當(dāng)歸不同產(chǎn)地不同提取方法的比較

張雨晴，李艷玲

(河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院 動物醫(yī)藥學(xué)院，河南 鄭州450046)

藥用植物當(dāng)歸，屬傘形科，多年生植物[1]，其根莖有補(bǔ)血活血、調(diào)經(jīng)止痛、潤腸通便之功效[2]。當(dāng)歸俗稱“女科之圣藥”、“血家圣藥”，在醫(yī)療實踐與日常生活中被廣泛使用。當(dāng)歸以其干燥根入藥，凈制方法為“切、去蘆頭、去須、去苗”[3]。甘肅岷縣的當(dāng)歸更具有道地性，故岷縣當(dāng)歸有“岷歸甲中華”的美稱[4]。目前，人們從當(dāng)歸中分離提取的有效成分已經(jīng)有160多種[5]。曹顏冬[6]通過文獻(xiàn)分析，發(fā)現(xiàn)人們所分離出來的當(dāng)歸主要化學(xué)成分有揮發(fā)油、有機(jī)酸類、多糖等。野生當(dāng)歸供不應(yīng)求，現(xiàn)在當(dāng)歸的主要來源依靠人工種植。不同產(chǎn)地的種植規(guī)范和加工方法不同，以及使用的化肥和農(nóng)藥有所不同，導(dǎo)致當(dāng)歸有效成分的含量因產(chǎn)地不同而有所差異。當(dāng)歸所含的化學(xué)成分有100多種，不同的化學(xué)成分有其相對應(yīng)的藥理作用，因此單一的化學(xué)成分無法體現(xiàn)出當(dāng)歸藥材的整體質(zhì)量，難以作為中藥材質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)。對不同產(chǎn)地的當(dāng)歸進(jìn)行整體質(zhì)量評價，對指導(dǎo)臨床用藥有重要的意義。以當(dāng)歸藥材的整體化學(xué)組分來評價控制其質(zhì)量，可為臨床上更有效利用該藥材提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗儀器

100 mL具塞錐形瓶(水提、醇提)、100 mL具塞錐形瓶(醚提)、BSA224S-CW分析天平(賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司)、HH-S4二列四孔水浴鍋(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)、101-2AS電熱鼓風(fēng)干燥箱(北京市光明醫(yī)療儀器廠)、變色硅膠干燥器、蒸發(fā)皿、電熱套、1 000 mL圓底燒瓶、揮發(fā)油測定器、回流冷凝管。

1.1.2 實驗樣品

10個產(chǎn)地當(dāng)歸樣品，具體信息見表1。

表1 實驗樣品來源

1.2 方法

1.2.1 水溶性浸出物測定法

冷浸法：取供試品約4 g，精密稱定，置250～300 mL的錐形瓶中，精密加95%乙醇100 mL，密塞，冷浸，前6小時內(nèi)間隔15～30分鐘振搖1次，再靜置18小時，用干燥濾器迅速濾過，精密量取濾液20 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3小時，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量。以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量(%)。

1.2.2 醇溶性浸出物測定法

取供試品約4 g，精密稱定，置250～300 mL的錐形瓶中，精密加水100 mL，密塞，冷浸，前6小時內(nèi)振搖，再靜置18小時，用干燥濾器迅速濾過，精密量取濾液20 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3小時，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量。以干燥品計算供試品中醇溶性浸出物的含量(%)。

1.2.3 揮發(fā)性醚浸出物測定法

取供試品(過四號篩)2～5 g，精密稱定，置五氧化二磷干燥器中干燥12小時，置索氏提取器中，加乙醚適量，除另有規(guī)定外，加熱回流8小時，取乙醚液，置干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，放置，揮去乙醚，殘渣置五氧化二磷干燥器中干燥18小時，精密稱定，緩緩加熱至105 ℃，并于105 ℃干燥至恒重。其減失重量即為揮發(fā)性醚浸出物的重量。

1.2.4 總揮發(fā)油的測定

取供試品適量(約相當(dāng)于含揮發(fā)油0.5～1.0 mL),稱定重量(精確至0.01 g)，水300～500 mL與玻璃珠數(shù)粒，振搖混合后連接揮發(fā)油測定器與回流冷凝管。自冷凝管上端加水使充滿揮發(fā)油測定器的刻度部分，并溢流入燒瓶為止。置電熱套中緩緩加熱至沸騰，并保持微沸約5小時，至測定器中油量不再增加，停止加熱，放置片刻，開啟測定器下端的活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達(dá)0線上約5 mm處為止。放置1小時以上，再開啟活塞使油層下降至其上端恰與刻度0線平齊，讀取揮發(fā)油量，并計算供試品中揮發(fā)油的含量(%)。

2 結(jié)果

2.1 水溶性浸出物測定結(jié)果

通過以上方法對當(dāng)歸的冷浸物進(jìn)行測定，得出浸出物含量結(jié)果如表2：

表2 10個產(chǎn)地當(dāng)歸水溶性浸出物測定結(jié)果

10個產(chǎn)地當(dāng)歸的水提物平均出膏率，如圖1。

圖1 10個產(chǎn)地當(dāng)歸的水提物平均出膏率

2.2 醇溶性浸出物測定結(jié)果

通過以上方法對當(dāng)歸的醇浸物進(jìn)行測定，得出浸出物含量結(jié)果如表3。

表3 10個產(chǎn)地當(dāng)歸醇溶性浸出物測定結(jié)果

10個產(chǎn)地當(dāng)歸醇提物的平均出膏率，如圖2。

圖2 10個產(chǎn)地當(dāng)歸的醇提物平均出膏率

2.3 總揮發(fā)油測定結(jié)果

通過以上方法對當(dāng)歸的總揮發(fā)油含量進(jìn)行測定，得出總樣發(fā)油含量結(jié)果如表4。

表4 10個產(chǎn)地當(dāng)歸總揮發(fā)油測定結(jié)果

10個產(chǎn)地當(dāng)歸的總揮發(fā)油提取率，如圖3。

圖3 10個產(chǎn)地當(dāng)歸的總揮發(fā)油提取率

2.4 醚浸出物測定結(jié)果

通過以上方法對當(dāng)歸的醚提物進(jìn)行測定，得出浸出物含量結(jié)果如表5。

表5 10個產(chǎn)地當(dāng)歸揮發(fā)性醚提物測定結(jié)果

10個產(chǎn)地當(dāng)歸的揮發(fā)性醚提取物平均出膏率，如圖4。

圖4 10個產(chǎn)地當(dāng)歸的揮發(fā)性醚提物平均出膏率

3 討論

楊瑜[7]等人以小鼠扭體反應(yīng)為試驗?zāi)Ｐ?，發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸根飲片制得的總浸膏及其4個洗脫部位都能使小鼠趨于平靜，即疼痛反應(yīng)減弱，效果最明顯的是水洗脫部位。楊晶[8]等人采用超臨界提取，同時聯(lián)用氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)分析當(dāng)歸揮發(fā)油中的有效成分并測定其含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)從當(dāng)歸揮發(fā)油中提取的多種成分中，有30種化合物的量超過0.1%，而其中Z-藁苯內(nèi)酯和E-藁苯內(nèi)酯含量更為突出，并由此推斷：當(dāng)歸揮發(fā)油的“核心”是藁苯內(nèi)酯。周圍[9]等人采用多種技術(shù)分離分析甘肅岷縣的當(dāng)歸揮發(fā)油成分，其結(jié)果與楊晶等人研究結(jié)果相同。本試驗研究了10個產(chǎn)地當(dāng)歸的水提物、醇提物、醚提物及總揮發(fā)油含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸的水提物出膏率普遍高于醇提物的出膏率，而醚提物出膏率與揮發(fā)油提取率相似，且醚提物和揮發(fā)油提取率遠(yuǎn)低于水提物和醇提物出膏率。因此應(yīng)優(yōu)先選擇水提。

當(dāng)歸的整體質(zhì)量受多種因素的共同影響。趙銳明[10]等人全面查驗了甘肅岷縣的野生當(dāng)歸資源，首次在甘肅岷縣的三處闊葉林樣地及其附近發(fā)現(xiàn)野生當(dāng)歸居群。野生當(dāng)歸與人工栽培的當(dāng)歸不盡相同，例如株高、根色、莖色等，除此之外，它們的有效成分含量和療效也有差異。本課題所研究的10個當(dāng)歸樣品，來自不同的產(chǎn)地，其海拔不同，土壤類型與栽培方式也不盡相同。這些因素都對當(dāng)歸的生長和內(nèi)在質(zhì)量有一定的影響。

本實驗結(jié)果表明，不同產(chǎn)地當(dāng)歸的水提物含量、醇提物含量、醚提物含量以及總揮發(fā)油含量均有所差異。這影響著當(dāng)歸藥材的藥理作用和整體療效。本實驗所研究的10個產(chǎn)地中，天祝、涼州和維西的當(dāng)歸質(zhì)量屬上乘，可以作為臨床用藥的參考。