廣州地區(qū)2 005例成人過敏性疾病患者過敏原特異性IgE檢測結(jié)果分析①

李宛珈 黃志鋒 廖陳喜 羅文婷 黃柳橋 孫寶清

(廣州呼吸健康研究院，呼吸疾病國家重點實驗室，國家呼吸臨床研究中心，廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，廣州 510120)

Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性疾病是一類IgE介導(dǎo)的涉及多器官和多系統(tǒng)的全身性疾病，在過去30年，過敏性疾病發(fā)病率不斷增長，已達全世界總?cè)丝诘?0%～30%[1，2]。如果患者的過敏原不明確，疾病可能久治不愈，甚至不斷加重。因此，明確過敏原對采取積極的預(yù)防診治措施具有重要意義。通常認(rèn)為IgE是介導(dǎo)Ⅰ型過敏反應(yīng)的主要抗體，而通過體外檢測患者血清過敏原特異性IgE(specific IgE,sIgE)是明確過敏原的重要途徑之一[3]。

既往對過敏原譜的分析研究多圍繞兒童和青少年患者，對成年過敏性疾病患者的過敏原分析數(shù)據(jù)報道較少。呼吸疾病國家重點實驗室(The Allergy Information Repository of the State Key Laboratory of Respiratory Disease,AIR-SKLRD)生物資源庫是依托于廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院建立的大型生物血清資源庫，在過去十年中收集和儲存了大量過敏性疾病患者的血清樣本及其臨床信息[4]。本研究基于此，分析廣州地區(qū)過敏性疾病成年患者過敏原sIgE的致敏特點，為臨床提供的相關(guān)流行病學(xué)數(shù)據(jù)。

1 資料與方法

1.1資料

1.1.1基本資料 選取2016年1月～2018年12月收錄于AIR-SKLRD數(shù)據(jù)庫、并進行本地區(qū)常見8種過敏原sIgE檢測的過敏性疾病成人患者(年齡≥18歲)2 005例進行回顧性分析。其中男性1 104例，女性901例，年齡分布為50(35,63)歲(中值，四分位區(qū)間)，按照不同年齡段分為以下5個階段：18～29歲290例(14.46%)、30～39歲344例(17.16%)、40～49歲344例(17.16%)、50～59歲390例(19.45%)，≥60歲637例(31.77%)。根據(jù)ARIA (The Allergic Rhinitis and its Impact on Asthma)指南和全球哮喘倡議指南(GINA guideline,http://ginasthma.org)診斷標(biāo)準(zhǔn)將就診患者分為鼻炎組304例(15.16%)和哮喘組550例(27.43%)[5]；同時根據(jù)(The EAACI/GA2LEN/EDF/WAO Guideline)分為皮膚過敏組(含蕁麻疹、特應(yīng)性皮炎)290例(14.46%)[6]。其他可疑過敏性疾病組包括患者自述食物過敏、慢性咳嗽等924例(46.08%)。4組疾病患者的總IgE水平分別為136 (40,349)，80 (21,268)，111 (38,333)，61 (15,206) (kU/L)(見表1)。本研究及患者血清的使用經(jīng)廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)：GYYY-2016-73，所有患者均簽署知情同意書。

1.1.2過敏原來源 過敏原購自Thermo Fisher Scientific,瑞典。

1.2方法 本研究采用Phadia 1000全自動熒光酶免疫檢測系統(tǒng)(ImmunoCAP)對血清過敏原sIgE進行檢測。所有患者均用含分離凝膠的真空采血管抽取靜脈血5 ml，3 000 r/min離心10 min，取上層血清進行檢測，剩余標(biāo)本置于-80℃冰箱長期保存，避免反復(fù)凍融。檢測項目為本院變態(tài)反應(yīng)科實驗室開展的成人過敏原篩查8項套餐項目，包括屋塵螨(d1)、貓毛(e1)、艾蒿(w6)、煙曲霉菌(m3)、蟑螂(i6)、小麥(f4)、大豆(f14)、蝦(f24)。所有測試均按照過敏原試劑說明書進行。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析 對于未稀釋的血清樣品，檢測范圍為0.01～100 kU/L。以0.35 kU/L作為閾值，sIgE結(jié)果≥ 0.35 kU/L則定義為血清致敏。按放射過敏原吸附試驗 (radioallegrosorbent test,RAST)分級標(biāo)準(zhǔn)將sIgE陽性結(jié)果分為1～6級：級別1 (0.35～0.69 kU/L)，級別2 (0.70～3.49 kU/L)，級別3 (3.50～17.49 kU/L)，級別4 (17.50～49.99 kU/L)，級別5(50.00～99.99 kU/L)，級別6(≥100.00 kU/L)[7]。

使用Excel2016和SPSS23.0進行數(shù)據(jù)分析。采用柱狀圖表示成人患者8項過敏原的致敏陽性率分布，組間陽性率差異采用卡方檢驗(理論頻數(shù)出現(xiàn)<5則用fish確切概率法校準(zhǔn))，兩兩比較采用Bonferroni法調(diào)整顯著性水平；以折線圖表示不同年齡階段各項過敏原的變化趨勢以及屋塵螨過敏原與其他7項過敏原合并致敏情況；使用Spearman檢驗分析8項過敏原相關(guān)性。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1成人常見8項過敏原sIgE致敏陽性率分布特征 本研究入選的2 005例成人過敏性疾病患者中，屋塵螨的陽性率最高(34.41%)，其次為蟑螂(24.14%)，貓毛過敏原在所檢測的8種過敏原中陽性率最低(3.14%)。成人患者中蝦過敏原也具有相對較高的致敏陽性率(21.00%)。此外，8項過敏原的陽性樣本中均以1～3級為主，并有16.47%的成人過敏患者的總IgE(tIgE)水平在100 kU/L以上(圖1)；tIgE水平為98 (34,301) kU/L(表1)。

2.2不同年齡階段中性別過敏原致敏差異 結(jié)果如圖2，對于屋塵螨、貓毛、艾蒿、蟑螂和蝦過敏原，不同性別的陽性率隨年齡的增加均呈下降趨勢，在18～29歲階段為陽性率峰值，并在≥60歲年齡段處于較低值。煙曲霉菌過敏原的女性致敏陽性率在50～59歲時達到峰值(8.12%)；男性陽性率隨年齡增長呈上升趨勢，并在≥60歲時達到峰值(10%)。廣州地區(qū)成人患者對于煙曲霉菌、小麥和大豆過敏原致敏陽性率與年齡增長的線性關(guān)系較差，且不同性別的致敏情況在各年齡階段差異無統(tǒng)計學(xué)意義 。

圖1 成人過敏性疾病患者的8項常見過敏原陽性率分布Fig.1 Positive rates of eight common allergens in adult allergic patients

圖2 不同年齡階段男女性別過敏原陽性率分布情況Fig.2 Distribution of allergen positive rate between male and female at different ages

卡方檢驗結(jié)果表明蟑螂過敏原在各年齡階段中男性的陽性率均略高于女性，并在30～39歲和≥60歲年齡段中的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(39.77% vs 27.38%,19.49% vs 10.53%,P<0.05)；在≥60歲年齡階段煙曲霉菌過敏原男女致敏率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(10.00% vs 4.05%，P<0.05)。對于蝦過敏原，整體上在成人患者中男性陽性率略高于女性，但僅在≥60歲時差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(19.49% vs 8.50%,P<0.05)。

2.3不同疾病成人患者過敏原致敏差異分析 由表2可知，4類疾病組的主要過敏原均為屋塵螨、蟑螂和蝦，貓毛陽性率最低?？ǚ綑z驗結(jié)果顯示，屋塵螨、貓毛、蟑螂和蝦過敏原在鼻炎組、哮喘組、皮膚過敏組和其他過敏性疾病組的陽性率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=72.103,χ2=21.839,χ2=25.722,χ2=10.849,P<0.05);兩兩比較顯示皮膚過敏組的屋塵螨、貓毛和蟑螂過敏原陽性率低于鼻炎組和其他過敏性疾病組(P<0.05)，對于上述8項常見過敏原，鼻炎組和哮喘組的陽性率均無統(tǒng)計學(xué)差異。

圖3 屋塵螨陽性患者合并其他過敏原致敏百分率Fig.3 Sensitization percentage of house dust mite positive patients complicated with other allergens

表1 入選患者基本信息和總IgE分布水平

表2 基于4種疾病組成人患者的各項過敏原陽性率分布

表3 8項過敏原sIgE濃度 Spearman相關(guān)性分析

2.4屋塵螨陽性患者合并其他過敏原致敏分析 本研究入選的成人患者中，屋塵螨陽性樣本中有71.43%(275/385)合并了其他7項過敏原中至少1項過敏原共同致敏，主要合并蟑螂和蝦共同致敏，而對于貓毛、艾蒿、煙曲霉菌、小麥和大豆過敏原的合并致敏情況不明顯。當(dāng)屋塵螨sIgE濃度水平為2級時，合并蟑螂和蝦的百分率最高，分別為70.85%和68.84%；在4級時，合并蟑螂和蝦的百分率最低，分別為37.38%和39.25%(圖3)。

2.58項常見過敏原血清sIgE相關(guān)性分析 屋塵螨、蟑螂和蝦過敏原兩兩間呈顯著的正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.823 (i6 vs f24)、0.801 (d1 vs f24)和0.737 (d1 vs i6，P<0.01)。艾蒿和其他7項過敏原也有較好的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)為0.538～0.785；此外，屋塵螨與貓毛相關(guān)系數(shù)為0.614 (P<0.01)，小麥和大豆相關(guān)系數(shù)為0.719 (P<0.01，見表3)。

3 討論

世界衛(wèi)生組織(WHO)數(shù)據(jù)表明目前全球有22%～25%的人患有過敏性疾病，在我國有超過兩億的過敏性疾病患者，并呈上升趨勢[8]。常見的過敏性疾病包括過敏性鼻炎、過敏性哮喘、過敏性皮炎等。目前對于過敏性疾病的診斷主要根據(jù)患者臨床癥狀、體內(nèi)激發(fā)試驗和體外過敏原sIgE檢測，而體外過敏原sIgE檢測因其不受患者皮膚、服藥等因素干擾，可有效避免個體差異帶來的不準(zhǔn)確結(jié)果及患者不良反應(yīng)的發(fā)生，使其在過敏性疾病預(yù)防診治中占重要地位，現(xiàn)已在臨床上廣泛應(yīng)用[9]。

Lou等[10]研究指出選擇符合本地區(qū)特點的6～8種過敏原組可對96%以上的過敏性疾病患者做出正確的篩查診斷，并提倡各地區(qū)可以結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果選擇合適的過敏原組合進行臨床篩查。本研究選擇成人過敏性疾病患者篩查組合，包括屋塵螨、貓毛、艾蒿、煙曲霉菌、蟑螂、小麥、大豆、蝦8項過敏原，結(jié)果表明本研究隊列中超過40%的樣本對上述8項過敏原的至少1項呈陽性。

與兒童和青少年過敏原分布特征相似，屋塵螨作為成人過敏患者最主要的吸入性過敏原，陽性率為34.41%[11]。在廣州地區(qū)蟑螂是僅次于塵螨的常見吸入性過敏原(24.14%)，與中國其他地區(qū)報道基本一致[12]。既往研究也證實蝦過敏原是廣州地區(qū)最主要的食物過敏原，其在本研究中陽性率為21.00%[13,14]。衰老會顯著影響免疫系統(tǒng)的相關(guān)功能，多項研究表明過敏患病率和IgE水平受年齡的影響[15-17]。本研究將患者年齡進一步劃分為5個年齡階段，結(jié)果顯示，對于屋塵螨、貓毛、艾蒿、蟑螂和蝦過敏原，不同性別的陽性率均隨年齡的增加呈下降趨勢，對于小麥和大豆過敏原，致敏陽性率與年齡增長的線性關(guān)系較差，且其不同性別的致敏陽性率在各年齡階段差異均無統(tǒng)計學(xué)意義；屋塵螨、蟑螂和蝦過敏原在各年齡段男性的致敏陽性率均高于女性，Boulet[18]等對3 371例呼吸道過敏疾病患者的研究中也發(fā)現(xiàn)男性比女性有更高的過敏指數(shù)，提示對于多數(shù)過敏原男性比女性更感敏。

對4組疾病的致敏陽性率進行分析，發(fā)現(xiàn)4個疾病組具有相似的致敏分布特征，均以屋塵螨為最主要的過敏原，貓毛致敏陽性率最低，與任華麗[19]報道的我國北京地區(qū)265例成人過敏性鼻炎患者sIgE檢測結(jié)果一致。而對于主要的致敏過敏原，不同疾病患者的過敏原陽性率也不同，本研究結(jié)果顯示，入院診斷為鼻炎的患者組比其他3組患者具有較高的陽性率，提示具有鼻炎相關(guān)臨床癥狀的患者更多是由于過敏引起。多項研究已經(jīng)報道原肌球蛋白作為屋塵螨、蟑螂和蝦蟹的主要交叉變應(yīng)原，可使屋塵螨陽性患者與蟑螂、蝦蟹過敏原合并致敏，同時造成假陽性[20，21]；本研究觀察到屋塵螨陽性樣本中超過70%的患者合并了其他7項過敏原中至少1項過敏原共同致敏，其中以合并蟑螂和蝦過敏原為主；相關(guān)性分析結(jié)果也表明屋塵螨、蟑螂和蝦過敏原兩兩之間呈顯著正相關(guān)。在屋塵螨致敏水平為2級和6級時，其合并蟑螂和蝦共同致敏的概率最高，可能是由于由交叉反應(yīng)蛋白(如原肌球蛋白)引起的陽性水平較低，而在致敏水平為6級時，則為真正的共同致敏，這需要采用組分診斷解決方案進一步深入驗證。

總之，過敏原在成人過敏性疾病中仍是主要因素，并以屋塵螨、蟑螂和蝦為最主要過敏原，且往往出現(xiàn)共同致敏現(xiàn)象；研究不同過敏性疾病患者過敏原致敏特征對過敏性疾病的預(yù)防診治具有重要意義，可為臨床診斷提供相關(guān)信息。