刺梨促消化功能研究

涂永麗，周宏炫，譚書明，羅繼偉

(貴州大學 釀酒與食品工程學院，貴州 貴陽，550025)

消化不良主要表現(xiàn)是由消化功效減弱、內(nèi)部絮亂所引發(fā)的胃腸道不適的系統(tǒng)性疾病。隨著人們生活質(zhì)量的提高及生活方式的改變，發(fā)病率呈現(xiàn)不斷升高趨勢[1]。據(jù)流行病學統(tǒng)計在門診中占消化內(nèi)科疾病的1/3, 發(fā)病率18%～23%,嚴重影響患者的生活水平[2-3]，這類消化疾病持續(xù)時間長，給患者身心健康造成嚴重的影響[4]，并帶來昂貴的醫(yī)藥費用[5]。目前臨床上主要使用合成藥，在消化疾病患者的初步階段治療效果較好，但對長期治療效果卻不理想[6]。因此，從天然植物中探索副作用小、促消化功能的食品原材料具有較高的市場前景和社會價值。

刺梨又名送春歸、團糖二等, 薔薇科多年生灌木[7]，主要分布在中國西南地區(qū)，尤其是貴州龍里、盤州等地[8]。其營養(yǎng)成分豐富，具有滋補開胃健脾的功效[9]。此外，刺梨果實中含有超氧化物岐化酶、有機酸、黃酮、多糖、多酚、微量元素及人體所需的氨基酸物質(zhì)等[10-13]?，F(xiàn)代藥理學研究，刺梨可以調(diào)節(jié)機體免疫力和延緩衰老、降血糖、降血脂、解酒、健胃消食等功效[14-19]。李永渝等[20]研究發(fā)現(xiàn)刺梨可以增強胃腸蠕動，使膽汁、胰液流量增加，促進消化的作用。李貽等[21]經(jīng)由體外模擬刺梨消化，得出胃蛋白酶、胰酶能增進消化及抗氧化活性。其他研究顯示，刺梨中的有機酸組分不僅是其果實品質(zhì)和特殊風味的重要組成因子, 它可能還具有和其他活性物質(zhì)一起共同促進消化及其他作用[11]。目前，關(guān)于研究刺梨汁促消化作用及其機制研究鮮有報道。所以本文以刺梨原汁及不同程度的濃縮后連續(xù)灌胃模型小鼠15 d，大鼠28 d后，探討刺梨汁的促消化作用，并以此為刺梨汁開發(fā)輔助健脾開胃食品及其促消化機理提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、動物與試劑

刺梨果實原汁，貴州省貴陽市龍里縣工業(yè)園區(qū)；刺梨汁高、中、低劑量組分別為旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮6倍、4倍、刺梨原汁，分別于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。實驗小鼠?8～22 g的KM種雄性小鼠(SCXK (湘) 2019—0014)，SD大鼠180～200 g(SCXK(湘)2019—0014)，湖南省長沙市天勤生物技術(shù)有限公司。復(fù)方地酚諾酯片，國藥準字(H32022716)，健胃消食片(批號18111036)，江中藥業(yè)股份有限公司；活性炭粉，阿拉丁試劑(上海)有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

R-201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海申勝生物技術(shù)有限公司；游標卡尺；剪刀。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品的配制

復(fù)方地芬諾酯片：取復(fù)方地酚諾酯片0.05 g,用研缽研碎呈粉末后加水至0.1 L,配制成質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL的混懸液，當天配制。

墨汁：取100 g阿拉伯樹膠粉溶于400 mL蒸餾水中，配成250 g/L的透明溶液，再放入50 g活性碳粉，煮沸3次，用蒸餾水定容至500 mL，4 ℃冷藏，用前混勻。

健胃消食片：用研缽研磨成細粉，用水制成0.133 g/mL的混懸液，當天配制。

1.3.2 動物分組及喂養(yǎng)

將小鼠造模成功后，按照體重隨機分成6組(n=10),分別是模型組、空白組、陽性組、刺梨汁低、中、高劑量組每天分別灌胃0.3、0.6、1.2 g/kg。大鼠按照體重隨機分成5組(n=8)，每天分別以10 mL/kg進行灌。小鼠模型組灌胃復(fù)方地芬諾酯混懸液，陽性組灌胃健胃消食懸浮液，刺梨汁中、高劑量組分別給予相應(yīng)濃縮倍數(shù)的刺梨汁，低劑量組給予原汁。15 d后測定小腸的蠕動功效；大鼠灌胃28 d，早上9點測定記下大鼠的飲食量，一周稱一次體重。實驗結(jié)束時測定大鼠體重、體重增加量、攝食量、飼料利用率、消化酶。

表1 各組小鼠的分組及喂養(yǎng)Table 1 Grouping and feeding of mices in each group

表2 各組大鼠的分組及喂養(yǎng)Table 2 Grouping and feeding of rats in each group

1.4 指標測定

1.4.1 小腸蠕動的測定

實驗結(jié)束前禁食不禁水，16 h后各給藥組和對照組再灌胃1次樣品及生理鹽水。30 min后各組灌胃墨汁,25 min后斷頸死亡,打開腹腔分開腸系膜,剪取上端自幽門、下端至回盲腸部位的腸管,置于托盤上,輕輕將小腸拉成直線,量取腸管長度為“小腸總長度”,從幽門至墨汁前沿為“小腸推進長度”[22]。

(1)

小腸推動率的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換,X=sin-1Ρ,式中P為小腸推進率。

1.4.2 大鼠體重、體重增重、攝食量和食物利用率的測定

灌胃28 d后，結(jié)束前禁食不禁水24 h后，計算體重增加量和食物利用率，食物利用率計算如公式(2)所示：

(2)

1.4.3 大鼠胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量的測定

胃液1 mL置于50 mL三角瓶中,配制15 mL 0.05 mol/L HCl溶液搖勻,放入新鮮制作的蛋白管。塞好瓶口,在37 ℃恒溫箱中孵育24 h后,拿出蛋白管,用游標卡尺量取蛋白管兩端前后透明處的長度(mm)。取4端處之值求其平均值。計算胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量[22]，如公式(3)和公式(4)所示：

胃蛋白酶活性/(U·mL-1)

=4端蛋白管透明部分長度均值2×16

(3)

胃蛋白酶排出量/(U·h-1)

=胃蛋白酶活性×每小時胃液量

(4)

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

全部數(shù)據(jù)采取SPSS 21.0軟件進行方差分析，P<0.05或P<0.01為具備統(tǒng)計學意義，Orgin制圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 刺梨對小鼠小腸蠕動的影響

消化不良主要與小腸的蠕動有關(guān)[23]。經(jīng)過不同劑量刺梨汁灌胃小鼠，測定小腸的推進功效。復(fù)方地芬諾酯是一種治療功能性腹瀉的藥物，配以抗膽堿藥阿托品, 協(xié)同加強對腸管蠕動的抑制,采用其誘導(dǎo)小鼠模型已經(jīng)成為檢驗促消化效果的試驗方法[24]。刺梨汁對小鼠小腸的蠕動結(jié)果如1圖所示。與正常組相比，模型組小腸推進率下降了52.77%，具備統(tǒng)計學意義(P<0.001)，表明小鼠在灌胃給予復(fù)方地芬諾酯后，腸道蠕動抑制模型建立成功。與模型組相比，刺梨汁中、高劑量、陽性組小腸推進率提高了45.83%、51.35%、43.93%(P<0.05，P<0.01)；濃縮汁高劑量與陽性組相比，明顯提高小腸推進率(P<0.05)。彭章蒙等[25]研究白蘿卜促消化作用，發(fā)現(xiàn)中、高2個劑量組小腸推進長度及推進率轉(zhuǎn)化值顯著增長(P<0.05)。

圖1 刺梨汁對小鼠小腸蠕動的影響Fig.1 Effect of Rose roxburghii Tratt juice on small intestinal peristalsis in mice注：##表示與正常組相比較P<0.01；*表示與模型組相比較 P<0.05；**表示與模型組相比較P<0.01

2.2 刺梨對大鼠體重、體重增加量、攝食量和食物利用率的影響

消化不良導(dǎo)致食欲減退、攝食量明顯減少，由此導(dǎo)致體重減輕、食物利用率下降；反之，消化功能越好則攝食量、體重增加量越大、食物利用率越高[26]。刺梨汁對大鼠體重的影響如圖2所示，對大鼠體重增加量、攝食量及食物利用率如表3。由圖2可知，刺梨汁低、中、高劑量組與空白組相比較，對大鼠體重無顯著性影響(P>0.05)。陽性組在給藥14 d后與空白組相比大鼠體重顯著增加(P<0.05)。由表3可知，刺梨汁各劑量組對大鼠體重增加量和食物利用率沒有顯著性差異(P>0.05)，但攝食量顯著增長(P<0.05)，與空白組相比，陽性組、刺梨低、中、高劑量組分別增加攝食量5.66%、1.39%、2.64%、4.25%，表明刺梨汁可以提高大鼠食欲。

2.3 刺梨對大鼠胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量的影響

胃蛋白酶是由胃內(nèi)的胃蛋白酶原經(jīng)過胃酸活化后產(chǎn)生[27]。刺梨汁各劑量組對大鼠胃蛋白酶活性及胃蛋白酶排出量的影響見圖3，陽性組、刺梨中、高劑量組與正常組相比，胃蛋白酶活性提高53.27%、33.41%、41.38%(P<0.05)，胃蛋白酶排出量提高58.41%、32.53%、38.19%(P<0.05)。表明刺梨汁可以增加胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。傅曼琴等[28]研究陳皮促消化，得出各活性物可以增長胃蛋白酶活性和蛋白酶排出量。

圖2 刺梨汁對大鼠體重量的影響Fig.2 Effects of Rose roxburghii Tratt juice on body mass in rats

表3 刺梨汁對大鼠體重增加量、攝食量、食物 利用率的影響Table 3 Effects of Rose roxburghii Tratt juice on weight gain, food intake and food utilization in rats

圖3 刺梨汁對大鼠胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量的影響Fig.3 Effect of Rose roxburghii Tratt juice on the activity and excretion of pepsin in rats注：*表示與正常組相比較P<0.05,**表示與正常組相比較P<0.01

3 結(jié)論

本文通過15 d小鼠、28 d大鼠動物實驗，并測定指標對促消化功效進行評價。研究得出，刺梨中、高劑量組與模型組相比，小腸推進率提高，高劑量組作用顯著(P<0.05)；刺梨不同劑量組與正常組相比，對大鼠體重增加量和食物利用率沒有顯著性差異(P>0.05)，但可以明顯增進攝食量(P<0.05)；中、高劑量組可以提高胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量(P<0.05)。研究證明刺梨汁具有促消化功能，如將刺梨汁研發(fā)成具有消化功效的食品，將大力促進食療領(lǐng)域新產(chǎn)品的研發(fā)。但目前關(guān)于刺梨汁促消化的機制還需要進一步的研究。