甘肅栽培肉蓯蓉的鑒別研究

蘇學(xué)秀 張富嫻 賈存勤 滕澤學(xué) 楊麗 陳小娟 楊世琴

【摘 要】 目的：建立甘肅栽培肉蓯蓉顯微、薄層色譜鑒別方法，為完善其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。方法：采用顯微數(shù)碼成像技術(shù)進行了顯微鑒別;考察了不同提取方法、展開條件，確定了最佳的薄層色譜條件。結(jié)果及結(jié)論：對樣品進行試驗，專屬性強;薄層色譜斑點清晰、分離度好，建議作為甘肅栽培肉蓯蓉的鑒別依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 肉蓯蓉;甘肅栽培;鑒別研究

【中圖分類號】R282?? 【文獻標(biāo)志碼】 A??? 【文章編號】1007-8517（2021）21-0025-03

Identification of Cultivated Cistanche Deserticola in GansuRovince

SU Xuexiu1 ZHANG Fuxian1 JIA Cunqin2 TENG Zexue1 YANG li1 CHEN? Xiaojuan2 YANG Shiqin1*

1.Baiyin Drug Testing Center， Gansu， Baiyin 730900，China; 2.Gansu Huiqin Biotechnology Co. ， Ltd. ，Gansu， Jingyuan 730600，China

Abstract：Objective to establish a method for the identification of cistanche Deserticola by thin layer chromatography （TLC） . Methods The microscopic identification was carried out by micro digital imaging technique， and the optimum conditions of thin layer chromatography were determined by investigating different extraction methods and development conditions. Results and Conclusion The samples were tested， the specificity was strong， the TLC spots were clear， the resolution was good， it was suggested that the identification of Cistanche Deserticola in Gansu Province.

Key words：Cistanche Deserticola; Cultivation in Gansu; Identification Study

肉蓯蓉為常用的滋補中藥，具有補腎陽、益精血、潤腸通便的功能，常用于治療腎陽不足、精血虧虛、陽痿不孕、腰膝酸軟、筋骨無力、腸燥便秘等[1];具有調(diào)節(jié)免疫、抗氧化抗衰老、改善記憶[2]、抗病毒抗腫瘤等藥理作用[3]，主產(chǎn)于中國內(nèi)蒙古、新疆、甘肅、寧夏等產(chǎn)區(qū)[4]。甘肅栽培肉蓯蓉為列當(dāng)科植物肉蓯蓉Cistanche deserticola Y. C. Ma的干燥帶鱗葉的肉質(zhì)莖，又稱荒漠肉蓯蓉[5]?！吨袊幍洹?015年版一部收載肉蓯蓉為列當(dāng)科植物肉蓯蓉Cistanche deserticola Y. C. Ma或管花肉蓯蓉Cistanche tubulosa（Schenk）Wight的干燥帶鱗葉的肉質(zhì)莖[1]。為了更好地鑒別甘肅栽培肉蓯蓉，本文建立了甘肅栽培肉蓯蓉顯微、薄層色譜鑒別方法，為鑒別甘肅栽培肉蓯蓉提供依據(jù)。

1 儀器設(shè)備及材料

詳見表1。

2 肉蓯蓉樣品

試驗用肉蓯蓉是2018年10月及2019年4月在甘肅種植產(chǎn)區(qū)酒泉市、張掖市、武威市、白銀市采挖的檢品，經(jīng)筆者賈存勤正高級工程師鑒定為列當(dāng)科植物肉蓯蓉 Cistanche deserticola Y. C. Ma的干燥帶鱗葉的肉質(zhì)莖，見表2、圖1。

3 顯微鑒別

由于肉蓯蓉一般較為粗大，顯微鏡視野有限，采用顯微數(shù)碼成像技術(shù)建立了甘肅栽培肉蓯蓉的粉末顯微鑒別方法。

3.1 方法 取肉蓯蓉樣品粉碎過4號篩的粉末，用水合氯醛試液透化后[6]，使用電子成像顯微鏡，在40倍物鏡下觀察其顯微特征，并拍照見圖2。

4 薄層色譜鑒別

4.1 色譜條件的優(yōu)選

4.1.1 提取方法 對不同的取樣量（0.5 g、1.0g、1.5 g），不同的提取方式（水浴回流加熱、超聲），不同提取溶劑（乙醇、乙醚、甲醇），不同提取時間（10 min、15 min、20 min），分別進行考察，確定了最佳的提取方法。

4.1.2 展開條件 對不同的點樣量（0.5 μL、1.0μL、1.5 μL、2.0 μL、2.5 μL），不同薄層板（G板、GF254板、聚酰胺板），不同展開劑[甲醇-醋酸-水（2∶1∶7 ）、甲醇-乙酸乙酯-水（2∶1∶7 ），不同溫濕度（T：17 ℃，RH：40%; T：22 ℃，RH：50%; T：25 ℃，RH：60%），不同檢視條件（365nm、254 nm）進行了比較，優(yōu)化了薄層色譜條件（T：溫度，RH：干濕球法測定得的相對濕度）。

4.2 對照溶液制備

4.2.1 對照品溶液制備 精密取松果菊苷對照品11.20 mg（按89.7%計）、毛蕊花糖苷對照品12.04 mg（按92.5%計），分別置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，分別制成每1.00mg/mL的松果菊苷對照品溶液，1.11 mg/mL的毛蕊花糖苷溶液，作為對照品溶液。

4.2.2 對照藥材溶液的制備 稱取肉蓯蓉對照藥材粉末1.02 g，加甲醇20 mL，超聲處理15 min，濾過，濾液濃縮至近干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為樣品溶液。

4.3 樣品溶液制備 取5批次肉蓯蓉粉末各1.0 g，加甲醇20 mL，超聲處理15 min，濾過，濾液濃縮至近干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為樣品溶液。

4.4 展開 吸取“4.3”的5批次樣品溶液、“4.2.1”對照品溶液、“4.2.2”對照藥材溶液各2μL點于同一聚酰胺薄層板上，在溫度為22～25℃，濕度為40%～50%條件下，以甲醇-醋酸-水（2∶1∶7 ） 為展開劑，展開，取出，晾干。

4.5 檢視 將“4.4”項薄層板置于紫外光燈（ 365 nm） 下檢視，結(jié)果見圖3。

5 結(jié)果與討論

5.1 顯微鑒別結(jié)果 粉末呈棕褐色。薄壁細胞呈不規(guī)則多邊形，排列緊密，壁略彎曲。厚壁細胞呈類多角形，壁厚，隱約可見層紋。導(dǎo)管為螺紋、網(wǎng)紋導(dǎo)管。淀粉粒較多，為長卵形、球形、長圓形，長 8～40 μm，臍點多呈點狀、裂縫狀;復(fù)粒極少，由2分粒組成[7]。纖維長梭形，有的中間有隔。

5.2 薄層色譜鑒別標(biāo)準(zhǔn) 取本品粉末1 g，加甲醇20 mL，超聲處理15 min，濾過，濾液濃縮至近干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。另取肉蓯蓉對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。再取松果菊苷對照品、毛蕊花糖苷對照品，加甲醇分別制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述三種溶液各2 μL，分別點于同一聚酰胺薄層板上，在T：22～25 ℃，RH：40%～50%條件下，以甲醇-醋酸-水（2∶1∶7）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。5批樣品試驗結(jié)果，方法專屬性強、斑點清晰、分離效果佳、穩(wěn)定性好。

6 結(jié)論

本文首次建立的甘肅栽培肉蓯蓉的顯微、薄層色譜鑒別方法，完善了質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，為甘肅栽培肉蓯蓉的鑒別提供了依據(jù)，建議可作為荒漠肉蓯蓉的品種鑒定依據(jù)。

參考文獻

[1]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典（一部） [M]. 北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：135-136.

[2]玄國東，劉春泉.肉蓯蓉苯乙醇苷對D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用研究[J].中藥材，2008，31（9）：1385-1388.

[3]張洪泉，許愛華，李電東.肉蓯蓉多糖對腫瘤和荷瘤小鼠的藥理作用[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，1997，17（S1）：155-156.

[4]龔華夢，胡輝，劉源才.HPLC測定肉蓯蓉配方顆粒的含量及指紋圖譜研究[J].華西藥學(xué)雜志，2018，33（6）：623-627.

[5]何燕萍， 尹哲洙， 屠鵬飛， 等.肉蓯蓉鑒定與商品藥材調(diào)查[J].中藥材，1997，20（3） ：117-122.

[6]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典（四部） [M]. 北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：230-231.

[7]付桂芳，陳敏，崔光紅，等.荒漠肉蓯蓉和管花肉蓯蓉的組織結(jié)構(gòu)比較研究[J].中華中醫(yī)藥雜志，2007，22（12）：840-843.

（收稿日期：2021-03-08 編輯：劉斌）