激光捕獲顯微切割技術(shù)在生物學(xué)方面的應(yīng)用*

陳璐瑤，吳鈞堅(jiān)，龔琳，趙靖悅，陳由強(qiáng)，何文錦

（1.福建師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院海洋生物醫(yī)藥與制品產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)技術(shù)公共服務(wù)平臺(tái)，福建 福州 350117； 2.福建師范大學(xué)南方海洋研究院福建省微藻種質(zhì)改良工程技術(shù)研究中心，福建 福州 350117）

機(jī)體組織是由許多功能和形態(tài)不同的細(xì)胞構(gòu)成，其中形態(tài)功能相同的細(xì)胞相互粘附在一起，并且這些細(xì)胞各自又與周?chē)钠渌?xì)胞或其他組分相互粘附，但這些細(xì)胞或組織都有各自的特異性。即細(xì)胞之間存在異質(zhì)性，即使表型相同，細(xì)胞的遺傳信息也可能具有顯著差異[1]。不論植物、動(dòng)物，它們都有著復(fù)雜的組織結(jié)構(gòu)，以前，分子水平的研究只能通過(guò)解剖鏡或其他手段分離出植物或動(dòng)物的某個(gè)組織，但不能精確到某類(lèi)細(xì)胞。為了分析研究不同組織和細(xì)胞間的異質(zhì)性，就需要將不同類(lèi)型的細(xì)胞分離出來(lái)，然而，由于常規(guī)分離單個(gè)細(xì)胞或單個(gè)細(xì)胞群難度大，而且在這個(gè)過(guò)程中容易被污染，所以一直無(wú)法成功分離。

隨著技術(shù)的進(jìn)步，出現(xiàn)了三種分離目標(biāo)單一細(xì)胞類(lèi)型的方法，即：體外細(xì)胞系培養(yǎng)、免疫磁珠分選和顯微切割[2,3]，相對(duì)于其他兩種方法，顯微切割技術(shù)（LCM）可以更深入地了解基因表達(dá)情況，因此更被廣泛地應(yīng)用于分子生物學(xué)水平上的研究。LCM的出現(xiàn)很快解決了細(xì)胞異質(zhì)性的問(wèn)題，它可以在顯微鏡下直接確定并且分離出目標(biāo)細(xì)胞。目前，顯微切割技術(shù)在單一性以及準(zhǔn)確性、保護(hù)其他分子等方面已經(jīng)有了很大的改善，因此，該技術(shù)在生物學(xué)領(lǐng)域單細(xì)胞捕獲以及下游研究中是一個(gè)不可或缺的手段。憑借強(qiáng)大的技術(shù)和適當(dāng)?shù)膽?yīng)用，該技術(shù)從自然組織棲息地中生長(zhǎng)的細(xì)胞提供了前所未有的細(xì)胞生物學(xué)見(jiàn)解。

本文就LCM的發(fā)展歷程以及在生物學(xué)方面的應(yīng)用進(jìn)行了綜述，并且對(duì)現(xiàn)存的問(wèn)題以及發(fā)展進(jìn)行討論。

1 激光捕獲顯微切割技術(shù)

激光捕獲顯微切割（Laser capture microdissection，LCM） ，是利用顯微鏡直接從冰凍或石蠟包埋切片中確定、分離獲取目標(biāo)細(xì)胞的技術(shù)[4]。激光顯微切割整體系統(tǒng)除了常見(jiàn)的LCM外，還有激光顯微切割及壓力彈射（LMPC）。兩者結(jié)合成功解決了細(xì)胞之間存在差異的問(wèn)題，因其具有迅速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)易、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，逐漸成為生物學(xué)領(lǐng)域中分子水平上研究的一個(gè)關(guān)鍵工具。

LCM基本原理是通過(guò)低能紅外激光脈沖激活熱塑膜——乙烯乙酸乙烯酯膜（ethylene vinylacetate，EVA），利用顯微鏡直視，然后有選擇地將目標(biāo)細(xì)胞粘到該膜上[5]。

2 發(fā)展歷程

顯微切割的發(fā)展經(jīng)歷手工顯微切割、機(jī)械輔助顯微切割、液壓控制顯微切割和激光捕獲顯微切割4個(gè)階段[5]。LCM是目前最常用的自動(dòng)化程度最高的新興設(shè)備，它可以精確分離出目標(biāo)樣品，然后對(duì)其進(jìn)行更深入的研究。

早期，人們采用手工顯微切割，該方法不僅耗時(shí)，而且操作復(fù)雜，更重要的是在此過(guò)程中造成樣品污染[6]。初期的LCM，它是利用發(fā)射出來(lái)的激光直接將非目標(biāo)細(xì)胞或細(xì)胞群灼燒，留下所需的組織，但該技術(shù)仍然不夠成熟，比如無(wú)法確定所需細(xì)胞是否純凈，獲得的目標(biāo)細(xì)胞可能混入其他的組織。1996年，美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院（National Institute of Health，NIH）國(guó)家腫瘤研究所的Michael等開(kāi)發(fā)出激光捕獲顯微切割技術(shù)[7]。之后，美國(guó)Arcturus Engineering公司研制出LCM系統(tǒng)，并進(jìn)行商品化的銷(xiāo)售[8]。應(yīng)用該技術(shù)可以解決之前細(xì)胞不純凈的問(wèn)題，通過(guò)顯微鏡直接快速準(zhǔn)確地獲取單一的目標(biāo)細(xì)胞群或細(xì)胞。近年來(lái)，LCM快速發(fā)展，以其迅速、準(zhǔn)確、自動(dòng)化、靈活性等優(yōu)點(diǎn)廣泛應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域，尤其是需要研究的細(xì)胞很難從樣本細(xì)胞中單一純凈地分離時(shí)，或細(xì)胞分布不均勻呈現(xiàn)散狀時(shí)，顯微切割技術(shù)顯得尤為重要[9]。

3 激光顯微捕獲切割技術(shù)的應(yīng)用

3.1 在腫瘤方面的應(yīng)用

LCM與之前的顯微切割技術(shù)相比較，已經(jīng)有了突破性進(jìn)展，是目前最廣泛的分離純化組織和細(xì)胞的新興技術(shù)。最初LCM的出現(xiàn)解決了細(xì)胞異質(zhì)性的問(wèn)題，是生物科學(xué)領(lǐng)域分子水平等方面的一大里程碑。目前LCM已廣泛應(yīng)用于腫瘤方面的研究，與測(cè)序技術(shù)、PCR技術(shù)、cDNA微陣列技術(shù)、基因表達(dá)系列分析（SAGE）生物標(biāo)記、定量蛋白質(zhì)組等技術(shù)相結(jié)合，現(xiàn)已應(yīng)用于肺癌、乳腺癌、甲狀腺癌、食管癌、胃癌、肝癌、結(jié)腸癌、淋巴瘤、卵巢癌等的研究[11]?？蒲腥藛T可以借用LCM精確分離捕獲單細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)對(duì)病況的分子譜進(jìn)行分析，然后進(jìn)一步的探究特定細(xì)胞群的遺傳學(xué)、解剖學(xué)特征以及相應(yīng)的功能。利用LCM我們可以整理正常細(xì)胞群、癌前細(xì)胞群和惡性細(xì)胞群之間的遺傳、表觀遺傳學(xué)和基因表達(dá)差異，將腫瘤易感基因篩選出來(lái)，然后對(duì)腫瘤的發(fā)生以及發(fā)展進(jìn)行分析，最后揭示它的發(fā)病機(jī)制、發(fā)展進(jìn)程等，它對(duì)特定細(xì)胞群的選擇性有望大大改善許多人類(lèi)疾病的診斷和管理[10,11]。

3.1.1 LCM結(jié)合腫瘤的基因組學(xué)分析

20世紀(jì)90年代中期發(fā)展起來(lái)的LCM技術(shù)能夠快速精確地從復(fù)雜組織中分離出單細(xì)胞或細(xì)胞群，利用這些優(yōu)點(diǎn)可以捕獲腫瘤細(xì)胞，它不會(huì)改變組織的特性，獲得單一的腫瘤細(xì)胞基因組進(jìn)行突變檢測(cè)，基本消除了其他組分對(duì)癌細(xì)胞基因組的污染，排除了因選用樣品引起的誤差[12]。

楊祎[13]等利用激光顯微切割技術(shù)分離了一些胃癌細(xì)胞，結(jié)合全基因組放大技術(shù)將其基因組放大，然后進(jìn)行與胃癌有關(guān)的前列腺干細(xì)胞抗原基因（PSCA）rs2976392與rs2294008位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性（SNP）分析。研究結(jié)果表明，全基因組放大技術(shù)保真性較高，分離出來(lái)的癌細(xì)胞中SNP的靈敏度和準(zhǔn)確性大大的提高。

在2010年，Navin等通過(guò)他們稱(chēng)為 SPP（Sector-Ploidy-Profiling）的方法[14]，進(jìn)行乳腺癌腫瘤細(xì)胞起源的研究。首先利用顯微切割獲取少量乳腺癌組織，再通過(guò)流式分選（Ploidy），進(jìn)而通過(guò)比較基因組雜交技術(shù)（comparative genomic hybridization，CGH）分析基因組染色體擴(kuò)增/缺失。結(jié)果發(fā)現(xiàn)有些是單克隆起源，而有些是多克隆起源的[15]。

俞莎莎[16]等通過(guò)全外顯子測(cè)序來(lái)對(duì)某一肺癌患者的腫瘤和相應(yīng)癌旁組織測(cè)序，然后利用COSMIC腫瘤數(shù)據(jù)庫(kù)比較分析，找出可能的致病基因，并通過(guò)LCM提取5個(gè)不同部位的腫瘤細(xì)胞，初步探索其起源和演化，再利用巢式PCR擴(kuò)增技術(shù)以及一代測(cè)序來(lái)驗(yàn)證基因分型。結(jié)果發(fā)現(xiàn)這例肺癌患者的7個(gè)高頻突變基因分別是LPHN2、TP53、MYH2、TGM2、C10orf137、MS4A3 和 EP300，這些基因它們的基因分型不同。

3.1.2 LCM結(jié)合腫瘤的轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析

RNA為基因表達(dá)產(chǎn)物，RNA水平的分析包括RT-PCR、cDNA微陣列等其他技術(shù)，這些分析過(guò)程需要較完整的RNA作為實(shí)驗(yàn)材料，利用LCM獲取單一細(xì)胞，RNA分析能夠更準(zhǔn)確地了解基因表達(dá)情況。

從復(fù)雜的生物組織（如大腦）獲得高質(zhì)量的RNA是建立高保真細(xì)胞類(lèi)型特異性轉(zhuǎn)錄組所必需的。通常，將基因標(biāo)記技術(shù)與LCM結(jié)合起來(lái)就足夠了，但對(duì)RNA降解和產(chǎn)量有限的擔(dān)憂使許多測(cè)序研究產(chǎn)生了疑問(wèn)。Farris Shannon[17]描述了從新鮮冷凍組織激光捕獲高質(zhì)量的RNA，然后為其確定合適的RNA-Seq文庫(kù)生成方法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)消化時(shí)間和溫度最小化時(shí)，可以從薄層組織的激光捕獲材料中分離出足夠濃度的高質(zhì)量RNA（RNA完整性指數(shù)，RIN＞9）。而且發(fā)現(xiàn)通過(guò)cDNA文庫(kù)生成保留核糖體RNA的文庫(kù)生成方法所需的PCR周期更少，從而最大程度地減少了所得文庫(kù)中的偏倚。最后測(cè)序前rRNA的終末消耗會(huì)增加靶RNA的含量，從而增加讀取深度和基因檢測(cè)水平，同時(shí)降低測(cè)序成本。

吳瑩[18]等利用LCM分離出61例不同個(gè)體結(jié)腸組織中的上皮細(xì)胞（24例正常組織，13例腺瘤，24例癌組織），與microRNA芯片技術(shù)相互結(jié)合檢測(cè)在腫瘤細(xì)胞中特異表達(dá)的microRNA，分析相同組織microRNA 表達(dá)情況的相關(guān)系數(shù)，結(jié)果表明了LCM與Agilent microRNA 芯片技術(shù)相結(jié)合的實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性。最后，采用定量RT-PCR、LCM、Agilent microRNA芯片技術(shù)結(jié)合驗(yàn)證了LCM+Agilent microRNA 芯片實(shí)驗(yàn)的靈敏性以及穩(wěn)定性，在科研、臨床診斷方面將有很大的應(yīng)用價(jià)值。

Xue Ruidong[19]對(duì)133種合并的肝細(xì)胞和肝內(nèi)膽管癌（cHCC-ICC）病例進(jìn)行了基因組和轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，包括單獨(dú)、合并和混合的亞型，結(jié)合LCM、癌細(xì)胞分?jǐn)?shù)分析和單核測(cè)序技術(shù)，發(fā)現(xiàn)cHCC-ICCs有大量的Nestin表達(dá)，這說(shuō)明Nestin可以作為診斷肝內(nèi)膽管癌的生物標(biāo)記，也為肝內(nèi)膽管癌提供了重要的診斷意見(jiàn)。

3.1.3 LCM結(jié)合腫瘤的蛋白質(zhì)組學(xué)分析

隨著人類(lèi)基因組計(jì)劃的實(shí)施和快速發(fā)展，生物學(xué)研究已經(jīng)進(jìn)入后基因組的水平，即蛋白質(zhì)組學(xué)（Proteomics），它已經(jīng)成為研究的核心內(nèi)容之一。對(duì)臨床病例研究，找到標(biāo)志物是蛋白質(zhì)組學(xué)分析的一個(gè)重要方向。

徐學(xué)清[20]等利用LCM和質(zhì)譜方法聯(lián)合研究乳腺癌上皮細(xì)胞和間質(zhì)間蛋白表達(dá)的差異，結(jié)果共檢測(cè)到431種蛋白，這些差異表達(dá)蛋白可以是疾病的篩選、診斷和預(yù)后判斷的蛋白標(biāo)志。李國(guó)慶[21]等采用LCM和同位素標(biāo)記聯(lián)合的方法捕獲結(jié)腸組織（正常的和患有結(jié)腸癌的），對(duì)蛋白進(jìn)行相對(duì)和絕對(duì)定量（iTRAQ），接著利用強(qiáng)陽(yáng)離子柱分離和反相液質(zhì)聯(lián)用（2D-LC-MS/MS）對(duì)差異表達(dá)的蛋白進(jìn)行鑒定，最后采用Western blotting及免疫組織化學(xué)技術(shù)（IHC）證實(shí)定量蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果的可靠性。研究表明，蛋白質(zhì)的差異表達(dá)與結(jié)腸癌的發(fā)生有關(guān)系，而且有可能會(huì)作為是否發(fā)生結(jié)腸癌的分子標(biāo)志物，為結(jié)腸癌的診斷提供新線索。

3.2 在其他疾病診斷方面的應(yīng)用

LCM成功解決了細(xì)胞之間異質(zhì)性問(wèn)題，除了被廣泛應(yīng)用于多種腫瘤病理學(xué)研究外，在其他疾病的病理診斷中發(fā)揮著很大作用，并表現(xiàn)出良好的應(yīng)用價(jià)值。

3.2.1 LCM應(yīng)用于阿爾茨海默病的診斷

阿爾茨海默?。ˋD）是一種神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，通常該病多發(fā)于70歲以上的人群并有年輕化發(fā)展的趨勢(shì)。隨著科技的發(fā)展，LCM技術(shù)逐漸在該疾病的診斷方面發(fā)揮著重要的作用。

Drummond Eleanor[22]等使用局部蛋白質(zhì)組學(xué)分析快速進(jìn)展性阿爾茨海默氏?。╮pAD）和典型的散發(fā)性阿爾茨海默?。╯AD）中淀粉樣蛋白斑塊中的蛋白質(zhì)差異，對(duì)從rpAD和sAD患者顯微切割的淀粉樣蛋白斑進(jìn)行了無(wú)標(biāo)記的定量LC-MS/MS并定量了蛋白質(zhì)表達(dá)差異，發(fā)現(xiàn)快速進(jìn)展性阿爾茨海默氏病斑塊中蛋白質(zhì)的累積差異，表明它可能是阿爾茨海默氏病的一種新型亞型。

3.2.2 LCM應(yīng)用于感染性疾病的診斷

Zhou Ya Bin[23]等首次應(yīng)用LCM和PCR相結(jié)合來(lái)確認(rèn)長(zhǎng)支原體感染。由LCM獲得的細(xì)胞DNA的測(cè)序結(jié)果表明與PCR測(cè)序結(jié)果相同。盡管存在潛在的弊端，需要收集大量單一細(xì)胞耗時(shí)久，可能會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)，但基于分子生物學(xué)技術(shù)的LCM技術(shù)還是一種用于判斷“真菌污染物”感染的很有前途的診斷工具。

3.2.3 LCM應(yīng)用于缺血性中風(fēng)疾病的診斷

García-Berrocoso Teresa[24]等獲得了缺血性中風(fēng)患者的死后腦切片，通過(guò)激光顯微切割分離梗塞（IC）和對(duì)側(cè)（CL）區(qū)域的神經(jīng)元和血腦屏障結(jié)構(gòu)（BBB）作為對(duì)照研究，并使用無(wú)標(biāo)記定量分析。結(jié)果表明對(duì)人腦缺血后神經(jīng)元和BBB的定量蛋白質(zhì)組的分析有助于增加對(duì)缺血性中風(fēng)病理學(xué)分子機(jī)制的了解，并突出顯示可能代表腦缺血或治療靶點(diǎn)生物標(biāo)志物的新蛋白質(zhì)。

3.3 在植物學(xué)方面的應(yīng)用

1992年，激光顯微切割技術(shù)開(kāi)始用于植物樣品的制備[25]，近年來(lái)，利用該技術(shù)在相關(guān)植物的基因組、轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組的分析發(fā)展較迅速[26-28]。然而，植物細(xì)胞與哺乳動(dòng)物細(xì)胞的質(zhì)地相反，大多數(shù)植物組織的細(xì)胞組織具有堅(jiān)硬的含纖維素的細(xì)胞壁，較大的液泡和空隙，因此使組織的制備和大分子（例如DNA）的提取變得復(fù)雜。

3.3.1 LCM結(jié)合植物基因組學(xué)的分析

植物的生長(zhǎng)和發(fā)育是由胚細(xì)胞不斷進(jìn)行特異分化，形成不同的組織和器官，若要對(duì)某一特別的細(xì)胞類(lèi)群進(jìn)行基因組學(xué)分析是比較困難的。如今可以利用LCM技術(shù)獲取某一特定的細(xì)胞類(lèi)群，然后進(jìn)行相關(guān)的分析，同時(shí)也成功的解決了分離異質(zhì)細(xì)胞的問(wèn)題。

Rossi Marika[29]等應(yīng)用LCM技術(shù)分析擬南芥特定組織中的細(xì)胞支原體基因表達(dá)譜。他們的研究表明LCM與擬南芥的結(jié)合使用為探索植物的生物學(xué)、分子和生物信息學(xué)以及闡明這些重要植物病原體感染機(jī)制的關(guān)鍵途徑開(kāi)辟了道路。

3.3.2 關(guān)于轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白組學(xué)的分析

目前轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)都在植物各方面研究中大量應(yīng)用。通常轉(zhuǎn)錄組水平的分析有RTPCR、cDNA微陣列等技術(shù)，該研究過(guò)程可利用LCM技術(shù)獲取單一且較完整的細(xì)胞，這有助于準(zhǔn)確地了解基因表達(dá)情況，然后在進(jìn)行后基因組水平的研究。 Canas Rafael A[30]等從1個(gè)月大的海岸松（Pinus pinaster）幼苗中分離了14種不同的組織，并分析了它們的轉(zhuǎn)錄組獲得的不同海岸松組織中基因表達(dá)的分布情況，明確了組織基因表達(dá)與功能之間的關(guān)系。該轉(zhuǎn)錄組圖譜是針葉樹(shù)功能基因組學(xué)研究的寶貴資源。

Yingxin Zhong[31]等對(duì)開(kāi)花后19天的小麥用激光顯微切割將糊粉、外胚乳、中胚乳、內(nèi)胚乳和轉(zhuǎn)移細(xì)胞從中分離出來(lái)，然后用qRT-PCR和LC-MS分別測(cè)定不同組織基因表達(dá)和蛋白質(zhì)的氨基酸水平。他們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果為深入了解胚乳中的蛋白質(zhì)合成和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)途徑提供了科學(xué)依據(jù)，并提出了提高優(yōu)質(zhì)珍珠白小麥品質(zhì)的可行性途徑的建議。

研究富含多酚或多糖的樹(shù)木的miRNA或基因的表達(dá)通常具有挑戰(zhàn)性。對(duì)此，Swati, Verma[32]等利用激光捕獲顯微切割的方法，對(duì)木本蘋(píng)果芽分生組織進(jìn)行有效分離，并獲得miRNA和基因的表達(dá)分析數(shù)據(jù)。他們實(shí)驗(yàn)證實(shí)，從LCM分離的蘋(píng)果芽分生組織中的RNA含有miRNA，并且其數(shù)量和質(zhì)量均良好，足以用于下游表達(dá)分析。

Sui Xiaolei[33]等利用顯微鏡，熒光染料遷移分析，顯微計(jì)算機(jī)斷層掃描，激光捕獲顯微切割和RNA測(cè)序（RNA-Seq）等技術(shù)相組合來(lái)研究?jī)?nèi)部韌皮部（IP）和外部韌皮部（EP）在黃瓜果實(shí)維管束（VB）中的功能。RNA-Seq數(shù)據(jù)表明，與分化/發(fā)育、激素轉(zhuǎn)運(yùn)、RNA或蛋白質(zhì)修飾/加工/運(yùn)輸以及氮化合物代謝和運(yùn)輸有關(guān)的基因轉(zhuǎn)錄優(yōu)先。這些發(fā)現(xiàn)為黃瓜果實(shí)維管組織中特定細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的分析提供了科學(xué)依據(jù)。

4 展望

LCM是近來(lái)快速發(fā)展起來(lái)的一個(gè)新興技術(shù)，其最大的優(yōu)點(diǎn)在于快速、準(zhǔn)確，它也成功地解決了分離異質(zhì)性細(xì)胞的問(wèn)題。與其他研究技術(shù)聯(lián)合，推進(jìn)了特異性細(xì)胞基因組、轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組等相關(guān)的研究，并顯示出了良好的應(yīng)用前景。如今，LCM技術(shù)被廣泛應(yīng)用與各個(gè)領(lǐng)域，但對(duì)于常規(guī)染色的組織切片，由于很難分辨組織結(jié)構(gòu)，尤其對(duì)于一些組織結(jié)構(gòu)較復(fù)雜的樣本想要準(zhǔn)確分離出目標(biāo)細(xì)胞也比較困難。隨著科技的發(fā)展，研究人員通過(guò)免疫組化方法，成功的解決了目標(biāo)細(xì)胞難以分離出來(lái)的問(wèn)題。 就目前LCM技術(shù)的應(yīng)用來(lái)看，隨著對(duì)實(shí)驗(yàn)精細(xì)度不斷提高，也要求LCM技術(shù)能更進(jìn)一步完善，例如切割微小組織時(shí)樣品需求量大，需要大量的時(shí)間去捕獲，以致影響下游實(shí)驗(yàn)研究，比如樣品RNA提取的質(zhì)量。

此外，對(duì)于激光顯微切割技術(shù)與彈射（PALM）技術(shù)結(jié)合而言，操作過(guò)程中目標(biāo)細(xì)胞捕獲相對(duì)困難，出現(xiàn)彈射方向偏移等問(wèn)題，無(wú)法準(zhǔn)確地將目標(biāo)細(xì)胞彈射到收集蓋中，因此后續(xù)可以開(kāi)發(fā)相應(yīng)的智能操作系統(tǒng)，根據(jù)目標(biāo)細(xì)胞的參數(shù)直接快速切割，準(zhǔn)確捕獲。還有在激光切割過(guò)程中由于切片厚度太厚，導(dǎo)致目標(biāo)細(xì)胞無(wú)法切割分離出來(lái)，建議可以開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì)更大的能量范圍，供給研究人員進(jìn)行選擇，快速捕獲加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，而不只是僅僅局限于低能切割。相信隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，技術(shù)體系逐漸完善以及更多高效試劑盒的研發(fā)，LCM技術(shù)勢(shì)被應(yīng)用于更多的生物醫(yī)學(xué)等研究領(lǐng)域。