蜜桃在线观看| 久久久久视频综合| 久久亚洲国产成人精品v| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产精品久久久久久久电影| 一边摸一边做爽爽视频免费| 搡女人真爽免费视频火全软件| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 久久影院123| 亚洲经典国产精华液单| 人妻少妇偷人精品九色| 日本午夜av视频| 久久久a久久爽久久v久久| www.熟女人妻精品国产 | 五月天丁香电影| av在线观看视频网站免费| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 男女边吃奶边做爰视频| 精品酒店卫生间| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 欧美成人精品欧美一级黄| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 热99久久久久精品小说推荐| 热re99久久国产66热| 中文天堂在线官网| 纯流量卡能插随身wifi吗| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 18+在线观看网站| 国产成人a∨麻豆精品| 满18在线观看网站| 婷婷成人精品国产| av又黄又爽大尺度在线免费看| 日韩成人伦理影院| 日韩欧美精品免费久久| 国产极品天堂在线| av在线app专区| √禁漫天堂资源中文www| 亚洲精品美女久久av网站| 亚洲精品国产av成人精品| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 丝瓜视频免费看黄片| 日韩av免费高清视频| 成年人免费黄色播放视频| 免费日韩欧美在线观看| 两性夫妻黄色片 | 日韩中字成人| 国产色婷婷99| 久久精品久久精品一区二区三区| 满18在线观看网站| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 五月玫瑰六月丁香| 捣出白浆h1v1| 亚洲国产色片| 看非洲黑人一级黄片| 青春草视频在线免费观看| 日本av手机在线免费观看| 欧美xxⅹ黑人| 如何舔出高潮| 亚洲内射少妇av| 国产在线免费精品| 国产精品一区www在线观看| 26uuu在线亚洲综合色| 精品一品国产午夜福利视频| 在线观看免费高清a一片| 国产永久视频网站| av线在线观看网站| 国产亚洲最大av| 色94色欧美一区二区| 久久久久国产精品人妻一区二区| 日韩制服骚丝袜av| 18禁国产床啪视频网站| 婷婷色综合www| 免费人妻精品一区二区三区视频| 在线观看人妻少妇| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲国产欧美在线一区| 黄色一级大片看看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产麻豆69| 亚洲精品一二三| 一级毛片我不卡| 久久99蜜桃精品久久| 一级爰片在线观看| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久久久久久久国产电影| 国产片内射在线| 精品国产露脸久久av麻豆| 妹子高潮喷水视频| 久久久国产一区二区| 成人免费观看视频高清| 一边摸一边做爽爽视频免费| 成人国产av品久久久| 99久久人妻综合| av天堂久久9| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 丝袜在线中文字幕| 国产精品三级大全| 国产男女超爽视频在线观看| 国产精品国产三级国产专区5o| 爱豆传媒免费全集在线观看| 日本黄色日本黄色录像| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲国产精品专区欧美| 伦精品一区二区三区| 亚洲精品日本国产第一区| 中文字幕人妻熟女乱码| 久久久精品免费免费高清| 日韩欧美精品免费久久| 大香蕉久久成人网| 精品一区二区三卡| av卡一久久| 国产精品偷伦视频观看了| 国产xxxxx性猛交| 91精品伊人久久大香线蕉| 免费高清在线观看视频在线观看| 在线观看一区二区三区激情| 黄色毛片三级朝国网站| 2022亚洲国产成人精品| tube8黄色片| 一二三四中文在线观看免费高清| 男女边摸边吃奶| 日本91视频免费播放| 国产av国产精品国产| 22中文网久久字幕| 97在线人人人人妻| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲精品视频女| 新久久久久国产一级毛片| xxxhd国产人妻xxx| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 国产精品蜜桃在线观看| 2018国产大陆天天弄谢| 国产av精品麻豆| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 欧美精品av麻豆av| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 中文字幕免费在线视频6| 97在线视频观看| 精品熟女少妇av免费看| 亚洲美女搞黄在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 久久99一区二区三区| 韩国精品一区二区三区 | 成人亚洲欧美一区二区av|