針刺通過(guò)調(diào)控?zé)嵝菘说鞍字委焹?nèi)科諸證研究概述

王月琪 徐家淳 李蕾 焦召華 李巖

針灸療法為我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的重要組成部分，目前針灸防病治病的機(jī)理也越來(lái)越受重視。研究發(fā)現(xiàn)，針刺可使機(jī)體產(chǎn)生適度應(yīng)激，并誘生一定量的熱休克蛋白(heat shock protein，HSP)。HSP又稱應(yīng)激蛋白，是生物體(或離體培養(yǎng)的細(xì)胞)在高溫、缺氧、感染、創(chuàng)傷等應(yīng)急源的誘導(dǎo)下產(chǎn)生的具有高度保守性的應(yīng)激蛋白，普遍存在于整個(gè)生物界。根據(jù)分子量大小，主要分為小分子HSP、HSP60、HSP70、HSP90、大分子HSP及泛素等幾個(gè)家族[1,2]。HSP具有分子伴侶、自穩(wěn)、協(xié)同免疫等作用，并且參與胚胎發(fā)育、抑制細(xì)胞凋亡，因此具有重要的生理、病理意義。目前已有研究證實(shí)，針刺可以通過(guò)熱休克蛋白發(fā)揮治療神經(jīng)系統(tǒng)、心腦血管、消化系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)等的疾病的作用。本文通過(guò)總結(jié)熱休克蛋白的生物性質(zhì)、功能以及針刺對(duì)于熱休克蛋白的影響，對(duì)針刺調(diào)控?zé)嵝菘说鞍字委焹?nèi)科諸證做以概述，為闡釋針灸療法的作用機(jī)制提供一定依據(jù)。

1 針刺通過(guò)影響熱休克蛋白治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病

針刺在治療中樞性神經(jīng)系統(tǒng)缺血性疾病中有明確療效，可通過(guò)改善腦微循環(huán)、抑制細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)能量機(jī)制等預(yù)防或治療缺血缺氧損傷，并能在細(xì)胞凋亡過(guò)程中直接調(diào)節(jié)蛋白或基因而達(dá)到治療效果[3,4]。同時(shí)針刺能促進(jìn)各種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素、生長(zhǎng)因子的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)腦神經(jīng)細(xì)胞的發(fā)育、修復(fù)和再生[5]。HSP70、HSP60等都具有神經(jīng)保護(hù)作用，與神經(jīng)系統(tǒng)及相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[6,7]。已有研究證實(shí)，針刺可通過(guò)介導(dǎo)熱休克蛋白表達(dá)而發(fā)揮治療作用

1.1 針刺調(diào)控HSP治療缺血性腦卒中

缺血性腦卒中又稱腦梗死，是指由于腦的供血?jiǎng)用}(頸動(dòng)脈和椎動(dòng)脈)狹窄或閉塞、腦供血不足導(dǎo)致的腦組織壞死的總稱。針刺具有醒腦開(kāi)竅、活血通絡(luò)之效，結(jié)合相應(yīng)穴位可發(fā)揮改善神經(jīng)功能的作用。而HSP70是一種內(nèi)源性保護(hù)蛋白，具有增強(qiáng)抗氧化能力、減輕氧化反應(yīng)、抑制細(xì)胞凋亡等作用，因而在抗損傷方面更有效[8]。趙軍等[9]電針家兔“頭四關(guān)穴”治療缺血性腦卒中時(shí)，發(fā)現(xiàn)針刺組HSP70高表達(dá)，腦組織缺血性損傷有一定改善，認(rèn)為通過(guò)增加缺血后HSP70在腦組織中的表達(dá)，可抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡，從而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。HSP70可通過(guò)多種機(jī)制阻止細(xì)胞凋亡，主要是阻止激活細(xì)胞凋亡的主要效應(yīng)器——信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)的上、下游通路。而針刺對(duì)于熱休克蛋白具有調(diào)控和誘導(dǎo)作用，因此針刺可通過(guò)影響熱休克蛋白，利用其生物學(xué)功能來(lái)治療缺血性腦卒中。

1.2 針刺調(diào)控HSP治療阿爾茲海默病

阿爾茨海默病(AD)是一種起病隱匿的進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，針刺在治療AD時(shí)，注重標(biāo)本兼治，而熱休克蛋白具有分子伴侶、保護(hù)神經(jīng)元等作用，所以在治療AD時(shí)，針刺可以通過(guò)調(diào)控?zé)嵝菘说鞍祝T導(dǎo)其表達(dá)，從而發(fā)揮生物學(xué)作用。杜艷軍等[10]在觀察針灸預(yù)刺激對(duì)HSP70、HSP90表達(dá)的影響以探討針灸預(yù)刺激防治AD的內(nèi)在機(jī)制時(shí)，發(fā)現(xiàn)經(jīng)針灸預(yù)刺激后AD模型大鼠海馬CA1區(qū)HSP70、HSP90的表達(dá)均明顯增加，提示針灸預(yù)刺激不僅可誘導(dǎo)一定量的熱休克蛋白表達(dá)，提高機(jī)體的自身抗病防御能力，還可能通過(guò)增加腦內(nèi)HSP70、HSP90的表達(dá)，啟動(dòng)針刺機(jī)制以抑制Aβ神經(jīng)細(xì)胞毒性作用，從而起到保護(hù)神經(jīng)元的作用。

2 針刺通過(guò)影響熱休克蛋白治療心血管疾病

針刺可通過(guò)影響機(jī)體多種調(diào)節(jié)機(jī)制從整體上調(diào)節(jié)心血管活動(dòng)，主要通過(guò)神經(jīng)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)其信號(hào)的傳入與輸出，并經(jīng)腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的多維整合以及體液、內(nèi)分泌乃至心臟局部的多重調(diào)節(jié)而緩解心律失?；蚱渌呐K疾病。心肌缺血是心血管系統(tǒng)疾病最為基礎(chǔ)的病理過(guò)程，大量研究表明，運(yùn)用不同方法誘導(dǎo)產(chǎn)生的熱休克蛋白能夠在缺血時(shí)對(duì)心肌細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用。

相關(guān)研究表明，誘導(dǎo)HSP70高表達(dá)可以防止脂多糖誘導(dǎo)的功能障礙，減少心肌梗死面積，還可促進(jìn)缺血再灌注損傷的恢復(fù)[11]。HSP70是一種內(nèi)源性保護(hù)因子，用其對(duì)心肌進(jìn)行預(yù)處理，能減少心肌梗死的面積和心肌超微結(jié)構(gòu)的損傷，同時(shí)有利于心肌細(xì)胞的恢復(fù)[12]。謝文娟[13]通過(guò)比較針灸預(yù)處理對(duì)不同時(shí)間兔心肌缺血再灌注損傷(MIRI)的保護(hù)效應(yīng)時(shí)發(fā)現(xiàn)，上調(diào)PKC蛋白活性并誘導(dǎo)HSP70大量表達(dá)可發(fā)揮心肌保護(hù)作用。HSP90在心肌的表達(dá)較高，側(cè)重反映心肌細(xì)胞損傷時(shí)伴有的防御性和耐受性變化。陽(yáng)晶晶[14]通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察針灸預(yù)刺激“內(nèi)關(guān)”穴對(duì)家兔MIRI的影響，發(fā)現(xiàn)與模型組相比較，電針預(yù)處理組HSP90含量增加，說(shuō)明除了應(yīng)激因素外，其表達(dá)增加或與針刺穴位也有關(guān)。而HSP90過(guò)度表達(dá)，激發(fā)內(nèi)源性一氧化氮途徑，可以明顯減少心肌缺血再灌注損傷，提示針刺可通過(guò)調(diào)控缺血心肌熱休克蛋白表達(dá)的增加以改善心肌缺血。

3 針刺通過(guò)影響熱休克蛋白治療胃腸疾病

胃黏膜經(jīng)常受到食物、乙醇、病原體等因素的刺激，細(xì)胞應(yīng)激誘發(fā)凋亡；同時(shí)，根據(jù)細(xì)胞適應(yīng)性保護(hù)原則，胃黏膜上皮細(xì)胞能及時(shí)調(diào)動(dòng)和調(diào)整保護(hù)機(jī)制，如促進(jìn)熱休克蛋白合成，減輕應(yīng)激損傷[15]。在正常大鼠胃組織中，均可檢測(cè)到HSP70、HSP60、HSP47及HSP32的少量表達(dá)，而在應(yīng)激條件下，胃腺體有多種、大量熱休克蛋白表達(dá)，并且核中可見(jiàn)[16]。HSP70作為分子伴侶對(duì)胃粘膜具有重要的保護(hù)作用，其表達(dá)的增加可以明顯緩解應(yīng)激性血流動(dòng)力學(xué)障礙，減輕應(yīng)激后胃粘膜的損傷程度，發(fā)揮調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、抑制細(xì)胞凋亡等重要作用[17]。HSP90與人類胃腸腫瘤發(fā)生有較密切關(guān)系，胃癌組織中HSP90表達(dá)明顯高于非癌變組織[18]。HSP27在多種腸道疾病中都呈現(xiàn)高表達(dá)，主要以磷酸化形式發(fā)揮效應(yīng)[19]。

針灸治療胃腸疾病有較好的療效，目前對(duì)其治療機(jī)制的研究集中在胃黏膜的保護(hù)因子和損傷因子上。趙翔等[20]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)電針腧穴“胃病方”可誘導(dǎo)HSP70表達(dá)上調(diào)，減輕胃黏膜損傷，發(fā)揮胃黏膜保護(hù)作用。朱小香等[21]研究發(fā)現(xiàn)電針組大鼠胃組織病理變化較模型組有所改善，胃黏膜損傷指數(shù)顯著降低，HSP60、HSP70 mRNA表達(dá)均顯著升高。提示HSP60、HSP70 mRNA的表達(dá)增強(qiáng)可能作為針刺促進(jìn)應(yīng)激性胃潰瘍愈合的作用機(jī)制之一，通過(guò)誘導(dǎo)胃組織中的HSP60和HSP70可促進(jìn)受損、變性的蛋白質(zhì)修復(fù)，抑制細(xì)胞凋亡，保護(hù)線粒體的結(jié)構(gòu)和功能。這為針灸從分子生物學(xué)的方面調(diào)節(jié)胃腸功能提供了可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

4 針刺通過(guò)熱休克蛋白治療代謝性及免疫系統(tǒng)疾病

HSP在免疫系統(tǒng)中是一類具有多種免疫功能的重要物質(zhì)，其作用包括參與抗原經(jīng)典呈遞與交叉呈遞途徑、巨噬細(xì)胞與淋巴細(xì)胞的活化以及樹(shù)突狀細(xì)胞的活化成熟等[22]。由于HSP具有免疫原性，所以在許多感染性和自身免疫病中不僅誘導(dǎo)體液免疫，而且能刺激機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答。研究證明，HSP70作為熱休克蛋白中效果較好的佐劑和保護(hù)性抗原之一[23]，不僅可作為免疫佐劑、抗原載體，而且可顯著提高DNA疫苗的免疫原性。HSP60有促炎和抗炎的雙重作用，而當(dāng)HSP60過(guò)度表達(dá)或異位表達(dá)于質(zhì)膜等時(shí)，可被免疫系統(tǒng)識(shí)別，并作為一種自身抗原被呈遞到細(xì)胞表面，激活特異性免疫應(yīng)答[6]。

4.1 針刺調(diào)控HSP治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎

痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎是由尿酸鹽沉積在關(guān)節(jié)囊、滑囊、軟骨、骨質(zhì)和其他組織中引起的病損及炎性反應(yīng)。熱休克蛋白具有細(xì)胞保護(hù)和抗炎作用，在炎癥性疾病發(fā)生時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的熱休克蛋白表達(dá)增加，通過(guò)抑制炎癥信號(hào)通路成分發(fā)揮細(xì)胞保護(hù)作用。針灸具有促防衛(wèi)免疫作用，對(duì)炎癥灶的變質(zhì)、滲出、增生過(guò)程均具有調(diào)整作用。電針和艾灸都可以使正常大鼠誘發(fā)HSPs，且電針還可顯著提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中HSP70的表達(dá)[24-25]。金弘[26]通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，電針可誘導(dǎo)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠局部組織中HSP70大量合成，成為其抑制滑膜組織炎癥發(fā)生的途徑之一。

4.2 針刺調(diào)控HSP治療帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛

帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛是一種復(fù)合性神經(jīng)病理性疼痛，指在帶狀皰疹皮疹愈合后持續(xù)一個(gè)月及以上的疼痛，是帶狀皰疹最常見(jiàn)的并發(fā)癥之一。中醫(yī)將本病稱為“蛇丹愈后痛”，病因大致可分為體虛失養(yǎng)所致“不榮則痛”和氣滯血瘀所致“不通則痛”[27]?；疳槸煼ㄊ轻樉寞煼ㄖ幸粋€(gè)獨(dú)特的治療體系，具有針刺和高溫雙重作用，在治療帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛時(shí)可誘導(dǎo)HSP表達(dá)的升高，發(fā)揮其細(xì)胞保護(hù)作用，提高細(xì)胞對(duì)炎癥因子的耐受性，同時(shí)通過(guò)特異性介導(dǎo)局部免疫細(xì)胞T細(xì)胞等，抑制促炎因子，從而減輕病毒引起的神經(jīng)損傷[28]。

5 討論

針刺療法從本質(zhì)上講應(yīng)屬于一種刺激的方法，主要通過(guò)刺激人體相關(guān)腧穴，達(dá)到激發(fā)經(jīng)氣，調(diào)和陰陽(yáng)，扶正祛邪的目的[29]。針刺適時(shí)的介入和適宜的刺激啟動(dòng)了人體內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制，加強(qiáng)了機(jī)體對(duì)疾病損傷的防御和耐受力。HSP作為一種進(jìn)化過(guò)程中高度保守的應(yīng)激蛋白，廣泛分布于原核及真核細(xì)胞中，是細(xì)胞發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)的生物標(biāo)志。在下丘腦—垂體—腎上腺皮質(zhì)(hypothalamo-pituitary-adrenal,HPA)軸中，應(yīng)激會(huì)增加促腎上腺皮質(zhì)激素(adrenocortico-tropic hormone,ACTH)的分泌，導(dǎo)致機(jī)體表現(xiàn)異常，而針刺可以通過(guò)降低ACTH的水平，使機(jī)體恢復(fù)正常。同時(shí)，有研究顯示HPA軸與HSP之間存在相互作用，且ACTH可誘導(dǎo)應(yīng)激反應(yīng)時(shí)細(xì)胞內(nèi)HSP水平的升高[30-31]。因此推測(cè)針刺可以通過(guò)調(diào)節(jié)HPA軸中CRH、ACTH從而影響熱休克蛋白。

一氧化氮(nitric oxide,NO)和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)廣泛存在于神經(jīng)元、血管內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等多種細(xì)胞中，被證實(shí)在人體諸多生理和病理過(guò)程中發(fā)揮作用。而誘導(dǎo)型NOS因具有誘導(dǎo)表達(dá)及高效產(chǎn)生NO的特性使其成為機(jī)體免疫系統(tǒng)用來(lái)對(duì)抗入侵的微生物及清除自身腫瘤細(xì)胞的重要工具。目前研究發(fā)現(xiàn)，熱休克蛋白對(duì)人體保護(hù)作用的產(chǎn)生與NO密切相關(guān)[32]。HSP70作為一種細(xì)胞保護(hù)性蛋白，與凋亡促進(jìn)因子-1交聯(lián)并影響其寡聚體化，可抑制凋亡酶體的形成，從而發(fā)揮抗凋亡的作用。而NO可介導(dǎo)HSP70的表達(dá)，從而抵抗TNF-α、氧離子和亞硝酸鹽離子等誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[33]。針刺作為一種機(jī)械性刺激，在治療應(yīng)激性高血壓時(shí)，可以影響血管NO的分泌，通過(guò)影響交感神經(jīng)活性調(diào)節(jié)NO水平，由此推測(cè)針刺調(diào)節(jié)熱休克蛋白或與影響NO水平有關(guān)。

HSP對(duì)于闡明針刺作用靶點(diǎn)與機(jī)制尤為重要，但目前相關(guān)研究還有一些不足。目前針對(duì)針刺與熱休克蛋白的研究多局限于針刺局部HSP的變化，而對(duì)于身體其他部位及整體狀態(tài)下的HSP觀測(cè)較少，今后要加強(qiáng)針灸調(diào)控整體和局部?jī)煞矫鏌嵝菘朔磻?yīng)介導(dǎo)機(jī)制的研究。其次，目前針灸調(diào)控HSP的作用機(jī)制還不是很明確，仍需進(jìn)一步的深入探討，為針刺發(fā)揮治療作用的機(jī)理提供理論依據(jù)。