結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1在婦科惡性腫瘤中的研究進(jìn)展

黃文斌 陳微楠 朱雪瓊

結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1（metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1）是對(duì)人結(jié)腸癌組織、轉(zhuǎn)移灶和正常結(jié)腸黏膜進(jìn)行差異顯示逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)并命名的，與結(jié)腸癌的發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[1]。MACC1位于人類7號(hào)染色體（7p21.1），包含7個(gè)外顯子和6個(gè)內(nèi)含子，編碼的cDNA包含2 559個(gè)核苷酸，編碼一個(gè)由852個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)。C-Met基因是MACC1的轉(zhuǎn)錄靶點(diǎn)之一，MACC1通過調(diào)節(jié)肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocyte growth factor,HGF）/C-Met信號(hào)通路促進(jìn)結(jié)腸腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲、轉(zhuǎn)移。C-Met啟動(dòng)子上的特異性Sp1結(jié)合位點(diǎn)對(duì)于MACC1誘導(dǎo)C-Met的激活和隨后HGF/C-Met通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是必不可少的[1]。有研究顯示結(jié)腸癌組織與結(jié)腸腺瘤或相應(yīng)的正常組織相比，MACC1的表達(dá)顯著上調(diào)，提示MACC1的表達(dá)上調(diào)與良性組織向惡性組織的轉(zhuǎn)變有關(guān)；MACC1在原發(fā)和轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌組織中均高度表達(dá)，發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌患者組織中MACC1的表達(dá)更高，可作為結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)指標(biāo)[2]。近年來，大量文獻(xiàn)報(bào)道MACC1在20多種實(shí)體癌中對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移起到關(guān)鍵作用，包括結(jié)腸癌、膀胱癌、乳腺癌、食管癌、胃癌、肝細(xì)胞癌、肺癌、卵巢癌、宮頸癌、腎癌等[3]。在對(duì)MACC1與婦科惡性腫瘤的研究中發(fā)現(xiàn)，MACC1在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、生物學(xué)行為、治療及預(yù)后等多方面均起了一定的作用。因此，本文就MACC1在婦科惡性腫瘤中的研究進(jìn)展作一綜述。

1 MACC1在卵巢癌中的研究

1.1 MACC1在卵巢癌中的表達(dá)及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 Li等[4]收集了92份卵巢組織標(biāo)本，包括47例上皮性卵巢癌組織，25例卵巢良性腫瘤組織，20例正常卵巢組織，采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)組織中MACC1 mRNA的表達(dá)量，結(jié)果顯示MACC1 mRNA在所有標(biāo)本中均有表達(dá)。卵巢癌組織中MACC1 mRNA表達(dá)水平顯著高于卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織，而卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中其表達(dá)無明顯差異。同時(shí)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示MACC1蛋白在卵巢癌組織中的陽性表達(dá)率明顯高于卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織。在卵巢癌組織中，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的卵巢癌患者腫瘤組織中MACC1的陽性表達(dá)率明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者；同時(shí)MACC1的表達(dá)與臨床分期和組織分化程度有關(guān)，即分期越晚、組織分化程度越低，MACC1表達(dá)的陽性率越高，但與組織學(xué)類型未見明顯相關(guān)。以上結(jié)果顯示MACC1可能在卵巢腫瘤的惡性進(jìn)展中起重要作用，可能成為卵巢癌新的預(yù)后標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。

Link等[5]比較了卵巢癌患者及健康人群血清MACC1 mRNA的差異，同時(shí)追蹤了手術(shù)及化療前后卵巢癌患者血清MACC1 mRNA表達(dá)的變化。結(jié)果顯示，與健康對(duì)照組相比，卵巢癌患者血清MACC1 mRNA水平顯著升高，且卵巢癌患者M(jìn)ACC1水平越高，則分期越晚、無進(jìn)展生存期越短、總體生存率越低；與術(shù)前相比，術(shù)后1周患者血清MACC1 mRNA水平顯著升高，這種現(xiàn)象可能是由于手術(shù)過程中組織損傷引起的，然后在術(shù)后化療過程中逐漸下降，逐漸接近健康對(duì)照組的水平。以上結(jié)果顯示MACC1可能成為卵巢癌新的血液學(xué)篩查和預(yù)后標(biāo)志物。

1.2 MACC1對(duì)卵巢癌生物學(xué)行為的影響及調(diào)節(jié)機(jī)制 鄧佑興等[6]應(yīng)用基因沉默技術(shù)抑制順鉑耐藥的卵巢癌細(xì)胞SKOV-3/DDP中MACC1的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖、體外黏附和侵襲能力在MACC1表達(dá)下降后明顯減弱，而細(xì)胞凋亡呈增加趨勢(shì)。提示MACC1會(huì)促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移。該研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)抑制癌細(xì)胞中MACC1表達(dá)后，HGF/C-Met通路和細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）信號(hào)通路中的CMet蛋白、磷酸化的ERK（p-ERK）蛋白表達(dá)較空質(zhì)粒組和空白對(duì)照組均明顯降低，提示MACC1對(duì)SKOV-3/DDP細(xì)胞生物學(xué)行為的影響與HGF/Met和ERK信號(hào)通路相關(guān)，這為靶向MACC1基因治療卵巢癌提供了理論依據(jù)。

1.3 MACC1對(duì)卵巢癌化療效果和預(yù)后的影響 Chen等[7]在對(duì)比順鉑耐藥的卵巢癌細(xì)胞（SKOV-3/DDP）與非耐藥的卵巢癌細(xì)胞（SKOV-3）中MACC1的表達(dá)水平時(shí)發(fā)現(xiàn)，SKOV-3/DDP中MACC1 mRNA與蛋白表達(dá)水平分別是SKOV-3的2.50倍與2.00倍，提示了MACC1與卵巢癌順鉑耐藥相關(guān)。在敲低SKOV-3/DDP中MACC1的表達(dá)后，用不同濃度（10、20、30、40、50、60 μmol/L）的順鉑處理細(xì)胞48 h，結(jié)果顯示敲低組細(xì)胞生存率較未敲低組明顯下降，且在順鉑濃度為20μmol/L時(shí)下降最明顯。這一結(jié)果也在另外的耐順鉑卵巢癌細(xì)胞系A(chǔ)2780/DDP和COC1/DDP中得到了驗(yàn)證[8]。這表明MACC1可能參與了卵巢癌的順鉑耐藥，對(duì)MACC1的抑制可提高順鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性。

Jeong等[9]分析了774例卵巢癌患者M(jìn)ACC1表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系，將MACC1表達(dá)高于或低于中位數(shù)的患者分別歸入高表達(dá)組和低表達(dá)組，結(jié)果顯示MACC1 mRNA高表達(dá)患者的10年總體生存率和無進(jìn)展生存率顯著低于低表達(dá)患者。miR-338-3p可以靶向調(diào)節(jié)多種惡性腫瘤組織中MACC1的表達(dá)[10]。Zhang等[11]用RTPCR方法檢測(cè)了65例卵巢癌組織中miR-338-3p和MACC1基因的表達(dá)，通過二元logistic回歸分析卵巢癌復(fù)發(fā)和死亡的危險(xiǎn)因素；同時(shí)利用Kaplan-Meier法分析miR-338-3p和MACC1表達(dá)與卵巢癌生存期的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，miR-338-3p低表達(dá)是卵巢癌患者復(fù)發(fā)、死亡的高危因素；并且，miR-338-3p低表達(dá)和MACC1高表達(dá)患者的5年總體生存率和無進(jìn)展生存率明顯短于miR-338-3p高表達(dá)和MACC1低表達(dá)患者。以上研究結(jié)果表明，MACC1高表達(dá)可作為預(yù)測(cè)卵巢癌患者預(yù)后不佳的生物標(biāo)志物。

2 MACC1在宮頸癌中的研究

2.1 MACC1在宮頸癌中的表達(dá)及其與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 Guo等[12]檢測(cè)了8對(duì)宮頸癌及鄰近正常宮頸上皮組織中MACC1的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)MACC1在宮頸癌組織中表達(dá)顯著高于鄰近的正常宮頸上皮組織。免疫組化發(fā)現(xiàn)MACC1表達(dá)與患者的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，而與患者年齡、組織分化無關(guān)。即臨床分期越晚、伴發(fā)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者組織中，MACC1蛋白表達(dá)越高。Zhou等[13]采用免疫組化檢測(cè)了宮頸癌組織與正常宮頸組織中MACC1蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示宮頸癌組織中MACC1蛋白表達(dá)顯著高于正常組。同樣發(fā)現(xiàn)臨床分期越晚、伴發(fā)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者組織中，MACC1蛋白表達(dá)越高。以上研究表明MACC1可能有助于宮頸癌的腫瘤發(fā)生和進(jìn)展，可能是評(píng)價(jià)宮頸癌預(yù)后的一個(gè)有價(jià)值的指標(biāo)。

2.2 MACC1對(duì)宮頸癌生物學(xué)行為的影響 Chai等[14]通過MACC1 siRNA轉(zhuǎn)染宮頸癌HeLa細(xì)胞，下調(diào)細(xì)胞中MACC1的表達(dá)。由于MACC1基因敲除，HeLa細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力明顯受到抑制，而細(xì)胞凋亡明顯增加。同時(shí)流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，siRNA轉(zhuǎn)染后，Hela細(xì)胞G0/G1期細(xì)胞比例增大，G2/M期細(xì)胞比例下降，表明了MACC1 siRNA可能通過干擾細(xì)胞有絲分裂和細(xì)胞周期進(jìn)程來抑制細(xì)胞增殖。以上結(jié)果表明，MACC1可能是宮頸癌一個(gè)新的生物標(biāo)志物和治療干預(yù)的靶點(diǎn)。隨著RNA干擾技術(shù)的發(fā)展，它可能成為未來宮頸癌有效的基因治療策略。

Wang等[15]通過生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)MACC1是miRNA-485的下游靶基因，RT-qPCR顯示miRNA-485在宮頸癌低表達(dá)，而MACC1高表達(dá)，且兩者表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。轉(zhuǎn)染miRNA-485類似物到宮頸癌細(xì)胞系后，發(fā)現(xiàn)miRNA-485的恢復(fù)表達(dá)顯著降低了細(xì)胞系中MACC1的表達(dá)，且細(xì)胞的增殖和侵襲能力也顯著下降。在共轉(zhuǎn)染miRNA-485類似物與MACC1 DNA后，發(fā)現(xiàn)miRNA-485過表達(dá)對(duì)MACC1表達(dá)的抑制被逆轉(zhuǎn)，且MACC1表達(dá)的恢復(fù)逆轉(zhuǎn)了miRNA-485介導(dǎo)的對(duì)細(xì)胞增殖和侵襲能力的抑制。以上結(jié)果表明miRNA-485可能通過抑制MACC1的表達(dá)發(fā)揮其腫瘤抑制作用，為宮頸癌患者的靶向治療提供了新的思路。

2.3 MACC1對(duì)宮頸癌治療和預(yù)后的影響 李萱等[16]檢測(cè)了100例宮頸癌患者應(yīng)用鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療前后（鹽酸伊立替康60 mg/m2+順鉑60 mg/m2）癌組織中MACC1和淋巴細(xì)胞瘤-2基因（B-cell lym－phoma-2,Bcl-2）蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果顯示75例臨床治療有效組中Bcl-2、MACC1在化療后的表達(dá)較化療前顯著降低，而在無效組中，兩者的表達(dá)在化療前后無明顯變化。這提示宮頸癌組織中Bcl-2與MACC1蛋白表達(dá)與鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑化療的效果相關(guān)。袁超君等[17]將92例宮頸癌患者分為兩組，1組采用伊立替康聯(lián)合順鉑化療方案（伊立替康60 mg/m2；順鉑60 mg/m2），另1組采用紫杉醇化療方案（75 mg/m2）。比較兩組治療前后臨床療效以及血清中Bcl-2及MACC1蛋白變化。結(jié)果顯示，治療后兩組患者血清Bcl-2及MACC1蛋白含量均較治療前顯著降低。與紫杉醇組相比，伊立替康聯(lián)合順鉑組患者血清Bcl-2及MACC1蛋白含量下降更為明顯。且伊立替康聯(lián)合順鉑組的1年生存率高于紫杉醇組。表明宮頸癌組織中Bcl-2及MACC1蛋白含量明顯下降與伊立替康聯(lián)合順鉑治療相關(guān)。這說明MACC1有可能成為評(píng)價(jià)宮頸癌方案化療的療效指標(biāo)。

Guo等[12]根據(jù)MACC1表達(dá)水平將104例宮頸癌標(biāo)本分為高M(jìn)ACC1組（51例）和低MACC1組（53例），Kaplan-Meier生存曲線顯示雖然MACC1表達(dá)與宮頸癌10年無進(jìn)展生存時(shí)間無明顯關(guān)系，但是MACC1表達(dá)水平與宮頸癌患者的10年總生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān)。多變量分析顯示宮頸癌組織中MACC1蛋白表達(dá)是患者總生存期的獨(dú)立的不良預(yù)后因素。Zhou等[13]分析了181例宮頸癌組織中MACC1蛋白表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)MACC1表達(dá)不僅與患者的10年總生存時(shí)間負(fù)相關(guān)，還與10年無進(jìn)展生存時(shí)間負(fù)相關(guān)。以上結(jié)果表明MACC1可能是評(píng)價(jià)宮頸癌患者預(yù)后的一個(gè)潛在的生物標(biāo)志物。

3 MACC1在子宮內(nèi)膜癌中的研究

3.1 MACC1在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 Chen等[18]采用免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)MACC1蛋白在158例子宮內(nèi)膜癌組織與31例正常子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)。結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜癌組織中MACC1表達(dá)顯著高于正常子宮內(nèi)膜組織，且臨床分期越晚、肌層浸潤(rùn)越深、伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的MACC1蛋白表達(dá)陽性率較高。提示MACC1與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。

3.2 MACC1對(duì)子宮內(nèi)膜癌生物學(xué)行為的影響 體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，周斌等[19]用MACC1 siRNA轉(zhuǎn)染子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa，使MACC1在細(xì)胞內(nèi)低表達(dá)，然后用CCK-8、流式細(xì)胞儀與Western blot檢測(cè)細(xì)胞增殖、凋亡及其相關(guān)蛋白與磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K）/蛋白激酶 B（protein kinase B,AKT）信號(hào)通路蛋白的變化。與陰性對(duì)照組相比，MACC1 siRNA轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖能力和增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）與PI3K/AKT信號(hào)通路蛋白PI3K、磷酸化的AKT（p-AKT）表達(dá)均明顯降低，而細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)蛋白Cleaved Caspase-3表達(dá)均明顯升高。這提示MACC1可能通過PI3K/AKT信號(hào)通路調(diào)控子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖與凋亡。根據(jù)microRNA預(yù)測(cè)網(wǎng)站，Chen等[18]發(fā)現(xiàn)MACC1可能是miRNA-23b的靶基因。qRT-PCR分析顯示miRNA-23b轉(zhuǎn)染子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞后可顯著下調(diào)MACC1的表達(dá)，進(jìn)而抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移能力。同時(shí)，該研究在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，裸鼠接種低表達(dá)MACC1的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞后，相同時(shí)間內(nèi)，腫瘤組織體積明顯小于接種陰性對(duì)照組子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的小鼠。以上結(jié)果表明miRNA-23b可能通過抑制MACC1的表達(dá)發(fā)揮其腫瘤抑制作用，MACC1可能是子宮內(nèi)膜癌新的治療靶點(diǎn)。

4 MACC1與其他婦科惡性腫瘤

目前尚未見MACC1與外陰癌、惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤、陰道癌、輸卵管癌等關(guān)系研究方面的文獻(xiàn)報(bào)道。

5 小結(jié)

現(xiàn)有證據(jù)表明MACC1與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及患者的不良預(yù)后相關(guān)[20]。同樣MACC1在婦科惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中起促進(jìn)作用。MACC1在卵巢癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)均明顯高于相應(yīng)正常組織，且與這些婦科腫瘤的惡性生物學(xué)行為相關(guān)。提示MACC1與婦科惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。同時(shí)，MACC1與卵巢癌及宮頸癌的順鉑耐藥及不良預(yù)后相關(guān)。因此，進(jìn)一步研究MACC1表達(dá)對(duì)婦科惡性腫瘤生物學(xué)行為影響的相關(guān)機(jī)制將為婦科惡性腫瘤治療提供新的思路。