苦歸婦炎膠囊的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)研究

牟建平 滕寶霞 顧健沛

1.甘肅省藥品檢驗(yàn)研究院，甘肅 蘭州730050，2.蘭州現(xiàn)代職業(yè)學(xué)院，甘肅 蘭州730000

苦歸婦炎膠囊是由苦參、當(dāng)歸、功夫木、益母草、赤豆、熟地黃、川芎、千金拔等多種中藥組成的制劑，具有抑菌、消炎、活血化瘀、清熱解毒等功能，用于治療濕熱下注型盆腔炎、陰道炎、慢性宮頸炎，癥見赤白帶下、陰癢、出血、痛經(jīng)等癥。近年來，根據(jù)世界衛(wèi)生組織不完全統(tǒng)計(jì)，婦女中各種婦科疾病發(fā)病率在65%以上［1，2］，臨床治療主要以外用藥為主，如栓劑、洗液，而在口服用藥上中藥比西藥具備更顯著的優(yōu)勢，消費(fèi)者對婦科類中成藥的療效較為認(rèn)同，這是化學(xué)藥無可比擬的［3］。本研究采用小鼠甩尾試驗(yàn)、小鼠熱板試驗(yàn)、小鼠扭體試驗(yàn)、建立甲醛致炎模型，評價(jià)苦歸婦炎膠囊的鎮(zhèn)痛作用，為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥物 苦歸婦炎膠囊，批號20161208，甘肅省人民醫(yī)院制劑室自制，推薦臨床劑量為4.8g/60kg，設(shè)三個(gè)劑量分別為0.4、0.8、1.2g/kg（相當(dāng)于推薦臨床劑量的5、10、15 倍）；元胡止痛片，蘭州佛慈制藥股份有限公司，批號20160418；陽性對照藥為婦炎康，批號20160201，珠海車鑫制藥有限公司，劑量1.2g/kg（相當(dāng)于臨床劑量10 倍）。取藥品適量，用蒸餾水稀釋至所需濃度，備用?？瞻讓φ諡樯睇}水。

1.2 動物 昆明種小鼠，體重（20.0±2.0）g；由蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物中心驗(yàn)室購進(jìn)，動物合格證：甘肅省實(shí)驗(yàn)動物管委會GSAL 普-003-01。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法［4-7］

1.3.1 小鼠甩尾試驗(yàn)。昆明種小鼠72 只，雌性，分6組，每組12 只。分別為空白對照組，婦炎康組（陽性對照組），苦歸婦炎膠囊的低、中、高劑量組（0.4、0.8、1.2g/kg）和元胡止痛片組。連續(xù)灌胃給藥3 天，在最后一次給藥30min 后，將小鼠尾巴下1/3 浸入47℃恒溫水浴中，用秒表記錄小鼠甩尾時(shí)間。

1.3.2 小鼠熱板試驗(yàn)。昆明種小鼠72 只，雌性。分組、給藥途徑、給藥劑量與給藥時(shí)間同實(shí)驗(yàn)1.3.1，最后一次給藥前，測痛閾值（以小鼠舔后足作為痛反應(yīng)指標(biāo)），測給藥30、60 分鐘后的痛閾值。

1.3.3 小鼠扭體次數(shù)試驗(yàn)。取昆明種小鼠72 只，雌雄各半，體重18～20g，實(shí)驗(yàn)分組、給藥途徑、給藥劑量與給藥時(shí)間同實(shí)驗(yàn)1.3.1。在末次給藥1h 后，腹腔注射0.4%冰醋酸溶液0.2mL/只。即刻觀察至10min 內(nèi)的扭體次數(shù)。

1.3.4 小鼠甲醛致痛試驗(yàn)。取昆明種小鼠72 只，雌雄各半，體重18～20g，給藥途徑、給藥劑量與給藥時(shí)間同實(shí)驗(yàn)1.3.1，在末次給藥1h 后，在小鼠右足被皮下注射

2.5%甲醛溶液（0.03mL/只），每間隔5 分鐘記錄1 次痛反應(yīng)。觀察注射甲醛5、15、30、45 和60 各個(gè)時(shí)間段的得分。按4 個(gè)級別記分表示痛反應(yīng)：①0 分：前兩足均接觸地面，行走自如；②1 分：注射前足輕微接觸地面，走動明顯跛行；③2 分：注射前足懸空抬起，不接觸地面；④3 分：小鼠舔、咬或抖動注射前足。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 苦歸婦炎膠囊對小鼠甩尾試驗(yàn)的影響 陽性對照組和苦歸婦炎膠囊中、高劑量組小鼠甩尾時(shí)間明顯延長，有鎮(zhèn)痛作用，與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與陽性對照藥婦炎康相比，低劑量與婦炎康甩尾時(shí)間相同，中、高劑量甩尾時(shí)間明顯高于婦炎康組，中、高劑量組鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)于陽性對照藥婦炎康組。見表1。

2.2 苦歸婦炎膠囊對小鼠熱板試驗(yàn)的影響 陽性對照組和苦歸婦炎膠囊中、高劑量組的小鼠舔后足時(shí)間明顯延長，有鎮(zhèn)痛作用，與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與陽性對照藥婦炎康相比，低、中、高劑量舔足時(shí)間明顯高于婦炎康組，鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)于陽性對照藥婦炎康組。見表2。

2.3 苦歸婦炎膠囊對小鼠扭體的影響 陽性對照組和苦歸婦炎膠囊高劑量組的小鼠扭體次數(shù)明顯減少，有鎮(zhèn)痛作用，與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與陽性對照藥婦炎康相比，低、中、高劑量扭體次數(shù)均低于婦炎康組，鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)于陽性對照藥婦炎康組。見表3。

2.4 苦歸婦炎膠囊對小鼠甲醛致痛的影響 注射甲醛后1 分鐘內(nèi)，各組動物出現(xiàn)明顯疼痛反應(yīng)，舔、咬或抖動注射前足，各給藥組疼痛反應(yīng)明顯減輕，30min 后，多數(shù)動物行走基本恢復(fù)正常，疼痛反應(yīng)評分將為2 分以下，而空白對照組疼痛反應(yīng)明顯，60min 仍沒有恢復(fù)正常。陽性對照組和苦歸婦炎膠囊中、高劑量組的小鼠對疼痛反應(yīng)輕，與空白對照組比較，差值具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與陽性對照藥婦炎康相比，低、中、高劑量組的小鼠對疼痛的反應(yīng)輕于婦炎康組，鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)于陽性對照藥婦炎康組。見表4。

表1 苦歸婦炎膠囊對小鼠甩尾時(shí)間的影響（±s，n＝12）

表1 苦歸婦炎膠囊對小鼠甩尾時(shí)間的影響（±s，n＝12）

注：與空白對照組比較，*P<0.05

組別 劑量（g/kg） 灌胃前（s） 灌胃30min（s） 灌胃60min（s） 灌胃90min（s） 灌胃120min（s）空白對照 － 9.89±2.27 9.94±2.84 9.15±2.84 8.96±2.15 10.36±2.31婦炎康 1.2 10.88±2.12 11.16±2.92 14.25±2.22 15.67±3.25* 14.20±3.55元胡止痛片 0.8 10.58±2.56 21.68±3.06* 23.78±4.25* 26.15±5.41* 18.464±4.36*苦歸婦炎膠囊0.4 10.69±2.46 13.27±4.01 14.78±3.21* 15.47±3.69* 13.544±3.20 0.8 10.01±2.57 18.58±4.08* 21.45±5.12* 22.47±3.62* 19.64±3.41*1.2 10.85±2.87 19.36±3.37* 22.40±3.85* 20.63±4.33* 20.74±4.16*

表2 苦歸婦炎膠囊對小鼠舔足時(shí)間的影響（±s，n＝12）

表2 苦歸婦炎膠囊對小鼠舔足時(shí)間的影響（±s，n＝12）

注：與空白對照組比較，*P<0.05

給藥后60min（s）空白對照組 － 9.39±2.21 11.68±3.03 10.24±3.28婦炎康 1.2 10.12±2.43 11.08±3.25 10.25±3.64元胡止痛片 0.8 9.54±3.12 17.46±4.33* 19.25±4.24*組別 劑量（g/kg） 給藥前（s） 給藥后30min（s）苦歸婦炎膠囊0.4 9.45±2.49 13.28±3.43 13.25±4.03 0.8 9.22±2.89 16.23±3.25* 18.87±4.87*1.2 9.34±2.77 17.82±3.75* 19.02±3.78*

表3 苦歸婦炎膠囊對小鼠扭體次數(shù)的影響（±s，n＝12）

表3 苦歸婦炎膠囊對小鼠扭體次數(shù)的影響（±s，n＝12）

注：與空白對照組比較，*P<0.05

組別 劑量（g/kg） 扭體次數(shù) 抑制百分率（%）空白對照組 - 52.5 ±9.2婦炎康 1.2 41.3±8.8* 21.3元胡止痛片 0.8 37.0±14.2* 29.5苦歸婦炎膠囊0.4 46.3±8.8 11.8 0.8 43.3±9.3* 12.5 1.2 37.4±10.2* 28.8

表4 苦歸婦炎膠囊對小鼠甲醛致痛的影響（±s，n＝12）

表4 苦歸婦炎膠囊對小鼠甲醛致痛的影響（±s，n＝12）

注：與空白對照組比較，*P<0.05

組別 劑量（g/kg） 用藥后不同時(shí)間（min）疼痛強(qiáng)度評分（分）5 15 30 45 60空白對照組 － 2.6 ±0.5 2.5±0.5 2.4±0.7 2.5±0.5 2.4±0.6婦炎康 1.2 2.5 ±0.5 2.3±0.4 2.2±0.4 2.2±0.6 2.3±0.5元胡止痛片 0.8 2.4±0.3 1.8±0.5* 1.5±0.5* 1.3±0.4* 1.6±0.5*苦歸婦炎膠囊0.4 2.4±0.5 2.3±0.5 2.2±0.6 2.0±0.4* 2.2±0.4 0.8 2.5±0.5 2.0±0.6* 1.9±0.6* 1.7±0.5* 2.0±0.6*1.2 2.2±0.4 2.0±0.3* 1.7±0.4* 1.5±0.4* 1.8±0.5*

3 討論

苦歸婦炎膠囊是由苦參、當(dāng)歸、功夫木、益母草、赤豆、熟地黃、川芎、千金拔等多種中藥組成的中藥制劑。其中當(dāng)歸、川芎、千金拔具有止痛的藥理作用，經(jīng)過對苦歸婦炎膠囊的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果表明：苦歸婦炎膠囊具有延長熱痛反應(yīng)潛伏期，抑制醋酸誘發(fā)的小鼠扭體反應(yīng)，拮抗甲醛致痛作用，苦歸婦炎膠囊對炎癥性疼痛反應(yīng)有較強(qiáng)的抑制作用。