ABCG1基因啟動子區(qū)rs1378577位點A/C多態(tài)性對陳舊性心肌梗死合并心力衰竭患者心臟血流動力學的影響〔1〕

高勝利，高淑紅*，翟曉娟，李莉

(1.山西醫(yī)科大學汾陽學院，山西 汾陽 032200；2.山西醫(yī)科大學附屬汾陽醫(yī)院，山西 汾陽 032200)

陳舊性心肌梗死(OMI)是心力衰竭的常見病因之一，早期識別高危人群有助于早期預防、早期干預，減緩心力衰竭的發(fā)生和發(fā)展[1]。三磷酸腺苷(ATP)結合盒轉運體Gl(ABCGl)與動脈粥樣硬化、冠心病等關系密切[2]，其基因啟動子區(qū)rs1378577位點單核苷酸多態(tài)性存在AA、AC和CC三種基因表型。多項研究表明，AC和CC基因型人群冠心病心肌梗死的患病率高，而且病情嚴重[3]。心臟血流動力學改變是心力衰竭重要的病理生理學表現(xiàn)之一[4]，ABCG1基因啟動子區(qū)rs1378577位點A/C多態(tài)性是否影響陳舊性心肌梗死合并心力衰竭患者的心臟血流動力學，目前相關報道較少，本文對此進行研究，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019年1月—2019年10月山西省汾陽醫(yī)院心血管內(nèi)科收治的OMI合并心力衰竭患者178 例，其中男119 例，女59 例，年齡(59.50±2.26) 歲。依據(jù)ABCG1基因啟動子區(qū)rs1378577位A/C多態(tài)性基因型，分為三組：AA基因型組(AA組)57 例，AC基因型組(AC組)69 例和CC基因型組(CC組)52 例。三組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性(見表1)。

表1 三組患者一般資料比較

1.2 納入和排除標準

納入標準：心電圖及超聲心動圖檢查確診為陳舊性心肌梗死；符合《慢性心力衰竭診斷治療指南》；NYHA心力衰竭分級Ⅱ～Ⅳ級，左心室射血分數(shù)<40%。排除標準：由非冠心病引發(fā)的慢性心力衰竭者；合并慢性阻塞性肺疾病、感染、休克等嚴重并發(fā)癥者；心源性休克者；嚴重精神或意識障礙者。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.3 方法

1.3.1 ABCG1啟動子rs1378577位點A/C多態(tài)性檢測

禁食12 h，靜脈采血5 mL，EDTA抗凝，提取全血基因組DNA，采用課題組[5]建立的聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性分析基因型。

1.3.2 血漿血脂水平檢測

禁食12 h，靜脈采血5 mL，Olympus2700生化分析儀測定血脂水平。

1.3.3 ABCG1 mRNA的表達水平檢測

禁食12 h，靜脈采血，提取全血RNA，采用課題組[6]建立的實時熒光定量PCR法檢測，以甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)為內(nèi)參，計算其相對表達量，數(shù)據(jù)采用2-ΔΔCT分析。

1.3.4 血漿一氧化氮含量和內(nèi)皮一氧化氮合酶活性檢測

禁食12 h，靜脈采血，3 000 r/min，離心15 min，分離血漿，按照說明書酶聯(lián)免疫吸附法測定內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性，硝酸還原酶法檢測一氧化氮(NO)含量。

1.3.5 無創(chuàng)心臟血流動力學檢測

采用CHM T3002無創(chuàng)心臟血流動力學監(jiān)測儀，依據(jù)使用說明書，記錄有關無創(chuàng)血流動力學參數(shù)。

1.4 觀察指標

比較三組患者全血ABCG1 mRNA的相對表達水平、血漿NO含量和eNOS活性及無創(chuàng)血流動力學參數(shù)。泵功能：每搏輸出量(SV)、心輸出量(CO)、每搏指數(shù)(SVI)、心指數(shù)(CD)、射血分數(shù)(EF)、最大射血速率(AMP C)；收縮功能：包括射血前期(PEP)、左室射血期(LVET)、PEP/LVET收縮時間比(STR)、收縮指數(shù)(IC)、收縮功能指數(shù)(HI)；作功：左室每搏作功(SW)、左室每分作功(CW)、搏功指數(shù)(SWI)等。

1.5 統(tǒng)計學方法

2 結 果

2.1 ABCG1基因啟動子區(qū)rs1378577位A/C多態(tài)性基因型檢測結果

經(jīng)PCR-RFLP方法分析，AA純合型57 例(32.02%)，AC雜合型69 例(38.76%)，CC純合型52 例(29.21%)。經(jīng)擬合優(yōu)度檢驗群體遺傳性分析，基因型頻率符合Hardy-Weinberg平衡規(guī)律(χ2=4.557，P>0.05)。

2.2 三組患者臨床指標比較

與AA組相比，AC組和CC組ABCG1mRNA/GAPDH值下降，總膽固醇(TC)升高，eNOS活性降低，NO含量下降，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(見表2)。

表2 三組患者臨床指標比較

2.3 三組患者無創(chuàng)血流動力學指標比較

與AA組相比，AC和CC組SV，SVI，EF，AMP C下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，CO和CD存在下降趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(見表3)。PEP時間延長，LVET縮短，PEP/LVET增大，IC，HI，SW和SWI下降，差異均有統(tǒng)計學意義，CW降低，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(見表4)。

表3 三組心臟泵功能參數(shù)比較

表4 三組收縮功能和做功比較

3 討 論

心力衰竭是全球導致死亡的主要原因之一[6]。ABCGl參與膽固醇的逆向轉運，其rs1378577位點存在AA、AC和CC基因型，AC和CC基因型人群冠心病心肌梗死的患病率高而且病情嚴重[3]，心肌梗死并發(fā)心力衰竭會導致血流動力學改變[7-8]。本研究中，與AA組相比，AC和CC組SV，SVI，EF及AMP C均顯著降低，提示AC和CC組心臟泵功能下降。同時，與AA組相比，AC和CC組PEP及LVET時間延長，PEP/LVET比值增大，IC和HI下降，提示AC和CC組心室肌收縮功能下降。本研究還顯示，與AA組相比，AC和CC組SWI顯著降低，提示AC和CC組心臟做功降低。由此可見，對于OMI合并心力衰竭患者，與AA基因型相比，AC和CC基因型患者的心臟泵功能、收縮功能及做功下降。ABCGl基因多態(tài)性會影響其表達及功能[9]。本研究中，與AA組相比，AC和CC組ABCG1 mRNA表達下降[10]，同時血漿膽固醇增高，eNOS活性降低，NO含量下降，其原因可能是由于ABCGl表達下降可以導致轉運膽固醇功能降低，引起細胞內(nèi)膽固醇增高，抑制eNOS活性，導致NO減少[11-12]。eNOS與NO具有增加冠脈血流和心肌細胞能量供給、縮短心肌的收縮期、增強心室舒張效應及心肌細胞收縮能力等作用[13-14]。由此推測，AC和CC基因型患者血流動力學改變與eNOS和NO系統(tǒng)受損有關。因此，eNOS和NO系統(tǒng)作為治療心力衰竭的靶點，具有改善血流動力學的作用，例如他汀類藥物可以降低膽固醇，增強eNOS和NO系統(tǒng)功能，改善超聲心動圖參數(shù)，防止左室擴張，延緩心力衰竭進展，有效降低發(fā)病率和死亡率[15-16]。然而也有研究表明[17]，降低膽固醇并不能有效改善心力衰竭患者的血流動力學指標，考慮部分原因為單基因表達改變?；诖耍覀冊谂R床應用過程中，給予AC和CC基因型患者適當劑型和劑量的他汀藥物[18]，有效改善了患者的血流動力學指標，然而療效還在進一步研究之中。同時，本研究對象為EF降低的心力衰竭患者，而對于EF正常的心力衰竭患者是否也具有影響作用，有待于進一步研究。