脫落細(xì)胞學(xué)檢查聯(lián)合熒光原位雜交技術(shù)及血清膀胱腫瘤抗原水平檢測(cè)對(duì)腎盂癌的診斷價(jià)值

李亞潔，李坤朋

(南陽(yáng)市第二人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 南陽(yáng) 473000)

目前，臨床研究尚未對(duì)腎盂癌發(fā)病機(jī)制作全面闡述，但普遍認(rèn)為與長(zhǎng)期吸煙、服用鎮(zhèn)痛藥等因素相關(guān)，且腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)范圍、分化程度不同，預(yù)后效果差異較大[1-3]。及早確診采取針對(duì)性治療方案，對(duì)延長(zhǎng)患者生存期，降低病死率有積極意義。脫落細(xì)胞學(xué)檢查(exfoliative cytology，EC)、熒光原位雜交技術(shù)(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)、膀胱腫瘤抗原(bladder tumor antigen，BTA)為臨床常用輔助診斷方法。本研究選取2015年1月至2019年10月南陽(yáng)市第二人民醫(yī)院收治的150例疑似腎盂癌患者作為研究對(duì)象，探討EC、FISH、血清BTA水平聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2015年1月至2019年10月南陽(yáng)市第二人民醫(yī)院收治的150例疑似腎盂癌的患者作為研究對(duì)象，均存在腰部疼痛、血尿等臨床癥狀，非妊娠期或哺乳期女性，無(wú)其他原發(fā)性惡性腫瘤，本研究經(jīng)南陽(yáng)市第二人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)通過。男86例，女64例；年齡47～72歲，平均(53.68±3.16)歲；體質(zhì)量指數(shù)17～25 kg·m-2，平均(22.39±1.08)kg·m-2。

1.2 方法行EC、FISH、血清BTA水平檢測(cè)。

1.2.1EC 取50 mL清潔中段晨尿，置于無(wú)菌瓶，1 h內(nèi)送檢，將尿液標(biāo)本離心沉淀，后制作為細(xì)胞涂片，使用蘇木精伊紅染色，光鏡下對(duì)細(xì)胞進(jìn)行檢查。陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：參照巴氏細(xì)胞分級(jí)法，Ⅲ～Ⅴ級(jí)為陽(yáng)性。

1.2.2FISH 取50 mL清潔中段晨尿，置于無(wú)菌瓶，1 h內(nèi)送檢，離心。37 ℃下使用氯化鈉溶液行尿液標(biāo)本低滲處理，使用5 mL混合液(甲醇加入冰乙酸)，混勻離心，取上清液，pH值7.0 SSC溶液漂洗，體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇玻片脫水，玻片雜交區(qū)域加入CSP3/CSP7、GLPp16/CSP17探針混合物，封邊，雜交處理(42 ℃，16 h)，移除蓋玻片，依次置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%NP-40/0.4×SSC溶液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30% NP-40/0.4×SSC溶液，振蕩(3 s)漂洗。干燥后雜交區(qū)域加入15 μg DAPI復(fù)染劑，蓋上蓋玻片，避光保存20 min。陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：熒光信號(hào)計(jì)數(shù)≥2個(gè)點(diǎn)位異常。

1.2.3血清BTA水平檢測(cè) 取5 mL空腹靜脈血，離心，分離血清。采用雙抗體夾心法和通蔚試劑(上海)有限公司生產(chǎn)的試劑盒檢測(cè)血清BTA值。陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：出現(xiàn)抗原體復(fù)合物。

1.3 聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)EC、FISH、血清BTA水平檢測(cè)單獨(dú)診斷任一為陽(yáng)性即為陽(yáng)性。

1.4 觀察指標(biāo)(1)以病理結(jié)果作為“金標(biāo)準(zhǔn)”，統(tǒng)計(jì)EC、FISH、血清BTA水平檢測(cè)單獨(dú)與聯(lián)合診斷腎盂癌的診斷結(jié)果。(2)統(tǒng)計(jì)EC、FISH、血清BTA水平檢測(cè)單獨(dú)與聯(lián)合診斷腎盂癌的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、漏診率、誤診率、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，行χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 診斷結(jié)果本組150例疑似腎盂癌患者，病理結(jié)果證實(shí)腎盂癌122例，腎結(jié)核16例，泌尿系感染12例。采用EC診斷出陽(yáng)性50例，陰性100例；采用FISH診斷出陽(yáng)性54例，陰性96例；采用血清BTA水平檢測(cè)診斷出陽(yáng)性85例，陰性65例；三者聯(lián)合診斷出陽(yáng)性124例，陰性26例。見表1。

表1 不同檢測(cè)方法診斷結(jié)果(n)

2.2 診斷效能EC、FISH、血清BTA水平聯(lián)合檢測(cè)診斷特異度、誤診率、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值與三者單獨(dú)診斷比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；EC、FISH、血清BTA水平聯(lián)合檢測(cè)診斷靈敏度、準(zhǔn)確度、陰性預(yù)測(cè)值高于三者單獨(dú)診斷，漏診率低于三者單獨(dú)診斷，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)診斷效能比較(%)

3 討論

腎盂癌為上尿路上皮細(xì)胞癌，因無(wú)典型臨床癥狀，臨床易漏診導(dǎo)致延誤治療[4-6]。腎盂癌患者因腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)生長(zhǎng)特性，腎組織與腎實(shí)質(zhì)之間界限具有一定模糊性，影像學(xué)診斷臨床應(yīng)用局限[7-8]。積極探討一種最佳診斷方法，提高診斷準(zhǔn)確度，降低漏診率，對(duì)改善患者預(yù)后有積極意義。

EC為臨床常用的無(wú)創(chuàng)式檢測(cè)診斷方法，特異度較高，具有一定診斷效果，但腎盂癌患者在疾病早期階段，浸潤(rùn)組織淺，在識(shí)別尿液標(biāo)本陽(yáng)性脫落細(xì)胞中敏感性低，且尋找尿液標(biāo)本中脫落細(xì)胞對(duì)臨床檢測(cè)人員綜合素質(zhì)、專業(yè)能力要求較高，加之EC檢測(cè)周期相對(duì)較長(zhǎng)，導(dǎo)致其臨床應(yīng)用具有一定局限性。FISH為新型檢測(cè)方法，在細(xì)胞、分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)上形成，染色體數(shù)目能為臨床診斷提供信息支持，且能結(jié)合結(jié)構(gòu)異常情況評(píng)估檢查結(jié)果，探針可顯示3、7、17號(hào)染色體，為FISH篩查腎盂癌提供理論基礎(chǔ)，但合并尿路細(xì)菌增生的疑似腎盂癌患者，局部組織存在自發(fā)熒光，干擾腫瘤特異性熒光信號(hào)，影響診斷準(zhǔn)確度。BTA為蛋白水解酶，主要來(lái)自于腎盂癌腫瘤細(xì)胞增殖過程中，正常人群中BTA呈低表達(dá)、不表達(dá)狀態(tài)，血清BTA水平檢測(cè)能結(jié)合血清BTA水平診斷腎盂癌，但合并泌尿系感染、結(jié)石等疑似腎盂癌患者易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，導(dǎo)致誤診。本研究結(jié)果顯示，EC、FISH、血清BTA水平聯(lián)合檢測(cè)診斷腎盂癌靈敏度92.62%，高于三者單獨(dú)診斷36.07%、37.70%、61.48%，與王元元等[9]研究結(jié)果一致。同時(shí)，本研究中EC、FISH、血清BTA水平聯(lián)合檢測(cè)診斷腎盂癌準(zhǔn)確度86.67%、陰性預(yù)測(cè)值65.38%，高于EC單獨(dú)診斷44.00%(66/150)、22.00%(22/100)，F(xiàn)ISH單獨(dú)診斷44.00%(66/150)、20.83%(20/96)，血清BTA水平檢測(cè)單獨(dú)診斷62.00%(93/150)、27.69%(18/65)，漏診率7.38%低于三者單獨(dú)診斷63.93%、62.30%、38.52%。上述結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)三者聯(lián)合可優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，提高診斷準(zhǔn)確度、陰性預(yù)測(cè)值，降低漏診率，保障患者可及時(shí)得到有效治療，延長(zhǎng)生存期。

綜上，EC、FISH、血清BTA水平聯(lián)合檢測(cè)診斷腎盂癌，可提高診斷靈敏度、準(zhǔn)確度，降低漏診率，可為臨床診療提供更多信息支持，有助于腎盂癌患者早期得到及時(shí)有效治療，降低病死率，改善預(yù)后。