• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    心臟再生治療的最新進展

    2020-12-27 06:56:24韓月朱莉宋桂仙
    實用心腦肺血管病雜志 2020年3期
    關(guān)鍵詞:多肽心肌細胞干細胞

    韓月 ,朱莉 ,宋桂仙

    近年來,隨著社會快速發(fā)展和人們物質(zhì)生活水平不斷提升,心肌梗死等心血管疾病已成為導致人類因病死亡的重要原因。多數(shù)急性心肌梗死患者最終會進展為進行性心力衰竭,而由于成年人心肌細胞幾乎沒有再生能力、受損的心肌會被纖維化瘢痕組織所取代,因此急性心肌梗死等心血管疾病的治療只能集中于保護心臟并避免進展為心力衰竭,如通過溶栓、心臟介入和旁路移植手術(shù)等血運重建術(shù)改善心肌血液供應(yīng)、挽救受損的缺血心肌,或通過抑制心肌重塑藥物血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(angiotensin converting enzyme inhibitors,ACEI)、血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(angiotensin Ⅱ receptor antagonists,ARB)、重組人腦利鈉肽(recombinant human brain natriuretic peptide,rh-BNP)、左孟西坦等降低心力衰竭致死率等。目前,心臟移植是治療終末期心力衰竭的唯一方法,但心臟供體來源及其免疫排斥反應(yīng)等問題使心臟移植難以廣泛應(yīng)用。為保護衰竭的心臟,近幾十年來眾多科學家專注于促進心臟再生的方法,而心臟再生成為當前心血管病學領(lǐng)域的研究熱點之一,本文主要綜述了心臟再生治療的最新研究進展、局限性和發(fā)展前景。

    1 干細胞

    干細胞移植是目前心臟再生領(lǐng)域最重要的治療方法,雖然近兩年關(guān)于干細胞的研究呈“噴井式”爆發(fā),但也面臨著巨大爭議,近兩年干細胞在心臟再生領(lǐng)域的最新進展及爭議如下。

    1.1 胚胎干細胞(embryonic stem cells,ESC) ESC指從胚泡內(nèi)細胞團獲得的多能干細胞,其除具有向外胚層、內(nèi)胚層及中胚層分化的能力外,還具有無限的自我更新能力[1]。ESC很容易擴增并能在體外分化為心肌細胞,可為心臟移植提供數(shù)量充足的心肌細胞。2015年,人類ESC首次在心臟病患者中使用,即在冠狀動脈旁路移植(coronary artery bypass graft,CABG)術(shù)或左房室瓣手術(shù)時向晚期缺血性心肌病患者遞送人胚胎干細胞(human embryonic stem cells,hESC),經(jīng)超聲心動圖檢查證實患者心臟收縮功能明顯改善,且隨訪3個月患者左心室射血分數(shù)(left ventricular ejection fractions,LVEF)較基線提高10%,即從26%提高到36%[2]。在一項大型動物模型中,心肌梗死獼猴移植了7.5億個冷凍保存的人胚胎干細胞來源的心肌細胞(human embryonic stem cellderived cardiomyocytes,hESC-CMS),結(jié)果發(fā)現(xiàn)移植hESCCMS 1個月后心肌梗死獼猴總體LVEF明顯提高,移植hESCCMS 3個月后LVEF提高更加明顯且心肌梗死面積明顯減?。?]。近期VADAKKE-MADATHIL等[4]通過動物模型證實,來自胎盤的一種干細胞—Cdx2細胞可在體外分化為自發(fā)搏動的心肌細胞和血管細胞,且與傳統(tǒng)胚胎干細胞相比,Cdx2細胞似乎可避免免疫排斥。

    不同于經(jīng)皮心臟注射、經(jīng)皮冠狀動脈內(nèi)和心室內(nèi)導管等傳統(tǒng)細胞移植方法,目前移植hESC的最新方法是將細胞整合到纖維蛋白薄片后放置于心包內(nèi),這種方法具有提高細胞存活率、減少細胞損傷、降低室性心律失常發(fā)生風險、提高患者存活率及改善患者心臟功能等優(yōu)勢,但hESC移植可能存在醫(yī)學倫理方面的問題,且有致心律失常、患者存活率低等風險,因此hESC移植能否用于心臟再生治療尚需進一步研究。

    1.2 誘導多能干細胞(induced pluripotent stem cells,IPSCs) 小鼠和人成纖維細胞被轉(zhuǎn)錄因子Oct-4、Sox-2、Klf4、c-Myc重新編程到類似ESC的多能狀態(tài)則稱之為IPSCs[5]。IPSCs提供了一種新的基于細胞的心臟修復方法,使自體或異基因移植成為可能,并避免了與ESC相關(guān)的倫理問題。ROJAS等[6]通過將高純度小鼠誘導多能干細胞來源的心肌細胞(induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes,IPSC-CMS)移植到結(jié)扎左前降支的心肌梗死小鼠心臟并觀察28 d發(fā)現(xiàn),移植的IPSC-CMS不僅會在心肌內(nèi)形成成熟的移植物、表達心臟標志物并顯示出肌節(jié)結(jié)構(gòu)、有效地分化為心肌細胞,還可明顯抑制心肌重塑并改善左心室功能。MA等[7]研究發(fā)現(xiàn),電刺激可通過激活Ca2+/PKC/ERK途徑而介導人誘導多能干細胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)分化為心肌細胞,且經(jīng)電刺激預處理的hiPSCs來源的心肌細胞不僅能有效改善心臟功能并減小心肌梗死范圍,還能與宿主心臟功能相融合。近年研究發(fā)現(xiàn),IPSCs分泌的細胞外囊泡(extracellular vesicles,EVS)富含miRNAs和具有促血管生成和細胞保護特性的蛋白質(zhì),可在體外增強小鼠心臟內(nèi)皮細胞血管生成、遷移及抗凋亡特性,且與IPSCs相比,IPSCs分泌的EVS能更好地改善左心室功能、減少細胞凋亡、減少畸胎瘤的形成等[8],而為IPSCs衍生的心肌細胞提供支架如羊膜、水凝膠、細胞片等則已被證實可提高心臟再生治療效果[9-11]。

    雖然IPSCs已被證實為心臟再生治療領(lǐng)域的一項重大突破,但與其他干細胞一樣,IPSCs也存在著分化不成熟、存活率低、致心律失常、增加腫瘤發(fā)生風險等缺陷,相信隨著IPSCs分泌的EVS的發(fā)現(xiàn)、IPSCs純度的提高、電刺激技術(shù)及新型支架的發(fā)明等,IPSCs的缺陷將被一一攻破,用于心臟再生治療的風險將進一步降低。

    1.3 內(nèi)源性心臟干細胞/祖細胞(endogenous cardiac stem cells/progenitor cells,CSCs/PCs) CSCs/PCs包括c-kit+細胞、Sca-1+細胞、心球樣細胞團源性細胞(cardiosphere-derived cells,CDC)、islet-1+細胞及心外膜來源細胞[12]。早在2001年,哈佛大學著名科學家PIERO ANVERSA便稱可以用骨髓來源的c-kit+細胞使心肌再生;2003年,PIERO ANVERSA在《細胞》雜志上發(fā)表文章稱成人心臟中有一組具有在心臟損傷后分化為心肌細胞能力的c-kit+細胞,但從2004年起就不斷有質(zhì)疑的聲音出現(xiàn):有學者發(fā)現(xiàn)骨髓來源的c-kit+細胞并不能分化為心肌細胞,因此其用于心臟再生治療已被否定;2014—2016年,有三個獨立的實驗室通過體內(nèi)基因追蹤技術(shù)確認成年人心臟中c-kit+細胞并不具有分化為心肌細胞的能力,即不是心臟干細胞[13-18]。

    近期,PIERO ANVERSA的心臟干細胞學術(shù)造假新聞將干細胞研究推向了風口浪尖,哈佛大學最終撤回了PIERO ANVERSA關(guān)于心臟干細胞的31篇研究性論文,結(jié)束了心臟干細胞療法這一騙局,而這一心臟干細胞學術(shù)造假的鬧劇除使全球數(shù)百萬終末期心力衰竭患者的希望破滅外,還使全球?qū)τ诟杉毎谛呐K再生治療中的作用心灰意冷并有人開始全盤否認干細胞研究領(lǐng)域的研究成果。在此需要指出的是,心臟干細胞研究與心臟的干細胞研究不同,心臟的干細胞研究領(lǐng)域十分廣闊,PIERO ANVERSA涉及的心臟干細胞研究只是其中之一,而我國關(guān)于干細胞的研究如間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)、ESC、IPSCs等誘導干細胞分化為心肌譜系細胞和干細胞旁分泌作用是無法磨滅的、有效可信的、前景巨大的。

    2 多肽

    多肽指α-氨基酸通過肽鍵連接在一起而形成的化合物,通常由三個或三個以上氨基酸分子脫水縮合而成,因此蛋白質(zhì)有時也被稱為多肽[19]。目前,臨床上常見的多肽包括已被人們所熟知并具有一定診斷及治療價值的促紅細胞生成素、白介素、促甲狀腺激素釋放激素、腦鈉肽、利鈉肽等,而深入探索多肽在心臟再生治療中的作用則有助于為心臟再生治療開辟出一條新的道路。

    2.1 基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)抑制劑 MMPs是一類鋅依賴性內(nèi)肽酶,其主要參與細胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)中各種蛋白質(zhì)的降解,而組織金屬蛋白酶抑制劑(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases,TIMPs)是MMPs的特異性抑制劑,MMPs與TIMPs的失衡會破壞ECM的動態(tài)平衡并導致心肌梗死、心臟損傷等[20]。PURCELL等[20]通過將組織金屬蛋白酶抑制劑3重組蛋白(recombinant tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-3,rTIMP-3)注射入心肌梗死豬模型并觀察28 d發(fā)現(xiàn),心肌梗死豬左心室舒張末期容積、室壁變薄程度及左心房大小明顯減小,心肌梗死后不良重塑進程中斷。FAN等[21]通過將基質(zhì)金屬蛋白酶2特異性抑制劑CTTHWGFTLC注入梗死的心臟發(fā)現(xiàn),4周后心臟組織厚度增加并保留了與正常心臟組織相似的膠原成分,具有有效減少不良心肌重塑和改善心功能的潛力。AWADA等[22]通過組織金屬蛋白酶組織抑制劑3(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-3,TIMP-3)和其他兩種多肽堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,F(xiàn)GF-2)和基質(zhì)細胞衍生因子1α(stromal cell-derived factor-1 alpha,SDF-1α)處理心肌梗死大鼠發(fā)現(xiàn),大鼠心臟收縮力有所改善,心臟擴張程度明顯減輕,心臟炎癥、纖維化及ECM降解明顯減少。目前,MMPs抑制劑已成為心臟再生治療領(lǐng)域多肽研究方面最重要的部分。

    2.2 1,4-二(4-苯氧基苯甲?;┍剑≒-EKKE) 近期,筆者所在課題組應(yīng)用Nano LC-MS/MS質(zhì)譜技術(shù)篩選出一條與心臟再生相關(guān)的多肽p-EKKE,經(jīng)生物信息學分析發(fā)現(xiàn),P-EKKE由12個氨基酸組成,分子量為2 kDa,等電位點為6.14,是一條疏水性多肽,在體內(nèi)比較穩(wěn)定;P-EKKE來自于前體蛋白半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白3(cysteine and enrichment of glycine protein 3,CSRP3),而CSRP3對細胞增殖、周期具有重要調(diào)控作用[23],多肽常與前體蛋白功能相似;P-EKKE在哺乳動物中高度保守,人、猿猴、大鼠、小鼠P-EKKE序列完全一致,提示P-EKKE具有重要的潛在功能,并因此而成為筆者所在課題組關(guān)注的目標。筆者所在課題組通過將熒光標記的P-EKKE經(jīng)尾靜脈注射入小鼠體內(nèi),1 h后在小鼠心臟部位發(fā)現(xiàn)熒光標記的P-EKKE。H9c2細胞是源自心臟肌層的鼠源細胞系,可高度模擬在體心肌細胞的結(jié)構(gòu)與功能,目前已被廣泛地用于心血管疾病的基礎(chǔ)與臨床研究[24];筆者所在課題組采用熒光標記的P-EKKE培養(yǎng)H9c2細胞發(fā)現(xiàn),P-EKKE可有效促進H9c2細胞增殖并促使細胞進入S期及G2期,并能有效調(diào)節(jié)周期相關(guān)基因的表達,初步證實P-EKKE在心臟再生過程中發(fā)揮作用的可能性,但目前國內(nèi)尚無關(guān)于P-EKKE在心臟再生治療中作用的研究報道,而對于P-EKKE在心臟再生過程中的作用及其作用機制等尚需進行大量臨床和動物實驗進一步研究,以為心臟再生治療提供新的思路。

    3 中藥

    中藥因?qū)Ω杉毎恼T導具有促進作用而在心臟再生領(lǐng)域中占得一席之地,有研究發(fā)現(xiàn),中藥固本培元散的中藥合劑喂養(yǎng)的心肌梗死大鼠血清可在體外促進新生大鼠心肌細胞和hiPSCs來源的心肌細胞的分裂,并促進成年小鼠心肌損傷后心臟修復[25];也有研究發(fā)現(xiàn),中藥方劑柴胡龍骨髓湯可促進骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMMSCs)動員并抑制炎性反應(yīng),減輕急性心肌梗死(AMI)引起的心臟損傷[26]。因此,中藥可能成為未來心肌損傷和心力衰竭的非侵入性替代治療的良好選擇。

    4 microRNA(miRNA)

    miRNA是一類由內(nèi)源基因編碼的約由22個核苷酸組成的非編碼單鏈RNA分子,其在動植物中參與轉(zhuǎn)錄后基因表達調(diào)控[27]。近年研究發(fā)現(xiàn),心肌細胞增殖受miRNA網(wǎng)絡(luò)控制[28]。BORDEN等[29]研究發(fā)現(xiàn),心肌梗死小鼠經(jīng)miRNA-294治療兩個月后心臟功能明顯改善,受損心肌組織面積明顯減小且經(jīng)過處理的心臟細胞周期重新恢復,表明這些細胞被重新激活并恢復了產(chǎn)生新細胞的能力。GABISONIA等[28]研究發(fā)現(xiàn),將一小段miRNA-199基因材料植入心肌梗死豬心臟一個月后其心功能幾乎完全恢復。由于miRNA持續(xù)和不受控制的表達將導致心律失常甚至死亡,因此,miRNA在心臟再生治療中的應(yīng)用目前還處于起步階段,且其劑量尚需嚴格控制。

    5 3D打印心臟

    心臟供體數(shù)量極其稀少,心臟移植供體不足和免疫排斥問題是心臟移植的世界性難題,而近年來人造心臟的問世將有利于解決這一世界性難題。早在2017年,香港中文大學的研究人員就成功利用干細胞打印出心臟組織;在2018年,香港大學的研究人員成功地利用干細胞和基因工程技術(shù)生產(chǎn)出世界上第一個迷你人造心臟;近期以色列科學家將提取的人體自身脂肪細胞重新編程為多能干細胞并將脂肪組織中ECM加工成“個性化水凝膠”,之后成功分化為心肌細胞和內(nèi)皮細胞,三者結(jié)合以充當3D打印的“墨水”,最終世界首顆3D打印心臟問世,這顆心臟不僅結(jié)構(gòu)完整而且具有收縮能力,但并不具有正常心臟搏動及泵血功能,且一些細小的血管也無法打印出來[30]。3D打印心臟這一轟動全球的重大突破有利于解決心臟移植供體不足和免疫排斥問題,相信隨著3D打印心臟技術(shù)的成熟與應(yīng)用將成為心臟再生治療領(lǐng)域甚至醫(yī)學領(lǐng)域最偉大的革命。

    6 小結(jié)與展望

    從傳統(tǒng)的藥物治療到手術(shù)治療,從干細胞移植到3D心臟打印,近年來心臟再生治療研究不斷取得突破性進展,而心臟再生治療領(lǐng)域的新進展也有利于臨床建立新的有效的衰竭的心臟再生治方法。目前,心臟再生領(lǐng)域?qū)Ω杉毎难芯恳讶〉弥卮笸黄?,雖然存在著缺陷、風險、爭議,但仍是心臟再生治療領(lǐng)域最主要的組成部分;多肽是最有前景心臟再生治療方法,而由于多種多肽通過打破ECM的平衡而促進心臟損傷,因此多肽特異性抑制劑相關(guān)研究如火如荼。此外,心臟再生治療領(lǐng)域的一些新興研究不斷涌現(xiàn),如中藥對干細胞的誘導的促進作用、miRNA對心臟細胞重生的促進作用及3D打印心臟可能成為未來心臟移植的重要供體來源等,相信隨著心臟再生治療研究的不斷深入,未來瀕死心臟恢復跳動的希望已經(jīng)不是夢想。

    作者貢獻:韓月進行文章的構(gòu)思與設(shè)計,資料的收集、整理,撰寫論文,并對文章整體負責,監(jiān)督管理;朱莉負責文章的質(zhì)量控制及審校;朱莉、宋桂仙進行論文的修訂。

    本文無利益沖突。

    猜你喜歡
    多肽心肌細胞干細胞
    干細胞:“小細胞”造就“大健康”
    左歸降糖舒心方對糖尿病心肌病MKR鼠心肌細胞損傷和凋亡的影響
    活血解毒方對缺氧/復氧所致心肌細胞凋亡的影響
    造血干細胞移植與捐獻
    高多肽含量苦瓜新品種“多肽3號”的選育
    干細胞產(chǎn)業(yè)的春天來了?
    抗HPV18 E6多肽單克隆抗體的制備及鑒定
    心肌細胞慢性缺氧適應(yīng)性反應(yīng)的研究進展
    槲皮素通過抑制蛋白酶體活性減輕心肌細胞肥大
    胎盤多肽超劑量應(yīng)用致嚴重不良事件1例
    窝窝影院91人妻| 成人特级黄色片久久久久久久| 亚洲精品乱久久久久久| 久久精品成人免费网站| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 老司机靠b影院| 咕卡用的链子| 亚洲精品国产一区二区精华液| 男女免费视频国产| 人妻 亚洲 视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 久久国产亚洲av麻豆专区| aaaaa片日本免费| 国产成人精品无人区| 一进一出好大好爽视频| 午夜免费成人在线视频| 一区二区三区激情视频| 成人永久免费在线观看视频| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产亚洲欧美精品永久| 欧美精品一区二区免费开放| 最近最新中文字幕大全免费视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲 国产 在线| av电影中文网址| 美女扒开内裤让男人捅视频| 日本wwww免费看| 中文字幕人妻丝袜制服| 亚洲,欧美精品.| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 91九色精品人成在线观看| 大码成人一级视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 大型av网站在线播放| 欧美黑人欧美精品刺激| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产精品99久久99久久久不卡| 淫妇啪啪啪对白视频| 精品欧美一区二区三区在线| 欧美日韩一级在线毛片| 两性夫妻黄色片| 久久久国产成人免费| 免费在线观看亚洲国产| 高清毛片免费观看视频网站 | 国产区一区二久久| a在线观看视频网站| 高清视频免费观看一区二区| 在线永久观看黄色视频| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 久热爱精品视频在线9| 国产99久久九九免费精品| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 欧美日韩成人在线一区二区| 久久香蕉国产精品| 国产欧美日韩一区二区三| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲全国av大片| 国产精品免费视频内射| 99国产精品一区二区三区| 亚洲在线自拍视频| 国产97色在线日韩免费| 欧美精品一区二区免费开放| 男女免费视频国产| 大香蕉久久网| 黄色女人牲交| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 中文亚洲av片在线观看爽 | 欧美黑人欧美精品刺激| 精品国产美女av久久久久小说| 国产成人系列免费观看| 日韩免费av在线播放| 午夜福利免费观看在线| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 久久久精品区二区三区| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 欧美最黄视频在线播放免费 | 夜夜爽天天搞| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲视频免费观看视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 亚洲专区中文字幕在线| 天堂俺去俺来也www色官网| 精品福利观看| 欧美性长视频在线观看| 91在线观看av| 国产1区2区3区精品| 国产精品电影一区二区三区 | 亚洲成人免费电影在线观看| 99香蕉大伊视频| 精品福利观看| 亚洲精品粉嫩美女一区| www.自偷自拍.com| 成人特级黄色片久久久久久久| 男人操女人黄网站| 免费高清在线观看日韩| 国产又爽黄色视频| 色在线成人网| 纯流量卡能插随身wifi吗| 午夜两性在线视频| 精品久久久精品久久久| 亚洲精品av麻豆狂野| 欧美国产精品一级二级三级| 三级毛片av免费| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 后天国语完整版免费观看| 午夜精品在线福利| 后天国语完整版免费观看| 久9热在线精品视频| 欧美日韩一级在线毛片| 一级作爱视频免费观看| 成年人黄色毛片网站| 99riav亚洲国产免费| 欧美日韩成人在线一区二区| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 午夜老司机福利片| 黄片大片在线免费观看| 中国美女看黄片| 色精品久久人妻99蜜桃| 又大又爽又粗| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲精华国产精华精| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲av成人一区二区三| 免费观看精品视频网站| 国产激情欧美一区二区| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 精品国内亚洲2022精品成人 | 下体分泌物呈黄色| 麻豆乱淫一区二区| 天堂俺去俺来也www色官网| 999久久久精品免费观看国产| 日韩中文字幕欧美一区二区| 热re99久久精品国产66热6| 一区二区三区激情视频| 不卡一级毛片| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲专区中文字幕在线| 国产精品影院久久| 色在线成人网| 久久亚洲精品不卡| a级片在线免费高清观看视频| 国产欧美日韩一区二区三| 日本精品一区二区三区蜜桃| 老汉色av国产亚洲站长工具| 免费观看精品视频网站| 黄色丝袜av网址大全| 成人18禁在线播放| 精品国产乱子伦一区二区三区| 美女福利国产在线| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产精品国产高清国产av | 香蕉丝袜av| 母亲3免费完整高清在线观看| 十八禁人妻一区二区| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 两人在一起打扑克的视频| 高清av免费在线| 9色porny在线观看| 韩国av一区二区三区四区| 无限看片的www在线观看| 亚洲一区中文字幕在线| 9热在线视频观看99| 麻豆成人av在线观看| 午夜视频精品福利| 老熟妇仑乱视频hdxx| 久久精品国产a三级三级三级| 好男人电影高清在线观看| 搡老岳熟女国产| 欧美在线黄色| 日韩精品免费视频一区二区三区| 亚洲精品一二三| 日韩三级视频一区二区三区| 欧美日韩乱码在线| 日韩大码丰满熟妇| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 一级,二级,三级黄色视频| 69精品国产乱码久久久| 狂野欧美激情性xxxx| 久久午夜综合久久蜜桃| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产在视频线精品| 在线观看66精品国产| 久久久久久免费高清国产稀缺| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 午夜免费成人在线视频| 在线观看免费视频网站a站| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国产男女超爽视频在线观看| 麻豆av在线久日| 一级作爱视频免费观看| 中文字幕色久视频| 国产精品永久免费网站| 国产激情欧美一区二区| 老司机深夜福利视频在线观看| 又紧又爽又黄一区二区| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 国产精品久久久av美女十八| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲九九香蕉| 制服诱惑二区| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 成人18禁在线播放| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 午夜成年电影在线免费观看| 国产成人免费无遮挡视频| 9热在线视频观看99| 欧美+亚洲+日韩+国产| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 久久中文字幕一级| 高清毛片免费观看视频网站 | 午夜福利在线免费观看网站| 一级片免费观看大全| 午夜老司机福利片| 久久人妻av系列| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 乱人伦中国视频| 国产精品免费一区二区三区在线 | 国产国语露脸激情在线看| 欧美国产精品一级二级三级| 久久精品国产综合久久久| 又紧又爽又黄一区二区| 精品亚洲成国产av| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 精品一区二区三区四区五区乱码| 丰满迷人的少妇在线观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 亚洲精品国产区一区二| 精品视频人人做人人爽| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 日本wwww免费看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 老司机亚洲免费影院| 国产深夜福利视频在线观看| 一进一出好大好爽视频| 日韩欧美免费精品| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 一区二区三区国产精品乱码| 久久香蕉精品热| av国产精品久久久久影院| 久久精品国产综合久久久| 日韩免费av在线播放| 久久精品国产清高在天天线| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 99香蕉大伊视频| 91大片在线观看| 亚洲国产精品合色在线| av线在线观看网站| 免费在线观看完整版高清| 久久99一区二区三区| 老司机午夜十八禁免费视频| bbb黄色大片| 大片电影免费在线观看免费| 一区二区三区国产精品乱码| 久热爱精品视频在线9| 水蜜桃什么品种好| 好男人电影高清在线观看| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 在线免费观看的www视频| 欧美激情高清一区二区三区| 99香蕉大伊视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲专区字幕在线| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲黑人精品在线| 国产区一区二久久| 久久 成人 亚洲| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产高清激情床上av| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产成人免费观看mmmm| 男男h啪啪无遮挡| 热re99久久精品国产66热6| www.999成人在线观看| 一区二区三区精品91| 极品教师在线免费播放| 国产伦人伦偷精品视频| 一进一出抽搐动态| 人人澡人人妻人| 中文亚洲av片在线观看爽 | 精品一区二区三区四区五区乱码| 丁香六月欧美| 一边摸一边做爽爽视频免费| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 两人在一起打扑克的视频| 精品一区二区三区av网在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产av一区二区精品久久| 一级,二级,三级黄色视频| 免费av中文字幕在线| 亚洲色图av天堂| 亚洲国产看品久久| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 欧美一级毛片孕妇| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 在线观看一区二区三区激情| 天天添夜夜摸| 极品人妻少妇av视频| 男男h啪啪无遮挡| 嫩草影视91久久| 90打野战视频偷拍视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲av成人一区二区三| 婷婷精品国产亚洲av在线 | 亚洲情色 制服丝袜| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产精品免费一区二区三区在线 | 最新在线观看一区二区三区| 亚洲成人手机| 成人国产一区最新在线观看| 精品久久久久久久毛片微露脸| 无人区码免费观看不卡| 丝袜美足系列| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 黄色片一级片一级黄色片| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲男人天堂网一区| 波多野结衣一区麻豆| 窝窝影院91人妻| 国产精品综合久久久久久久免费 | 亚洲一码二码三码区别大吗| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 下体分泌物呈黄色| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 男女下面插进去视频免费观看| 人妻久久中文字幕网| 国产精品98久久久久久宅男小说| 国产蜜桃级精品一区二区三区 | 可以免费在线观看a视频的电影网站| netflix在线观看网站| 日韩欧美国产一区二区入口| 欧美黄色片欧美黄色片| 欧美日韩福利视频一区二区| 一级毛片高清免费大全| 好男人电影高清在线观看| 日韩视频一区二区在线观看| 亚洲免费av在线视频| 美国免费a级毛片| 久久狼人影院| 又大又爽又粗| 黄片播放在线免费| 欧美日韩黄片免| 99在线人妻在线中文字幕 | 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲视频免费观看视频| 欧美精品一区二区免费开放| 怎么达到女性高潮| 久久久久久人人人人人| 国产一区二区激情短视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 村上凉子中文字幕在线| 国产一区二区激情短视频| 99热网站在线观看| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 国产激情久久老熟女| 少妇 在线观看| 宅男免费午夜| 午夜精品在线福利| 国产成人免费无遮挡视频| 欧美在线黄色| 这个男人来自地球电影免费观看| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产男女超爽视频在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| 热re99久久精品国产66热6| 美女高潮到喷水免费观看| 色婷婷av一区二区三区视频| 国产免费男女视频| 国产欧美日韩一区二区三| 中文字幕人妻熟女乱码| 咕卡用的链子| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 麻豆av在线久日| 免费在线观看日本一区| 极品少妇高潮喷水抽搐| 夜夜爽天天搞| 人妻丰满熟妇av一区二区三区 | 高清视频免费观看一区二区| 很黄的视频免费| 手机成人av网站| www.999成人在线观看| 亚洲一区高清亚洲精品| 欧美日韩精品网址| 黄片小视频在线播放| x7x7x7水蜜桃| 一级黄色大片毛片| 国产一区二区三区综合在线观看| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲色图av天堂| 男女床上黄色一级片免费看| e午夜精品久久久久久久| 水蜜桃什么品种好| 十八禁网站免费在线| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 午夜两性在线视频| 午夜福利在线免费观看网站| 国产精品免费大片| 少妇粗大呻吟视频| 男女之事视频高清在线观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 夜夜爽天天搞| 成人精品一区二区免费| 日本欧美视频一区| 久久性视频一级片| 亚洲午夜理论影院| 国产一卡二卡三卡精品| 热99re8久久精品国产| 97人妻天天添夜夜摸| 亚洲av成人av| 最新在线观看一区二区三区| 亚洲精品成人av观看孕妇| 午夜福利在线免费观看网站| 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久国产精品影院| 99re6热这里在线精品视频| 久久性视频一级片| 9191精品国产免费久久| 欧美黑人精品巨大| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 欧美黑人精品巨大| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产精品亚洲av一区麻豆| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产av精品麻豆| 最新美女视频免费是黄的| 丝瓜视频免费看黄片| 夜夜爽天天搞| 一级毛片高清免费大全| 午夜免费观看网址| 中出人妻视频一区二区| 老司机靠b影院| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产成人系列免费观看| 桃红色精品国产亚洲av| 看黄色毛片网站| 国产一卡二卡三卡精品| 国产成人免费观看mmmm| 婷婷成人精品国产| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产99久久九九免费精品| 搡老岳熟女国产| 欧美日韩一级在线毛片| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 国产精品.久久久| 91大片在线观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| tocl精华| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 国产一卡二卡三卡精品| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产成人精品久久二区二区91| 91精品国产国语对白视频| 亚洲国产看品久久| aaaaa片日本免费| 亚洲精品中文字幕在线视频| 久久亚洲真实| 在线观看舔阴道视频| 人妻一区二区av| 欧美中文综合在线视频| 免费看a级黄色片| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 欧美日韩精品网址| 香蕉丝袜av| 国产av精品麻豆| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产又色又爽无遮挡免费看| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲精品在线美女| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产野战对白在线观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲精品国产一区二区精华液| 精品亚洲成国产av| 中文欧美无线码| 九色亚洲精品在线播放| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国产熟女午夜一区二区三区| 麻豆成人av在线观看| 日本黄色日本黄色录像| x7x7x7水蜜桃| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 大香蕉久久网| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 午夜福利乱码中文字幕| 精品久久久久久电影网| 12—13女人毛片做爰片一| 大香蕉久久成人网| 曰老女人黄片| 亚洲av电影在线进入| 国精品久久久久久国模美| 午夜免费观看网址| 大片电影免费在线观看免费| 亚洲美女黄片视频| 黄色片一级片一级黄色片| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 中国美女看黄片| 曰老女人黄片| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| av国产精品久久久久影院| 欧美午夜高清在线| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 激情在线观看视频在线高清 | 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 一二三四社区在线视频社区8| 久久热在线av| 午夜福利一区二区在线看| 少妇的丰满在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 久久香蕉激情| 天堂俺去俺来也www色官网| 在线观看午夜福利视频| 下体分泌物呈黄色| 狠狠狠狠99中文字幕| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产成人精品在线电影| 91老司机精品| 99国产精品免费福利视频| 中文字幕最新亚洲高清| 久热这里只有精品99| av网站在线播放免费| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 国产97色在线日韩免费| 日韩欧美国产一区二区入口| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 不卡一级毛片| 国产色视频综合| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲国产欧美一区二区综合| 老司机在亚洲福利影院| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 在线观看舔阴道视频| 黑丝袜美女国产一区| 9191精品国产免费久久| 五月开心婷婷网| 亚洲在线自拍视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 国产成人av激情在线播放| 99热只有精品国产| 两个人看的免费小视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲avbb在线观看| 精品一品国产午夜福利视频| 成人三级做爰电影| 日本欧美视频一区| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产精品香港三级国产av潘金莲| av网站在线播放免费| 国产精品香港三级国产av潘金莲| svipshipincom国产片| 国产精品久久久人人做人人爽| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产不卡av网站在线观看| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美激情 高清一区二区三区| 久久热在线av| 亚洲精品美女久久av网站| 免费在线观看日本一区| 日本黄色日本黄色录像| 丁香六月欧美| 午夜福利在线免费观看网站| 亚洲欧美一区二区三区久久| 久久中文字幕一级| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 精品福利永久在线观看| 亚洲专区国产一区二区| 免费人成视频x8x8入口观看| av免费在线观看网站| 国产成人影院久久av| 在线观看www视频免费| 国产av又大| 纯流量卡能插随身wifi吗| 热99re8久久精品国产| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产成人欧美在线观看 | 国产成人av教育| av天堂在线播放| 女人被狂操c到高潮| 国产又色又爽无遮挡免费看| 正在播放国产对白刺激| 亚洲第一青青草原| 亚洲在线自拍视频|