神經(jīng)病理性疼痛CCI 模型評(píng)價(jià)

小梅，斯楞格，木日根吉雅，阿古拉

（1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010030；2.內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 包頭 014040）

0 引言

1 CCI模型的制備方法

神經(jīng)病理性疼痛 （neuropathic pain，NP）是由軀體感覺系統(tǒng)損傷或疾病導(dǎo)致的疼痛?；谄鋼p傷部位或疾病的解剖位置可以分為周圍神經(jīng)病理性疼（peripherally- induced neuropathic pain，pNP ）和中樞神經(jīng)病理性疼痛2類。它是一種慢性疼痛，主要表現(xiàn)為痛覺過敏、痛覺異常和自發(fā)性疼痛，病情時(shí)好時(shí)壞，遷延不愈，嚴(yán)重時(shí)可引起抑郁、焦慮等情緒異常反應(yīng)，嚴(yán)重影響人們的生活質(zhì)量、威脅健康。

有關(guān)神經(jīng)病理性疼痛模型較多，常見的有坐骨神經(jīng)部分結(jié)扎模型 （ partial sciatic nerve ligation，PSNL）、坐骨神經(jīng)分支選擇性結(jié)扎模型 （ spared nerve selected injury，SNI）、脊神經(jīng)選擇性結(jié)扎模型（spinal nerve ligation model，SNL）、坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷模型（ chronic constriction injury，CCI ）等。與其他神經(jīng)病理性疼痛模型相比，CCI是具有神經(jīng)病理性疼痛與炎癥性疼痛特點(diǎn)的復(fù)合型模型，其模型制備方法簡(jiǎn)單，即適度結(jié)扎坐骨神經(jīng)主干，使神經(jīng)纖維選擇性損傷，廣泛用于外周神經(jīng)損傷而導(dǎo)致的慢性疼痛的基礎(chǔ)研究。因此CCI模型創(chuàng)傷小、死亡率低，適合廣泛應(yīng)用的外周神經(jīng)疼痛模型。

1988年，Bennett 和Xie報(bào)道了CCI模型，它是用羊腸線、絲線等對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)進(jìn)行結(jié)扎導(dǎo)致神經(jīng)疼痛的一種模型。有相關(guān)學(xué)者研究了制備模型的材料及結(jié)扎數(shù)，提示[1]用0.9%氯化鈉溶液浸泡后的羊腸線結(jié)扎3～4道為最佳。其具體造模方法如下[2]：大鼠常規(guī)劑量麻醉后進(jìn)行備皮操作，之后分層鈍性剝離皮下組織、淺筋膜，并找到股二頭肌，充分暴露坐骨神經(jīng)干，采用浸泡好的4～0鉻制羊腸線結(jié)扎坐骨神經(jīng)主干，結(jié)扎數(shù)為4道，結(jié)扎間距為1 mm，結(jié)扎強(qiáng)度以不完全阻斷神經(jīng)為宜，肌肉產(chǎn)生輕微抽動(dòng)為度。術(shù)后1d開始出現(xiàn)感覺異常，表現(xiàn)為對(duì)熱刺激、冷刺激和機(jī)械性刺激的敏感性過高以及出現(xiàn)自發(fā)性疼痛癥狀，疼痛在10～14 d后達(dá)到峰值，持續(xù)數(shù)月。造模觀察期間很少出現(xiàn)自噬現(xiàn)象，但偶伴有患肢損傷遠(yuǎn)端區(qū)域有髓鞘神經(jīng)纖維脫髓鞘改變。

2 CCI模型的主要特點(diǎn)

該模型主要特征是適度結(jié)扎坐骨神經(jīng)導(dǎo)致坐骨神經(jīng)內(nèi)一定程度的損傷，進(jìn)而影響遠(yuǎn)端的神經(jīng)纖維，但對(duì)無髓鞘纖維損傷較小[3]。疼痛是結(jié)扎線處產(chǎn)生的炎癥反應(yīng)對(duì)神經(jīng)形成慢性的機(jī)械性壓迫，進(jìn)而影響促炎因子，最后引起神經(jīng)纖維損傷，疼痛的發(fā)生[4]。術(shù)后動(dòng)物出現(xiàn)步態(tài)異常、自發(fā)性疼痛等行為表現(xiàn)（患側(cè)足趾蜷縮、足底不負(fù)重、爪外翻，重復(fù)抖動(dòng)、保護(hù)或舔舐患側(cè)后爪），術(shù)后1d即可出現(xiàn)明確的熱痛敏、機(jī)械痛敏以及其他感覺異常癥狀，術(shù)后10-15d疼痛可達(dá)高峰并可保持?jǐn)?shù)月。

3 CCI模型的評(píng)價(jià)方法

神經(jīng)性病理性疼痛主要出現(xiàn)痛覺過敏、痛覺超敏、感覺異常等癥狀。因此CCI模型的評(píng)價(jià)方法為機(jī)械痛覺超敏和機(jī)械痛覺過敏、熱（冷）痛覺過敏。痛覺超敏（allodynia ）即非痛刺激（羽毛等）所引起的疼痛[5]。機(jī)械痛覺超敏采用一系列Von Frey纖維絲或電子Von Frey刺激待測(cè)動(dòng)物足底反射區(qū)，up and down 法測(cè)定機(jī)械刺激痛閾值（mechanical withdrawal threshold，MWT）。痛覺過敏（hyperalgesia）是指對(duì)正常致痛刺激所引起的疼痛感增強(qiáng)[5]。機(jī)械痛覺過敏主要采用針尖刺激動(dòng)物足底，以10～15 s為上限值。熱痛覺過敏采用熱板法實(shí)驗(yàn)，將待測(cè)動(dòng)物放在50℃金屬板上，觀察一定時(shí)間內(nèi)患側(cè)縮足時(shí)間、次數(shù)和足懸空時(shí)間，并觀察動(dòng)物的舔足、撕咬等行為。

4 CCI模型制備的關(guān)鍵因素

影響CCI模型制備的因素有很多，常見的主要有結(jié)扎強(qiáng)度、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡、性別、體重、實(shí)驗(yàn)材料等[6]，但關(guān)鍵因素是結(jié)扎強(qiáng)度，有關(guān)文獻(xiàn)表明結(jié)扎強(qiáng)度以術(shù)側(cè)暴露的肌肉微微顫動(dòng)為宜，切忌結(jié)扎過緊。CCI模型結(jié)扎強(qiáng)度和神經(jīng)鞘膜水腫壞死程度與肢端自噬現(xiàn)象相關(guān)，也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)最終結(jié)果的觀察。由于CCI模型是復(fù)合性模型，常伴炎癥反應(yīng)，因此在基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究中可模擬神經(jīng)性疼痛和炎癥性疼痛的特征。

5 其他常用的神經(jīng)病理性疼痛模型

SNI模型和PSNI模型的造模方法基本同CCI模型。PSNI模型在基礎(chǔ)研究中主要用于模擬由于手術(shù)過程中的神經(jīng)損傷引起的術(shù)后慢性疼痛反應(yīng)，其模型制備與 CCI相同，區(qū)別在于之后用硅絲線緊扎神經(jīng)干。而SNI模型主要觀察坐骨神經(jīng)分支，暴露位置與CCI模型相比相對(duì)靠下，制備時(shí)充分暴露脛神經(jīng)和腓總神經(jīng)，在不破壞腓腸神經(jīng)的前提下，雙重結(jié)扎，之后逐層縫合肌肉組織和皮膚。SNL模型最早是在1992年由Kim 和Chung報(bào)道，采用絲線緊緊結(jié)扎大鼠單側(cè) L5 或 L5/L6 脊神經(jīng)。與CCI模型相比，該模型手術(shù)操作相對(duì)復(fù)雜，對(duì)動(dòng)物損傷較大，術(shù)后感染率高。

SNL、SNI、PSNI模型都是相對(duì)常用的神經(jīng)病理性疼痛模型。但SNL和 SNI模型對(duì)熱刺激敏感性不高，而對(duì)機(jī)械疼痛刺激敏感；CCI模型不僅對(duì)機(jī)械疼痛刺激敏感，對(duì)熱刺激的敏感性也高。而炎癥性疼痛患者對(duì)熱刺激非常敏感，因此CCI 模型能模擬神經(jīng)病理性疼痛和炎癥性疼痛特點(diǎn)，所以能較好地模擬外周神經(jīng)病理性疼痛。其模型制備方法與其他模型相比具有操作簡(jiǎn)單、創(chuàng)傷小、感染低等優(yōu)點(diǎn)。并且針刺療法在此模型上有明顯的療效。PSNI模型由于結(jié)扎的纖維數(shù)量不固定，導(dǎo)致其損傷程度不易控制，特定區(qū)域的感覺不易定位。另外還有一些其他模型，應(yīng)用雖不及上述模型，但它們模擬了臨床相應(yīng)的神經(jīng)痛，為研究相應(yīng)疾病提供了良好的模型基礎(chǔ)。

6 結(jié)論

本文我們回顧了CCI模型及其他常見神經(jīng)病理性疼痛模型得出CCI模型能較好模擬外周神經(jīng)損傷引起的神經(jīng)病理性慢性疼痛癥狀。隨著人們對(duì)慢性疼痛認(rèn)識(shí)的加深，出現(xiàn)了多種疼痛模型，其制備方法和有關(guān)指標(biāo)也不徑相同。每一種模型都有其各自適用的疾病。因此實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)該廣泛的查閱文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮托枨筮x擇相關(guān)的模型。造模時(shí)注意根據(jù)實(shí)驗(yàn)涉及的病種選擇適合的物種、年齡、體重、性別等，以上因素均可影響對(duì)實(shí)驗(yàn)最終結(jié)果。利用反復(fù)多次驗(yàn)證后得到的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)結(jié)論最終服務(wù)于臨床工作，才是具有價(jià)值的研究。