血清PDGF-D表達(dá)水平與老年出血性腦卒中患者顱內(nèi)血腫擴(kuò)大的相關(guān)性

韓非 王穎竹 楊鵬 顧俊怡

(蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院 1急診科，江蘇 蘇州 215006；2老年科；3神經(jīng)外科)

出血性腦卒中(HS)又稱腦出血，是臨床常見的非外傷性腦實質(zhì)出血，可形成顱內(nèi)血腫，其在老年人中多有發(fā)生，具有較高致殘率及死亡率〔1，2〕。血腫擴(kuò)大在HS后較為常見，是腦持續(xù)性出血或再出血，促使血腫不斷擴(kuò)大的過程及現(xiàn)象，可增加HS患者死亡率〔3，4〕。既往研究資料顯示，血小板源性生長因子(PDGF)-D是PDGF家族成員之一，其可能參與血管生成、血管重塑、炎癥反應(yīng)和損傷修復(fù)等過程〔5〕。方顕文等〔6〕研究發(fā)現(xiàn)PDGF在腦出血患者血清中表達(dá)水平明顯上調(diào)，PDGF有助于評估腦出血患者神經(jīng)功能受損情況，其有望成為早期診斷腦出血的生物學(xué)標(biāo)志物。但PDGF-D在老年HS患者血清中的表達(dá)水平與顱內(nèi)血腫擴(kuò)大的相關(guān)性尚未見到相關(guān)報道。本研究觀察PDGF-D在HS血腫擴(kuò)大/未擴(kuò)大患者中的表達(dá)，分析PDGF-D與顱內(nèi)血腫擴(kuò)大的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2016年6月至2019年8月蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院診治的老年HS患者189例，診斷標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會制定的《中國腦出血診治指南(2014)》〔7〕進(jìn)行HS判定。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者符合HS診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)腦CT證實；②腦CT復(fù)查前未接受過手術(shù)治療；③所有患者研究相關(guān)資料齊全。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有腦出血史者；②合并顱內(nèi)腫瘤、外傷性出血、腦梗死者；③合并長期使用外科治療者；④合并血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、多器官疾病者。血腫擴(kuò)大判定標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)Brott標(biāo)準(zhǔn)〔8〕，比較先后兩次腦CT血腫體積，當(dāng)復(fù)查CT血腫體積比前次CT血腫體積超過33%為血腫擴(kuò)大。按照顱內(nèi)血腫是否擴(kuò)大分為血腫擴(kuò)大組62例及血腫未擴(kuò)大組127例。其中血腫擴(kuò)大組：男35例，女27例；年齡61～82歲，平均(69.92±7.15)歲；體重指數(shù)(BMI)為18.01～26.27 kg/m2，平均(22.80±2.22)kg/m2。血腫未擴(kuò)大組：男71例，女56例；年齡60～81歲，平均(70.87±7.94)歲；BMI為17.96～26.20 kg/m2，平均(22.93±2.35)kg/m2。兩組性別、年齡、BMI方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究符合倫理學(xué)要求，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核、批準(zhǔn)，并獲得患者家屬知情同意，簽署知情同意書。

1.2主要試劑與儀器 人PDGF-D酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(貨號：DG10421H)購自北京冬歌博業(yè)生物科技有限公司上海將來實業(yè)股份有限公司；人腫瘤壞死因子(TNF)-α ELISA試劑盒(貨號：BMH051)購自上海冠東生物科技有限公司；AMR-100酶標(biāo)儀(型號：AS-16050-00)購自杭州奧盛儀器有限公司。

1.3臨床相關(guān)資料收集 所有HS患者發(fā)病3 h內(nèi)就診，并行CT檢查，均符合保守治療條件。臨床觀察到HS患者病情發(fā)生變化，立即進(jìn)行頭顱CT復(fù)查，而病情相對穩(wěn)定患者于發(fā)病24 h時進(jìn)行頭顱CT復(fù)查，并于入院時收集患者年齡、BMI、血壓、基礎(chǔ)病史、白細(xì)胞(WBC)計數(shù)、凝血酶原時間(PT)、格拉斯哥昏迷評分(GCS)等臨床資料。

1.4樣本采集與預(yù)處理 收集兩組肘靜脈血3～4 ml于5 ml EP管中，室溫下自然凝集，1 750 r/min離心12 min，收集上層血清，分裝，于-20℃冰箱中凍存，待檢。

1.5ELISA檢測血清PDGF-D、TNF-α水平 取出兩組受試者凍存血清樣本，解凍，嚴(yán)格按照PDGF-D、TNF-α ELISA試劑盒說明書進(jìn)行檢測。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS24.0軟件行t檢驗、χ2檢驗、Pearson相關(guān)分析、Logistic回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組臨床資料比較 與血腫未擴(kuò)大組比較，血腫擴(kuò)大組HS患者收縮壓、舒張壓及GCS評分均明顯升高(P<0.05)。見表1。

表1 兩組臨床資料比較

2.2兩組PDGF-D、TNF-α水平、不同時間血腫量及比值比較 與血腫未擴(kuò)大組相比，血腫擴(kuò)大組血清PDGF-D、TNF-α水平、復(fù)查血腫量(V2)及V2/入院時血腫量(V1)值均明顯升高(P<0.05)。見表2。

表2 兩組PDGF-D、TNF-α水平、不同時間血腫量及比值比較

2.3血腫擴(kuò)大患者血清PDGF-D、V2與收縮壓、舒張壓、GCS評分、TNF-α關(guān)系 血腫擴(kuò)大患者血清PDGF-D水平與GCS評分、TNF-α水平均呈正相關(guān)(P<0.01；P<0.001)；V2與入院收縮壓、GCS評分、TNF-α水平均呈顯著正相關(guān)(P<0.01；P<0.001)。見表3。

表3 血腫擴(kuò)大患者血清PDGF-D、V2與收縮壓、舒張壓、GCS評分、TNF-α關(guān)系

2.4Logistic回歸分析顱內(nèi)血腫擴(kuò)大的影響因素 以血腫是否擴(kuò)大為應(yīng)變量，以收縮壓、舒張壓、GCS評分、PDGF-D、TNF-α為因變量，行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，收縮壓、GCS評分、PDGF-D、TNF-α均為血腫擴(kuò)大的危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 影響顱內(nèi)血腫擴(kuò)大的Logistic回歸分析

3 討 論

HS是多發(fā)于老年人的腦血管疾病，易發(fā)生顱內(nèi)血腫擴(kuò)大現(xiàn)象，且血腫擴(kuò)大可增加患者死亡風(fēng)險，影響患者生存質(zhì)量〔9，10〕。因此，尋找顱內(nèi)血腫擴(kuò)大的相關(guān)因素，及時監(jiān)測有關(guān)指標(biāo)，對改善大腦炎癥、神經(jīng)功能及患者生活質(zhì)量具有積極意義。

PDGF可促進(jìn)膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管平滑肌等多種細(xì)胞分裂、增殖，在個體神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、細(xì)胞分化、信號傳導(dǎo)等生物學(xué)過程中具有重要調(diào)節(jié)作用〔11，12〕。研究表明，PDGF-D作為PDGF的重要成員，其可能與非高血壓性腦出血有關(guān)，可能參與并影響腦出血發(fā)展過程〔13〕。研究顯示，PDGF-D在腦出血后表達(dá)水平升高，可增強(qiáng)細(xì)胞浸潤，誘導(dǎo)促炎因子TNF-α產(chǎn)生，進(jìn)而增強(qiáng)小膠質(zhì)細(xì)胞活性及中性粒細(xì)胞浸潤，從而在腦出血炎癥過程中發(fā)揮促進(jìn)作用，其具有診治腦出血的潛在價值〔14〕。研究表明，PDGF-D表達(dá)異常與炎癥性腦血管疾病相關(guān)。本研究提示PDGF-D可能在HS患者發(fā)生血腫擴(kuò)大過程中起重要作用。推測HS可引發(fā)腦缺血缺氧、顱內(nèi)壓升高、腦水腫，進(jìn)而引起大量星形膠質(zhì)細(xì)胞增生，促使PDGF-D分泌，PDGF-D通過血腦屏障進(jìn)入血液循環(huán)；此外，腦水腫可激活血小板、受損內(nèi)皮細(xì)胞，并誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，均會促進(jìn)PDGF-D表達(dá)，PDGF-D與其受體結(jié)合后可能影響HS的炎癥損傷及血氧供給環(huán)節(jié)，從而在血腫擴(kuò)大進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。

機(jī)體在腦出血后處于應(yīng)激狀態(tài)，T細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞等血清免疫細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞等被激活，合成并分泌炎性因子，炎性因子在調(diào)節(jié)介導(dǎo)炎癥反應(yīng)中具有重要作用，其也可影響繼發(fā)性顱腦損傷〔15，16〕。有關(guān)研究顯示，TNF-α是腦損傷重要的炎性因子，其在腦出血患者中呈高表達(dá)，其水平隨著腦出血量增加及病情進(jìn)展呈上升趨勢，其可能參與并影響腦出血過程，TNF-α水平有利于病情評估〔17，18〕。此外，鐘建斌等〔19〕研究發(fā)現(xiàn)TNF-α在急性高血壓腦出血患者中表達(dá)上調(diào)，經(jīng)破血逐瘀法聯(lián)合依達(dá)拉奉治療后，其表達(dá)水平明顯下調(diào)，TNF-α可能在急性高血壓腦出血的發(fā)展過程中發(fā)揮促炎作用。以上研究表明，TNF-α表達(dá)異?？赡芘c腦出血發(fā)病進(jìn)程密切相關(guān)。本研究提示TNF-α可能在血腫擴(kuò)大進(jìn)程中發(fā)揮作用。推測TNF-α在腦出血后過度釋放，其可促進(jìn)IL-6等炎癥因子釋放，影響繼發(fā)性顱腦損傷；此外，TNF-α可通過直接調(diào)控膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元壞死及血管新生等生物過程〔15〕，從而在顱腦血腫擴(kuò)大中發(fā)揮促進(jìn)作用。

有研究表明，血腫擴(kuò)大在HS患者發(fā)病首日發(fā)生率較高，在發(fā)病后6 h內(nèi)發(fā)生率最高〔20〕。目前，臨床應(yīng)用CT判定腦出血血腫擴(kuò)大尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，Brott〔8〕標(biāo)準(zhǔn)受到廣泛認(rèn)可。本研究提示在臨床工作中，HS患者在入院后當(dāng)日病情發(fā)生變化時，應(yīng)立即復(fù)查CT，檢查血腫變化情況，及時采取相應(yīng)治療手段。

本研究提示血清PDGF-D水平與GCS評分、TNF-α水平，V2與收縮壓、GCS評分、TNF-α水平相互影響，從而協(xié)調(diào)HS患者發(fā)生血腫擴(kuò)大過程。收縮壓、GCS評分、PDGF-D、TNF-α水平升高，均可能使血腫擴(kuò)大發(fā)生風(fēng)險增加，及時監(jiān)測上述指標(biāo)有助于早期評估并控制HS患者病情。