中醫(yī)藥對(duì)缺血再灌注損傷心肌細(xì)胞凋亡影響的研究進(jìn)展

蘇歡，張志明通訊作者，雍文興，李高勤，宋忠陽(yáng)

（1. 甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅 蘭州 730000；2. 甘肅中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，甘肅 蘭州 730000）

0 引言

心梗的治療已進(jìn)入再灌注時(shí)代。心肌缺血再灌注損傷概念由Jennings 等[1]于1960 用犬結(jié)扎冠狀動(dòng)脈建立缺血再灌注模型提出，并首次描述了缺血再灌注損傷。心肌缺血再灌注損傷建模目前存在以結(jié)扎冠狀動(dòng)脈等血管的體內(nèi)和建立心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型的體外模型等方式。本文從不同建模途徑出發(fā)，對(duì)近年來(lái)中醫(yī)藥在缺血再灌注損傷致心肌細(xì)胞凋亡方面的研究，做一簡(jiǎn)要的總結(jié)。

1 大鼠動(dòng)脈結(jié)扎模型

1.1 中藥提取物。蔡智慧[2]在心肌缺血再灌注大鼠模型中發(fā)現(xiàn)梔子苷能減少氧自由基生成和增高其清除力，增加Bcl-2、降低Bax 蛋白水平并上調(diào)Bcl-2/Bax 比率，降低大鼠心肌細(xì)胞p53 蛋白表達(dá)，從而抑制心肌細(xì)胞凋亡。楊禹晗[3]發(fā)現(xiàn)玉竹提取物能降低心肌組織中FFA，LAC 含量，升高ATP/AMP 值，并減輕線粒體的損傷，不同劑量均能降低Caspase3、9、12 含量并呈現(xiàn)劑量依賴型，由此抗心肌細(xì)胞凋亡。胡彥武[4]研究淫羊藿苷對(duì)糖尿病心肌缺血再灌注大鼠模型的影響，發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷可提高NO 水平，減少M(fèi)DA 生成，降 低CK-MB 和LDH 活 性、升 高SOD 和GSH-Px 活性來(lái)抗氧化應(yīng)激，降低Caspase3及Bax 蛋白的表達(dá)，增高Bcl2 蛋白的表達(dá)來(lái)抗心肌細(xì)胞凋亡。楊欣[5]發(fā)現(xiàn)蛇床子素能提高再灌注損傷大鼠心肌細(xì)胞抗凋亡蛋白Bcl-2 的表達(dá)，降低促凋亡蛋白cle-vage-Caspase3 和Bax 的表達(dá)；減少細(xì)胞色素C 和AIF 的表達(dá)降低線粒體內(nèi)膜的通透性，且蛇床子素可減少p53 信號(hào)通路激活中p53 和p21 表達(dá)。故蛇床子通過(guò)抑制Wnt/β-cantenin/p53 信號(hào)通路激活而抑制線粒體介導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡。李劍[6]阻斷升主動(dòng)脈建立心肌缺血再灌注模型，發(fā)現(xiàn)葛根素可抑制線粒體mPTP 開(kāi)放，減少心肌細(xì)胞Caspase3 的表達(dá)及細(xì)胞色素C 的釋放，發(fā)揮其在缺血再灌注損傷后抗心肌細(xì)胞凋亡的作用。孫秀玉[7]發(fā)現(xiàn)葒草苷可降低Parkin 非依賴性信號(hào)相關(guān)通路中Bnip3 的表達(dá)水平，降低促凋亡蛋白Bax 和Bak 表達(dá)、提高抑凋亡蛋白Bcl-2 和Bclxl 表達(dá)，實(shí)現(xiàn)葒草苷抑制再灌注期間Parkin 依賴性信號(hào)通路介導(dǎo)的線粒體自噬過(guò)度激活，改善線粒體質(zhì)量，減少心肌細(xì)胞凋亡。丁丹[8]通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)燈盞花素可減少心肌細(xì)胞凋亡，高劑量效果優(yōu)于低劑量。蛋白測(cè)定示α7nAChR、p65 蛋白上調(diào)而IkB-α 蛋白下調(diào)，其機(jī)制與燈盞花素能夠有效調(diào)節(jié)膽堿能抗炎通路及NF-kB 信號(hào)通路有關(guān)。孫弼[9]將太子參加工為太子參多糖浸膏，得出太子參多糖能夠抑制促凋亡相關(guān)蛋白Bax、Caspase-3 和促進(jìn)抑凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2 的表達(dá)而抗心肌細(xì)胞凋亡。

1.2 中成藥。李俊平[10]發(fā)現(xiàn)丹蔞片(主要成分為黃芪、丹參、葛根、川芎等)能降低心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)，下調(diào)Caspase-3、Bax 蛋白，上調(diào)Bcl-2 蛋白表達(dá)，從而減輕缺血再灌注后心肌細(xì)胞凋亡。張翠香[11]等發(fā)現(xiàn)冠脈通片能提高血清AST、CK、CK-MB、c-TnT 活性，減輕細(xì)胞損傷，改善心肌水腫、變性、壞死等病理形態(tài)，改善炎細(xì)胞浸潤(rùn)、灶性壞死發(fā)揮抗心肌細(xì)胞凋亡的作用。陳亞妮[12]通過(guò)速效救心丸干預(yù)大鼠模型，發(fā)現(xiàn)速效救心丸通過(guò)抑制MPTP 的開(kāi)放，保護(hù)心肌細(xì)胞線粒體膜功能的完整性，減少細(xì)胞色素C 的釋放，從而減輕缺血再灌注損傷后心肌細(xì)胞凋亡。秦琦[13]發(fā)現(xiàn)雙參通脈顆粒能抑制缺血再灌注損傷大鼠的炎性反應(yīng)及氧化應(yīng)激，并上調(diào)P-JAK2 表達(dá)發(fā)揮抗心肌細(xì)胞凋亡的作用。陳龍[14]研究生黃合劑（參麥飲黃芩莖葉總黃酮組成）對(duì)大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響，發(fā)現(xiàn)其能促進(jìn)抑凋亡基因bcl-2mRNA、抑制促凋亡基因baxmRNA 的表達(dá)并提高bcl-2/bax 比值抗心肌細(xì)胞凋亡且有劑量依賴性。

1.3 經(jīng)典方劑。劉春曉[15]在枳實(shí)薤白桂枝湯基礎(chǔ)上加三七、人參構(gòu)成溫陽(yáng)通脈方，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)二者均能夠降低心肌組織的細(xì)胞凋亡率，細(xì)胞色素C 與Caspase-3 和Caspase-9的蛋白表達(dá)，但是對(duì)Caspase-8 的影響不明顯。其抗凋亡作用可能是抑制線粒體途徑介導(dǎo)的凋亡途徑產(chǎn)生的。唐丹麗[16]發(fā)現(xiàn)栝樓薤白半夏湯組能降低血清CK、LDH 含量，下調(diào)心肌Beclin1、LC3II、Bax 表達(dá)及LC3II/LC3I 水平且效果優(yōu)于對(duì)照組，其抗心肌細(xì)胞凋亡的機(jī)制與抑制缺血再灌注后過(guò)度細(xì)胞自噬，減輕細(xì)胞凋亡反應(yīng)有關(guān)。

2 細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型

2.1 中藥提取物。建立H9C2 細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型，發(fā)現(xiàn)燈盞花素能有效減輕炎性反應(yīng)，抗氧化應(yīng)激及增強(qiáng)細(xì)胞增殖，促進(jìn)抑凋亡蛋白Bcl2，VEGF，MMP2 和MMP9 的表達(dá)，抑制促凋亡分子Bax 和caspase-3，繼而激活JAK2/STAT3 信號(hào)通路發(fā)揮抗氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡的作用。徐珊[17]發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛能降低缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞的凋亡率、細(xì)胞ROS 水平、MDA 含量及細(xì)胞培養(yǎng)上清液中LDH 含量，并降低TLR4/NF-κB 信號(hào)通路中NF-κBp65 和TLR4 的表達(dá)抑制細(xì)胞損傷和凋亡。

2.2 中成藥。銀盞心脈滴丸李潔[18]觀察銀盞心脈滴丸（以燈盞細(xì)辛、銀杏葉、丹參、冰片等制成）能降低缺氧/復(fù)氧損傷心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)，刺激心肌細(xì)胞增加基礎(chǔ)呼吸、以及ATP 的生成；提升線粒體的呼吸儲(chǔ)備能力，分子機(jī)制有待研究。

3 結(jié)論

基于不同的心肌缺血再灌注損傷模型，研究表明中醫(yī)藥在此方面確有療效，無(wú)論是中藥的提取物、中成制劑、經(jīng)典方劑或是臨床驗(yàn)方，都能有效抑制缺血再灌注損傷導(dǎo)致的心肌細(xì)胞凋亡，其作用靶點(diǎn)各有不同。然中醫(yī)藥研究仍有不足，其具體表現(xiàn)在檢測(cè)指標(biāo)簡(jiǎn)單，缺乏有說(shuō)服力的實(shí)驗(yàn)研究，機(jī)制研究仍需進(jìn)一步的深入，且中醫(yī)藥的研究應(yīng)當(dāng)結(jié)合中醫(yī)理論，發(fā)揮中醫(yī)特色，將辨證論治與用藥結(jié)合起來(lái)，進(jìn)一步發(fā)掘中醫(yī)藥在心肌缺血再灌注損傷中的治療價(jià)值，期待中醫(yī)藥能夠在抑制心肌細(xì)胞凋亡方面發(fā)揮更大的作用。