肌動蛋白纖維相關蛋白1-反義RNA 1: 一種新的致癌長鏈非編碼RNA

石 雪, 高宏宇, 楊 威

(中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院 血液科, 遼寧 沈陽, 110020)

長鏈非編碼 RNA(lncRNA)是一類長度大于200個核苷酸，不具有編碼蛋白質功能的RNA, 其表達異常與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關[1]。肌動蛋白纖維相關蛋白1-反義RNA 1(AFAP1-AS1)最初在食管腺癌中被WU W等[2]發(fā)現。AFAP1-AS1在多種惡性腫瘤組織中表達上調，并在腫瘤進展中發(fā)揮重要作用?，F將AFAP1-AS1作為綜述對象，深入探討其在惡性腫瘤中的臨床意義、生物學功能和作用機制。

1 AFAP1-AS1概述

AFAP1-AS1屬于反義lncRNA, 長度6 810 bp, 位于4號染色體4p16.1區(qū)域，由AFAP1基因的反義鏈轉錄。AFAP1-AS1基因的第2外顯子與AFAP1基因的第14～16外顯子區(qū)域重疊、互補。有研究表明AFAP1-AS1在多種腫瘤組織和細胞系中表達上調，如食管癌[2-4]、胰腺癌[5-6]、鼻咽癌[7-9]、肝細胞癌[10-11]和肺癌[12-15]等。此外, AFAP1-AS1過表達與腫瘤大小、轉移、TNM分期和不良預后等臨床病理特征相關[5, 7, 10]。沉默AFAP1-AS1可調控相關基因和信號通路，抑制腫瘤細胞增殖、侵襲和轉移，誘導細胞周期阻滯和凋亡[10, 16-17]。

2 AFAP1-AS1與惡性腫瘤

2.1 食管癌

食管癌是全球最常見的癌癥類型之一，也是全球第六大與腫瘤相關的死亡原因[18]。食管癌有2種主要的組織學亞型，包括食管腺癌(OAC)和食管鱗狀細胞癌(OSCC), 且食管癌的長期生存率非常低。食管癌發(fā)病率逐年上升，預后較差，迫切需要尋找新的腫瘤標志物和治療靶點，以對食管癌患者進行早期診斷和精準治療。

WU W等[2]應用HELP-seq技術對巴雷特食管和OAC組織的全基因組甲基化譜進行檢測，發(fā)現AFAP1-AS1在這兩種疾病組織中低甲基化且呈過表達。沉默AFAP1-AS1可抑制食管腺癌細胞增殖、克隆形成、遷移和侵襲，誘導細胞凋亡并使細胞周期阻滯于G2/M期，但對AFAP1的表達無影響[2]。AFAP1-AS1在OAC中發(fā)揮促癌作用，且其過表達與低甲基化相關。

ZHOU XL等[3]研究發(fā)現OSCC組織中AFAP1-AS1表達上調，且AFAP1-AS1過表達與淋巴轉移、TNM分期以及針對性放療、化療反應相關。此外, AFAP1-AS1過表達的食管鱗狀細胞癌患者的無進展生存期(PFS)和總生存期(OS)較均短，多因素分析表明AFAP1-AS1過表達是該病預后不良的獨立預測因子。LUO HL等[4]通過細胞實驗發(fā)現沉默AFAP1-AS1可抑制OSCC細胞增殖、克隆形成和誘導細胞凋亡。AFAP1-AS1可能成為食管癌新的預后標志物和潛在的治療靶點。

2.2 胰腺癌

胰腺導管腺癌(PDAC)是胰腺癌(PC)的主要病理類型，是全球第四大最常見的癌癥致死原因[19]。PDAC是一種早期轉移的致命性疾病，PDAC患者的5年生存率只有5%～7%[20]。因此，確定用于PDAC患者早期診斷的生物標志物至關重要。

YE Y等[5]通過芯片技術和實時熒光定量PCR發(fā)現AFAP1-AS1在胰腺導管細胞癌組織中表達上調，且其過表達與淋巴轉移、周圍神經侵襲和較短的PFS和OS相關。細胞實驗發(fā)現沉默AFAP1-AS1可抑制胰腺導管癌細胞增殖，使細胞周期阻滯于G2/M期，并通過調控上皮標志物(E-cadherin)、間充質標志物(Vimentin 和 N-cadherin)、Slug和Snail1等上皮間質轉化(EMT)相關基因的表達，抑制腫瘤細胞遷移和侵襲。裸鼠實驗表明沉默AFAP1-AS1會導致胰腺導管癌細胞成瘤能力減弱。

ZHOU J等[6]發(fā)現葫蘆素B(CuB)可通過下調AFAP1-AS1的表達來抑制PC細胞增殖，并使細胞周期停滯于G2/M期。生物信息學分析和雙熒光素酶報告基因檢測發(fā)現表皮生長因子受體(EGFR)和AFAP1-AS1與miR-146b-5p直接競爭結合，假設AFAP1-AS1可作為競爭性內源RNA(ceRNA)，有效作為miR-146b-5p的分子海綿，激活EGFR的表達。CuB誘導miR-146b-5p高表達，抑制AFAP1-AS1表達。體內實驗證實CuB通過破壞AFAP1-AS1/miR-146b-5p/EGFR軸來抑制PC細胞的增殖。AFAP1-AS1可調控PC的進展，并有潛力作為PC早期檢測和個體化治療的生物標志物。

2.3 鼻咽癌

鼻咽癌(NPC)是東南亞特有的一種疾病，與EB病毒感染有關[21]。75%～90%的NPC患者因早期癥狀無特異性和體檢不便等原因，被診斷時已為晚期。NPC主要采用放療，但復發(fā)率、死亡率較高[22]。因此，為早期確診高危人群和評估NPC治療效果，尋找NPC的治療靶點和預后生物標志物至關重要。

BO H等[7]通過芯片分析發(fā)現NPC組織中AFAP1-AS1表達上調，且其過表達與淋巴結轉移和TNM分期相關，隨后對石蠟包埋的NPC組織樣本進行原位雜交驗證，發(fā)現AFAP1-AS1過表達與腫瘤遠處轉移以及較短的PFS和OS相關，而與腫瘤分期無關。細胞實驗表明沉默AFAP1-AS1可下調AFAP1蛋白表達，調控應力纖維的完整性以及小GTP酶信號Rho/Rac通路中多種蛋白的表達，促進NPC細胞遷移和侵襲，但對細胞增殖、凋亡無影響。蛋白質免疫印跡結果顯示下調AFAP1-AS1后，RhoA、Rac2、Rab10、Rab11a、Rhogdi和Pfn1表達上調，而RhoC、Rab11b和Lasp1表達下調。此外，裸鼠實驗也證實沉默AFAP1-AS1會使NPC細胞肺轉移的能力受到抑制。

TANG Y等[8]對96例石蠟包埋的NPC組織中AFAP1-AS1和PD-1進行檢測，結果發(fā)現NPC組織的浸潤淋巴細胞中AFAP1-AS1和PD-1呈現共表達。浸潤淋巴細胞中AFAP1-AS1或PD1過表達的患者更易出現遠處轉移，并且AFAP1-AS1和PD1雙過表達的NPC患者預后不良。此外，HE B等[9]通過受試者工作曲線分析發(fā)現血清中3種循環(huán)lncRNA MALAT1、AFAP1-AS1和AL359062有助于診斷早期NPC, 且三者過表達與TNM分期和EB病毒感染密切相關。這些結果表明, AFAP1-AS1可能是NPC的促癌基因和潛在的治療靶點。

2.4 肺癌

肺癌是全球最常見的癌癥相關死亡原因[19]。目前非小細胞肺癌(NSCLC)的化療和分子靶向治療取得了一定進展，但由于治療方案有限、腫瘤轉移和復發(fā)，NSCLC的5年生存率低于15%[23]。因此，為肺癌的早期診斷和轉移識別找到合適的生物標志物非常重要。

YU H[12]通過芯片技術鑒定出NSCLC組織中有551條lncRNA表達上調，其中AFAP1-AS1上調最顯著。DENG J等[15]研究表明AFAP1-AS1過表達與NSCLC患者的臨床分期、吸煙史、浸潤程度、淋巴結轉移和遠處轉移等臨床特征相關。通過Kaplan-Meier分析AFAP1-AS1不同表達水平的NSCLC患者與OS的關系，發(fā)現AFAP1-AS1過表達的患者生存期較短, Cox回歸分析表明AFAP1-AS1是NSCLC的獨立預后因素。

ZENG Z等[13]也證實AFAP1-AS1在肺癌組織中上調最顯著，且與不良預后有關。細胞實驗表明沉默AFAP1-AS1可促進AFAP1蛋白表達，調控小GTP酶家族信號Rho/Rac通路和肌動蛋白角蛋白通路抑制肺癌細胞遷移和侵襲。AFAP1-AS1僅影響AFAP1蛋白水平的表達，對其mRNA水平的表達無影響。此外, ZHUANG Y等[14]報道AFAP1-AS1在肺腺癌組織中過表達，且其過表達與較短的DFS相關。細胞實驗表明沉默AFAP1-AS1后可抑制肺腺癌細胞增殖和侵襲，誘導細胞凋亡。

YIN D等[24]發(fā)現AFAP1-AS1在NSCLC組織中表達上調，且與腫瘤大小和TNM分期有關。Kaplan-Meier分析和log-rank 檢驗表明在NSCLC患者中AFAP1-AS1過表達預示著預后不良，單變量和多變量分析顯示AFAP1-AS1的表達水平可以作為NSCLC患者OS的獨立預測因子。體外實驗證實敲減AFAP1-AS1可抑制細胞增殖，阻滯細胞周期于G0/G1期。裸鼠成瘤實驗也證實敲減AFAP1-AS1可抑制腫瘤形成。質核分離提示AFAP1-AS1大部分存在于NSCLC細胞的細胞核中。AFAP1-AS1通過與zeste基因增強子同源物2(EZH2)結合，表觀沉默p21基因，從而促進NSCLC細胞增殖。

HE J等[25]通過高通量RNA測序發(fā)現在NSCLC組織中AFAP1-AS1表達明顯上調，實時熒光定量PCR也證實了AFAP1-AS1在NSCLC組織和細胞系中表達顯著升高。質核分離和熒光原位雜交(FISH)提示AFAP1-AS1大部分存在于NSCLC細胞的細胞質中。體外實驗發(fā)現，過表達AFAP1-AS1明顯提高細胞遷移和侵襲能力，敲減AFAP1-AS1明顯抑制細胞遷移和侵襲能力。此外, Kaplan-Meier曲線分析顯示AFAP1高表達與NSCLC患者OS較差有關; Cox回歸分析表明AFAP1的高表達與宮頸鱗狀細胞癌、宮頸腺癌的DFS較差有關。通過RNA測序篩選差異表達基因及生信分析發(fā)現AFAP1-AS1通過上調PPP1R13L、VASP和SPTAN1的表達促進細胞侵襲，并通過下調STAT1、NF1、FBN2的表達促進腫瘤轉移。AFAP1-AS1過表達促進AFAP1在mRNA和蛋白水平的升高來促進細胞轉移, AFAP1-AS1啟動子區(qū)CpG低甲基化導致NSCLC中AFAP1-AS1表達增加。

TANG XD等[26]發(fā)現在NSCLC患者外周血中AFAP1-AS1表達升高，白細胞介素-12表達下降，白細胞介素-10和γ干擾素表達升高。AFAP1-AS1異常表達與NSCLC的病理分級，TNM分期和轉移潛能有關。過表達AFAP1-AS1促進NSCLC細胞增殖，侵襲和轉移，并抑制細胞凋亡。體外實驗證實AFAP1-AS1過表達能夠激活干擾素調節(jié)因子7(IRF7)、維甲酸誘導基因蛋白I(RIG-I)樣受體信號通路和Bcl-2, 從而促進NSCLC侵襲和轉移。

LI W等[27]發(fā)現NSCLC患者血清中AFAP1-AS1的表達水平顯著升高。血清AFAP1-AS1可以用作NSCLC患者的分子標志物，其ROC曲線下面積為0.759，AFAP1-AS1與CYFRA21-1結合的ROC曲線下面積為0.860。血清中AFAP1-AS1過表達與NSCLC遠處轉移，淋巴結轉移，臨床預后差，腫瘤體積大相關。血清AFAP1-AS1可以作為NSCLC診斷的理想的聯合分子標志物。這些結果表明AFAP1-AS1可能作為肺癌的致癌lncRNA和潛在的預后生物標志物和治療靶點。

2.5 卵巢癌

卵巢癌(OC)是女性生殖系統中第三大最普遍癌癥[28]。OC的死亡率很高，大多數患者被診斷時已為晚期[29]。YANG SL等[30]報道AFAP1-AS1在OC組織和細胞系中過表達，且其過表達與侵襲性臨床病理參數如耐藥反應和FIGO分期相關。沉默AFAP1-AS1可抑制OC細胞增殖和誘導凋亡。AFAP1-AS1可作為OC的一個新的促癌lncRNA和治療靶點。

2.6 結直腸癌

結直腸癌(CRC)是全球第三大最常見的癌癥，也是第二大癌癥致死原因[19]。雖然可以采用手術、放療、化療和靶向治療相結合的手段來改善CRC患者的預后，但CRC的復發(fā)和轉移仍不可避免[31-32]。通過篩查早期可治愈的CRC, 可以降低其發(fā)生率和死亡率，因此需要尋找一種新的CRC診斷和預后指標。

研究[17]表明AFAP1-AS1在CRC組織和細胞系中呈過表達，提示不良預后。WANG F等[17]發(fā)現AFAP1-AS1過表達與CRC腫瘤大小、TNM分期、遠處轉移、較短的OS和DFS密切相關，單因素和多因素Cox回歸分析表明AFAP1-AS1是該病的獨立預后因子。細胞實驗表明沉默AFAP1-AS1可抑制CRC細胞增殖、克隆、遷移和侵襲，使細胞周期阻滯于G0/G1期[17, 33]。HAN X等[33]認為AFAP1-AS1抑制E-cadherin表達和調控N-cadherin、vimentin、fibronectin和MMP-9等EMT相關蛋白的表達，使CRC細胞遷移和侵襲。此外，沉默AFAP1-AS1僅調控AFAP1蛋白水平的表達，而對其mRNA水平無影響。隨后，裸鼠實驗也證實沉默AFAP1-AS1可抑制CRC細胞成瘤能力和肝轉移。

BO H等[34]從GEO數據庫和TCGA數據庫中分析lncRNA的RNA-seq數據發(fā)現AFAP1-AS1在結腸癌(CC)組織中明顯高表達，且與CC患者較差的DFS和OS相關。體外實驗表明，敲減AFAP1-AS1顯著抑制了CC細胞的侵襲和遷移能力。敲減AFAP1-AS1, E-cadherin和ZO-1的表達升高, Vimentin、MMP9、ZEB1和β-catenin的表達抑制，說明AFAP1-AS1 參與CC的EMT過程。此外，敲減AFAP1-AS1也影響肌動蛋白-細胞角蛋白信號通路。AFAP1-AS1有潛力成為CRC一種新的診斷標志物和治療靶點。

2.7 膽道癌

膽道癌(BTC)包括膽囊癌(GBC)和膽管癌(CCA)。GBC占BTC的80%～95%, 其余為CCA, CCA分為肝內膽管癌和肝外膽管癌[35]。CCA是膽道上皮細胞中最具侵襲性和致命性的腫瘤之一。GBC是一種高度侵襲性惡性腫瘤，其5年生存率低于5%。由于無癥狀和缺乏敏感的生物標志物，早期診斷BTC十分困難。因此，迫切需要尋找早期診斷標志物和新的治療靶點。

MA F等[36]研究發(fā)現AFAP1-AS1在GBC組織和細胞系中表達顯著上調，與腫瘤大小和不良預后相關。細胞實驗表明沉默AFAP1-AS1可抑制GBC細胞增殖和侵襲，并下調轉錄因子Twist1和vimentin的表達以及上調E-cadherin的表達阻礙EMT進程, AFAP1-AS1可能通過促進EMT進程促進GBC細胞侵襲。

SHI X等[37]研究發(fā)現AFAP1-AS1在CCA組織樣本和細胞系中表達上調，沉默AFAP1-AS1會抑制CCA細胞增殖、克隆，誘導G0/G1期阻滯和抑制S-G2/M期轉化。此外，沉默AFAP1-AS1可促進AFAP1的表達，使應力纖維完整性缺失，導致CCA細胞的遷移和侵襲能力減弱。LU X等[38]研究發(fā)現AFAP1-AS1過表達與CCA腫瘤大小、血管侵襲、TNM分期和較短的OS相關。細胞實驗表明AFAP1-AS1通過上調C-Myc和CYCLIN D1蛋白表達促進CCA細胞增殖，通過上調MMP-2和MMP-9蛋白表達促進腫瘤細胞遷移。此外，裸鼠實驗也證實沉默AFAP1-AS1可抑制CCA細胞的成瘤能力。

這些結果表明AFAP1-AS1在BTC中發(fā)揮致癌作用，可能成為BTC一種有效的診斷和治療靶點。

2.8 胃癌

胃癌(GC)是世界上第四大最常見的癌癥，也是第二大癌癥致死原因[39]。晚期GC患者預后很差, 5年生存率極低[40]。因此，迫切需要尋找一種新的GC診斷和預后生物標志物。

GUO JQ等[16]報道AFAP1-AS1在GC組織和細胞系中表達上調，細胞實驗表明AFAP1-AS1可調控PTEN/p-AKT通路促進GC細胞增殖，沉默AFAP1-AS1后p-AKT蛋白表達降低、PTEN蛋白表達升高。此外，沉默AFAP1-AS1可抑制Bcl-2表達和調控PARP、caspase-3、caspase-9和Bax的表達促進GC細胞凋亡。

FENG Y等[41]發(fā)現AFAP1-AS1在GC組織和細胞中表達顯著上升，且AFAP1-AS1的高表達與淋巴結轉移、TNM分期和更短的OS成正相關。多變量回歸分析顯示AFAP1-AS1表達水平、淋巴結轉移和TNM分期是GC患者OS的獨立預后因子。敲減AFAP1-AS1顯著抑制細胞增殖，EMT標志物E-cadherin上調和vimentin下調，進而抑制細胞侵襲能力。這些結論表明AFAP1-AS1可作為GC的一個潛在治療靶點。

YE F等[42]發(fā)現AFAP1-AS1 在GC組織中表達升高，并且與腫瘤大小，臨床分期和腫瘤分化明顯相關。多變量回歸分析提示AFAP1-AS1表達水平可作為GC患者的獨立預后因子。體外實驗表明敲減AFAP1-AS1可顯著抑制GC細胞增殖、轉移和侵襲能力。裸鼠成瘤實驗表明敲減AFAP1-AS1可抑制腫瘤在體內生長。AFAP1-AS1可作為GC的預后因子和治療靶點。

ZHAO H等[43]通過檢測80對原發(fā)性GC組織和鄰近正常組織，發(fā)現AFAP1-AS1在GC組織中表達顯著上升，且與TNM分期(Ⅲ期或Ⅳ期)和更短的生存時間相關。ROC曲線分析表明AFAP1-AS1在截斷值為0.504時，能區(qū)分GC組織和鄰近正常組織，曲線下面積(AUC)為 0.880, 敏感性為81.25%, 特異性83.75%。體外實驗證實，敲減AFAP1-AS1可顯著抑制GC細胞增殖和侵襲能力，上調E-cadherin蛋白表達水平、下調N-cadherin和vimentin 蛋白表達水平，抑制GC細胞轉移[43]。AFAP1-AS1可作為GC診斷和預后的生物標志物。

2.9 肝細胞癌

肝細胞癌(HCC)是全球第六大最常見的癌癥，也是第三大癌癥致死原因[44]。手術切除和肝移植是治療HCC的主要方法，但由于HCC患者在診斷時已處于晚期，其5年生存率較低[45]。因此，尋找與腫瘤發(fā)生相關的基因對于HCC患者的診斷、靶向治療、疾病監(jiān)測和臨床結局具有重要意義。

ZHANG JY等[10]研究發(fā)現HCC中AFAP1-AS1表達上調，且與病理分期、淋巴-血管侵襲和較短的OS密切相關，多因素分析提示AFAP1-AS1可作為HCC的獨立預后因子。LU X等[11]研究也證實AFAP1-AS1在HCC組織中高表達，且與腫瘤大小、TNM分期、血管侵襲和較短的OS和DFS相關。細胞實驗表明沉默AFAP1-AS1可通過抑制RhoA/Rac2信號通路和調控Bcl-2、Bax、MMP-9、Ki67的表達，抑制HCC細胞增殖和侵襲，誘導細胞凋亡，使細胞周期阻滯于S期。此外，裸鼠實驗也證實沉默AFAP1-AS1可顯著抑制HCC細胞的成瘤能力[10-11]。AFAP1-AS1有潛力成為HCC新的治療靶點。

2.10 乳腺癌

ZHANG K等[46]發(fā)現AFAP1-AS1在三陰性乳腺癌(TNBC)組織細胞中高表達，并且與TNBC的不良預后相關。體外實驗表明上調AFAP1-AS1促進TNBC細胞增殖、侵襲和遷移，抑制細胞凋亡; 體內實驗表明, AFAP1-AS1過表達促進腫瘤生長。上調AFAP1-AS1通過激活Wnt/β-catenin通路，使TNBC中C-myc和EMT相關基因高表達，促進腫瘤發(fā)生和細胞侵襲。AFAP1-AS1可作為TNBC的獨立預后標志物和有效治療靶點。

DIANATPOUR A等[47]發(fā)現AFAP1-AS1在乳腺癌細胞組織中表達顯著上升，其反義蛋白編碼基因AFAP1在腫瘤組織和鄰近的非癌組織(ANCTs)的表達水平無明顯區(qū)別。在腫瘤組織或ANCTs中, AFAP1-AS1和AFAP1的表達水平無顯著相關性，并且它們的表達水平與乳腺癌患者的臨床特征無顯著相關性，但AFAP1-AS1、AFAP1在Ki-67陰性腫瘤組織中表達顯著下調。

MA D等[48]發(fā)現 AFAP1-AS1在乳腺癌組織細胞中上調并且與乳腺癌的惡性程度相關, AFAP1-AS1高表達預示著不良預后。體外實驗發(fā)現，敲減AFAP1-AS1能抑制乳腺癌細胞增殖、遷移，并促進細胞凋亡，但不影響AFAP1的表達和肌動蛋白絲的完整性。AFAP1-AS1可能參與乳腺癌的發(fā)病過程，并有潛力成為一種生物標志物或治療靶點。

2.11 舌鱗狀細胞癌

WANG ZY等[49]研究發(fā)現AFAP1-AS1在舌鱗狀細胞癌(TSCC)組織中高表達，且與腫瘤分化、T分級、臨床分期、浸潤深度、復發(fā)和較短的OS密切相關。敲減AFAP1-AS1可顯著抑制TSCC細胞的增殖并使細胞周期停滯于G0/G1期，部分抑制TSCC細胞的遷移和侵襲。體外實驗證實，在TSCC細胞中敲減AFAP1-AS1, 可降低Wnt/β-catenin通路的活性并抑制EMT相關基因(SLUG、SNAIL1、VIM、CADN、ZEB1、ZEB2、SMAD2和TWIST1)的表達。裸鼠成瘤實驗發(fā)現，敲減AFAP1-AS1可抑制腫瘤生長和EMT相關基因(SLUG、SNIAL1、VIM、ZEB1、NANOG、SMAD2、NESTIN 和 SOX2)的表達。AFAP1-AS1有潛力成為TSCC的新的治療靶點。

2.12 視網膜母細胞瘤

HAO F等[50]發(fā)現AFAP1-AS1在視網膜母細胞瘤組織和細胞中表達升高，并與腫瘤大小、脈絡膜浸潤和視神經浸潤有關。此外, AFAP1-AS1高表達是視網膜母細胞瘤患者的一個獨立的不良預后因素。體外實驗表明，下調AFAP1-AS1可抑制視網膜母細胞瘤細胞的增殖、遷移和侵襲，阻斷細胞周期于G0/G1期。AFAP1-AS1在視網膜母細胞瘤中與致癌密切相關。

2.13 甲狀腺癌

DAI W等[51]采用實時熒光定量PCR檢測發(fā)現AFAP1-AS1在甲狀腺癌組織中表達增加，并與患者較短的OS相關。MTT比色法檢測表明，下調AFAP1-AS1可抑制甲狀腺癌細胞生長。流式細胞儀檢測結果證實，敲減AFAP1-AS1可誘導甲狀腺癌細胞凋亡。Transwell細胞體外侵襲實驗顯示，下調AFAP1-AS1可增加E-cadherin以及降低Vimentin、N-cadherin的表達來抑制甲狀腺癌細胞遷移。AFAP1-AS1可能成為甲狀腺癌的治療靶點。

2.14 膠質瘤

WANG Y等[52]發(fā)現AFAP1-AS1在膠質瘤組織和細胞中表達上調，其表達水平與膠質瘤分級及KPS評分有關，并且AFAP1-AS1高表達的膠質瘤患者預后較差。敲減AFAP1-AS1后，膠質瘤細胞的侵襲能力明顯下降，侵襲相關蛋白MMP2和MMP9的表達也明顯下降。AFAP1-AS1可以作為膠質瘤惡性程度和預后的獨立預測因子，也可作為潛在的治療靶點。

2.15 骨肉瘤

LI R等[53]發(fā)現AFAP1-AS1在骨肉瘤組織和細胞中表達明顯上調，其表達水平與骨肉瘤患者的預后呈負相關。體外實驗表明，敲減AFAP1-AS1可顯著抑制骨肉瘤細胞的增殖和侵襲; 體內移植瘤實驗顯示，敲減AFAP1-AS1可抑制腫瘤生長。生信分析和熒光素酶報告基因檢測發(fā)現AFAP1-AS1作為分子海綿抑制miR-4695-5p的表達水平，并且miR-4695-5p靶向Wnt/β-catenin信號通路的核心效應因子轉錄因子4(TCF4)。過表達AFAP1-AS1可抑制miR-4695-5p的表達，而過表達miR-4695-5p可降低TCF4的表達并且抑制Wnt/β-catenin信號通路的活性。TCF4表達的恢復逆轉了AFAP1-AS1敲低或miR-4695-5p過表達對骨肉瘤細胞的影響。AFAP1-AS1/miR-4695-5p/TCF4-β-catenin軸在骨肉瘤進展過程中發(fā)揮重要作用[53]。

3 結 論

長鏈非編碼RNA AFAP1-AS1作為一個新發(fā)現的促癌lncRNA, 在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。AFAP1-AS1在多種腫瘤中表達上調，包括食管癌、胰腺癌、鼻咽癌、肺癌、卵巢癌、結直腸癌、膽道癌、胃癌、肝細胞癌、乳腺癌、舌鱗狀細胞癌、視網膜母細胞瘤、膠質瘤和骨肉瘤等。研究表明AFAP1-AS1與惡性腫瘤的臨床病理特征密切相關，包括腫瘤大小、淋巴轉移、遠處轉移、TNM分期以及較短的生存期等。細胞功能實驗表明AFAP1-AS1可促進腫瘤細胞增殖、遷移和侵襲，抑制細胞凋亡。一些與AFAP1-AS1相關的基因和信號通路已被闡述，如EMT相關基因、Rho/Rac通路、PTEN/p-AKT通路和Wnt/β-catenin通路等，但其具體調控機制尚未闡明。目前對AFAP1-AS1的研究處在早期階段，還需深入，AFAP1-AS1與miRNA、mRNA或蛋白的直接相互作用應是今后的研究重點。