維甲酸受體在食管胃癌前病變中的表達(dá)研究

金 哲，崔少杰，金建軍

食管癌(esophagus cancer,EC)、胃癌(gastric cancer,GC)都是常見的惡性腫瘤，尤其以日本以及東亞地區(qū)高發(fā)。我國(guó)是食管癌、胃癌的發(fā)生大國(guó)，發(fā)病率較高，病死率也很高。研究發(fā)現(xiàn)，食管癌、胃癌的發(fā)生是一個(gè)多因素、多步驟、慢性進(jìn)行性的發(fā)展過(guò)程，包括食管、胃黏膜上皮細(xì)胞的增殖和凋亡失平衡，癌基因、抑癌基因以及生長(zhǎng)因子等[1]。多數(shù)文獻(xiàn)支持癌前病變與食管癌、胃癌有著密切關(guān)系，且是多步驟進(jìn)行性發(fā)展的過(guò)程。異型性級(jí)別越高，癌變的發(fā)生率也越高[2]。因此，對(duì)食管/胃癌前病變的發(fā)病機(jī)制、診斷以及治療的研究成為診治的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。維甲酸(retinoic acids,RA)是臨床上廣泛應(yīng)用的一種誘導(dǎo)分化劑，但必須通過(guò)維甲酸受體才能發(fā)揮生物活性[3]。這些受體有兩大類：其一為維甲酸受體(retinoic acid receptors,RARs)，其二為維甲酸X受體(retinoic X receptors,RXRs)，兩類受體都有α、β、γ 3個(gè)亞型。研究發(fā)現(xiàn)，兩種受體及其亞型在不同器官、組織的分布可能不同，在不同的病理狀態(tài)下表達(dá)也不一樣[4-6]。那么維甲酸受體在癌前病變組織中表達(dá)如何，在食管癌、胃癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起何作用，文獻(xiàn)較少報(bào)道。本研究用分組對(duì)照的方法，調(diào)查維甲酸受體的表達(dá)與食管/胃癌前病變的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象選取近5 a來(lái)在我院消化內(nèi)科門診或病房就診的患者，均具有胸骨后或上腹部不適。經(jīng)胃鏡活檢診為慢性胃黏膜炎癥或食管炎癥伴輕、中或重度異型增生，另外可伴或不伴腸化生者共100例，作為觀察組；單純慢性淺表性胃炎、食管炎患者100例，作為對(duì)照組。觀察組100例：男49例，女51例，年齡(56.46±11.18)歲，其中食管炎伴異型增生40例，胃炎伴異型增生60例。在這100例中輕、中、重異型增生分別為50、32、18例，另外合并腸化生47例。對(duì)照組100例：男50例，女50例，年齡(55.53±12.19)歲。其中食管炎者40例，胃炎者60例。兩組年齡、性別等一般情況的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)年齡限定范圍在20～72歲之間，病程6個(gè)月以上；合并其他臟器疾病者除外；胃鏡取病理要求：一般病人于食管病變處、胃竇部近幽門1～2 cm的相當(dāng)于3、6、9點(diǎn)鐘部位，以及胃角各鉗取組織1塊，若存在明顯胃黏膜局限病灶者，于病灶部位再鉗取組織2～3塊，標(biāo)本分別裝瓶做好標(biāo)記，用福爾馬林及時(shí)固定、送檢。

1.3 病理診斷由同一組病理醫(yī)師負(fù)責(zé)，先做病理診斷和分級(jí)，根據(jù)中國(guó)胃食管反流病共識(shí)意見和中國(guó)慢性胃炎共識(shí)意見(2006年) 制定的異型增生分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，分輕、中、重3級(jí)(本研究腸化生暫不做分級(jí))。然后采用免疫組化法檢測(cè)維甲酸受體(抗-維甲酸受體α來(lái)源于上海安研商貿(mào)有限公司，其余所用檢測(cè)試劑均來(lái)源于福州邁新生物技術(shù)有限公司)。

1.4 維甲酸受體檢測(cè)結(jié)果判定采用積分法，按Mark Kelley實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)[7]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 17.0進(jìn)行全面分析，等級(jí)資料和計(jì)數(shù)資料分別用秩和、χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 單純慢性淺表性胃炎食管炎和食管胃癌前病變組織中維甲酸受體表達(dá)見表1。癌前病變組織中維甲酸受體陽(yáng)性表達(dá)低于單純慢性炎癥組，陰性表達(dá)高于對(duì)照組，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 兩組間維甲酸受體表達(dá)情況的比較 例(%)

2.2 不同級(jí)別癌前病變組織中維甲酸受體表達(dá)見表2。癌前病變組織中從輕度到重度維甲酸受體陽(yáng)性表達(dá)率由高到低，陰性表達(dá)率由低到高，三者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表2 不同級(jí)別癌前病變組織中維甲酸受體表達(dá) 例(%)

2.3 合并腸化生與不合并腸化生的異型增生組織中維甲酸受體表達(dá)見表3。合并腸化生與不合并腸化生的異型增生組織中維甲酸受體表達(dá)差別很小，兩者比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表3 合并與不合并腸化生的異型增生組織中維甲酸受體表達(dá) 例(%)

3 討論

維甲酸是臨床上廣泛應(yīng)用的一種誘導(dǎo)分化劑，但必須通過(guò)維甲酸受體才能發(fā)揮生物活性。Petkovich等[8]首先報(bào)道了維甲酸類受體，它是一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白，這種受體有兩大類：RARs和RXRs，兩個(gè)受體家族分別有α、β、γ 3個(gè)亞型，這些受體能夠參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的發(fā)育、增殖、分化等。研究發(fā)現(xiàn)每種受體及其亞型在不同器官、組織的分布可能不同，在不同的病理狀態(tài)下表達(dá)也不一樣。消化道組織中的RARs含量較豐富，其中RAR-α數(shù)量最多且分布廣泛。Wei等[9]通過(guò)放射配體結(jié)合分析法測(cè)出：結(jié)腸惡性腫瘤組織細(xì)胞核內(nèi)RAR的含量?jī)H為1.16 fmol·μg-1DNA，平均含量很低，而在正常結(jié)腸組織細(xì)胞核內(nèi)RAR的含量則高達(dá)2.64 fmol·μg-1DNA，平均含量很高。他們推測(cè)細(xì)胞核內(nèi)RAR表達(dá)減少很有可能和結(jié)腸腫瘤的發(fā)生有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)癌前病變組織中維甲酸受體表達(dá)明顯低于單純慢性胃炎、食管炎組織，且異型增生程度越重，表達(dá)越低，提示食管癌、胃癌的發(fā)生發(fā)展可能與維甲酸受體表達(dá)降低有一定關(guān)系。本研究合并腸化生與不合并腸化生異型增生組織中維甲酸受體表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，需要擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究證實(shí)。

有研究提示癌組織中維甲酸受體表達(dá)減少是RAR-α基因的啟動(dòng)子區(qū)被甲基化引起的。還有人發(fā)現(xiàn)，MCF-7乳腺癌細(xì)胞株中RAR-α基因轉(zhuǎn)錄活性很低，合成量下降，也和啟動(dòng)子區(qū)高甲基化有關(guān),致使信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路失調(diào),促進(jìn)了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[10]。還有研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)維甲酸治療后，RAR-α基因的mRNA恢復(fù)正常表達(dá)[11-12]。這些為維甲酸治療腫瘤和癌前病變提供了理論依據(jù)。

另一些研究發(fā)現(xiàn)RAR-βmRNA 在正常上皮細(xì)胞中的表達(dá)提高，而在惡性腫瘤細(xì)胞中則降低[13-14]；在有的肝臟惡性腫瘤細(xì)胞中RAR-β升高，而在有的宮頸、肺和乳腺等臟器的惡性腫瘤中RAR-β表達(dá)則下降，恢復(fù)RAR-β表達(dá)則可以抑制腫瘤的生長(zhǎng)[12,15]。

以上這些無(wú)疑對(duì)腫瘤發(fā)生機(jī)制的研究提供了幫助，為腫瘤的防治和食管癌、胃癌癌前病變的治療提供了新的思路。