以PD-1和PD-L1為靶點(diǎn)的腫瘤免疫治療研究進(jìn)展

楊占菊，黃長(zhǎng)江，王名雪

煙臺(tái)邁百瑞國(guó)際生物醫(yī)藥有限公司，山東 煙臺(tái)264006

目前，腫瘤的發(fā)病率呈持續(xù)增長(zhǎng)趨勢(shì)，現(xiàn)已成為嚴(yán)峻的社會(huì)負(fù)擔(dān)[1]。隨著對(duì)腫瘤治療的不斷摸索，人們?cè)絹碓揭庾R(shí)到腫瘤免疫治療的有效性，目前其已成為腫瘤治療研究的熱點(diǎn)，在實(shí)體瘤和血液腫瘤的治療中都顯示出了極其突出的效果，特別是程序性死亡受體1（programmed cell death1，PDCD1，也稱 PD-1）/程序性死亡受體配體 1（programmed cell death 1 ligand 1，PDCD1LG1，也稱PD-L1）免疫檢查點(diǎn)抑制劑的應(yīng)用取得了喜人的成績(jī)[2]。PD-1也稱CD279，是由288個(gè)氨基酸組成的一個(gè)55 kD的I型跨膜糖蛋白，屬于B7-CD28受體家族成員[3-4]。PD-1由胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域組成。胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域具有兩種酪氨酸，一種存在于免疫受體酪氨酸抑制基序（immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif，ITIM）中，另一種存在于免疫受體酪氨酸開關(guān)基序（immunoreceptor tyrosine-based switch motif，ITSM）中，在PD-1發(fā)揮作用的過程中有重要地位。作為一種重要的免疫檢查點(diǎn)，PD-1是一種抑制T細(xì)胞炎癥活動(dòng)的細(xì)胞表面受體，常在患者的T細(xì)胞中表達(dá)。PD-1有兩種配體：PD-L1和PD-L2，在抗原呈遞細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)。正常情況下，T細(xì)胞激活時(shí)誘導(dǎo)PD-1表達(dá)，與配體PD-L1或PD-L2結(jié)合后，主要通過磷酸化Src同源-2區(qū)域包含酪氨酸蛋白磷酸酶（Src homologous 2 domain region-containing protein tyrosine phosphatases，SHP2）抑制 T細(xì)胞的活化，調(diào)節(jié)T細(xì)胞和抗原呈遞細(xì)胞或效應(yīng)細(xì)胞的接觸，促進(jìn)免疫抑制細(xì)胞——調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cell，Treg）的增殖，從而抑制機(jī)體的免疫效應(yīng)。腫瘤細(xì)胞通過上調(diào)PD-L1，形成PD-1/PD-L1通路，從而抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)。因此，以PD-1/PD-L1為靶點(diǎn)的腫瘤免疫治療是通過抑制PD-1/PD-L1通路恢復(fù)機(jī)體免疫功能，從而產(chǎn)生抗腫瘤作用[5]。本文針對(duì)以PD-1和PD-L1為靶點(diǎn)的腫瘤免疫治療研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 小分子抑制劑

對(duì)于以PD-1和PD-L1為靶點(diǎn)的免疫治療，小分子抑制劑有其自身的優(yōu)點(diǎn)：缺乏免疫原性，有很高的口服生物利用度等。PD-1是表達(dá)于抗原刺激T細(xì)胞的表面共抑制受體之一，小分子抑制劑破壞PD-1/PD-L1相互作用是增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)的重要途徑[6-8]。非抗體小分子PD-1/PD-L1抑制劑主要包括非肽類和肽類，肽類又包括模擬肽、大環(huán)肽及環(huán)寡肽等[9]。尋找小分子免疫檢查點(diǎn)抑制劑一直是人們關(guān)注的熱點(diǎn)。

1.1 非肽類小分子抑制劑

非肽類小分子抑制劑容易被吸收，有很高的生物利用度，可以在腫瘤微環(huán)境中積累很高的濃度，因此也更容易控制病情。聯(lián)芳基衍生物PD-1/PD-L1相互作用小分子抑制劑BMS-1001和BMS-1166能夠與人PD-L1結(jié)合并阻斷其與PD-1的相互作用，具有很好的有效性和高效性[10]。最新研究還報(bào)道了兩類聯(lián)苯結(jié)構(gòu)的PD-1/PD-L1非肽類小分子抑制劑，一類含有2-甲基3-聯(lián)苯基甲醇結(jié)構(gòu)，例如BMS-202[11]；另一類含3-2-甲苯基甲醇結(jié)構(gòu)，例如BMS-200，這些小分子的半抑制濃度為（9.2×10-4）～14.25 μmol/L[12]。

CA-170是一種可抑制PD-L1/PD-L2活性的小分子抑制劑[13]，是第一個(gè)I期臨床試驗(yàn)治療晚期實(shí)體瘤和淋巴瘤的小分子抑制劑[14-15]。日服1次CA-170可顯著減少B16/F10黑色素瘤和肺轉(zhuǎn)移瘤的數(shù)量，與環(huán)磷酰胺聯(lián)用可明顯抑制CT26結(jié)腸腫瘤的生長(zhǎng)。此外，小分子抑制劑CA-327也能夠干擾PD-1/PD-L1相互作用，干擾形成PD-1/PD-L1復(fù)合物，現(xiàn)已進(jìn)入新藥研究申請(qǐng)（investigational new drug，IND）階段。

1.2 肽類小分子抑制劑

2015年Chang等[16]報(bào)道了針對(duì)PD-1/PD-L1靶點(diǎn)的D-肽拮抗劑（DPPA-1），這種肽基抑制劑能夠在腫瘤細(xì)胞中積累并抑制腫瘤生長(zhǎng)，延長(zhǎng)動(dòng)物壽命。2016年最先進(jìn)的肽基化合物BMS-986189已進(jìn)入I期臨床試驗(yàn)。此外，有研究報(bào)道Ar5Y-4多肽抑制劑靶向于PD-1和PD-L1的結(jié)合親和力大約為1.38mmol/L[17]。AUNP-12多肽抑制劑結(jié)合PD-L1/L2，抑制原發(fā)腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，并維持至少24 h的抗腫瘤免疫活性。另一種靶向PD-L1的多肽抑制劑TPP-1，能夠干擾PD-1/PD-L1的相互作用，抑制腫瘤的生長(zhǎng)，可以作為腫瘤免疫治療抗體的替代品[18]。

2 單抗

目前，已有9種基于抗體的PD-1/PD-L1免疫檢查點(diǎn)抑制劑獲批上市用于腫瘤的治療。第一類為靶向PD-1的單抗：納武利尤單抗（Nivolumab）、帕博利珠單抗（Pembrolizumab）、塞普利單抗（Cemiplimab）、特瑞普利單抗（Toripalimab）、信迪利單抗（Sintilimab）和卡瑞利珠單抗（Camrelizumab）；第二類為靶向PD-L1的單抗：阿特朱單抗（Atezolizumab）、德魯單抗（Durvalumab）和阿維單抗（Avelumab）。

2.1 納武利尤單抗

納武利尤單抗于2014年12月獲美國(guó)食品藥品管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）批準(zhǔn)用于晚期黑色素瘤的治療，同時(shí)也是中國(guó)首個(gè)獲批上市的腫瘤免疫治療藥物。納武利尤單抗是一種靶向PD-1的全人源免疫球蛋白G4（immunoglobulin G4，IgG4）kappa單克隆抗體，能夠阻斷PD-1與其配體PD-L1和PD-L2的相互作用。針對(duì)晚期實(shí)體瘤，包括黑色素瘤的臨床研究顯示，納武利尤單抗具有良好的安全性以及持久的腫瘤緩解效果。2015年納武利尤單抗相繼被美國(guó)FDA批準(zhǔn)用于難治或復(fù)發(fā)的晚期鱗狀和非鱗狀非小細(xì)胞肺癌的二線治療[19-20]。目前，納武利尤單抗已經(jīng)被批準(zhǔn)用于多種腫瘤治療，如腎細(xì)胞癌[21]、轉(zhuǎn)移性頭頸部鱗狀細(xì)胞癌[22]、經(jīng)典霍奇金淋巴瘤[23]、結(jié)直腸癌[24]和移行細(xì)胞癌[25]。

2.2 帕博利珠單抗

帕博利珠單抗于2014年9月獲FDA批準(zhǔn)用于治療對(duì)其他藥物無反應(yīng)的晚期或不能進(jìn)行手術(shù)切除的黑色素瘤（Ⅳ期黑色素瘤），2018年7月在中國(guó)獲批上市，成為繼納武利尤單抗之后第2個(gè)在中國(guó)獲批上市的PD-1/PD-L1單克隆抗體類藥物。帕博利珠單抗是一種靶向PD-1的人源化IgG4 kappa單克隆抗體，是FDA批準(zhǔn)的首個(gè)PD-1阻斷劑，并授予其突破性療法認(rèn)證和罕用藥資格。帕博利珠單抗能激活腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（tumor infiltrating lymphocyte，TIL）[26]，通過與TIL表面的PD-1結(jié)合抑制其與PD-L1/L2的相互作用，以達(dá)到激活TIL解除經(jīng)PD-1通路介導(dǎo)的免疫反應(yīng)（包括抗腫瘤免疫反應(yīng)）抑制的效果[26]。此外，帕博利珠單抗的研究還涉及非小細(xì)胞肺癌、血液腫瘤、肺癌、乳腺癌、膀胱癌和頭頸癌[26-27]等30多種腫瘤類型且初步臨床研究均獲得良好療效。

KEYNOTE-010的研究首次前瞻性證實(shí)了帕博利珠單抗在二線治療中的有效性，在PD-L1高表達(dá)患者中有效率高[28]。2018年10月31日，美國(guó)FDA批準(zhǔn)帕博利珠單抗聯(lián)合紫杉醇+卡鉑一線治療晚期肺鱗狀細(xì)胞癌，不需要考慮腫瘤的PD-L1表達(dá)水平。2019年4月11日，其被FDA批準(zhǔn)用于腫瘤無表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）或間變性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase，ALK）基因突變且表達(dá)PD-L1，不能手術(shù)切除或不能放化療的Ⅲ期非小細(xì)胞肺癌或轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌患者的一線治療。

2.3 塞普利單抗

塞普利單抗于2018年9月28日獲FDA批準(zhǔn)上市，后于2019年6月28日獲歐洲藥物管理局（European Medicines Agency，EMA）批準(zhǔn)上市，用于治療轉(zhuǎn)移性皮膚鱗狀細(xì)胞癌（cutaneous squamous cell carcinoma，CSCC）或不能接受治愈性手術(shù)或放療的局部晚期CSCC患者。塞普利單抗是一種靶向PD-1的全人源單克隆抗體，通過阻斷PD-1與PD-L1的結(jié)合阻斷T細(xì)胞失活[29]，增強(qiáng)免疫系統(tǒng)的抗腫瘤反應(yīng)，是FDA批準(zhǔn)的第一個(gè)針對(duì)晚期CSCC的藥物，同時(shí)也是第三個(gè)獲得FDA批準(zhǔn)的抗PD-1抗體。

2.4 特瑞普利單抗

特瑞普利單抗于2018年12月17日獲得國(guó)家藥品監(jiān)督管理局（National Medical Products Administration，NMPA）批準(zhǔn)上市，用于治療既往接受全身系統(tǒng)治療失敗后的不可切除或轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者。特瑞普利單抗是一種靶向PD-1的人源化IgG4 kappa單克隆抗體，是首個(gè)在中國(guó)上市的中國(guó)自主研發(fā)的PD-1單抗[30]。

2.5 信迪利單抗

信迪利單抗于2018年12月24日獲NMPA批準(zhǔn)上市，用于至少經(jīng)過二線系統(tǒng)化療的復(fù)發(fā)或難治性經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤的治療。信迪利單抗是一種靶向PD-1的全人源單克隆抗體，通過阻斷體內(nèi)PD-1與配體PD-L1的結(jié)合，使T細(xì)胞發(fā)揮正常作用，進(jìn)而利用自身免疫清除腫瘤細(xì)胞[31]。信迪利單抗比納武利尤單抗和帕博利珠單抗對(duì)PD-1具有更大的結(jié)合親和力[32]，此外，治療晚期或轉(zhuǎn)移性鱗狀非小細(xì)胞肺癌、胃及胃食管交界處腺癌的研究，現(xiàn)處于臨床Ⅲ期試驗(yàn)階段。

2.6 卡瑞利珠單抗

卡瑞利珠單抗于2019年5月獲NMPA批準(zhǔn)上市，用于治療既往接受過至少二線系統(tǒng)性治療的復(fù)發(fā)/難治性經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤患者?？ㄈ鹄閱慰故且环N靶向PD-1的人源化IgG4 kappa單克隆抗體[33]。此外用于復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移性鼻咽癌、晚期食管癌、晚期肝癌、復(fù)發(fā)或難治性結(jié)外自然殺傷（nature killer，NK）細(xì)胞/T細(xì)胞淋巴瘤（鼻型）、非小細(xì)胞肺癌、晚期泌尿系統(tǒng)腫瘤、婦科腫瘤、軟組織肉瘤、胃食管交界癌、轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌、小細(xì)胞肺癌等實(shí)體瘤的研究也在進(jìn)行中。

2.7 阿特朱單抗

阿特朱單抗于2016年5月獲FDA批準(zhǔn)上市，用于局部晚期或轉(zhuǎn)移性尿路上皮癌的治療。阿特朱單抗是首個(gè)靶向PD-L1的人源化IgG1單克隆抗體，阻斷PD-L1與PD-1和B7-1受體的相互作用，解除PD-L1/PD-1介導(dǎo)的免疫反應(yīng)抑制。目前，F(xiàn)DA相繼批準(zhǔn)阿特朱單抗用于治療鉑類化療后疾病進(jìn)展的轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌和無法化療的局部晚期或轉(zhuǎn)移性尿路上皮癌，與貝伐珠單抗、卡鉑和紫杉醇聯(lián)合使用，作為轉(zhuǎn)移性非鱗狀非小細(xì)胞肺癌患者的一線治療藥物。2019年3月8日FDA加速批準(zhǔn)阿特朱單抗聯(lián)合白蛋白-紫杉醇用于PD-L1陽(yáng)性、轉(zhuǎn)移性三陰性乳腺癌的一線治療[34]。2019年3月18日，F(xiàn)DA批準(zhǔn)阿特朱單抗聯(lián)合卡鉑和依托泊苷用于成人廣泛期小細(xì)胞肺癌的一線治療。

2.8 阿維單抗

阿維單抗于2017年3月23日獲得美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市，用于治療轉(zhuǎn)移性Merkel細(xì)胞癌[35]。阿維單抗是以PD-L1為靶點(diǎn)的人源化IgG1單克隆抗體，通過阻斷PD-1和PD-L1的相互作用，避免腫瘤細(xì)胞逃脫免疫系統(tǒng)的攻擊。2017年5月，F(xiàn)DA批準(zhǔn)阿維單抗用于治療局部晚期或轉(zhuǎn)移性尿路上皮癌[36]。目前針對(duì)阿維單抗有9個(gè)Ⅲ期臨床研究，涵蓋超過15種腫瘤類型，包括乳腺癌、胃癌/胃食管交界腺癌、頭頸部癌、Merkel細(xì)胞癌、間皮瘤、黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌、腎癌及膀胱癌等。

2.9 德魯單抗

德魯單抗于2017年5月1日成為FDA批準(zhǔn)的第3個(gè)PD-L1抑制劑，用于局部晚期或轉(zhuǎn)移性尿路上皮癌的治療[37]。德魯單抗是一種靶向PD-L1的IgG1 kappa單克隆抗體，阻斷PD-L1/PD-1和PD-L1/CD80相互作用，解除免疫應(yīng)答的抑制，而不誘導(dǎo)抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（antibody-dependent cell mediated cytotoxic action，ADCC）[36]。2018年2月16日德魯單抗獲FDA批準(zhǔn)用于患有不可切除的Ⅲ期非小細(xì)胞肺癌患者。2018年12月26日，德魯單抗成為首個(gè)在中國(guó)申請(qǐng)上市的PD-L1單克隆抗體藥物。

以PD-1/PD-L1為靶點(diǎn)的單抗藥物是目前的研究熱點(diǎn)，隨著國(guó)內(nèi)新藥研發(fā)環(huán)境的不斷改善，國(guó)內(nèi)多家公司PD-1單抗藥物的上市審批競(jìng)爭(zhēng)也非常激烈。一種靶向于PD-1的人源化IgG4單克隆抗體替雷利珠單抗（Tislelizumab）正處于生物制品許可申請(qǐng)（biologic license application，BLA）階段。

3 雙特異性抗體（bispecificantibody，BsAb）

BsAb是同時(shí)特異性結(jié)合兩個(gè)不同抗原的人工抗體，由于其特異性和雙功能性，現(xiàn)已成為抗體工程領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。目前處于臨床研究階段的靶向PD-1/PD-L1的BsAb有如下幾類。

3.1 靶向PD-L 1和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）的BsAb

M7824能夠同時(shí)結(jié)合PD-L1和TGF-β兩個(gè)靶點(diǎn)，這是第一個(gè)進(jìn)入臨床研究的靶向PD-L1和TGF-β的BsAb[38]。TGF-β是屬于調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的TGF超家族成員，通常存在于人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）相關(guān)腫瘤的腫瘤微環(huán)境中，可能在腫瘤生長(zhǎng)、進(jìn)展和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮作用，還可能阻礙免疫細(xì)胞浸潤(rùn)腫瘤。在HPV相關(guān)腫瘤中，PD-L1水平有所提高，靶向兩者都有助于促進(jìn)免疫系統(tǒng)攻擊腫瘤細(xì)胞[39]。目前，M7824處于更大規(guī)模的Ⅱ期臨床試驗(yàn)中，納入了未接受檢查點(diǎn)抑制劑治療或在檢查點(diǎn)抑制劑治療期間出現(xiàn)進(jìn)展的HPV相關(guān)腫瘤患者。此外，研究人員還在非HPV相關(guān)腫瘤中開展研究，包括肺癌、結(jié)直腸癌和三陰性乳腺癌。

中國(guó)在研的BsAb SHR-1701能夠同時(shí)靶向PD-L1和TGF-β兩個(gè)靶點(diǎn)，目前處于I期臨床試驗(yàn)，擬用于晚期惡性實(shí)體瘤或前列腺癌患者的治療，這是首個(gè)進(jìn)入臨床階段的國(guó)產(chǎn)PD-L1/TGF-β BsAb。

3.2 靶向PD 1和細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原 4（cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4，CTLA 4）的BsAb

AK104能夠同時(shí)結(jié)合PD-1和CTLA-4兩個(gè)靶點(diǎn)，是全球首個(gè)進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段的靶向PD-1和CTLA-4的BsAb。CTLA-4又名CD152，能夠與配體B7分子結(jié)合，誘導(dǎo)T細(xì)胞無效應(yīng)性，從而參與免疫反應(yīng)的負(fù)調(diào)節(jié)，CTLA-4抗體能夠阻斷其與配體的結(jié)合[40]。相較于PD-1抗體和CTLA-4抗體聯(lián)合用藥，AK104單藥可同時(shí)阻斷在腫瘤浸潤(rùn)淋巴T細(xì)胞上共表達(dá)的CTLA-4和PD-1免疫檢查點(diǎn)蛋白，在保證藥效的同時(shí)，能夠大幅度降低患者的用藥成本。2019年3月，AK104在中國(guó)啟動(dòng)Ib/Ⅱ期臨床試驗(yàn)，這項(xiàng)試驗(yàn)主要評(píng)估AK104聯(lián)合標(biāo)準(zhǔn)化療一線治療不可手術(shù)切除的晚期或轉(zhuǎn)移性胃腺癌或胃食管結(jié)合部腺癌患者的有效性和安全性。

此外，靶向PD-L1和CTLA-4的BsAb KN046在澳大利亞和中國(guó)均已經(jīng)進(jìn)入Ia/Ib期臨床試驗(yàn)階段，適應(yīng)證為晚期實(shí)體瘤和淋巴瘤。

3.3 靶向PD-1和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor ，VEGF）的BsAb

AK112能夠同時(shí)結(jié)合PD-1和VEGF兩個(gè)靶點(diǎn)。2019年7月1日，AK112獲得美國(guó)FDAIND批準(zhǔn)。VEGF除腫瘤血管生成作用之外，直接參與腫瘤的免疫逃逸機(jī)制，抑制免疫細(xì)胞通過外滲進(jìn)入腫瘤組織，以及通過抑制NK細(xì)胞成熟降低腫瘤抗原的呈現(xiàn)。AK112能夠同時(shí)阻斷PD-1和VEGF通路，通過改變腫瘤微環(huán)境以遏制腫瘤免疫逃逸、釋放免疫檢查點(diǎn)的免疫抑制以壓制腫瘤血管生成達(dá)到抗腫瘤的協(xié)同效應(yīng)。AK112用于治療肝癌、胃癌和結(jié)直腸癌等惡性腫瘤。

3.4 靶向PD-L 1和 4-1BB的BsAb

ES101又名INBRX-105，是同時(shí)結(jié)合PD-L1和4-1BB（CD137）兩個(gè)靶點(diǎn)的BsAb，它包含4個(gè)結(jié)合域，其中兩個(gè)靶向PD-L1，另外兩個(gè)靶向4-1BB。4-1BB屬于腫瘤壞死因子（tumornecrosis factor，TNF）受體，可被淋巴細(xì)胞活化誘導(dǎo)，是一種免疫位點(diǎn)協(xié)同刺激因子[41]，在免疫系統(tǒng)中能起到類似“油門”的作用，添加4-1BB激動(dòng)劑，能夠加強(qiáng)免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的攻擊[42]。2019年2月，ES101獲得藥品審評(píng)中心（center for drug evaluation，CDE）臨床試驗(yàn)許可，即將在中國(guó)開展臨床試驗(yàn)。

此外，靶向 PD-1/CD47（HX009）的BsAb目前已完成中試，正在猴子體內(nèi)進(jìn)行長(zhǎng)毒試驗(yàn)，預(yù)計(jì)2020年中旬獲得臨床批件。靶向PD-1/LAG3、PD-L1/CSPG4[43]、TIM3/PD-1[44]等 BsAb也處于不同的研發(fā)階段。

4 抗體-藥物偶聯(lián)物

抗體-藥物偶聯(lián)物（antibody-drug conjugate，ADC）是一種有效的靶向治療腫瘤的藥物。它們通常由單克隆抗體、細(xì)胞毒性藥物和使兩者共軛的連接子組成[45]。在腫瘤治療中，這種組合尤其有效，因?yàn)榭贵w是腫瘤細(xì)胞表面過表達(dá)蛋白的特異性靶向配體，以便有效地傳遞細(xì)胞毒性藥物[46]。

阿特珠單抗已被FDA批準(zhǔn)用于轉(zhuǎn)移性尿路上皮癌、非小細(xì)胞肺癌和三陰性乳腺癌。但是包括阿特珠單抗在內(nèi)的幾種PD-L1免疫檢查點(diǎn)抗體只能適用于少數(shù)幾種腫瘤的治療，因此，將細(xì)胞毒性藥物與抗PD-L1抗體結(jié)合將是一個(gè)重要的腫瘤治療方向，特別是對(duì)實(shí)體腫瘤組成的致密腫瘤基質(zhì)。

多柔比星（Dox）等化療藥物作為有效的抗癌藥物已被應(yīng)用很長(zhǎng)一段時(shí)間，2019年，Sau等[45]首次報(bào)告了Dox結(jié)合PD-L1抗體（PD-L1-Dox）用于化學(xué)引導(dǎo)免疫治療的廣泛應(yīng)用。Dox的使用目的是破壞腫瘤細(xì)胞外環(huán)境，使PD-L1抗體可以穿透腫瘤核心，表現(xiàn)出明顯的細(xì)胞殺傷作用。在乳腺癌細(xì)胞系中PD-L1-Dox能夠破壞腫瘤球體，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。報(bào)告顯示PD-L1-Dox ADC藥物有很好的腫瘤靶向能力和核心穿透能力。

5 嵌合抗原受體-T細(xì)胞（chimeric antigen receptor-T，CAR-T）

CAR-T療法是從患者自身收集T細(xì)胞，通過基因工程技術(shù)在其表面表達(dá)能夠識(shí)別特異性腫瘤抗原的特殊受體，即嵌合抗原受體（chimeric antigen receptor，CAR），同時(shí)在受體的胞內(nèi)段加上引起T細(xì)胞活化的信號(hào)傳遞區(qū)域，CAR-T經(jīng)擴(kuò)增后被注入到患者體內(nèi)，識(shí)別并結(jié)合具有相應(yīng)特異性抗原的腫瘤細(xì)胞，進(jìn)而攻擊腫瘤細(xì)胞[47]。針對(duì)PD-1/PD-L1的CAR-T治療也處在臨床及研發(fā)的不同階段。

由天津醫(yī)科大學(xué)研發(fā)的PD-1單抗活化T細(xì)胞制劑，是靶向PD-1的CAR-T，利用PD-1單抗活化患者外周血T細(xì)胞。該細(xì)胞制劑處于臨床Ⅲ期試驗(yàn)階段，用于治療結(jié)直腸癌和Ⅲb/Ⅲc/Ⅳ期肺癌。

由日本山口大學(xué)醫(yī)學(xué)院研發(fā)的CAR-T細(xì)胞產(chǎn)生PD-1蛋白單鏈可變片段（single chain variable fragment，scFv）技術(shù)旨在在血液惡性腫瘤治療中應(yīng)用。CAR-T細(xì)胞治療在血液病惡性腫瘤，特別是B細(xì)胞白血病和淋巴瘤的治療中具有重要的前景，但由于實(shí)體腫瘤微環(huán)境的生物學(xué)特性，對(duì)非血液病惡性腫瘤的治療效果受到限制。CAR-T細(xì)胞產(chǎn)生PD-1 scFv，衰減CAR-T細(xì)胞和鄰近腫瘤特異性非CAR-T細(xì)胞中PD-1依賴的抑制信號(hào)[48]。此外，抗PD-1 scFv產(chǎn)生CAR-T細(xì)胞的治療導(dǎo)致腫瘤組織中PD-1 scFv濃度升高，但在血清中沒有升高，這表明全身免疫相關(guān)不良事件不嚴(yán)重。

6 小結(jié)與展望

雖然以PD1/PD-L1為靶點(diǎn)的藥物已經(jīng)初有成效，但是仍存在很多問題尚待解決?？贵w雖然有很好的靶向性但單獨(dú)用藥療效一般，需與其他治療方式聯(lián)合使用效果佳；傳統(tǒng)的小分子藥物與抗體藥物相比，雖然有研發(fā)成本低、制劑多樣、較好的腫瘤微環(huán)境滲透作用等優(yōu)勢(shì)，但是存在很大程度上的耐藥性，需要研發(fā)新一代的制劑解決耐藥性；ADC藥物既有抗體的靶向性又具有小分子的毒性，與單純直接使用抗體+化療藥物的聯(lián)用治療方法相比，可以顯著延長(zhǎng)腫瘤患者生存期，但是藥物荷載量的一致性及臨床安全性亟待解決，這需要更加完善的抗體偶聯(lián)技術(shù)的出現(xiàn)；CAR-T細(xì)胞免疫療法雖然在腫瘤治療方面有不錯(cuò)的安全性和有效性，但也存在T細(xì)胞衰竭的現(xiàn)象，需要聯(lián)合治療和新的藥物遞送系統(tǒng)提高T細(xì)胞的存活率。同時(shí)隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和發(fā)展，腫瘤免疫治療逐漸規(guī)范化，以PD-1和PD-L1為靶點(diǎn)的免疫治療機(jī)制逐漸清晰，相信這些難題和技術(shù)瓶頸會(huì)不斷被解決和攻破，為惡性腫瘤患者帶來福音。

目前市場(chǎng)上雖然有很多腫瘤免疫治療新靶點(diǎn)的出現(xiàn)，但以PD-1和PD-L1為靶點(diǎn)的腫瘤免疫治療仍是目前熱門靶點(diǎn)之一，在學(xué)術(shù)、產(chǎn)業(yè)和投資界都受到了極大的關(guān)注。多家制藥公司研發(fā)的PD-1和PD-L1制劑已經(jīng)開始進(jìn)入臨床，在治療包括肺癌、黑色素瘤、腸癌等領(lǐng)域都得到廣泛應(yīng)用。其中，一些中國(guó)自主原創(chuàng)的本土PD-1/PD-L1藥物已經(jīng)在中國(guó)獲批，估計(jì)會(huì)對(duì)世界其他國(guó)家也產(chǎn)生影響，非常值得期待。